中国组织工程研究 ›› 2011, Vol. 15 ›› Issue (16): 2871-2876.doi: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.16.006
• 组织工程骨及软骨材料 tissue-engineered bone and cartilage materials • 上一篇 下一篇
杨 浩,朱晓松,李世和,吴 迪
Yang Hao, Zhu Xiao-song, Li Shi-he, Wu Di
摘要:
背景:使用体外构建的组织工程软骨治疗软骨损伤是目前的研究热点,材料与支架材料的选择仍有较多问题尚待解决。 目的:观察脂肪基质干细胞-小肠黏膜下层复合物在体外经成软骨诱导培养基诱导分化的效果。 方法:将第3代脂肪基质干细胞接种于复水后的小肠黏膜下层双面,加入成软骨诱导培养基,于体外诱导培养7 d和14 d后,使用实时荧光定量RT-PCR检测Ⅱ型胶原mRNA,免疫组织化学染色检测Ⅱ型胶原蛋白,甲苯胺蓝染色观察细胞外基质,扫描电镜观察体外成软骨诱导14 d后细胞在支架材料上的生长状况。 结果与结论:Ⅱ型胶原mRNA实时荧光定量RT-PCR检测提示,体外成软骨诱导后7,14 d的脂肪基质干细胞-小肠黏膜下层复合物Ⅱ型胶原mRNA的标化值与未诱导的脂肪基质干细胞-小肠黏膜下层复合物差异有显著性意义(P < 0.05),诱导 14 d与诱导7 d相比,差异亦有显著性意义(P < 0.05)。脂肪基质干细胞-小肠黏膜下层复合物成软骨诱导后14 d,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色为阳性,甲苯胺蓝染色可见基质异染,未诱导的复合物Ⅱ型胶原免疫组织化学染色为阴性。扫描电镜检测显示诱导14 d时,细胞长满支架材料的双面。提示脂肪基质干细胞复合至小肠黏膜下层后,在体外经成软骨诱导培养基成软骨诱导后,能够向成软骨细胞分化。
中图分类号: