羟基丁酸-羟基辛酸聚合物/胶原软骨组织工程支架的细胞亲和性

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2014.12.015

中国组织工程研究 ›› 2014, Vol. 18 ›› Issue (12): 1895-1900.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.12.015

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羟基丁酸-羟基辛酸聚合物/胶原软骨组织工程支架的细胞亲和性

陆兴¹，张永红¹，李二峰¹，王增荣¹，赵良启²

1山西医科大学第二医院骨科，山西省太原市 030001
2山西大学生物技术研究所，山西省太原市 030006

修回日期:2014-01-13 出版日期:2014-03-19 发布日期:2014-03-19
通讯作者: 张永红，博士，硕士生导师，主任医师，山西医科大学第二医院骨科，山西省太原市030001
作者简介:陆兴，男，1978年生，山西省阳泉市人，汉族，山西医科大学第二医院在读硕士，主要从事骨与软骨组织工程的研究。
基金资助:
国家自然科学基金(主任基金)(31040030)

Cell affinity of cartilage tissue engineering scaffolds prepared by poly(hydroxybutyrate-co-hydroxyoctanoate)/collagen composite materials

Lu Xing¹, Zhang Yong-hong¹, Li Er-feng¹, Wang Zeng-rong¹, Zhao Liang-qi²

1Department of Orthopedics, the Second Hospital of Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, Shanxi Province, China
2Institute of Biotechnology, Shanxi University, Taiyuan 030006, Shanxi Province, China

Revised:2014-01-13 Online:2014-03-19 Published:2014-03-19
Contact: Zhang Yong-hong, M.D., Master’s supervisor, Chief physician, Department of Orthopedics, the Second Hospital of Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, Shanxi Province, China
About author:Lu Xing, Studying for master’s degree, Department of Orthopedics, the Second Hospital of Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, Shanxi Province, China
Supported by:
the National Natural Science Foundation of China, No. 31040030

摘要/Abstract

摘要：

背景：已有很多实验证明，单独高分子材料或生物性材料制备的组织工程支架无法满足组织工程研究。
目的：评价羟基丁酸-羟基辛酸聚合物/胶原组织工程支架的生物学特性及细胞亲和性。
方法：以羟基丁酸-羟基辛酸聚合物作为主体材料，按质量分数复合不同比例(2%，4%，6%，8%，10%)的胶原，采用溶剂浇铸-颗粒沥滤法制备组织工程支架。通过扫描电镜观察材料内部结构及孔径大小，液体位移法测定材料孔隙率。将羟基丁酸-羟基辛酸聚合物/胶原支架、羟基丁酸-羟基辛酸聚合物支架分别与兔软骨细胞复合培养，MTT法测定细胞的生长曲线，扫描电镜观察细胞在材料上的生长黏附情况。
结果与结论：羟基丁酸-羟基辛酸聚合物/胶原复合软骨组织工程支架孔径大小200 μm左右，孔隙率为(85±2)%，细胞亲水性随加入胶原比例的增加而升高。与羟基丁酸-羟基辛酸聚合物支架比较，不同比例的羟基丁酸-羟基辛酸聚合物/胶原支架可明显促进软骨细胞的黏附、增殖。证实羟基丁酸-羟基辛酸聚合物/胶原复合支架具备更好的细胞亲和性。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

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关键词: 生物材料, 软骨生物材料, 羟基丁酸-羟基辛酸聚合物(PHBHOx), 胶原, 软骨, 组织工程, 国家自然科学基金

Abstract:

BACKGROUND: Many experiments have demonstrated that tissue engineering scaffolds prepared by polymer materials alone or biomaterials cannot meet the requirement of tissue engineering research.
OBJECTIVE: To evaluate biological characteristics and cell affinity of poly(hydroxybutyrate-co-hydroxyoctanoate)/collagen composite scaffold.
METHODS: Tissue engineering scaffolds were prepared by combination of poly(hydroxybutyrate-co-hydroxyoctanoate) and collagen at different proportions (2%, 4%, 6%, 8% and 10%) using solvent casting/particulate leaching method. Inner structure and apertures were observed by scanning electron microscope, and the porosity was determined by liquid displacement method. Rabbit chondrocytes were co-cultured with poly(hydroxybutyrate-co-hydroxyoctanoate)/collagen composite scaffold and poly(hydroxybutyrate-co-hydroxyoctanoate) scaffold. Growth curve of cells was determined by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay, and cell adhesion on the scaffolds was observed by scanning electron microscope.
RESULTS AND CONCLUSION: The pore size and porosity of the composite scaffold were about 200 μm and (85±2)%, respectively. The cell affinity dynamically increased with the increasing of proportion of collagen. Compared with the poly(hydroxybutyrate-co-hydroxyoctanoate) scaffold, the poly(hydroxybutyrate-co- hydroxyoctanoate)/collagen composite scaffolds are better to improve cell adhesion and proliferation, with favorable cellular affinity.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

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Key words: biocompatible materials, 3-hydroxybutyric acid, collagen, chondrocytes

中图分类号:

R318

陆兴，张永红，李二峰，王增荣，赵良启. 羟基丁酸-羟基辛酸聚合物/胶原软骨组织工程支架的细胞亲和性[J]. 中国组织工程研究, 2014, 18(12): 1895-1900.

Lu Xing, Zhang Yong-hong, Li Er-feng, Wang Zeng-rong, Zhao Liang-qi . Cell affinity of cartilage tissue engineering scaffolds prepared by poly(hydroxybutyrate-co-hydroxyoctanoate)/collagen composite materials[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2014, 18(12): 1895-1900.

图/表（结果） 2

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引言

在临床骨科中关节软骨的损伤是常见病，多发病，并且关节软骨的损伤对于关节功能的影响巨大。然而关节软骨中缺乏神经、血管及淋巴组织，软骨细胞又呈高度分化状态，自身繁殖能力极为有限，所以关节软骨自身的修复能力很低，一旦损伤很难修复，传统的临床治疗如软骨下穿透术、异体软骨移植等可以起到一定疗效，但很难从根本上修复缺损的软骨^[1]。随着组织工程学的发展，人造组织工程软骨走进了人们的视野，为软骨缺损治疗提供了一种可行的方法，有望从根本上解决软骨缺损难以治疗的问题。组织工程最主要的3要素：载体支架、种子细胞、生物活性因子^[2]。在这3方面中，载体支架起到了基础性的作用，其为种子细胞的黏附、增殖、分化提供理想的场所，是组织工程软骨制备成功的必备条件。支架材料的选择及支架制备方法是目前组织工程的研究热点。

目前，支架材料的选择比较广泛，如几丁质、聚乳酸/乙醇酸共聚物、胶原等，但其性能都不尽如人意。已有很多实验证明，单独的高分子材料或生物性材料制备的组织工程支架无法满足组织工程的研究，复合材料能够兼顾各种材料的优缺点，满足组织工程的需要。实验采用的主体材料羟基丁酸-羟基辛酸共聚体，是通过生物发酵技术获得的生物可降解新材料，是原核生物在碳、氧失衡的情况下，作为碳源和能量储存而合成的一类聚羟基链烷酸，具有良好的生物相容性和机械强度，其由生物合成，不含有化学原料，是一种韧性与强度均较为理想的聚羟基内酯，其可加工性、生物相容性、无毒性已被多次证实，近年来被广泛用于组织工程载体支架材料研究领域^[3-7]，例如董岳峰等^[3]选用细胞毒性实验、急性全身毒性实验、溶血实验、热源实验、皮内刺激实验、遗传毒性实验和皮下植入实验等7个生物相容性实验对生物可降解支架材料羟基丁酸与羟基辛酸共聚体的生物相容性进行评价，结果发现羟基丁酸与羟基辛酸共聚体及其浸提液与小鼠成骨细胞共培养时，细胞生长形态均良好，数量逐渐增加，无细胞毒性；羟基丁酸与羟基辛酸共聚体浸提液无急性毒性反应；其溶血率为1.67%，符合ISO规定的溶血率<5%的标准；将其注入家兔耳缘静脉后未引起发热反应：注入家兔皮内未引起皮肤刺激反应；注入小鼠尾静脉未引起遗传毒性反应：将羟基丁酸与羟基辛酸共聚体膜植入皮下12周，尚未发现明显的炎症反应，提示羟基丁酸与羟基辛酸共聚体具有良好的生物相容性。吴俊等^[6]探讨聚(羟基丁酸酯羟基戊酸酯)多孔材料作为软骨组织工程支架的可行性，以及体内外培养方式对软骨形成的影响。采用“压片-热处理-粒子析出”技术制备聚(羟基丁酸酯羟基戊酸酯)多孔支架。体外分离培养软骨细胞后接种到聚(羟基丁酸酯羟基戊酸酯)支架体外培养2周，期间扫描电镜观察细胞在支架上的生长情况，然后与单纯聚(羟基丁酸酯羟基戊酸酯)支架同植入裸鼠皮下继续培养4，8周后取材，与体外培养至6、10周的细胞-支架复合物同行组织学观察。电镜观察示软骨细胞在支架上黏附、增殖良好并能分泌细胞外基质；组织学观察示聚(羟基丁酸酯羟基戊酸酯)浅层有新生软骨组织形成，且皮下培养的软骨组织比体外培养的更为成熟。单纯聚(羟基丁酸酯羟基戊酸酯)支架皮下培养没有软骨组织形成。表明聚(羟基丁酸酯羟基戊酸酯)可以作为软骨组织工程支架材料，体内培养较体外更有利于组织工程化软骨的形成。但其亲水性较差，单纯羟基丁酸-羟基辛酸共聚体支架与软骨细胞共培养显示细胞黏附不佳。

胶原是生物体内的一种非常重要的蛋白质，主要存在于结缔组织中，具有很强的伸张能力，是韧带和肌键的主要成分。胶原蛋白还是细胞外基质的主要组成成分，是细胞外基质中最重要的水不溶性纤维蛋白，在细胞外基质中形成半晶体的纤维，给细胞提供抗张力和弹性并在细胞的迁移和发育中起作用，是构成细胞外基质的骨架，属于天然生物活性材料，具有良好的生物相容性、低免疫原性和较强的组织亲和力，有利于软骨细胞黏附、增殖、分化和表型的保持^[8]；而且胶原能为细胞的酶识别，重塑及降解，为新生组织提供足够的空间，外源性胶原还能刺激细胞分泌形成新的胶原^[9]，但单独应用具有降解速率快、物理性能差等不足，无法满足组织工程的要求。

实验针对上述两种材料各自的优缺点及性质互补的特点，将其按照不同的比例复合后进行支架制备，通过植入种子细胞，在体外培养环境下观察细胞的增殖情况，来检测复合材料的各项性能，以期寻找满足软骨组织工程临床应用的材料。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程
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材料方法

设计：支架制备及观察实验。

时间及地点：于2011年1至12月在山西大学生物技术研究所完成。

材料：

实验动物：3周龄新西兰乳兔1只，雌雄不拘，体质量0.8 kg，由山西医科大学实验动物中心提供。

实验方法：

复合支架的制备：羟基丁酸-羟基辛酸聚合物(羟基辛酸含量10%，相对分子质量1.47×10⁵)由山西大学生物技术研究所研制提供。支架采用溶剂浇铸-颗粒沥滤法制备而成^[10]。

将羟基丁酸-羟基辛酸聚合物、Ⅰ型胶原(分别以2%，4%，6%，8%，10%加入)及一定粒径的氯化钠颗粒 (200 μm)等按一定比例溶于三氯甲烷中，充分溶解后制成黏稠液体，待半干时，装入自制模具中，充分挤压，待三氯甲烷完全挥发后，支架冷冻干燥，将复合支架置于去离子水中浸泡、搅拌，去除盐粒，烘干后既得复合支架，以此作为实验组。对照组不复合胶原，单纯采用羟基丁酸-羟基辛酸聚合物。

复合架性能的测定：支架的评价指标主要包括孔隙率、孔径大小、孔隙分布及孔隙间连通情况等。①孔隙结构、大小和连通性主要通过扫描电镜观察。②孔隙率的测定采用采用液体置换法测定^[11]。量取V1体积的无水乙醇，放入支架，反复抽真空使得无气泡冒出，量筒刻度为V2；取出支架后量筒刻度为V3；该支架的孔隙率P=(V1-V3)/(V2-V3)×100%。③支架亲水性测定^[3]。取一定体积的支架样本，充分浸泡于37 ℃的PBS中24 h，取出后吸干表面水分后称质量为m1；随后放入37 ℃真空烘箱内干燥12 h，再次称质量m2，则支架的亲水性为H=(m1-m2)/m2×100%。

软骨细胞的分离培养：取4周龄新西兰乳兔1只，切取新西兰大耳白兔膝关节软骨，进行软骨细胞原代培养^[12-14]，经细胞活力测试后，取第1代软骨细胞为种子细胞。收集第1代软骨细胞，制成5.0×10¹⁰L^-1细胞悬液备用。

细胞-支架体外培养模型的建立：将实验组复合支架切成圆饼状，环氧乙烷消毒后，PBS漂洗3次，DMEM液浸泡过夜。两组支架分别放于2个24孔培养板，采用滴注法将制备好的软骨细胞悬液以5.0×10¹⁰L^-1的浓度接种于支架上，放回24孔板，置于37 ℃、体积分数5% CO₂培养箱2 h后，加入含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养液继续培养；5 d后以3%戊二醛固定，梯度乙醇脱水，叔丁醇置换，真空干燥，离子喷射仪喷金，扫描电镜下观察细胞在支架表面及内部的黏附状态。

MTT法检测细胞在支架上的增殖活性：将含不同比例胶原的各组支架分别取16个，分别放入24孔板，滴注法将软骨细胞悬液滴至含不同比例胶原的80个支架作为实验组，每个样品100 μL，另外4个滴加等量单纯培养液作为调零组。另取 20个单纯羟基丁酸-羟基辛酸聚合物支架放入另一24孔板，其中 16孔滴入细胞悬液 100 μL做为对照组，另4孔滴入等量单纯培养液作为调零组。在 37 ℃、体积分数5% CO₂ 孵箱中静置 2 h后，每孔加入培养液2 mL，隔日换液。

2，4，6，8 d后，实验组和对照组随机选取4孔，将支架-细胞复合物移至新孔，每孔加入1 mL培养液和0.1 mL MTT溶液，培养箱放置2 h后弃去孔内液体, 并在各孔加入1 mL DMSO，微量振荡器上振荡10 min后，每孔吸取100 μL液体加入96孔板。选择492 nm波长，各组分别选1个调零孔调零，在全自动酶标仪上测定各孔光吸收值(A值)。

主要观察指标：羟基丁酸-羟基辛酸聚合物/胶原组织工程支架的生物学特性及细胞亲和性。

统计学分析：采用SPSS 13.0统计软件进行分析。数据以x(_)±s表示，组间比较采用卡方检验或配对t 检验， P < 0.05为差异有显著性意义。

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讨论

纵观国内外骨软骨组织工程的发展历程与现状，可以看出经过科学家多年的实验研究，骨软骨组织工程已在支架的材料选择与制作、生长因子的筛选与应用、种子细胞的分离与培养及体内外修复试验等方面取得一系列的研究进展。但软骨构建用生物材料研究仍相对薄弱，是限制软骨组织工程临床应用的重要障碍之一，在生物材料研制与开发过程中应特别注重细胞与生物材料相互作用的研究，避免生物材料研究与种子细胞研究脱节。

目前常用的合成高分子材料如聚乙交酯、聚丙交酯等对组织来说是种异物，降解产物呈酸性，植入体内可引起不同程度的炎症反应，且其亲水性较差，对细胞吸附不足；而天然材料制备支架的可控性较差，易出现性能和结构变化。因此探索新材料尤其是复合材料成为当前研究的重点。

羟基丁酸-羟基辛酸聚合物属于聚羟基脂肪酸脂材料家族，目前各项研究表明与早期聚羟基脂肪酸脂类材料相比，羟基丁酸-羟基辛酸聚合物具有良好的机械性能及组织相容性，无细胞毒性。但羟基丁酸-羟基辛酸聚合物也存在亲水性差、细胞黏附不佳的缺点。张永红等^[10]观察羟基丁酸-羟基辛酸共聚体/脱细胞软骨基质支架的细胞黏附性，实验取新鲜猪膝关节表面透明软骨，采用非离子型去污剂Triton X-100、低渗Tris-HCl及Dna酶和Rna酶等进行脱细胞处理，低温粉碎后与羟基丁酸-羟基辛酸共聚体以不同比例复合，采用溶剂浇铸-颗粒沥滤技术制备支架。分离培养猪关节软骨细胞进行细胞-支架黏附实验，并通过MTT比色法和扫描电镜观察软骨细胞在支架上的黏附存活情况。羟基丁酸-羟基辛酸共聚体/脱细胞软骨基质支架的细胞黏附率较对照组显著提高，软骨细胞在支架上黏附紧密，生长良好，提示复合脱细胞软骨基质可以明显提高单纯羟基丁酸-羟基辛酸共聚体支架的细胞黏附性能。软骨中的主要结构蛋白就是胶原，具有一定的力学特点，与细胞共培养时可促进细胞的黏附、增殖、分化；此外，胶原降解后可为细胞的增殖进一步提供空间，促进胶原基质的分泌^[15]。有学者指出，Ⅰ型胶原能够诱导成纤维细胞样形态及纤维性基质的形成；而且具有来源广泛、易于提取的特点，在组织工程领域应用十分广泛^[16]。有研究观察体外Ⅰ型胶原三维立体支架培养软骨细胞形态、增殖能力及Ⅱ型胶原表达的变化，并与单层培养结果相比较。试验选择2周龄健康雄性一级新西兰大白兔1只，体外分离兔双侧股骨髁关节软骨细胞后行单层贴壁培养，细胞铺满单层后，分别将细胞悬液按2×10⁶，2×10⁷，2×10⁸L^-1浓度传代培养。选择生长状态良好的第2，3代细胞置于Ⅰ型胶原三维立体支架培养。分别通过相差倒置显微镜、流式细胞仪、电镜检查以及组织学染色及免疫组织化学染色，分析软骨细胞的表型、增殖速度等生物学性状变化情况。结果显示：①单层培养随着时间的延长，增殖速度逐渐减慢，第6代细胞增殖能力较第2代明显下降，出现树突状的细胞突起，表现出细胞老化的趋势。分泌Ⅱ型胶原的能力也逐渐减低，第2代细胞Ⅱ型胶原免疫组化染色胞浆内呈阳性反应，至第6代呈阴性。在以低密度传代培养时上述过程出现较快，而以高密度传代培养时软骨细胞形态改变延迟。②在Ⅰ型胶原三维立体支架中培养时，软骨细胞大量增殖，能维持其细胞表型及分泌Ⅱ型胶原的功能。扫描电镜观察到软骨细胞成团吸附于支架孔隙网壁，说明支架吸附性良好，与软骨细胞相容性好。结果提示软骨细胞在体外单层培养会失去细胞表型，不能分泌Ⅱ型胶原，高密度培养能减缓该过程。而在Ⅰ型胶原三维立体支架中培养，有利于维持软骨细胞的表型及分泌Ⅱ型胶原的功能。实验将羟基丁酸-羟基辛酸聚合物与Ⅰ型胶原按照不同比例混合制备组织工程软骨支架，探讨支架亲水性能与胶原含量之间的关系，发现胶原含量越高支架的亲水性能越高，说明胶原具有极强的亲水性。

种子细胞的选择是组织工程化软骨的重点内容，理想的软骨组织工程种子细胞应该具备以下几个特点： ①易取材，且对机体损伤小。②具有较强的增殖能力，且易分化为目标细胞。③对于相应的支架材料，黏附能力强。④能够耐受环境的变迁，适应不同应力条件。种子细胞应用较为广泛的有软骨细胞、骨髓间充质干细胞、转基因细胞及胚胎干细胞等^[17]。骨髓间充质干细胞来源广泛，易于提取、培养，但在培养后期涉及到分化等因素，向软骨细胞表型转化需要很好的控制细胞因子，难度较大^[18]，适合于条件较好的实验室进行。胚胎干细胞和转基因细胞的原来相对较少，而且涉及伦理学等问题，限制了其自身的应用^[19]。同种异体软骨细胞取材简单、来源广泛，虽有一定的免疫排斥反应，但在动物实验阶段表现并不十分明显，因而很多学者将其作为软骨组织工程的首选细胞^[20]。有两条途径较有希望获得软骨细胞：①同种异体软骨细胞：具有来源广泛、容易获取，在三维培养环境和(或)生长因子作用下，可保持软骨细胞分化特性。临床上可考虑收集截肢病人或新鲜尸体关节软骨作为来源。国外有学者报告临床应用Ⅰ型胶原为基质支架的同种异体软骨细胞移植，未见明显的免疫反应，而其他人报道存在着软骨表面抗原诱导免疫反应。②另一途径为间充质干细胞：可经诱导产生软骨前体细胞，一些实验已证实间充质干细胞可诱导分化为软骨细胞，在体内形成软骨组织，此干细胞有可能在体外诱导培养成软骨细胞等，成为自体软骨修复之来源，且无长期免疫反应。以上两种技术在软骨修复中均有广阔的应用前景。例如有研究对低温冻存异体软骨种子细胞构建的工程化软骨用于修复兔膝关节缺损进行大体和组织形态学观察，从而探讨低温冻存异体软骨细胞作为软骨组织工程种子细胞修复关节软骨缺损的可行性及效果。实验选用成年新西兰大白兔27只，用电钻在股骨的髌股关节面中心造成直径3.0 mm，深3.0 mm的全层软骨缺损模型，随机在缺损处植入体外培养2周的软骨细胞-海藻酸钠盘(A组)及无细胞的海藻酸钠载体(B组)，空白组不做处理(C组)。分别于术后4，8，12周采用空气栓塞法分批处死动物后取材，行大体观察，苏木精-伊红、甲苯胺蓝染色及免疫组织化学分析观察；进行Wakitani组织学评分，观察在体内关节软骨缺损修复效果。结果显示软骨种子细胞在海藻酸钠支架内，于培养4 d后开始增殖，2周时继续增量生长并形成工程化软骨。术后3组观察关节内滑膜均无充血、水肿，无关节液的异常，关节囊无粘连。术后12周时，A组修复缺损组织与周围正常软骨组织很难区分，与周围正常组织无明显界限，颜色接近，表面光滑，色泽一致，按压弹性一致；其余两组均可见缺损处未完全修复，有凹陷，按压略有弹性，低于周围软骨组织，未见软骨组织，与周围组织有明显差别。表明通过慢速梯度降温法保存的软骨细胞可以作为软骨组织工程的种子细胞。还有研究获取1个月龄兔耳郭软骨，分离消化后将软骨细胞种于聚D，L乳酸上形成复合物，6 h后植于兔皮下，分别于6，12，18周取材行大体和组织学观察以及苏木精-伊红染色、甲苯胺蓝染色和Masson’s三色染色。体内培养6周后，软骨细胞/聚D，L乳酸复合物中有基质分泌，软骨细胞不成熟，12周时软骨细胞接近成熟并形成凹陷，18周时新生软骨基本接近正常软骨，提示利用同种异体软骨细胞直接构建组织工程化软骨的方法可以在动物体内形成新的软骨。

细胞实验结果表明，分离培养的软骨细胞在支架上生长情况良好，MTT结果显示细胞呈对数生长趋势，扫描电镜观察到细胞能够在支架上黏附增殖，与对照组相比，羟基丁酸-羟基辛酸聚合物/胶原支架的亲水性随胶原比例的增高明显提高。而且在细胞-支架复合培养的不同时期，实验组复合支架的细胞黏附率及细胞增殖活性均明显增强，说明采用复合材料的支架能够为细胞增殖提供更加良好的环境，作为复合材料的Ⅰ型胶原具有非常良好的细胞亲和性，对提高复合支架的生物亲和性起了至关重要的作用，并且显著改善了羟基丁酸-羟基辛酸聚合物的亲水性。

由于实验条件所限，实验只证明了该复合支架的部分理化性质及生物相容性，该复合支架材料在体内的降解吸收情况、胶原含量对细胞接种后表型维持，以及修复关节骨软骨损伤的效果还有待进一步研究。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程
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羟基丁酸-羟基辛酸聚合物/胶原软骨组织工程支架的细胞亲和性

Cell affinity of cartilage tissue engineering scaffolds prepared by poly(hydroxybutyrate-co-hydroxyoctanoate)/collagen composite materials

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