用芸香苷干扰白细胞介素1β诱导的髓核细胞发现，芸香苷以剂量依赖性改善白细胞介素1β对髓核细胞造成的毒性，当芸香苷的处理浓度用100 μmol/L时，能够完全缓解10 μg/L的白细胞介素1β对髓核细胞造成的毒性(P > 0.05，见图1B)。因此，浓度为100 μmol/L的芸香苷应用于后续的研究。



2.3   芸香苷抑制白细胞介素1β诱导的髓核细胞中炎症因子和氧化应激因子的表达    
2.3.1   ELISA检测   与未处理的髓核细胞相比，白细胞介素1β诱导了白细胞介素6、肿瘤坏死因子α和诱导型一氧化氮合酶的表达(P < 0.01)。有趣的是，芸香苷处理减少了白细胞介素6、肿瘤坏死因子α和诱导型一氧化氮合酶的水平，从而消除了白细胞介素1β对髓核细胞的影响(见图2A-C)。
2.3.2   Western blotting检测   结果显示，环氧化酶2和诱导型一氧化氮合酶的蛋白表达水平在白细胞介素1β诱导的髓核细胞中显著升高(见图2D)，经芸香苷处理后环氧化酶2恢复正常水平，诱导型一氧化氮合酶的蛋白水平也显著降低(见图2E，F，P < 0.01)。

以上结果显示，在髓核细胞中，芸香苷抑制白细胞介素1β诱导的炎症因子和氧化应激因子的表达。因此，推测芸香苷可能通过抑制炎症反应和氧化应激的发生，从而抑制椎间盘退变的发生。
2.4   芸香苷抑制白细胞介素1β诱导的髓核细胞代谢酶的生成和基质降解   结果发现在白细胞介素1β的刺激下，髓核细胞中代谢酶基质金属蛋白酶3、13和ADAMTS-5的水平均显著上调(P < 0.01)，胶原Ⅱ的水平显著减少(P < 0.01)，经芸香苷处理代谢酶基质金属蛋白酶3(见图3A)、基质金属蛋白酶13(见图3B)和ADAMTS-5(见图3C)的水平均有所下调，胶原Ⅱ的水平显著上调(P > 0.05，见图3D)。此外，芸香苷处理抑制白细胞介素1β诱导的髓核细胞中聚集蛋白多糖的蛋白水平升高(见图3E和F)。这些结果提示，芸香苷能够抑制白细胞介素1β诱导的髓核细胞代谢酶的生成，缓解细胞外基质的降解。因此，推测芸香苷可能通过抑制基质降解缓解椎间盘退变的进展。



2.5   芸香苷抑制白细胞介素1β诱导的髓核细胞凋亡   为了进一步研究芸香苷对髓核细胞生物学功能的影响，观察了芸香苷对白细胞介素1β诱导的髓核细胞的影响。发现与未经处理的髓核细胞相比，白细胞介素1β诱导了caspase-3的活性升高和Bax表达，降低了Bcl-2表达，诱导了髓核细胞凋亡，芸香苷处理降低了髓核细胞中的caspase-3活性(见图4A)和Bax表达(见图4C)，升高了Bcl-2的mRNA(见图4B)和蛋白表达(见图4D和E)，显著减少了髓核细胞凋亡(P < 0.01，见图4F，G)。经此研究发现，芸香苷能够很好地保护髓核细胞，免受白细胞介素1β刺激诱导的细胞凋亡。



2.6   芸香苷抑制白细胞介素1β诱导的WNT/β-catenin信号通路的活化  
2.6.1   RT-qPCR检测   研究发现，β-catenin、c-Myc和Cyclin D1在髓核细胞中的mRNA表达在白细胞介素1β的诱导下显著升高(P < 0.01)，芸香苷处理降低了β-catenin(见图5A)、c-Myc(见图5B)和Cyclin D1(见图5C)的mRNA水平。
2.6.2   Western blotting结果   与白细胞介素1β刺激的髓核细胞相比，芸香苷(100 μmol/L)处理能够显著抑制白细胞介素1β诱导的髓核细胞中β-catenin、c-Myc和Cyclin D1的蛋白表达上调(见图5D，E，P < 0.01)。当芸香苷和WNT/β-catenin通路的激活剂R-spondin1同时处理髓核细胞时，芸香苷的作用被R-spondin1抵消(P > 0.05)。

这些结果表明，芸香苷能够抑制髓核细胞中WNT/β-catenin信号通路的活化。
2.7   芸香苷改善针刺诱导的大鼠的椎间盘退变   为了进一步验证芸香苷对椎间盘退变的影响，用芸香苷干预针刺诱导的椎间盘退变模型大鼠，观察大鼠的椎间盘生理生化指标的变化。见图6。
2.7.1   MRI检测   经针刺诱导1周后，MRI观察发现针刺诱导的大鼠髓核组织内部不均匀且呈黑色(见图6A)，即针刺诱导了大鼠的椎间盘退变，说明成功构建椎间盘退变大鼠模型。8周后，观察到针刺诱导显著增加了大鼠的Pfirrmann分级(P < 0.01，见图6B)。
2.7.2   ELISA检测   8周后，经检测发现与假手术组大鼠相比，椎间盘退变大鼠的髓核组织中炎症因子白细胞介素6的水平显著升高(见图6C，P < 0.01)，细胞外基质发生了一定程度的降解。在芸香苷干预的椎间盘退变大鼠髓核组织中，白细胞介素6的水平表达显著降低(P < 0.01)，细胞外基质的组成成分胶原Ⅱ(见图6D)的水平显著升高(P > 0.05)；此外，还发现芸香苷能够降低椎间盘退变大鼠的髓核组织中caspase-3的活性(见图6G)。
2.7.3   Western blotting检测   在芸香苷干预的椎间盘退变大鼠髓核组织中，诱导型一氧化氮合酶的蛋白表达均显著降低(P < 0.05)，聚集蛋白聚糖的蛋白表达显著升高(见图6E，F，P > 0.05)。

综上所示，芸香苷能够通过抑制体内炎症因子、氧化应激因子、代谢酶的产生，以及基质降解来改善椎间盘退变的进展。

椎间盘退变是一种复杂的多因素疾病，被认为是导致下腰痛的主要原因之一，严重时会致残[1]。目前，全世界大约80%的人正在遭受下腰痛的困扰[2]。有研究显示，椎间盘退变与椎间盘退化、衰老和过度劳累有关[3-4]。椎间盘由髓核、纤维环和软骨终板3个主要结构组成。髓核是位于椎间盘中心的柔性球体，在前后左右方向被纤维环包围，软骨终板附着在髓核上、下，损害髓核、纤维环或软骨终板的因素可能导致椎间盘的退化。髓核在椎间盘功能中起核心作用，由髓核细胞和细胞外基质成分组成，髓核无血管组织，通过终板扩散获得营养。氧化应激、炎症、细胞饥饿和机械力可导致髓核细胞功能障碍并破坏细胞外基质合成和分解的平衡，髓核细胞功能的调节和细胞外基质代谢平衡的恢复是延迟椎间盘退变的关键[5]。椎间盘退变在临床上的治疗通常采用保守的药物治疗或者手术治疗，但现有的治疗手段均存在很大的局限性，只能部分缓解椎间盘退变引起的症状，不能从根本上逆转椎间盘退变。目前尚无有效的方法可逆转椎间盘退变的进展，且该疾病治疗后易复发[6-7]。因此，迫切需要开发有效的治疗药物，真正改善椎间盘退变的进展。

植物提取物作为一种天然化合物，因其毒副作用小在世界范围内引起了广泛的关注，被广泛开发用于治疗各种类型的疾病[8]。类黄酮作为一种天然化合物具有多重药理活性，例如抗氧化、抗诱变、抗菌、抗血管生成、抗炎、抗过敏等[9]；除此之外，类黄酮还具有阻断细胞周期、诱导细胞凋亡、破坏有丝分裂纺锤体形成的能力，使其在药物开发领域具有广阔的应用前景[9-10]。芸香苷(Rutin)，又名芦丁，是类黄酮的一种，广泛存在于荞麦、茶叶、苹果等植物中[11]，具有抗氧化、抗炎、抗细胞凋亡、血管保护、神经保护和心脏保护等药理活性，被用于治疗癌症、糖尿病、高血压和高胆固醇血症等多种疾病[9]。但芸香苷在椎间盘退变性疾病中的研究较少，因此，通过构建椎间盘退变的模型大鼠，探索芸香苷在椎间盘退变中的调节作用及其机制，拟为椎间盘退变的临床治疗提供一定的理论基础，为治疗椎间盘退变的药物开发提供新的思路。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

1.1   设计   随机对照动物实验。两组比较采用t检验，多组比较采用单因素方差分析(ANOVA)。
1.2   时间及地点   实验于2021年3-9月在河南省中医院河南中医药大学实验动物中心完成。
1.3   材料
1.3.1   动物   36只SPF级成年雄性SD大鼠，体质量200-250 g，购买于河南中医药大学实验动物中心，动物合格证编号为SYXK(豫)2021-0003，在河南中医药大学实验动物中心室内饲养。环境温度控制在(22±3) ℃，湿度45%-60%，采用昼夜节律12 h 间隔照明，大鼠分笼饲养，实验期间保证自由进食。

动物实验经河南省中医院河南中医药大学动物实验伦理委员会批准(批准号为HNZYY-2021005)。实验过程遵循了国际兽医学编辑协会《关于动物伦理与福利的作者指南共识》和本地及国家法规。实验动物在麻醉下进行所有的手术，并尽一切努力最大限度地减少其疼痛、痛苦和死亡。

1.3.2   试剂   芸香苷购自南京泽郎医药科技有限公司，纯度>98%；DMEM/F12培养液、胎牛血清购于美国GIBCO BRL公司；抗体环氧化酶2、诱导型一氧化氮合酶、聚集蛋白聚糖、caspase-3、Bcl-2、Bax、β-catenin、c-Myc、Cyclin D1、GAPDH抗体和特异性二抗购于美国Sigma公司；ECL 发光试剂盒购于Amersham；BCA检测试剂盒购于上海碧云天生物；白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、基质金属蛋白酶3，9，13、ADAMTS-4、ADAMTS-5和胶原Ⅱ的 ELISA试剂盒购于中国西塘公司；诱导型一氧化氮合酶和caspase-3 活性试剂盒购于Abcam；CCK-8 试剂盒购于上海生工生物工程有限公司；流式法细胞凋亡检测试剂盒购于美国BD公司；Total RNA提取试剂盒、反转录试剂盒和RT-qPCR 试剂盒购于Invitrogen；引物在上海生工生物工程股份有限公司合成；Recombinant Human R-Spondin 1购自北京义翘神州科技股份有限公司。
1.3.3   仪器   二氧化碳培养箱(美国 Thermo Scientific 公司)；酶标仪Spectra Max 190(美国MolecuLarDerices公司)；Multifuge X1R 台式高速冷冻离心机(美国Thermo Scientific 公司)；BX-41型显微镜(日本Olympus)；Scion Image图像分析系统(美国Apple公司)；PCR扩增仪(德国 Biometra公司)；核磁共振仪PT2025(瑞典Metrolab公司)；流式细胞仪DxFLEX(美国Beckman Coulter公司)。
1.4   实验方法   
1.4.1   动物分组和处理   将36只雄性SD大鼠随机选取26只进行椎间盘退变建模手术，剩余10只为假手术组。所有大鼠均经腹腔注射戊巴比妥麻醉。通过骶骨区域脊椎数确定第3和第4个尾骨椎间盘的位置，用26号无菌针刺穿尾部皮肤纤维环整层向髓核方向平行于终板穿刺椎间盘。将针头旋转360°并保持在该位置30 s，损坏整个纤维环层。假手术组大鼠操作同模型组，但不损坏纤维环层。

手术后，让大鼠在笼内自由活动，不禁食，严格观察有无尿潴留和感染。1周后，磁共振成像(MRI)分析证实了椎间盘退变大鼠模型的成功建立。将建模成功的大鼠随机分为椎间盘退变模型组和芸香苷组。芸香苷组每日以40 mg/kg的剂量灌胃处理，椎间盘退变组给予等量生理盐水。实验持续8周，结束时CO2致死，采集各组大鼠髓核组织，备用。

1.4.2   MRI评估   术后1周，MRI检查大鼠椎间盘退变情况。所有大鼠经10%戊巴比妥(40 mg/kg)腹腔注射麻醉，在磁共振扫描仪中将尾巴拉直。使用3.0 T临床磁铁对所有大鼠进行磁共振成像，以评估矢状面T2加权像的信号和结构变化。采用Pfirrmann分级系统评定椎间盘退变程度[12]。

Pfirrmann分级标准：Ⅰ级，髓核内部结构均匀明亮，椎间盘高正常；Ⅱ级，髓核内部不均匀，椎间盘高度正常；Ⅲ级，髓核内部不均匀且呈灰色，椎间盘高度正常降低；Ⅳ级，髓核内部不均匀且呈黑色，椎间盘高度降低且坍塌。

1.4.3   髓核细胞分离培养   将收集的正常大鼠椎间盘组织分离髓核，用2 g/L胶原酶Ⅱ在37 ℃下消化4 h。然后，将组织转移到含有体积分数15%胎牛血清(FBS)和1%青霉素/链霉素的DMEM/F12培养基中，置于体积分数5% CO2培养箱中37 ℃培养48 h。融合后用0.25%胰蛋白酶-EDTA提取髓核细胞。随后，以5×103 细胞/孔将2 mL髓核细胞传代到10 cm的培养板中。通过免疫荧光标记蛋白聚糖和Ⅱ型胶原蛋白确认髓核细胞，每次实验(包括重复实验)前，分离新的原代髓核细胞并传代到第3代。
1.4.4   髓核细胞活性测定   将100 μL髓核细胞以5×103 细胞/孔 接种至含不同浓度芸香苷(10，50，100，200和400 μmol/L)的96孔板(DMEM/F12培养基)中培养24 h，对照组用生理盐水代替。随后，用10 μg/L的白细胞介素1β处理经不同浓度芸香苷处理的髓核细胞30 min，加入10 μL CCK-8试剂孵育3 h，酶标仪在450 nm处检测吸光度。
1.4.5   RT-qPCR检测   用TRIzol试剂提取髓核组织和细胞中的总RNA，反转录试剂盒将提取的RNA反转录为cDNA。随后，使用RT-qPCR试剂盒在荧光定量PCR仪上进行RT-qPCR反应，采集荧光并分析髓核细胞中Bax、Bcl-2、β-catenin、c-Myc和Cyclin D1的mRNA表达水平。GAPDH作内参，相对表达通过2-ΔΔCt公式计算。引物序列见表1。

1.4.6   免疫印迹(Western blotting)检测   用含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解髓核组织和细胞，BCA测定蛋白浓度。总蛋白经12% 的SDS-PAGE分离，之后转移至PVDF膜上，用含5%脱脂牛奶室温封闭2 h，与环氧化酶2(1∶1 000)、诱导型一氧化氮合酶(1∶1 000)、聚集蛋白聚糖(1∶500)、caspase-3(1∶500)、Bcl-2(1∶500)、Bax(1∶1 000)、β-catenin(1∶1 000)、c-Myc(1∶1 000)、Cyclin D1(1∶1 000)和GAPDH(1∶1 000)抗体4 ℃孵育过夜。随后，PVDF膜与二抗(1∶600)室温共孵育1 h。使用ECL试剂盒在成像系统上进行可视化处理和条带采集，使用Image Lab 3.0软件对环氧化酶2、诱导型一氧化氮合酶、聚集蛋白聚糖、cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2、β-catenin、c-Myc和Cyclin D1的蛋白条带灰度值进行量化分析。并进一步将芸香苷和WNT/β-catenin通路的激活剂R-spondin-1同时处理髓核细胞，分为空白对照组、白细胞介素1β组、白细胞介素1β组+芸香苷(100 μmol/L)组、白细胞介素1β组+芸香苷(100 μmol/L)+R-spondin1(20 μg/L)组，检测芸香苷对白细胞介素1β诱导的髓核细胞中WNT/β-catenin信号通路的影响。
1.4.7   ELISA试剂盒检测   按照ELISA试剂盒说明书，分别用酶标仪在指定波长下检测髓核组织和细胞中炎症因子白细胞介素6和肿瘤坏死因子α，代谢酶基质金属蛋白酶3，9，13、ADAMTS-4和ADAMTS-5，胶原Ⅱ的水平，以及诱导型一氧化氮合酶和caspase-3 的活性。
1.4.8   流式细胞术分析   原代髓核细胞培养至1×105时，接种1 mL于6孔板培养24 h，用胰蛋白酶进行消化。之后将细胞分散在1 mL碘化丙啶(50 mg/L)中，在黑暗中于4 ℃孵育30 min，流式细胞仪观察、记录细胞的凋亡数。
1.5   主要观察指标   ①芸香苷对髓核细胞活性的影响；②芸香苷抑制白细胞介素1β诱导的髓核细胞中炎症因子和氧化应激因子的表达；③芸香苷抑制白细胞介素1β诱导的髓核细胞代谢酶的生成和基质降解；④芸香苷抑制白细胞介素1β诱导的髓核细胞凋亡；⑤芸香苷抑制白细胞介素1β诱导的WNT/β-catenin信号通路的活化；⑥芸香苷改善针刺诱导的大鼠的椎间盘退变。
1.6   统计学分析   使用SPSS 20.0软件进行统计学分析，所有数据均以x±s表示。两组比较采用t检验，多组比较采用单因素方差分析(ANOVA)，当P < 0.05表示差异有显著性意义。文章统计学方法已经河南省中医药大学生物统计学专家审核。

椎间盘退变是近年来导致腰痛的主要潜在原因[2]。椎间盘退变的初始治疗仅限于保守的止痛药和物理治疗，如果保守治疗不能解决疼痛症状和潜在的问题，就需要手术治疗，但手术治疗通常会伴随一系列后遗症的出现[2，6]。随着对椎间盘退变病理知识的快速积累，探索一种促进内源性修复刺激、延缓和治疗椎间盘退变的新药尤为重要，尤其是能够在椎间盘退变早期治疗的药物。

椎间盘退变的发病过程较为复杂，涉及多个生物学过程，如衰老、过度的机械负荷、发生炎症等[1，3]。炎症是退行性级联反应中的传递信使[13]，与正常椎间盘相比，退变的组织中会产生大量的炎症因子[13- 14]。例如，JIN等[15]的研究显示，在椎间盘退变大鼠中肿瘤坏死因子α表达显著升高；SUN等[16]的研究发现，白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α在椎间盘退变大鼠的髓核组织中表达显著上调。在此次研究中发现，白细胞介素1β诱导的髓核细胞中，炎症因子白细胞介素6和肿瘤坏死因子α的表达显著升高。为了进一步验证椎间盘退变过程中会产生大量炎症因子，构建了椎间盘退变大鼠模型，研究发现与正常大鼠髓核组织相比，椎间盘退变大鼠中炎症因子白细胞介素6表达水平显著升高，这与以前的报道相一致，也就表明椎间盘退变的发生引发了大量炎症因子的表达。

有研究显示，白细胞介素1β作为一种细胞因子，与其受体的表达促进细胞外基质降解，进而推进椎间盘退变的进展[3，17]。WANG等[17]的研究显示，白细胞介素1β处理会诱导髓核细胞胞外基质发生降解；ZHANG等[18]的研究显示，褪黑激素可以通过增强胶原蛋白Ⅱ和聚集蛋白聚糖的表达水平，以及下调基质金属蛋白酶3来调节白细胞介素1β诱导的细胞外基质重塑，从而减轻椎间盘退变。在此次研究中，白细胞介素1β诱导的髓核细胞中，代谢酶基质金属蛋白酶3、13和ADAMTS-5的水平显著升高，而胶原Ⅱ和聚集蛋白聚糖的水平则在白细胞介素1β的诱导下显著降低，髓核细胞的凋亡显著增加。除此之外，在此次体内研究发现，发生椎间盘退变大鼠的代谢酶基质金属蛋白酶3的水平要比正常大鼠高，而细胞外基质胶原Ⅱ和聚集蛋白多糖则比正常大鼠低，这一结果更进一步证明了基质降解是推动椎间盘退变发生和发展的一个重要因素。

除此之外，作者还发现，与假手术组相比，在白细胞介素1β诱导的髓核细胞和椎间盘退变大鼠体内，诱导型一氧化氮合酶的表达均显著升高，这一结果表示椎间盘退变的发生过程中有氧化应激发生。这一发现与之前的研究结果一致，在椎间盘退变发生过程中会产生大量的氧化应激因子[19]。CHE等[20]发现，在椎间盘退变小鼠的椎间盘中活性氧水平显著升高；WANG等[21]发现机械敏感离子通道 Piezo1的激活增加了髓核细胞内活性氧水平，以及GRP78和CHOP的表达，促进了氧化应激和内质网 (ER) 应激。Piezo1 沉默改善了体内大鼠模型中的椎间盘退变。有研究显示，芸香苷可以抑制氧化应激、炎症反应和细胞凋亡，从而缓解氯化汞诱导的大鼠肾脏中毒[22]；芸香苷还可以通过抑制氧化应激来减弱万古霉素诱导的肾小管细胞凋亡[23]。在此次研究中，芸香苷的处理能够显著缓解白细胞介素1β诱导的髓核细胞中炎症因子白细胞介素6和肿瘤坏死因子α的表达，抑制白细胞介素1β诱导的环氧化酶2和诱导型一氧化氮合酶的表达。此外，在芸香苷处理的椎间盘退变大鼠中，白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、环氧化酶2和诱导型一氧化氮合酶的表达均比椎间盘退变模型大鼠体内表达降低。与假手术组相比，芸香苷的处理也降低了白细胞介素1β诱导的髓核细胞和椎间盘退变大鼠的髓核组织中的代谢酶的水平，显著升高了胶原Ⅱ的水平和聚集蛋白多糖的表达水平。此次研究结果证实了芸香苷具有一定的抗氧化和抗炎活性，能够通过抑制氧化应激因子和炎症因子的产生，以及抑制细胞外基质的降解来缓解白细胞介素1β诱导的髓核细胞的凋亡，从而改善大鼠的椎间盘退变。

先前的研究显示，WNT/β-catenin通路是椎间盘退变的一个重要信号调节途径，WNT/β-catenin信号通路的活化加剧了椎间盘退变的恶化。如ZHAN等[24]的报道，长链非编码RNA HOTAIR能够激活WNT/β-catenin通路，从而促进髓核细胞衰老、凋亡和细胞外基质降解，加剧椎间盘退变恶变；WANG等[25]的报道显示，RNA结合基序，单链相互作用蛋白3(RBMS3)可降低髓核细胞中β-catenin和c-myc的表达，抑制Wnt/β-catenin信号通路的活性，提高髓核细胞增殖能力，抑制其凋亡和炎症反应，从而延缓椎间盘退变。在此次研究中发现，白细胞介素1β诱导了髓核细胞中WNT/β-catenin信号通路相关基因β-catenin、c-Myc和Cyclin D1的高表达，用芸香苷处理后β-catenin、c-Myc和Cyclin D1的表达显著降低；此外，研究还发现WNT/β-catenin通路的激活剂R-spondin1逆转了芸香苷对WNT/β-catenin信号通路的抑制。这些研究也就表明，芸香苷能够抑制WNT/β-catenin信号通路的活化，这与之前的报道一致[26]。

综上所述，芸香苷能够通过抑制白细胞介素1β诱导的髓核细胞中炎症因子和氧化应激因子的产生，抑制基质降解和髓核细胞凋亡，经WNT/β-catenin通路改善大鼠的椎间盘退变。然而，椎间盘退变的过程涉及多种机制和通路，此次研究仅从炎症因子和氧化应激因子的产生、基质降解、髓核细胞凋亡和WNT/β-catenin通路出发，故后续应进一步探究芸香苷对大鼠椎间盘退变的其他调节机制。
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文题释义：
椎间盘退变：椎间盘退变的发病过程较为复杂，涉及多个生物学过程，如衰老、过度的机械负荷、发生炎症等。炎症是退行性级联反应中的传递信使，与正常椎间盘相比，退变的组织中会产生大量的炎症因子。
芸香苷：研究显示类黄酮还具有阻断细胞周期、诱导细胞凋亡、破坏有丝分裂纺锤体形成的能力，使其在药物开发领域具有广阔的应用前景。芸香苷(Rutin)，又名芦丁，是类黄酮的一种，广泛存在于荞麦、茶叶、苹果等植物中，具有抗氧化、抗炎、抗细胞凋亡、血管保护、神经保护和心脏保护等药理活性，可用于治疗癌症、糖尿病、高血压和高胆固醇血症等多种疾病。

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椎间盘退变是一种复杂的多因素疾病，被认为是导致下腰痛的主要原因之一，严重时会造成致残。目前，全世界大约80%的人正在遭受这一疾病的困扰。有研究显示，椎间盘退变与椎间盘退化、衰老和过度劳累有关。椎间盘由髓核、纤维环和软骨终板3个主要结构组成。髓核是位于椎间盘中心的柔性球体，在前后左右方向被纤维环包围。软骨终板附着在髓核上、下。损害髓核、纤维环或软骨终板的因素可能导致椎间盘的退化。髓核在椎间盘功能中起核心作用，由髓核细胞和细胞外基质成分组成。髓核是无血管组织，通过终板扩散获得营养。氧化应激、炎症、细胞饥饿和机械力可导致髓核细胞功能障碍并破坏细胞外基质合成和分解的平衡。髓核细胞功能的调节和细胞外基质代谢平衡的恢复是延迟椎间盘退变的关键。椎间盘退变在临床上的治疗通常采用保守的药物治疗或者手术治疗，但现有的治疗手段均存在很大的局限性，只能部分缓解椎间盘退变引起的症状，不能从根本上逆转椎间盘退变。目前尚无有效的方法可逆转椎间盘退变的进展，且该疾病治疗后易复发。因此，迫切需要开发有效的治疗药物，真正改善椎间盘退变的进展。

芸香苷(Rutin)，又名芦丁，是类黄酮的一种，广泛存在于荞麦、茶叶、苹果等植物中，具有抗氧化、抗炎、抗细胞凋亡、血管保护、神经保护和心脏保护等药理活性，被用于治疗癌症、糖尿病、高血压和高胆固醇血症等多种疾病。但芸香苷在椎间盘退变性疾病中的研究较少，因此，通过构建椎间盘退变的模型大鼠，探索芸香苷在椎间盘退变中的调节作用及其机制，拟为椎间盘退变的临床治疗提供一定的理论基础，为治疗椎间盘退变的药物开发提供新的思路。

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