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淫羊藿苷对大鼠肾脏缺血再灌注后炎性损伤的保护

丰贵文，刘龙山，尚文俊

中国组织工程研究 2012, 16 (40): 7496-7502. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2012.40.017

摘要（280）

PDF （566KB）（479）

背景：肾移植过程中移植肾缺血再灌注损伤不可避免，采用药物减轻该损伤有助于提高肾移植近远期疗效。淫羊藿苷对心肌和脑缺血的治疗效果较好，对肾脏缺血再灌注的作用尚不清楚。
目的：探索淫羊藿苷对肾脏的缺血再灌注损伤的保护机制。
方法：54只SD大鼠随机等分为假手术组、淫羊藿苷组和模型组，后2组大鼠建立单侧肾脏缺血再灌注损伤模型，假手术组大鼠仅游离肾蒂而不钳夹阻断肾血管。淫羊藿苷组和模型组在造模前2 d至造模后12 d分别给予100 mg/kg淫羊藿苷和1 mL/kg 0.3%羧甲基纤维素钠灌胃，1次/d。
结果与结论：相比于对照组，肾脏缺血再灌注损伤后大鼠血肌酐明显升高，肌酐清除率下降，肾组织出现病理性损伤，而给予淫羊藿苷的大鼠，大鼠肾组织诱生型一氧化氮合酶 mRNA和蛋白表达水平下降，肾组织内的促炎因子(肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β，6)、趋化因子(干扰素诱导蛋白10、单核细胞趋化蛋白1、巨噬细胞炎性蛋白2)mRNA的表达水平降低，肾脏缺血再灌注损伤后6 h，大鼠血浆亚硝酸盐/硝酸盐和肾组织内髓过氧化物酶水平最高，而后逐渐下降；且淫羊藿苷组大鼠血浆亚硝酸盐/硝酸盐和肾组织内髓过氧化物酶水平低于模型组(P < 0.05)。提示淫羊藿苷可通过抑制诱生型一氧化氮合酶酶表达及其下游的炎症级联反应而减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤。

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大黄酸可影响高糖培养SD大鼠肾小球系膜细胞的凋亡

郭禹，李岩，房卉，印晓星，魏群利

中国组织工程研究 2012, 16 (40): 7503-7507. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2012.40.018

摘要（293）

PDF （481KB）（555）

背景：含有大黄的复方中药消可宁能有效防治早期糖尿病肾病。
目的：观察大黄酸对髙糖培养的SD大鼠肾小球系膜细胞凋亡的影响。
方法：以20，40，80 μmol/L浓度的大黄酸刺激髙糖培养的肾小球系膜细胞，苏木精-伊红染色观察凋亡细胞形态，DAPI荧光染色观察细胞核凋亡情况，流式细胞仪观察细胞凋亡率。
结果与结论：苏木精-伊红染色及DAPI染色结果显示大黄酸可促进髙糖培养的肾小球系膜细胞的凋亡，且与浓度与时间成正相关。各组肾小球系膜细胞的细胞凋亡率差异有显著性意义(P < 0.05)，表明大黄酸对髙糖培养的肾小球系膜细胞凋亡产生影响且与浓度及时间成正相关。

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单侧输尿管梗阻肾间质纤维化模型大鼠与川芎嗪的干预

李健芝，庾江东，梁瑜，刘玉明，胡丽，杨波，周秀田

中国组织工程研究 2012, 16 (40): 7508-7513. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2012.40.019

摘要（373）

PDF （772KB）（452）

背景：肾间质纤维化与组织基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制因子2表达失衡有关。
目的：建立单侧输尿管梗阻肾纤维化模型，观察川芎嗪治疗后肾间质病理变化及肾组织组织基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制因子2的表达变化。
方法：24只雌性SD大鼠分为3组，除假手术组外，模型组及川芎嗪组均在无菌条件下行左侧输尿管结扎建立单侧输尿管梗阻模型，川芎嗪组于术前1 d开始灌胃给药，40 mg/(kg•d)，1次/d，连续2周。术后14 d处死各组大鼠，留取梗阻侧肾组织行苏木精-伊红染色和Masson染色以观察肾组织病理改变，免疫组化和反转录-聚合酶链反应方法检测肾组织基质金属蛋白酶2、金属蛋白酶组织抑制因子2的表达水平。
结果与结论：川芎嗪组可明显减轻肾小管的扩张和萎缩，减轻肾间质纤维组织增生及炎性细胞浸润。与假手术组相比，模型组基质金属蛋白酶2、金属蛋白酶组织抑制因子2蛋白和mRNA基因表达均明显增加(P < 0.01)；川芎嗪组上述物质表达较模型组明显减少(P < 0.01)。提示川芎嗪通过下调基质金属蛋白酶2、金属蛋白酶组织抑制因子2的表达，从而改善单侧输尿管梗阻大鼠的肾间质纤维化。

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丹参对缺血再灌注损伤皮瓣成活率的影响

何志，仇树林

中国组织工程研究 2011, 15 (5): 855-860. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.05.023

摘要（318）

PDF （1768KB）（653）

背景：丹参被认为有防治皮瓣缺血再灌注损伤的作用，但其具体机制尚不明确。
目的：观察丹参注射液对皮瓣缺血再灌注损伤的保护作用，并探讨其机制。
方法：48只Wistar大鼠随机分为3组(n=16)：对照组：不进行灌注干预；缺血再灌注组：术前3 d至术后5 d，每日腹腔注射生理盐水2 mL/kg；丹参组：将生理盐水换为等量的丹参注射液。在大鼠以腹壁浅血管为蒂的岛状皮瓣缺血再灌注模型上，分别测定皮瓣组织中丙二醛、髓过氧化物酶、细胞间黏附分子1、核因子κB含量，并对切片进行图像分析，观察皮瓣成活率。
结果与结论：缺血再灌注组、丹参组于再灌注后2，8，24 h，对照组于术后10，16，32 h，丙二醛、髓过氧化物酶值以及核因子κB和细胞间黏附分子1的表达均呈现出：缺血再灌注组>丹参组>对照组(P < 0.01)。皮瓣成活率为：缺血再灌注组<丹参组<对照组(P < 0.01)。结果提示，丹参可能通过抑制核因子κB激活环形炎症反应通路及自身即具有的抗氧化、提高机体总体抗氧化的能力，减轻皮瓣缺血再灌注损伤，促进皮瓣成活。

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雷公藤甲素PG490-88联合环孢素A免疫抑制诱导肾移植急性排斥反应模型大鼠的免疫耐受

戴澄，王平，张新涛，黄志恒，朱量

中国组织工程研究 2011, 15 (5): 861-864. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.05.024

摘要（333）

PDF （1311KB）（430）

背景：近年来的研究发现雷公藤甲素具有很好的抗排异、抗肿瘤作用。PG490-88是雷公藤甲素的提取物，能够预防移植物抗宿主病和诱导免疫耐受。
目的：探讨雷公藤甲素PG490-88联合环孢素A在大鼠肾移植急性排斥反应中诱导免疫耐受的作用。
方法：改良法建立大鼠肾移植动物模型。40只Wistar大鼠做供体、40只SD大鼠做受体，随机数字表法均分为4组：对照组给予常规饮食。雷公藤甲素组给予雷公藤甲素PG490-88 20 mg/(kg•d)灌胃。环孢素A组给予环孢素A 15 mg/(kg•d)灌胃；联合治疗组：PG490-88 20 mg/(kg•d)+环孢素A 15 mg/(kg•d)灌胃。分别检测肾移植后各组1，3，5，7，14 d外周血白细胞介素2受体水平和肾移植后大鼠的脾脏淋巴细胞组织中的白细胞介素2活性蛋白表达。
结果与结论：3个治疗组的白细胞介素2活性和白细胞介素2受体均明显低于对照组(P < 0.05)。其中，联合治疗组低于雷公藤甲素组和环孢素A组，差异有显著性意义(P < 0.05)。提示，雷公藤甲素PG490-88通过对白细胞介素2、白细胞介素2受体的影响，来达到免疫抑制作用，不但具有免疫抑制作用，而且还能够诱导一定程度的免疫耐受，联合环孢素A效果会更好。

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落新妇甙对肝缺血再灌注损伤的保护作用

慕宁，江艺，张绍庚，陈少华，吕立志，张坤，杨芳，张小进，蔡秋程，潘凡

中国组织工程研究 2011, 15 (5): 865-869. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.05.025

摘要（352）

PDF （627KB）（455）

背景：肝脏是对缺血再灌注损伤最敏感的器官之一。黄酮类化合物落新妇甙可作为递氢体清除氧自由基，从而可能在减轻肝脏缺血再灌注损伤等方面发挥作用。
目的：观察落新妇甙对肝脏热缺血再灌注损伤的保护作用，对其机制进行初步探讨。
方法：C57BL/6小鼠随机分为4组：假手术组、模型组、小剂量干预组和大剂量干预组。干预组小鼠于缺血前24 h和1 h分别给予10或40 mg/kg的落新妇甙腹腔注射，然后建立70%部分肝缺血再灌注模型。采集血液和肝脏组织样本。检测血清丙氨酸氨基转移酶活性，ELISA测血清肿瘤坏死因子α水平，化学比色法测定肝组织中超氧化物歧化酶、丙二醛含量。肝脏组织病理学检测。Westernblot检测肝组织中肿瘤坏死因子α蛋白含量，RT-PCR检测肿瘤坏死因子α mRNA。
结果与结论：落新妇甙干预能有效降低血清丙氨酸氨基转移酶水平，干预组肝组织丙二醛含量较模型对照组明显下降(P < 0.01)；而超氧化物歧化酶含量明显上升(P < 0.01)；干预组血清肿瘤坏死因子α含量较模型组对照组明显下降(P < 0.01)；小、大剂量干预组肝组织中肿瘤坏死因子α蛋白表达与模型组模型对照组比较渐次降低，与半定量RT-PCR结果相符(小剂量干预组P < 0.05，大剂量干预组P < 0.01)。落新妇甙保护肝脏热缺血再灌注损伤显示出剂量-效应关系趋势。结果提示，落新妇甙干预能减轻小鼠肝脏热缺血再灌注损伤后的炎症反应和脂质过氧化损伤，有效改善肝功能和肝脏病理损害；机制可能在于其能抑制缺血再灌注损伤肝组织中肿瘤坏死因子α的高表达。

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大鼠背部超长原位回植皮瓣成活：人参皂甙Rb1影响的验证

曹畅，李棋，岑瑛

中国组织工程研究 2010, 14 (18): 3339-3342. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.18.026

摘要（367）

PDF （818KB）（464）

背景：国内外将人参皂甙Rb1应用于心、脑、肺、肾及肝损害的保护与治疗的报道较多，但是将人参皂甙Rb1用于皮瓣的研究还未见报道。
目的：观察腹腔注射人参皂甙Rb1对大鼠背部超长宽比例随意皮瓣成活的影响。
方法：将健康成年SD大鼠以数字表法随机分为实验组及对照组。于大鼠背部设计制备蒂部在尾部的超长皮瓣80 mm× 20 mm(长宽比4∶1)，原位回植。术中即刻、术后第1~5天腹腔注射2 mg/kg人参皂甙Rb1生理盐水溶液，对照组腹腔注射等量生理盐水。术后1 d取材测定皮瓣一氧化氮和丙二醛含量，术后10 d测定皮瓣存活率，取皮瓣近、中、远段行苏木精-伊红染色观察。
结果与结论：术后1 d实验组皮瓣一氧化氮含量高于对照组(P < 0.01)，丙二醛含量低于对照组(P < 0.01)。术后10 d，实验组皮瓣成活率明显高于对照组(P < 0.001)。组织学观察显示，实验组水肿及炎性细胞浸润较对照组明显减轻，纤维增生较对照组明显。结果提示围手术期腹腔注射人参皂甙Rb1能明显改善大鼠皮瓣血供，提高皮瓣的成活面积和成活率，其作用机制可能与促进内皮细胞分泌释放NO、清除氧自由基、降低脂质过氧化产物、促进皮瓣血管新生有关。

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川芎嗪对皮瓣缺血再灌注损伤的保护作用

曹正品，程春生，赵志伟，单海民

中国组织工程研究 2010, 14 (18): 3343-3346. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.18.027

摘要（281）

PDF （798KB）（403）

背景：近年来研究发现，川芎嗪有清除氧自由基及保护血管内皮细胞的作用，大量的实验及临床研究涉及各种脏器，但对川芎嗪在皮瓣移植过程中缺血再灌注损伤的防治作用报道甚少。
目的：观察川芎嗪对大鼠腹部皮瓣组织缺血再灌注损伤的影响，并分析其作用途径。
方法：纳入24只健康SD大鼠，制备腹壁浅动脉为蒂的轴型缺血再灌注皮瓣。按随机数字表法分为假手术组、模型对照组和川芎嗪组，每组8只。假手术组皮瓣无缺血再灌注过程；模型对照组于造模前30 min给予生理盐水4 mL/kg；川芎嗪组造模后再灌注即刻给予川芎嗪4 mL/kg腹腔注射。模型对照组及川芎嗪组在皮瓣形成即刻、缺血8 h、再灌注1 h，假手术组在皮瓣形成即刻、术后8，9 h，取皮瓣中远处组织，测定组织匀浆内超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量，光镜及电镜下观察组织形态学变化。
结果与结论：缺血8 h、再灌注1 h，模型对照组皮瓣组织中超氧化物歧化酶活性显著低于假手术组(P < 0.05~0.01)，川芎嗪组皮瓣组织中超氧化物歧化酶活性显著高于模型对照组(P < 0.05~0.01)。再灌注1 h，模型对照组皮瓣组织中丙二醛含量显著高于假手术组(P < 0.01)，川芎嗪组皮瓣组织中丙二醛含量显著低于模型对照组(P < 0.01)。与模型对照组比较，川芎嗪组皮瓣超微组织结构、血管内皮细胞损伤轻。提示川芎嗪可以抑制中性粒细胞活化、黏附，减轻组织炎症反应，保护内皮细胞，拮抗自由基的脂质过氧化，对皮瓣缺血再灌注损伤有一定的防治作用。

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