植物源神经导管与鼻黏膜外胚层间充质干细胞的生物相容性

doi:10.12307/2022.330

中国组织工程研究 ›› 2022, Vol. 26 ›› Issue (13): 2040-2044.doi: 10.12307/2022.330

• 干细胞培养与分化 stem cell culture and differentiation • 上一篇下一篇

植物源神经导管与鼻黏膜外胚层间充质干细胞的生物相容性

郑又菲1，2，史文涛2，刘效谷2，庄琴2，吕德民1，2，张佳音2，袁依雯2，张志坚2，徐晓峰1，2

1江苏大学附属医院脊柱一科，江苏省镇江市 212000；2江苏大学医学院，江苏省镇江市 212000

收稿日期:2020-12-07 修回日期:2020-12-11 接受日期:2021-01-27 出版日期:2022-05-08 发布日期:2021-12-20
通讯作者: 徐晓峰，主任医师，江苏大学附属医院骨科，江苏省镇江市 212000；江苏大学医学院，江苏省镇江市 212000
作者简介:郑又菲，男，1994年生，汉族，江苏大学在读硕士，医师，主要从事外周神经损伤及生物工程方向的研究。
基金资助:
国家自然科学基金地区科学基金项目(81571830)，项目负责人：张志坚；江苏大学临床医学科技发展基金项目(JLY20180040)，项目负责人：史文涛

Biocompatibility of plant-derived nerve conduits to nasal ectomesenchymal stem cells

Zheng Youfei1, 2, Shi Wentao2, Liu Xiaogu2, Zhuang Qin2, Lü Demin1, 2, Zhang Jiayin2, Yuan Yiwen2, Zhang Zhijian2, Xu Xiaofeng1, 2

1First Department of Orthopedics, Affiliated Hospital of Jiangsu University, Zhenjiang 212000, Jiangsu Province, China; 2Medical School, Jiangsu University, Zhenjiang 212000, Jiangsu Province, China

Received:2020-12-07 Revised:2020-12-11 Accepted:2021-01-27 Online:2022-05-08 Published:2021-12-20
Contact: Xu Xiaofeng, Chief physician, First Department of Orthopedics, Affiliated Hospital of Jiangsu University, Zhenjiang 212000, Jiangsu Province, China; Medical School, Jiangsu University, Zhenjiang 212000, Jiangsu Province, China
About author:Zheng Youfei, Master candidate, Physician, First Department of Orthopedics, Affiliated Hospital of Jiangsu University, Zhenjiang 212000, Jiangsu Province, China; Medical School, Jiangsu University, Zhenjiang 212000, Jiangsu Province, China
Supported by:
the National Natural Science Foundation of China, No. 81571830 (to ZZJ); the Clinical Medicine Science and Technology Development Project of Jiangsu University, No. JLY20180040 (to SWT)

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：
植物源神经导管：选取植物管状茎秆，去除植物蛋白，保留其纤维性管状外形，并在其表面修饰细胞外基质制成的神经导管，可通过进一步研究，尝试用于桥接周围神经缺损断端。
生物相容性：文章对培养的鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞与植物源神经导管进行生物相容性研究，在提取SD大鼠鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞并培养和鉴定后，将细胞种植于神经导管表面，通过蛋白免疫印迹、免疫荧光及MTT细胞活性检测等方法综合评估该神经导管与鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞的生物相容性。

背景：神经导管桥接神经间隙替代自体神经移植修复周围神经损伤的报道很多，鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞是移植治疗周围神经损伤的重要种子细胞。
目的：研究鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞与植物源神经导管的生物相容性及其在导管表面的自发分化生长情况。
方法：取自然界内径为0.2 cm的植物管状茎秆，用物理和化学方法去除茎秆的肉质，保留其纤维性管状外形，用层粘连蛋白以京尼平交联修饰植物导管表面；体外分离和培养鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞，并分为3组，分别种植于空白培养板、未修饰导管及修饰导管表面，于1，3，5，7，14 d以MTT法检测细胞活性，体外评估二者的生物相容性；细胞种植并培养2周后以细胞蛋白免疫印迹及免疫荧光实验观察该导管对鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞自发分化的影响。
结果与结论：①鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞在植物导管纤维表面生长良好且成定向排列，植物导管与鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞具有良好的生物相容性；②经层粘连蛋白修饰的导管表面的鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞表达MBP和S100，且均高于空白组及未修饰导管组；③结果表明，层粘连蛋白修饰的植物源神经导管可促进鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞向许旺细胞分化，可为天然植物源神经导管负载种子细胞移植修复周围神经缺损提供新的理论依据。

https://orcid.org/0000-0001-7059-8384(郑又菲)；https://orcid.org/0000-0001-6120-0530 (徐晓峰)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

关键词: 干细胞, 移植, 鼻黏膜, 外胚层间充质干细胞, 植物纤维, 神经导管, 生物相容性, 周围神经损伤

Abstract: BACKGROUND: There are many reports on the repair of peripheral nerve injury by nerve conduit bridging nerve gap instead of autogenous nerve graft. The nasal ectomesenchymal stem cell is an important seed cell for the transplantation of peripheral nerve injury.
OBJECTIVE: To investigate the biocompatibility of nasal ectomesenchymal stem cells and plant-derived neural conduits and the spontaneous differentiation and growth of nasal ectomesenchymal stem cells on the surface of the conduit.
METHODS: Tube culms with an inner diameter of 0.2 cm were selected in nature. After physical and chemical removal of pulp, their fibrous tubular shape was retained. The extracellular matrix protein laminin was modified by genipin. Nasal ectomesenchymal stem cells were isolated and cultured in vitro, and divided into three groups: the blank group (blank culture plate), the unmodified group (unmodified conduit) and the modified group (modified conduit). MTT assay was performed at 1, 3, 5, 7, and 14 days to evaluate cell viability. Biocompatibility was assessed in vitro. The effect of the conduit on the spontaneous differentiation of nasal mucosa-derived ectodermal mesenchymal stem cell was observed by immunoblotting and immunofluorescence two weeks after cell implantation and culture.
RESULTS AND CONCLUSION: (1) Nasal ectomesenchymal stem cells grow well and were oriented on the surface of plant duct fibers, and plant conduits were biocompatible with nasal ectomesenchymal stem cells. (2) The expression levels of MBP and S100 in nasal ectomesenchymal stem cells implanted on the surface of the catheter were higher than those in the blank and unmodified groups. (3) It is concluded that the differentiation of nasal ectomesenchymal stem cells into Schwann cells can be promoted by laminin-modified plant-derived nerve conduits, which may provide a new theoretical basis for the transplantation and repair of peripheral nerve cells loaded with natural plant-derived nerve conduits.

Key words: stem cells, transplantation, nasal mucosa, ectodermal mesenchymal stem cell, fiber plants, nerve conduit, biocompatibility, peripheral nerve injury

中图分类号:

郑又菲, 史文涛, 刘效谷, 庄琴, 吕德民, 张佳音, 袁依雯, 张志坚, 徐晓峰. 植物源神经导管与鼻黏膜外胚层间充质干细胞的生物相容性[J]. 中国组织工程研究, 2022, 26(13): 2040-2044.

Zheng Youfei, Shi Wentao, Liu Xiaogu, Zhuang Qin, Lü Demin, Zhang Jiayin, Yuan Yiwen, Zhang Zhijian, Xu Xiaofeng. Biocompatibility of plant-derived nerve conduits to nasal ectomesenchymal stem cells[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2022, 26(13): 2040-2044.

图/表（结果） 5

2.1 鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞的干细胞标志蛋白的表达第1代大鼠鼻黏膜细胞形成小集群分布，早期扁平多边形上皮样细胞为优势细胞，呈鹅卵石状，巢样分布。随传代次数增加上皮样细胞逐渐消失，梭形的鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞增殖较快，当细胞铺满瓶底时，可见大量长条形纺锤状细胞平行排列。免疫荧光染色可观察到传代培养的鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞表达Nestin和Vimentin，见图1，且这2种表面标志物的表达率都大于95%，这表明实验分离培养的鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞纯度较高。

2.2 植物导管的外观和表面显微结构未经处理的节节草茎秆为管状，见图2A，管壁有肉质和纤维组成，不透明，表面纹路不清楚；经过化学处理的茎秆为浅黄色半透明管状，见图2B，表面纹路清楚；再用京尼平交联层粘连蛋白修饰后植物导管的透明度降低，外观呈浅蓝色，见图2C。未修饰的植物导管用相差显微镜观察可见平行排列的条纹，见图2D；将层粘连蛋白修饰的植物导管剪开压平成膜片，用荧光显微镜观察均可见自发性红色荧光，条纹更清晰，见图2E，因使用京尼平交联后导管具有自发性红色荧光，故导管表面鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞蛋白荧光染色选用绿色荧光二抗IgG-Dylight 488。

2.3 鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞在植物纤维导管表面的生长状态及其与导管的生物形容性将鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞与所制备的植物神经导管复合培养，培养14 d取出细胞/导管复合物，免疫荧光染色观察细胞表达S100与MBP，由此可见鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞在所构建的植物源神经导管表面可自发向许旺细胞分化，见图3。

倒置荧光显微镜观察，对照组(培养板上生长的细胞)细胞排列无明显方向性，S100和MBP染色相对较弱；未经修饰的植物导管膜片上S100及MBP荧光阳性鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞生长状态不良，细胞分布稀疏，形态为短梭形或圆形；层粘连蛋白修饰的植物导管膜片上S100及MBP荧光阳性鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞生长状态良好，细胞基本布满于植物纤维导管膜片，细胞呈长梭形，其突起生长方向与植物纤维导管膜片表面条纹长轴平行。由此说明层粘连蛋白修饰有利于细胞的黏附和生长。
MTT检测结果显示，鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞与植物源神经导管复合培养1，3，5，7，14 d的吸光度值随培养时间增加而增大，前5 d细胞增长较快，7 d后细胞增殖相对较缓慢，生长曲线呈S形且与对照组生长曲线相似，见图4，说明植物源性神经导管对鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞活性没有明显影响。

提取并配平各组细胞蛋白，免疫印迹法检测结果显示，种植于未修饰植物神经导管表面的鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞表达MBP与S100；种植于层粘连蛋白修饰的植物神经导管表面的鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞高表达MBP与S100，见图5。

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引言

周围神经损伤引起的神经干缺损在临床病例中很常见[1-2]。自体神经移植仍是修复神经缺损的常用方法[3]，但是这种疗法有很多局限性，例如供者来源不足、需要额外切口、神经匹配问题，还可能引起一些严重的并发症如供区神经功能丧失、炎症反应及供区神经瘤等[4-6]，近年来已经开发了很多自体神经移植的替代方法[7]，例如使用神经导管桥接神经间隙[8-9]。自然界中具有很多管状植物，获取容易，植物纤维无明显抗原性，植入宿主体内不易引起免疫反应。以植物纤维为主体的植物导管具有生物相容性好、管型结构持久稳固等神经导管应具备的优点，去除肉质后，因其主体为植物纤维横纵排列构成的网状结构，相比于同样不可降解的硅胶管，植物导管具有良好的渗透性，有利于内外物质交换，同时可阻止周围组织向导管内增生形成瘢痕，其天然具备的网状条纹结构有利于细胞生长黏附 [10]，故近来受到科研工作者的关注[11]。
外胚层间充质干细胞(ectomesenchymal stem cells，EMSCs)起源于胚胎发育时期神经嵴[12-13]，是间充质干细胞中的一种特殊类型，可从口腔黏膜、牙髓和鼻腔黏膜(包括呼吸部黏膜和嗅黏膜)获得。相比于嗅黏膜，呼吸部黏膜的手术操作方便，取材量更大，损伤小，且对嗅觉无损伤[14-15]。研究表明，外胚层间充质干细胞具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能，在细胞因子和特定的理化环境诱导下，能够分化为许旺细胞、成骨细胞、神经元和神经胶质细胞等多种细胞类型[16]；外胚层间充质干细胞还能够分泌多种神经营养因子如神经生长因子、音猬因子及细胞外基质，诱导神经干细胞向神经元分化，维持一个适宜神经干细胞定向分化的微环境[12，17]。外胚层间充质干细胞可作为移植治疗外周神经损伤的重要种子细胞，并且可与神经导管联合运用[18]。但是，目前对于外胚层间充质干细胞与植物源神经导管的生物相容性知之甚少。
该研究率先选用植物“节节草”为研究对象[10]，利用化学和物理方法去除植物蛋白，保留植物原有的管状纤维结构。然而，植物导管表面不利于细胞黏附，因此以交联剂京尼平在其表面交联了利于神经突起延伸、干细胞黏附、增殖及迁移的层粘连蛋白制成植物神经导管[19-21]。体外探讨鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞与该植物神经导管的生物相容性以及鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞在植物神经导管上的自发分化情况。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

材料方法

1.1 设计离体细胞模型，植物材料与细胞的生物相容性，细胞功能数据采用单因素方差分析。
1.2 时间及地点实验于2019年10月至2020年5月在江苏大学医学院基础研究所2408实验室完成。
1.3 材料
1.3.1 实验动物 SPF级雌性SD大鼠6只，4周龄，体质量(80±5) g，由江苏大学实验动物中心提供，机构许可证号：SCXK(苏)2018-0012。
1.3.2 实验试剂、仪器、设备自制内径2 mm植物神经导管若干；DMEM/F12和胎牛血清(Gibco公司)；二巯基乙醇(北京鼎国生物科技有限公司)；层粘连蛋白、0.5%胰酶(Sigma公司)；免疫组织化学染色和Western blot检测试剂[Loadingbuffer、兔抗Nestin、小鼠抗Vimentin、小鼠抗S100、小鼠抗MBP、小鼠抗β-tubulin抗体、荧光素(Cy3，Dylight 488)标记二抗、HRP标记二抗、PVDF膜和ECL-Plus 化学发光剂等]均购自武汉博士德生物公司。
1.4 实验方法
1.4.1 植物来源神经导管的制备选取内径适宜(约2 mm)的节节草茎杆的节间部分，利用酸、碱浸泡和胰蛋白酶及木瓜蛋白酶消化的处理方法，去除茎杆的肉质。具体处理步骤：①自节节草茎杆节间段截取1 cm长的导管，于去离子水中浸泡24 h；②将导管置圆底烧瓶中以300 mL 10%硫酸在60 ℃水浴条件下反应40 min取出，用双蒸水清洗至中性；将导管置300 mL 10%氢氧化钠中，在60 ℃水浴条件下反应20 min取出，用双蒸水清洗至中性；③将导管依次浸泡于10 mL 0.5%胰酶与10 mL 1%木瓜蛋白酶中，在37 ℃条件下消化10 min；④用体积分数为30%，50%，70%，90%，100%梯度乙醇对导管脱水，每个梯度10 min，使导管变成半透明管状；⑤最后导管置于4 ℃冰箱保存，用于后续的表面修饰。
1.4.2 植物导管的层粘连蛋白修饰为了提高植物导管的生物相容性，促进细胞黏附，将上述化学处理的纤维性植物导管放入1%京尼平溶液中浸泡1 h，置于37 ℃真空烘箱内烘干，放入1 mg/L层粘连蛋白溶液中浸泡1 h，置于37 ℃真空烘箱内烘干，重复处理3遍，制备好的导管置4 ℃冰箱保存备用。

1.4.3 鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞的培养与鉴定将SD大鼠颈椎脱位处死，用碘酒消毒鼻及周边区域，在无菌操作台内提取鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞。具体操作：用剪刀去除鼻头软骨及软组织，剪开两侧鼻腔，掀起颌骨，用镊子完整取出鼻中隔并分离全层鼻黏膜；用无血清DMEM/F12将鼻黏膜漂洗3次，剪碎，去上清，加入0.25%胰酶消化10 min，PBS漂洗3次后离心去除胰酶，转移至细胞培养瓶，加入4 mL含体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12(含青霉素100 U/mL和链霉素100 U/mL)，于细胞培养箱中(37 ℃，体积分数为5% CO2，饱和湿度)培养，每2 d半量换液1次，弃去未贴壁的细胞，当细胞铺满瓶底85%时，消化传代，可得第1代鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞，两三天后观察到细胞贴壁生长密集，再进行传代，待贴壁后获得第2代扩增的细胞。大鼠鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞在使用前已传代3-5次。取第3代培养至铺满25 cm2培养瓶底的鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞，消化后接种于24孔板(2瓶接种于1个24孔板，约1×106/孔)，待细胞铺满板底80%时，用40 g/L多聚甲醛4 ℃固定8 h，PBS漂洗3遍，用含0.1% Triton X-100的2% BSA封闭30 min，弃封闭液，加入Nestin和Vimentin抗体，4 ℃孵育12 h，PBS漂洗3次，加入对应标记二抗(Cy3，Dylight 488)，37 ℃孵育1 h，DAPI复染细胞核，封固后于荧光显微镜下观察。

1.4.4 植物纤维导管与鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞的细胞相容性实验实验分3组，分别为空白组、未修饰导管组及修饰导管组。在无菌超净台中，将层粘连蛋白修饰和未修饰的植物纤维导管沿长轴剪开并用砝码(50 g)压平成膜片，将压平的植物导管膜片平铺于24孔板内(导管内表面向上)并用砝码(50 g)压平，以保证导管表面平行于24孔板，利于均匀接种细胞。取出砝码，将鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞悬液(细胞浓度为5×1010 L-1)分别滴加于空白培养板及两种植物导管膜片表面(20 μL/孔，约1×106/孔)，1 h后细胞即可黏附于植物纤维导管表面。细胞黏附后在培养孔周边轻轻加入1 mL含体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12培养基，于细胞培养箱内培养2周，用于接下来的免疫印迹和免疫荧光实验。
1.4.5 免疫印迹与免疫荧光实验收集种植于植物神经导管上的鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞蛋白，BCA方法测定蛋白含量，用PBS将蛋白样品调整为蛋白浓度相等后与等体积上样缓冲液混匀并煮沸5 min，置-80 ℃冰箱冻存备用。常规配制10%的分离胶和5%的浓缩胶，加样，电泳，转模，5%脱脂奶粉(TBS-T稀释)室温封闭1 h，以小鼠抗MBP、小鼠抗 S100、小鼠抗β-tubulin为一抗(1∶300)，4 ℃孵育过夜，以HRP标记的羊抗小鼠IgG为二抗(1∶5 000)室温孵育1 h，加入ECL-Plus发光剂室温孵育5 min，用分子成像系统扫描仪(TyPhoon 9400)扫描图像，以Image J软件分析灰度值，目的蛋白与内参蛋白β-tubulin条带灰度的比值表示目的蛋白的相对含量。另外，采用免疫荧光验证两种蛋白表达模式，方法如上细胞鉴定所述。
1.4.6 MTT细胞活性检测分别于1，3，5，7，14 d各取出植物神经导管3片，弃去原培养液，加入2% MTT试剂1 mL，置于37 ℃培养箱内1 h，每孔内滴加二甲基亚砜溶液1 mL，用吸管反复吹打导管表面约1 min，取96孔板，每孔内用吸液枪滴加200 μL吹打均匀的细胞悬液，采用酶标仪于490 nm波长下检测吸光度值。
1.5 主要观察指标鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞种植于植物源导管表面后的细胞活性以及MBP和S100的表达。
1.6 统计学分析使用SPSS 20.0统计软件对数据进行分析。数据以x±s表示，以单因素方差分析(One-way ANOVA)进行统计学检验，组间比较采用t检验，P < 0.05为差异有显著性意义。

讨论

以天然植物纤维形成的管状结构作为3D空间结构支架，它符合天然材料制备神经导管所需要具备的很多优点[22-23]：①植物纤维取材方便，自然界广泛存在，且植物纤维免疫原性弱；②取材于天然植物“节节草”，去除其肉质后，保留的植物纤维横纵排列呈网状结构，具有良好的渗透性，可吸取氧气及营养物质，且该结构韧性强，不易于桥接时被缝线切割；③该导管天然具备的网状条纹结构有利于细胞生长黏附，其较粗的纵向条纹有利于引导再生神经纤维向前延伸。已有实验证明含有排列结构的神经导管比空管具有更好的临床效果[24]；④因导管主体成分为植物纤维，由于人体组织不能分泌纤维素酶，植物导管能长期稳定维持管腔结构而不降解；⑤在其表面以京尼平交联层粘连蛋白提高了其生物相容性：层粘连蛋白是复杂的三聚体糖蛋白，是干细胞基底层的主要成分，对神经突的延伸和干细胞的黏附、增殖和迁移有积极作用，总体上表现出促进神经再生的能力[25]，这更利于干细胞移植发挥作用；⑥经无菌处理后便于长期保存及运输，不易损坏。该实验目的在于检测该生物支架与鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞的生物相容性，具体方法是将支架材料与种子细胞在体外共培养，研究细胞活性、细胞增殖情况及细胞在支架上自发分化等指标，具有客观性强、影响因素易控制等优点。
外胚层间充质干细胞是一种良好的生长因子来源的细胞[14，26]，起源于颅神经嵴，有潜力分化为骨骼、软骨、结缔组织和神经细胞[27-29]，且广泛分布于颅面黏膜固有层[30]。该研究从鼻黏膜组织块中获得了外胚层间充质干细胞，在体积分数为10%胎牛血清的普通培养基中快速增殖，免疫荧光染色显示Vimentin和Nestin表达阳性，提示其有干细胞特性。鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞可在植物神经导管中高表达MBP和S100，表明种植于植物神经导管表面的鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞可自发向许旺细胞分化。与以往的诱导分化不同[31-32]，该实验培养体系内未添加其他生物因子和化学诱导剂。鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞在该神经导管上自发向许旺细胞分化的原因可能由于其取自神经嵴，本身具有向神经谱系分化的潜能[26]，同时该植物神经导管存在顺向排列的微纳结构，该结构可驯化鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞，提供一定的机械性能，从而迫使鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞骨架改变，进而引发细胞表型的转变。然而，具体的分子机制仍然需要进一步探讨和阐明，在未来的研究中将继续跟进。另外，实验观察到接种在植物神经导管表面上细胞增殖活性良好，可作为种子细胞的良好载体。
综上所述，通过将鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞种植于植物神经导管表面，发现该导管与鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞具有良好的生物相容性，同时发现该植物神经导管可有效促进鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞向许旺细胞分化。然而，以植物神经导管作为鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞的载体移植治疗周围神经损伤仍然需进行体内实验验证，关于植物神经导管的具体理化性质以及移植治疗周围神经损伤，课题组将继续深入探讨。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

植物源神经导管与鼻黏膜外胚层间充质干细胞的生物相容性

Biocompatibility of plant-derived nerve conduits to nasal ectomesenchymal stem cells

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