中国组织工程研究 ›› 2010, Vol. 14 ›› Issue (47): 8755-8758.doi: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.47.004
• 组织工程神经材料 tissue-engineered nerve materials • 上一篇 下一篇
孙 黎1,张 力2,胡晓峰3,张 辉2,罗 强1,王新生1,朱登祥1,薄爱华1
Sun Li1, Zhang Li2, Hu Xiao-feng3, Zhang Hui2, Luo Qiang1, Wang Xin-sheng1, Zhu Deng-xiang1, Bo Ai-hua1
摘要:
背景:目前大鼠神经干细胞体外诱导分化的研究报道诸多,但其分化过程很难控制,很多实验的操作方法复杂,分化比率也很低。 目的:探索大鼠胚胎前脑神经干细胞体外原代及传代培养方法,并观察其分化规律。 方法:胎鼠在无菌条件下分离出前脑,制备单细胞悬液,以1×1011L-1接种于含N2的DMEM/F12培养基中培养,传代培养过程中加入BrdU,标记神经干细胞球。诱导分化实验分为多聚赖氨酸铺板组、明胶铺板组和无铺板组。采用体积分数20%胎牛血清刺激其分化。免疫细胞化学检测nestin、BrdU及在血清诱导条件下神经干细胞向神经细胞分化的能力。 结果与结论:细胞呈神经干细胞样生长,具有连续增殖能力,可以传代培养。传代神经球中的细胞均呈nestin阳性和BrdU阳性。多聚赖氨酸铺板组和明胶铺板组贴壁后分化为神经细胞能力强于无铺板组(P < 0.01)。多聚赖氨酸铺板组略强于明胶铺板组(P > 0.05)。神经谱系标记物神经胶质纤维酸性蛋白和微管相关蛋白2的免疫细胞化学结果均阳性。结果表明,大鼠胚胎前脑富含神经干细胞,其分化观察,多聚赖氨酸和明胶在诱导神经干细胞分化中作为细胞贴壁支持物提高分化细胞数量的作用,且多分化为星形胶质细胞。
中图分类号: