葛根素干预小鼠成骨细胞分化相关特征性蛋白mRNA的表达

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2014.42.002

中国组织工程研究 ›› 2014, Vol. 18 ›› Issue (42): 6732-6736.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.42.002

• 骨组织构建 bone tissue construction • 上一篇下一篇

葛根素干预小鼠成骨细胞分化相关特征性蛋白mRNA的表达

袁斯远¹，孔蓓蓓²，盛彤¹，王新祥¹，张允岭¹，刘雪梅¹，马涛¹，郑宏¹，闫妍¹，刘连起²

1北京中医药大学东方医院，北京市 100078
2北京中医药大学基础医学院，北京市 100029

修回日期:2014-09-19 出版日期:2014-10-08 发布日期:2014-10-08
通讯作者: 刘连起，硕士，副教授，北京中医药大学基础医学院，北京市 100029
作者简介:袁斯远，男，1990年生，江西省丰城市人，汉族，北京中医药大学在读硕士，主要从事中药药理研究。
基金资助:
国家自然科学基金资助项目(30873290)

Puerarin effects on the mRNA expression of osteoblast differentiation-related proteins

Yuan Si-yuan¹, Kong Bei-bei², Sheng Tong¹, Wang Xin-xiang¹, Zhang Yun-ling¹, Liu Xue-mei¹, Ma Tao¹, Zheng Hong¹, Yan Yan¹, Liu Lian-qi²

1Dongfang Hospital, Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100078, China
2School of Basic Medicine, Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100029, China

Revised:2014-09-19 Online:2014-10-08 Published:2014-10-08
Contact: Liu Lian-qi, Master, Associate professor, School of Basic Medicine, Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100029, China
About author:Yuan Si-yuan, Studying for master’s degree, Dongfang Hospital, Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100078, China
Supported by:
the National Natural Science Foundation of China, No. 30873290

摘要/Abstract

摘要：

背景：研究证实葛根素对小鼠卵巢以及与睾丸切除所致骨质疏松具有很好的防治作用，但关于葛根素对成骨细胞分化的影响却少有报道。
目的：观察葛根素对成骨细胞碱性磷酸酶mRNA、骨涎蛋白mRNA、骨桥蛋白mRNA以及骨钙素mRNA表达的影响情况。
方法：体外培养小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞，随机分为3组。空白对照组仅更换培养基；葛根素组更换为含有葛根素1×10^-6 mol/L培养基；雌二醇组更换为含有雌二醇1×10^-7 mol/L培养基。RT-PCR法测定MC3T3-E1细胞碱性磷酸酶、骨涎蛋白、骨桥蛋白、骨钙素mRNA的表达
结果与结论：葛根素和雌二醇能够延长碱性磷酸酶表达时间，在第12天达到高峰；葛根素和雌二醇在第10天和第12天能够增加骨涎蛋白mRNA的表达。葛根素和雌二醇在第5天和第12天能够减少骨桥蛋白的表达；葛根素和雌二醇在第10天和第12天能够增强骨钙素表达。结果表明葛根素能够通过影响成骨细胞分化相关特征性蛋白mRNA表达，促进成骨细胞的分化，可能是葛根素抗骨质疏松的重要的细胞分子机制之一。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

全文链接：

关键词: 组织构建, 骨组织工程, 葛根素, 成骨细胞, 细胞分化, 碱性磷酸酶, 骨涎蛋白, 骨桥蛋白, 骨钙素, 骨质疏松, 体外实验, 国家自然科学基金

Abstract:

BACKGROUND: Experimental studies have showed that puerarin has an obvious protective effect on osteoporosis in ovariectomized and orchiectomized mice. But the influence of puerarin in the molecular level in the process of osteoblast differentiation is seldom reported.
OBJECTIVE: To observe the effect of puerarin on the mRNA expression of alkaline phosphatase, bone sialoprotein, osteopontin and osteocalcin in osteoblasts.
METHODS: The MC3T3-E1 cells from mice cultured in vitro were randomly divided into control group, puerarin group (10^-6 mol/L puerarin) and estradiol group (10^-7 mol/L estradiol) to observe the effects of puerarin on the differentiation of osteoblasts. mRNA expression of alkaline phosphatase, bone sialoprotein, osteopontin and osteocalcin in MC3T3-E1 cells was determined using RT-PCR method.
RESULTS AND CONCLUSION: Puerarin and estradiol both could prolong the expression of alkaline phosphatase that reached the peak at 12 days. Puerarin and estradiol strengthened the mRNA expression of bone sialoprotein at 10 and 12 days, reduced expression of osteopontin at 5 and 12 days, and increased expression of osteocalcin at 10 and 12 days. These results reveal that puerarin can induce the differentiation of cultured osteoblasts by influencing osteoblast differentiation-related protein mRNA expressions, which may be one of the important molecular mechanisms of puerarin for prevention of osteoporosis.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

全文链接：

Key words: osteoblasts, alkaline phosphatase, osteopontin, osteocalcin, osteoporosis

中图分类号:

R318

袁斯远，孔蓓蓓，盛彤，王新祥，张允岭，刘雪梅，马涛，郑宏，闫妍，刘连起 . 葛根素干预小鼠成骨细胞分化相关特征性蛋白mRNA的表达[J]. 中国组织工程研究, 2014, 18(42): 6732-6736.

Yuan Si-yuan, Kong Bei-bei, Sheng Tong, Wang Xin-xiang, Zhang Yun-ling, Liu Xue-mei, Ma Tao, Zheng Hong, Yan Yan, Liu Lian-qi . Puerarin effects on the mRNA expression of osteoblast differentiation-related proteins[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2014, 18(42): 6732-6736.

图/表（结果） 5

2.1 葛根素对MC3T3-E1细胞碱性磷酸酶、骨涎蛋白、骨桥蛋白、骨钙素基因mRNA表达的影响 空白对照组、葛根素与雌二醇分别作用于小鼠成骨细胞5，7，10，12 d，提取总RNA后，用表1所示引物RT-PCR法对成骨细胞分化相关蛋白碱性磷酸酶、骨涎蛋白、骨桥蛋白、骨钙素mRNA以及参照基因GAPDH mRNA进行扩增，电泳结果见图1。

2.2 葛根素对MC3T3-E1细胞碱性磷酸酶mRNA表达的影响 如图1碱性磷酸酶行所示，空白对照组小鼠成骨细胞碱性磷酸酶mRNA在5，7，10，12 d均有表达，随时间推移表达增强，第10天达高峰后下降。葛根素和雌二醇能够延长其表达时间，在第12天达到高峰。凝胶成像后相对吸光度的分析结果见表2，第12天葛根素和雌二醇能增加碱性磷酸酶mRNA表达量，与对照组相比差异有显著性意义。葛根素与雌二醇相比作用较弱，差异有显著性意义。

2.3 葛根素对MC3T3-E1细胞骨涎蛋白mRNA表达的影响 如图1骨涎蛋白行所示，空白对照组小鼠成骨细胞骨涎蛋白mRNA在5，7，10，12 d均有表达，随时间推移表达增强，第12天到达高峰。葛根素和雌二醇在第10和12天能增加其表达。凝胶成像后相对吸光度分析结果见表3，在第10和12天葛根素和雌二醇能增加骨涎蛋白mRNA表达量，与对照组比差异有显著性意义。葛根素与雌二醇作用相当。

2.4 葛根素对MC3T3-E1细胞骨桥蛋白mRNA表达的影响 如图1骨桥蛋白行所示，空白对照组小鼠成骨细胞骨桥蛋白mRNA在5，7，10，12 d均有表达，随时间推移表达增强，第10天达高峰后下降。葛根素和雌二醇在第5和12天能减少其表达，但不影响在接近高峰期的第10天与达高峰第12天的表达。凝胶成像后相对吸光度分析结果见表4。

2.5 葛根素对MC3T3-E1细胞骨钙素mRNA表达的影响如图1骨钙素行所示，对照组小鼠成骨细胞骨钙素mRNA在第5与7天未见表达，在第10与12天出现表达。葛根素和雌二醇在第10天和第12天能够增强其表达。凝胶成像后相对吸光度的分析结果见表5，在第10天葛根素和雌二醇能增加骨钙素mRNA表达量，与对照组相比差异有显著性意义。在第12天葛根素与雌二醇仍能增加骨钙素mRNA表达量，其中葛根素与对照相比差异无显著性意义，雌二醇组与对照组相比差异有显著性意义。

参考文献

[1] 王新祥,张允岭,吴坚,等.葛根对骨质疏松模型小鼠骨密度和骨组织构造的作用[J].中国骨质疏松杂志,2008,14(5):349-354.
[2] 王新祥,张允岭,吴坚,等.葛根对睾丸切除骨质疏松模型小鼠骨密度和骨构造的作用[J].中国组织工程研究与临床康复, 2010, 14(7):1262-1266.
[3] 尹丽红,李艳枫,孟繁琳.葛根的化学成分、药理作用和临床应用[J].黑龙江医药,2010,23(3):371-373.
[4] Liu XJ, Mei ZG, Qian JP,et al. Puerarin partly counteracts the inflammatory response after cerebral ischemia/reperfusion via activating the cholinergic anti-inflammatory pathway. Neural Regene Res.2013;8(34): 3203-3215.
[5] 黄延玲,石凤英.葛根素对去卵巢大鼠骨密度和骨代谢生化指标的影响[J].中国临床康复, 2004,8(12): 2307-2309.
[6] Huh JE, Yang HR, Park DS, et al. Puerariae radix promotes differentiation and mineralization in human osteoblast-like SaOS-2 cells.Ethnopharmacol. 2006; 104(3):345-350.
[7] 周强,付庭斌.葛根素对去卵巢大鼠骨质疏松性骨折愈合的促进作用[J].中国临床康复,2006,10(27):45-47.
[8] 田泉,汤旭磊,白孟海,等.葛根素对去卵巢大鼠骨质疏松和血脂的作用[J].中华老年医学杂志,2006,25(7):543-545.
[9] 黄彤,金邦荃,孙桂菊,等.葛根素对去卵巢大鼠骨密度和骨强度的改善[J].现代预防医学,2010,37(20):3894-3896.
[10] 李海,金花,黄海玲,等.葛根素对去卵巢大鼠和铅中毒大鼠骨组织的影响[J].现代预防医学,2011,38(18):3742-3744.
[11] 中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会.原发性骨质疏松症诊治指南[J].中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志,2011,4(11):2-16.
[12] Colon-Emeric C, Nordsletten L, Olson S, et al.Association between timing of zoledronic acid infusion and hip fracture healing.Osteoporos Int.2010;12(9):1669-1673.
[13] Abrahamsen B, Eiken P, Eastell R.Subtrochanteric and diaphyseal femur fractures in patients treated with alendronate:aregister -based national cohort study.J Bone Miner Res.2009;24(6):1095-1102.
[14] Khan AA, Sándor GK, Dore E, et al.Canadian consensus practice guidelines for bisphosphonate associated osteonecrosis of the jaw.J Rheumatol.2008;35(7):1391-1397.
[15] 赵学文.植物性雌激素对妇女疾病治疗中的作用[J].南通大学学报:医学版, 2005,25(3):231-232.
[16] Zhang Y, Chen WF, Lai WP, et al. Soy isoflavones and their bone protective effects.Inflammopharmacology. 2008; 16(5): 213-215.
[17] Atmaca A, Kleerekoper M, Bayraktar M,et al. Soy isoflavones in the management of postmenopausal osteoporosis. Menopause. 2008;15(4 Pt 1):748-757.
[18] Wang Q, Ge X, Tian X, et al. Soy isoflavone: The multipurpose phytochemical (Review).Biomed Rep. 2013; 1(5):697-701.
[19] Lagari VS, Levis S.Phytoestrogens in the prevention of postmenopausal bone loss.Clin Densitom. 2013;16(4): 445-449.
[20] Uehara M.Isoflavone metabolism and bone-sparing effects of daidzein-metabolites.Clin Biochem Nutr. 2013; 52(3):193-201.
[21] Xinxiang Wang, Jian Wu et al.Puerariae radix prevents bone loss in ovariectomized mice. J Bone Miner Metab. 2003;21(5): 268-275.
[22] 郑高利,张信岳,方晓林,等.葛根异黄酮对去卵巢大鼠骨矿密度和骨强度的影响[J].中草药,2001,32 (5):422-425.
[23] 华川,李杨.葛根素对大鼠成骨细胞增殖分化影响的血清药理学实验[J].华北国防医药,2005,17(6):393-395.
[24] 王久亮,郑忠志.葛根素对大鼠成骨细胞增殖和分化的影响[J].中国组织工程研究与临床康复,2007,7(36):7138-7141.
[25] 臧洪敏,陈君长.葛根素对成骨细胞生物学作用的实验研究[J].中国中药杂志,2005,30(24):1947-1949.
[26] 郭辉,刘奕琛.葛根素对大鼠成骨细胞代谢调控的机制的实验研究[J].现代中医药,2008,28(1):48-50.
[27] 王昌,汤旭磊,陈克明,等.葛根素在体外对成骨细胞增殖和分化的影响[J].中国组织工程研究,2012,16(33):6102-6106.
[28] 王建华,潘永梅,詹文红.葛根素对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响[J].中药药理与临床,2007,23(2):21-22.
[29] 王海珍,贠云飞,苗志勃.葛根素对大鼠成骨细胞增殖影响的体外实验研究[J].中国医药导报,2013,19(3):77-79.
[30] 王新祥,张允岭,郑宏,等.葛根素定量分析及对卵巢切除小鼠骨密度作用[J]中国科技论文在线,http://www.paper.edu.cn. 201102-82.
[31] Woldarski KH. Properties and origin of osteoblasts. Clin Orthop Relat Res. 1990; (252):276-293.
[32] Fisher IW,Torchia DA,Fohr B,et al.Flexible structure of SIBLINGproteins, bone sialoProtein and osteopontin. Biochem Biollys Res Commun.2001;80:460-465.
[33] Paz J, Wade K, Kiyoshima T, et al. Tissue and bone cell-specific expression of bone sialoprotein is directed by a 9.0 kb promoter in transgenic mice. J ,Matrix Biol. 2005;24(5):341-352.
[34] 盛彤,谢培凤,王新祥,等.神经精神因素对骨代谢的影响[J].中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志,2013,6(2):178-183.

引言

植物性雌激素对成骨细胞的增殖与分化具有重要影响。实验研究表明葛根对卵巢与睾丸切除小鼠所致骨质疏松具有明显防治作用^[1-2]。葛根素为葛根中所含主要植物性雌激素之一^[3]，研究证实葛根素对卵巢以及与睾丸切除小鼠所致骨质疏松亦具有很好的防治作用^[4-10]，但关于葛根素对成骨细胞分化的影响却少有报道。原发性骨质疏松症(以下简称骨质疏松症)是与社会人口老龄化关系最为密切的疾病之一，是老年人的常见病和多发病，是以骨量减少、骨组织结构退化为特征、导致骨脆性增高及骨折危险性增加的一种全身性代谢性骨病。2011中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会在《原发性骨质疏松症诊治指南》中指出，全国2006年在50岁以上人群中约有6 944万人患有骨质疏松症，约有2亿1千万人存在低骨量^[11]。随着中国人均寿命的延长和人口结构的改变，其发病率呈上升趋势。骨质疏松症不仅是中国，并已成为全球性的一个严重的公众卫生问题，被称为无声无息的流行病。

世界各国特别是在发达国家由于社会老龄化更为严重，因此对骨质疏松症预防与治疗措施从科学研究到企业新药开发都进行了大量的投入。药物方面目前用于预防和治疗骨质疏松症的西药种类较多，钙剂、激素替代疗法、选择性雌激素受体调节剂、降钙素、双膦酸盐等，另外新研发药物也层出不穷，如锶盐，重组人甲状旁腺激素(PTH)药物-特立帕肽等，这些药物以衡量骨质疏松症诊断与疗效的骨密度作为标准来说，疗效确切。但随着应用的日益广泛，逐渐有一些严重的不良反应报道，如双膦酸盐用药后骨折修复的延迟、下颌骨坏死、非典型骨折发生率增加等，其安全性也重新引起了人们的关注^[12-14]；同时由于存在对患者其他症状或体征不能有效改善，或生活质量得不到提高等问题，因此并不能很好满足临床的需要。安全、有效并具多环节、多靶点整体调节优势的预防和治疗骨质疏松症的中药或天然药物，成为当今医药科学研究的热点之一。

非类固醇类、具有弱雌激素样作用称为植物雌激素的植物来源的化合物，不仅对女性闭经后骨质疏松症具有明显的防治作用，而且对一些常见的老年病，如心血管疾病、更年期综合征、和与性激素有关的肿瘤都有一定的防治作用，而受到人们广大的关注^[15]。异黄酮是植物雌激素中最为主要的一类化合物，食品中作为主要植物雌激素来源的大豆异黄酮对骨质疏松症的防治作用已经进行了众多研究^[16-20]。作为同科植物的葛根比大豆含有更为丰富的异黄酮，它是一种常用传统中药，为药、食两用的天然植物。葛根始载于《神农本草经》谓其主要作用为：“主消渴、身大热、呕吐、诸痹、起阴气、解诸毒。”

作者以前报道了葛根对卵巢与睾丸切除小鼠所致骨质疏松具有显著防治作用^[21-22]。葛根素为葛根中所含的主要活性成分。近年体外实验表明，葛根素能促进成骨细胞增殖^[23-29]；在成骨细胞分化方面的指标方面，研究以增加成骨细胞碱性磷酸酶活性研究为多，未见更多深入研究。本实验以成骨细胞分化为研究对象，应用葛根素对其进行干预，并以雌二醇为阳性对照，观察葛根素对成骨细胞分化相关蛋白mRNA表达(碱性磷酸酶、骨涎蛋白、骨桥蛋白以及骨钙素的mRNA)，探讨葛根素调节骨代谢的细胞分子机制。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

全文链接：

材料方法

设计：分组对照观察、细胞学实验。

时间及地点：实验于2011年9月至2013年5月在北京中医药大学东方医院实验中心完成。

材料：

实验细胞：小鼠成骨细胞株MC3T3-E1(小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14)购自中国科学院细胞库。

实验方法：

成骨细胞分化实验：

细胞培养：将MC3T3-E1细胞接种于75 cm²培养瓶中，每瓶加入体积分数10%胎牛血清a-MEM培养基10 mL(含1%青霉素及链霉素溶液)，置于37 ℃、体积分数5%CO₂培养箱中培养。

实验分组：待细胞生长密度达70%-80%时进行传代。然后将细胞悬液以每孔1×10⁶个细胞接种于6孔板中，加入含体积分数10%胎牛血清a-MEM 5 mL，培养24 h后，分为空白对照组，葛根素组与阳性对照药雌二醇组3组，每组3孔，除空白对照组仅更换培养基外，葛根素组与雌二醇组分别更换为含有葛根素1×10^-⁶ mol/L与雌二醇1×10^-⁷ mol/L培养基，3 d更换培养液1次。

RT-PCR法测定MC3T3-E1细胞碱性磷酸酶、骨涎蛋白、骨桥蛋白、骨钙素mRNA的表达：在加药后5，7，10，12 d后，用SV Total RNA Isolation System提取总RNA后，用紫外分光光度仪测定260 nm和280 nm处的吸光度，计算总RAN含量和纯度。使用Primer 3.0软件，计算机辅助所设计小鼠成骨细胞碱性磷酸酶、骨涎蛋白、骨桥蛋白、骨钙素mRNA及作为参照基因GAPDH引物后，由北京赛百盛生物工程公司合成，各个碱基序列见表1。按ReverTra - Plus-^TM试剂盒说明进行基因扩增。PCR反应条件为95 ℃，预变性2 min，然后98 ℃，10 s；52 ℃，30 s；68 ℃，40 s，30个循环。PCR产物在1%琼脂糖凝胶电泳后，用凝胶成像系统进行扫描，用Gel-Pro Analyzer 3.0分析软件，分析各扩增条带的吸光度值，与参照基因GAPDH条带吸光度值进行对比，计算相对吸光度。

主要观察指标：葛根素对MC3T3-E1细胞碱性磷酸酶、骨涎蛋白、骨桥蛋白、骨钙素基因mRNA表达的影响。

统计学分析：数据采用SPSS 20.0统计软件完成。数据结果用x(_)±s表示，进行单因素方差分析和组间t 检验，P < 0.05即认为差异有显著性意义。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

全文链接：

讨论

多项动物体内实验研究结果表明葛根素具有抗骨质疏松作用。黄延玲等^[4]发现葛根素对卵巢摘除大鼠的骨吸收具有抑制作用、对骨密度具有增加作用；黄彤等^[9]报道葛根素对去卵巢大鼠的骨密度和骨强度有较好的改善作用；李海等^[10]应用葛根素干预去卵巢大鼠和铅中毒大鼠发现葛根素能够明显提高骨组织骨钙、磷的含量以及使骨量增加，骨小梁变粗，变密等。作者以前研究也表明葛根素对性激素缺乏导致的小鼠骨密度和骨量下降有很好的防治作用^[30]。葛根素抗骨质疏松作用明确，但对葛根素防治骨质疏松的细胞分子机制研究较少，特别是涉及成骨细胞分化相关特征性蛋白表达未有研究。本实验选用成骨细胞为研究对象，葛根素对其进行干预，并以雌二醇为阳性对照，观察葛根素对成骨细胞分化指标的影响，通过检测碱性磷酸酶、骨涎蛋白、骨桥蛋白、骨钙素的 mRNA表达情况，从细胞分子水平研究葛根素对体外成骨细胞分化的影响。在先期检测葛根素对成骨细胞增殖及碱性磷酸酶活性的实验研究中，检测了10^-⁷ mol/L-10^-⁵ mol/L葛根素对小鼠成骨细胞增殖及碱性磷酸酶活性，其中以10^-⁶ mol/L葛根素作用最强，据此采用10^-⁶ mol/L葛根素浓度用于本实验研究。

成骨细胞是骨形成的主要功能细胞，负责骨基质的合成、分泌和矿化，是由具备多向分化潜能的间充质细胞分化而来，只有分化完全、成熟的成骨细胞才具有矿化能力，形成新骨。许多因素如激素、细胞因子与药物等，能够通过影响成骨细胞分化，进而影响新骨的形成。碱性磷酸酶是骨形成所必需的酶，是成骨细胞分化成熟和功能的早期标志^[31]，是最常见的评价骨形成的指标。实验结果显示，葛根素和雌二醇能够延长碱性磷酸酶mRNA表达时间，并能增加碱性磷酸酶其表达量。

骨涎蛋白是高度硫酸化、磷酸化酸性糖蛋白，与骨桥蛋白同为小整合素结合配体N端连结蛋白(small integrin- binding ligand. N-linkedglyeoprorein，SIBLING)家族成员之一^[32]，主要由成骨细胞分泌合成，对钙和羟基璘灰石有较高的亲和力^[33]。它作为一种骨基质非胶原蛋白，在成骨细胞分化过程中表达，在骨基质矿化中必不可少。骨桥蛋白在骨基质的吸收，矿化及维持骨组织完整性中起重要作用。骨涎蛋白与骨桥蛋白是反映成骨细胞分化程度的中期指标，实验显示，在成骨细胞分化中期的第7-10天，葛根素组和雌二醇能够能增加骨涎蛋白mRNA表达，而对骨桥蛋白mRNA表达没有明显影响。骨钙素是主要由成熟成骨细胞合成的一种骨基质非胶原蛋白，占骨非胶原蛋白的10%-20%，是含量最丰富的骨非胶原蛋白之一。骨钙素为成熟成骨细胞的标志物，在矿化出现前，分泌量随着成骨细胞分化逐渐增加。最近研究表明存储于骨基质骨钙素经破骨细胞脱羧后以低羧化形式(ucOCN)释放入血，最终作用于睾丸间质细胞以及胰岛β细胞，脂肪细胞，有可能作为一种新的内分泌调节物质，促进睾酮的生物合成，调节糖与脂肪代谢，从而与生殖功能以及糖尿病与肥胖等疾病密切相关^[34]。本实验结果表明小鼠成骨细胞骨钙素mRNA在培养早期未见表达，而在晚期的第10与12 天才出现表达，葛根素和雌二醇能显著增强其表达量。
综上所述，葛根素能够通过影响成骨细胞分化相关特征性蛋白mRNA表达，促进成骨细胞的成熟，可能是葛根素抗骨质疏松的重要的细胞分子机制之一。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

全文链接：

葛根素干预小鼠成骨细胞分化相关特征性蛋白mRNA的表达

Puerarin effects on the mRNA expression of osteoblast differentiation-related proteins

PDF

可视化

被引次数

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

图/表（结果） 5

参考文献

相关文章 15

引言

材料方法

讨论

文章快阅

延伸阅读

编辑推荐

Metrics

本文评价

[1]	唐辉, 姚志浩, 罗道文, 彭双麟, 杨双林, 王浪, 肖金刚. 高脂高糖饮食结合链脲佐菌素建立2型糖尿病性骨质疏松症大鼠模型[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1207-1211.
[2]	李中峰, 陈明海, 凡一诺, 魏秋实, 何伟, 陈镇秋. 右归饮治疗激素性股骨头坏死作用机制的网络药理学分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1256-1263.
[3]	李偲, 赵婷, 谭戈, 郑雨林, 张若男, 吴艳, 唐俊明. 血小板源生长因子BB可促进骨骼肌成肌细胞增殖、分化与迁移[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1050-1055.
[4]	侯广原, 张继学, 张志军, 孟祥晖, 段文, 高维陆. 骨水泥强化椎弓根螺钉内固定治疗伴骨质疏松腰椎退行性疾病的1年随访[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(6): 878-883.
[5]	李时斌, 赖渝, 周毅, 廖建钊, 章晓云, 张璇. 激素性股骨头坏死发病机制及相关信号通路的靶点效应[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(6): 935-941.
[6]	肖方骏, 陈树东, 栾继耀, 侯宇, 何坤, 林定坤. 丹参干预骨质疏松症：网络药理学解释的作用机制[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(5): 772-778.
[7]	刘波, 陈祥和, 杨康, 余慧琳, 陆鹏程. DNA甲基化在运动干预骨质疏松中的作用机制[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(5): 791-797.
[8]	吴子健, 胡昭端, 谢有琼, 王峰, 李佳, 李柏村, 蔡国伟, 彭锐. 3D打印技术与骨组织工程研究文献计量及研究热点可视化分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(4): 564-569.
[9]	李晓壮, 段浩, 王伟舟, 唐志宏, 王旸昊, 何飞. 骨组织工程材料治疗骨缺损疾病在体内实验中的应用[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(4): 626-631.
[10]	聂少波, 李建涛, 孙基恩, 赵喆, 赵燕鹏, 张里程, 唐佩福. 内侧支撑髓内钉置入支撑治疗严重骨质疏松性股骨转子间骨折的力学稳定性[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(3): 329-333.
[11]	钟远鸣, 万通, 钟锡锋, 吴卓檀, 何炳坤, 吴思贤. 弯角与单侧椎弓根入路椎体成形治疗骨质疏松性椎体压缩骨折有效性与安全性的Meta分析 [J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(3): 456-462.
[12]	张立书, 刘安琪, 何小宁, 金岩, 李蓓, 金钫. Alpl基因影响骨髓间充质干细胞治疗溃疡性结肠炎[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(25): 3970-3975.
[13]	王秋霏, 顾叶, 彭育沁, 薛峰, 巨荣, 朱锋, 王熠军, 耿德春, 徐耀增. 人工假体磨损颗粒作用下Wnt/β-catenin信号通路对成骨细胞的影响[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(24): 3894-3901.
[14]	唐小凯, 李伟明. Nel样分子1型蛋白在脊柱融合术后促进骨性融合的作用与机制[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(24): 3914-3920.
[15]	朱云, 陈渝, 邱皓, 刘盾, 靳国荣, 陈诗谋, 翁政. 对侧皮质锁定螺钉治疗骨质疏松股骨骨折的有限元分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(24): 3832-3837.