跑步运动结合摄取杜仲提取物对去卵巢大鼠骨密度和抗氧化能力的影响

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.0267

摘要/Abstract

摘要：

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文题释义：
杜仲：又名木棉、思仙。从杜仲中提取的化学成分按其结构可分为木脂素类、环烯醚萜类、黄酮类、苯丙素类、萜类、多糖类等。杜仲具有降血压、降血脂、降血糖、抗肿瘤、抗菌抗病毒、抗炎、抗氧化、保肝护肾、防止骨量流失等药理作用。
运动氧化伤害：机体剧烈运动过程中及运动结束后, 组织代谢率的增加导致氧自由基产生增加, 引起机体氧自由基代谢失衡，进而引发红细胞、心肌及骨骼肌等细胞的细胞膜及细胞器结构损伤甚至凋亡，造成运动氧化伤害。

摘要
背景：研究显示运动导致骨密度增加，并可改善身体组成。但妇女停经后身体抗氧化能力大幅下降，所以预防运动造成的氧化伤害亦非常关键。杜仲具有对改善骨密度和抗氧化效果，利用运动搭配杜仲摄入，尝试既可以改善更年期骨密度又能减少运动氧化伤害的方案。
目的：探讨跑步运动结合摄取杜仲提取物和单纯摄入杜仲提取物对接受卵巢切除大鼠骨密度、血清雌激素、骨质代谢、抗氧化能力的影响。
方法：先对大鼠进行1周适应性饲养，随机将大鼠分为2组，分别进行卵巢切除或假手术。大鼠恢复4周后，将切除卵巢大鼠随机分为模型组、杜仲组，杜仲运动组，进行12周干预，干预结束后，将所有大鼠置入代谢笼采集24 h尿样；隔日，所有大鼠进行力竭运动，之后采集大鼠腹腔血液。检测各组大鼠的氧化指标(包括血肌酸激酶、乳酸脱氢酶浓度、丙二醛、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化酶活性)，骨质代谢指标(包括血清骨钙素、碱性磷酸酶、Ca、P浓度以及尿液中的脱氧吡啶啉、Ca、P水平)，同时记录大鼠的体质量变化、血清雌二醇水平和股骨骨密度值。
结果与结论：经12周干预后，杜仲组和杜仲运动组大鼠体质量、丙二醛、骨钙、碱性磷酸酶、磷浓度显著低于模型组(P < 0.05)；血清雌二醇、股骨骨密度显著高于模型组(P < 0.05)。杜仲运动组各项指标均优于杜仲组和运动组，但未达到显著性差异(P > 0.05)。说明长期进行跑步运动并结合摄取杜仲提取物或单纯摄取杜仲提取物均可以显著提升切除卵巢骨质疏松大鼠的骨密度、血清雌激素水平，并可以促进骨代谢平衡，降低骨转换率和因卵巢功能降低导致的体质量增加，能够起到维护骨量、防止骨质疏松作用。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程
ORCID: 0000-0001-5362-4894(程林)

关键词: 杜仲, 组织构建, 骨组织工程, 运动, 跑步, 绝经后骨质疏松, 骨密度, 氧化

Abstract:

BACKGROUND: Exercise has been shown to increase bone mineral density (BMD) and improve body composition. Nevertheless, anti-oxidant capacity in postmenopausal women is significantly reduced, and it is crucial to prevent exercise-induced oxidative damage. Eucommia ulmoides has the abilities of increasing BMD and antioxidant capacity, so the combination of exercise and Eucommia ulmoides may be helpful to increase BMD and reduce oxidative damage in postmenopausal women.
OBJECTIVE: To investigate the effects of the combination of running and Eucommia ulmoides extract on the BMD, serum level of estrogen, bone metabolism and antioxidant capacity in ovariectomized rats.
METHODS: After the rats were allowed to acclimate for 1 week, the rats were randomly divided into two groups: ovariectomized and sham operation groups. The rats were recovered for 4 weeks, and the ovariectomized rats were randomly divided into model, Eucommia ulmoides and combination (Eucommia ulmoides and running) groups. The intervention time was 12 weeks. The 24-hour urine was recorded. All rats underwent exhaustive exercise on the following day and the blood samples from the abdominal cavity were collected. The oxidative indexes (serum levels of creatine kinase, lactate dehydrogenase, malondialdehyde, and superoxide dismutase, and glutathione peroxidase activity), bone metabolism indexes (serum levels of osteocalcin, alkaline phosphatase, creatine kinase, calcium and phosphorus, and urine levels of deoxypyridinoline, calcium and phosphorus), body mass, serum level of estradiol and femoral BMD were recorded.
RESULTS AND CONCLUSION: After 12 weeks of intervention, the body mass, levels of malondialdehyde, calcium, alkaline phosphatase and phosphorus in the Eucommia ulmoides and combination groups were significantly lower than those in the model group (P < 0.05). The serum level of estradiol and femoral BMD were significantly higher than those in the model group (P < 0.05). The indexes in the combination group all were superior to the Eucommia ulmoides and exercise groups (P > 0.05). These findings suggest that long-term running combined with Eucommia ulmoides extract or simple Eucommia ulmoides extract can significantly increase BMD, serum level of estrogen in ovariectomized rats, and can promote bone metabolism balance, reduce bone turnover rate and weight gain caused by ovarian dysfunction, thus maintaining bone mass and preventing osteoporosis.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

Key words: Osteoporosis, Postmenopausal, Eucommiaceae, Running, Bone Density, Tissue Engineering

中图分类号:

R318

程林. 跑步运动结合摄取杜仲提取物对去卵巢大鼠骨密度和抗氧化能力的影响[J]. 中国组织工程研究, 2018, 22(24): 3837-3842.

Cheng Lin. Effects of the combination of running and Eucommia ulmoides extract on the bone mineral density and antioxidant capacity in ovariectomized rats[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2018, 22(24): 3837-3842.

图/表（结果） 2

2.1 实验动物数量分析 80只大鼠全部进行结果分析，中途无脱落。

2.2 各组大鼠体质量变化表2显示：造模后进行干预前接受去卵巢手术的模型组、运动组、杜仲组、杜仲运动组大鼠体质量显著高于假手术组(P < 0.05)，在干预3，6，9，12周模型组大鼠体质量均显著高于假手术组(P < 0.05)，运动组、杜仲组、杜仲运动组大鼠体质量较模型组显著降低(P < 0.05)，在干预8，12周运动组、杜仲组与杜仲运动组大鼠体质量与假手术组比差异无显著性意义(P > 0.05)。

2.3 各组大鼠氧化指标比较表3显示：力竭运动后，假手术组抗氧化指标显著优于模型组(P < 0.05)，表明去除卵巢的大鼠抗氧伤害能力较差，易出显氧化损伤。12周摄入杜仲的杜仲组、杜仲运动组大鼠，肌酸激酶、乳酸脱氢酶、丙二醛、超氧歧化酶和谷胱甘肽过氧化酶数据显著优于未摄入杜仲的模型组和假手术组(P < 0.05)。杜仲组与杜仲运动组，丙二醛、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化酶等氧化指标没有显著差异(P > 0.05)，在肌酸激酶、乳酸脱氢酶指标上具有显著差异(P < 0.05)。

2.4 各组大鼠骨密度、血清雌二醇水平比较表4显示：模型组大鼠骨密度、血清雌二醇显著低于假手术组(P < 0.05)；运动组、杜仲组与杜仲运动组大鼠骨密度、血清雌二醇水平显著高于模型组(P < 0.05)，且与假手术组大鼠不具有显著性差异(P > 0.05)，杜仲运动组骨密度、血清雌二醇水平高于杜仲组、运动组，但差异无显著性意义(P > 0.05)。

2.5 各组大鼠骨代谢指标比较表5显示：模型组大鼠血清骨钙素、碱性磷酸酶及尿液DPD、Ca、P显著高于其他4组(P < 0.05)；假手术组、运动组、杜仲组和杜仲运动组组

间比较差异无显著性意义(P > 0.05)；大鼠血清Ca、P在模型组、假手术组、运动组、杜仲组和杜仲运动组组间差异无显著性意义(P > 0.05)。

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引言

女性更年期是正常的卵巢功能逐渐衰退至不具功能的过渡期，这期间因为体内雌激素水平迅速下降，并可能引起身体上许多不适，其中身体氧化程度增加和肌骨密度和骨骼肌流失是两个“隐形杀手”，这两种现象不易被发觉，却危害极大。女性停经后骨量与骨骼肌快速流失，髋、股骨、腰椎属易流失骨质的部位同时生理逐渐老化，荷尔蒙停止分泌，肌力减弱且骨骼脆性增加，容易因骨质疏松而骨折、关节退化和疼痛。可以说绝经后骨质疏松是当前比较常见的一种疾病^[1-2]。目前研究来看，仅依靠药物和食物进行干预，难以收到较好效果，所以通过运动手段防止骨量和骨骼肌流失成为研究热点。大量研究证实，不论有氧、负重及阻力运动皆能使腰椎的骨密度增加，并可改善身体组成。大量绝经后骨质疏松患者每天进行大量运动，希望改善骨密度，但是在大量运动后，虽然骨密度得到改善但部分患者有时会出现类似炎体反应的症状，造成身体不适，这可能是大量运动对身体带来氧化伤害以和肌肉损伤。Cooper等^[3]研究发现，人体于静止时有2%-5%氧分子会在电子传递链的过程中产生氧自由基，如过氧化氢、氢氧根自由基等。长时间激烈运动，人体需摄取10-20倍的氧气维持运动，同时肌肉含氧量也会增至平时的100-200倍，从而诱导过量的活性氧化物(reactive oxyFEn species，ROS)形成^[3]。因为其不稳定的性容易攻击周遭的细胞，如脂质、蛋白质、脱氧核醣核酸等，造成氧化伤害，可能进而引发高血压、糖尿病、帕金森症、退行性关节炎等疾病^[4]。妇女停经后身体抗氧化能力也呈现大幅下降趋势，所以预防运动造成的氧化伤害亦非常关键。

杜仲为杜仲科杜仲属多年生落叶乔木杜仲Eu-commia ulmoides Oliv.的干燥树皮，是常被用于骨伤的中药，许多研究认为它对骨密度具有改善效用。Ma等^[5]研究发现杜仲对氧自由基具有明显抑制、清除活性氧物和抗氧化效果。该实验将跑步运动和摄入杜仲提取物相结合进行联合干预，通过双侧卵巢切除大鼠建立更年期女性骨质疏松大鼠模型，研究跑步运动与摄入杜仲提取物相结合对去卵巢大鼠骨密度、抗氧化能力、骨代谢指标影响，希望可以得出既可以改善更年期骨密度又能减少运动造成氧化伤害的方案。

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材料方法

1.1 设计动物模型制备以及平行对照实验。

1.2 时间及地点 2016年3月至2017年1月在重庆人文科技学院动物实验室进行。

1.3 材料

1.3.1 实验动物清洁级健康雌性大鼠80只，12周龄，未经产，体质量(272.5±12.4) g，由重庆医科大学动物中心提供，许可证号：SCXK(渝) 2017-0023。大鼠进行分笼饲养，自由饮食，国家标准啮齿类动物饲料喂养，饲养环境室温22-25 ℃，相对湿度40%-60%，为使大鼠能尽快适应实验室的环境，白天保持动物饲养室光亮，晚上则保持黑暗，使其有正常的起居生活，所有动物实验前均未进行过跑步运动。实验过程中对动物处置符合科学技术部发布的《关于善待实验动物的指导性意见》。

1.3.2 实验用药物及试剂杜仲提取物：0.50 g粉末相当于原生药量2.5 g，由兰州百禾生物科技有限公司提供，使用时称取需要量的杜仲粉末，并加入0.5%CMC-Na溶液，后进行研磨混悬，配制成杜仲(生药0.4 g/mL)浓度，在4 ℃避光保存。

戊巴比妥钠由美国SIGMA生物科技有限公司提供；青霉素钠，石家庄太行医药有限公司提供；脱氧吡啶啉ELISA试剂盒(上海酶联生物科技有限公司)；雌二醇ELISA检测试剂盒(上海酶联生物科技有限公司)；肌酸激酶、乳酸脱氢酶、丙二醛、超氧歧化酶及谷胱甘肽过氧化酶的检测试剂盒(美国Calbiochem生物科技有限公司)。

1.3.3 实验设备血液分析仪(Johnson&Johnson DT-60Ⅱ，Rochester，NY，USA)；分光度计(Shimaduz，UV-1201，Japan)等；全自动生化分析仪(HITACHI，7000，JAPAN)；低温离心机(GL-22M，上海测维光电技术有限公司)；酶标仪(Bio-TekELX800，国产)；双能X线骨密度仪(Faxitron ultrafocus100,USA)。

1.4 实验方法

1.4.1 实验设计先对大鼠进行1周适应性饲养，随机将大鼠分为切除卵巢组和对照组，分别进行卵巢切除术或假手术，大鼠进行4周恢复，恢复后将切除卵巢大鼠随机分为模型组、杜仲组、运动组、杜仲运动组，进行12周干预，干预结束后，将所有大鼠置入代谢笼采集24 h尿样，隔日，所有大鼠进行力竭运动。之后采集所有大鼠的腹腔血液，进行生化分析并对其左侧股骨进行骨扫描。实验流程图见图1。

1.4.2 构建绝经大鼠模型进行1周适应性饲养后将大鼠随机分为切除卵巢组和假手术组，数量分别为60只和20只。将全部80大鼠用40 mg/kg戊巴比妥钠(0.1 g/kg)经腹腔麻醉后，剪除体毛，分别在脊柱两侧切开背肌1.5 cm切口，摘除大鼠卵巢，假手术组大鼠只对卵巢周围脂肪组织进行清除。用可被自体吸收的羊肠线缝合伤口，术后腹腔注射80×10⁴ U/kg青霉素钠，1次/d，持续注射5 d，防止手术后感染现象出现。切除卵巢组60只大鼠造模全部成功，所有大鼠均存活，且精神状态良好。

1.4.3 分组与执行方案术后4周，将接受去卵巢手术的60只大鼠随机分为模型组、运动组、杜仲组和杜仲运动组，每组15只。杜仲组按照15 mL/kg剂量灌胃给予杜仲提取物(含杜仲生药4 g/kg)，正常饲养不进行运动；杜仲运动组与杜仲组采用相同给药方式并进行运动；运动组、假手术组、模型组按与杜仲组相同体积0.5%CMC-Na进行灌胃，其中运动组每天进行与杜仲运动组相同运动，假手术组、模型组正常饲养，不运动。所有实验大鼠每天灌胃1次，每周灌胃6 d，连续给药12周。在12周干预后所有大鼠皆存活，未出现死亡，且精神状态良好。

1.4.4 跑步运动方案和力竭运动方案

(1)跑步运动方案：假手术组和杜仲组在笼中正常饲养，没有进行任何训练；运动组和杜仲运动组于去卵巢手术后4周开始进行运动(图2)，训练方案如表1。

(2)力竭训练方案：运动12周后，所有大鼠进行力竭运动。把动物跑台的坡度固定在10%，然后以渐进式力竭运动方式(图3)让运动组的大鼠运动至力竭为止。动物跑台后方设有电击区，因此力竭运动的判定是以大鼠经过多次电击后无法再运动。

1.5 主要观察指标

1.5.1 大鼠状态记录观察指标观察整个实验周期内各组大鼠术后伤口、精神状态，饮食排便等情况，每3周记录大鼠体质量。

1.5.2 骨密度和骨质代谢指标检测使用Faxitronultrafocus100双能X线骨密度仪AEC自动曝光活体小动物模式对所有大鼠左侧股骨进行扫描，扫描完成后对股骨干骺端进行分析。力竭实验后，腹腔取血，常温静置1 h，后将血液以3 000 r/min离心10 min，分离血清。通过酶联免疫法(ELISA)检测血清骨钙素(OC)、尿液中的脱氧吡啶啉(DPD)含量；通过全自动生化仪检测血清中钙(Ca)、碱性磷酸酶(ALP)、磷(P)含量以及尿液中的钙(Ca)、磷(P)。

1.5.3 生化分析 80只大鼠经实验处理后，以腹腔动脉采血的方式收集约15 mL血液，并置于含有EDTA 抗凝血剂的试管中，编妥号码，后将血液以3 000 r/min离心15 min，分离血清，通过血液分析仪、分光度仪等检验肌酸激酶、乳酸脱氢酶浓度、丙二醛、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化酶活性，采用ELISA酶法检测血清中雌二醇(E2)水平。

1.6 统计学分析采用SPSS 20.0软件进行统计分析。利用多因素方差分析检验运动和杜仲补给双因素对于大鼠骨密度和各项生化影响。若交互作用有达显著水平，则以Tukey method进行检验。此次研究设α=0.05为显著水平。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

讨论

运动是目前对抗骨质疏松症的重要手段，但是传统自重抗阻运动如跑步、走路等低冲击运动对于骨密度的增加产生作用一般认为要持续10-12个月，同时大量运动对身体氧化伤害也不容忽视，绝经过后女性抗氧化能力下降已经被证实。所以选用适量运动配合药物补充，达到改善骨健康和抗氧化双重目的是较为合理的手段。

3.1 跑步运动结合摄取杜仲提取物对骨密度和骨质代谢的影响大鼠接受双侧卵巢切除后，去卵巢大鼠体质量升高且显著高于假手术组，Yoon等^[6]的研究中也出现类似现象，通过验证和比对，Yoon认为造成这一现象的原因是生物体自身代偿导致的，当大鼠体内卵巢失能，体内雌激素水平降低，通过身体质量增加的方式刺激骨量增加，减少骨质结构性破坏。Yuan等^[7]研究发现，体质量增加与骨量增加不成正比，体质量反而对骨骼和关节造成较大压力，增加意外骨伤风险。此次研究中，各组大鼠的喂养条件一致，在干预后第3周杜仲组和杜仲运动组大鼠体质量显著降低，随着干预时间的推进，与假手术组大鼠体质量没有显著差异；杜仲组和杜仲运动组大鼠血清雌二醇水平也呈现显著上升，显著高于模型组(P < 0.05)，可能是大鼠通过杜仲提取物体刺激体内雌激素水平上升，从而抑制雌激素降低诱发的体质量代偿机制。Yuan等^[7]的实验中对去卵巢大鼠摄入戊酸雌二醇，发现体质量增加得到抑制，这验证了此次研究的观点。另外此次研究中，杜仲运动组大鼠体质量低于杜仲组，但并未达到统计学差异，此差别可能是因为大鼠运动导致有额外能量消耗从而影响体质量，结合两组大鼠的血清雌二醇水平没有显著性差异，所以判断运动对于雌激素的影响可能不是非常显著，摄入杜仲是该实验影响生物体内雌激素水平的主要因素。

绝经期妇女骨组织中无机物一般会高于70%，主要组成为磷酸钙盐，而有机物一般会少于30%，由Ⅰ型胶原组成。所以此次研究采用在检验学上常被用来代表骨骼中有机物和无机物代谢的指标，用以判断骨质代谢变化情况。在进行12周干预后，模型组大鼠血清骨钙素、碱性磷酸酶、尿液DPD、Ca、P升高均显著高于其他各组，这表明模型组骨转换率和骨吸收状况较强。模型组骨质代谢异常升高可能表示骨质较快的流失和生物代偿性吸收。杜仲组和杜仲运动组以上指标均显著低于模型组，与假手术组没有显著差异，这可能是杜仲有效成分可调节大鼠体内激素水平从而使骨代谢平衡，显著降低骨转换率，进而防止骨质疏松出现。在骨代谢指标方面杜仲运动组优于杜仲组，但是也未达统计学差异水平，这可能是运动也对骨代谢起到一定影响，到但是由于大鼠进行的是低冲击(跑步)，可能需要更久的时间才能出现较为明显的作用。

骨密度骨骼矿物质密度，是骨骼强度的一个重要指标，是用来判断骨质疏松、评价骨质健康状况重要指标。在双侧卵巢摘2周后，模型组大鼠股骨骨密度显著低于假手术组，可以就此判断该实验骨质疏松模型构建成功。同样接受去卵巢的大鼠，杜仲组和杜仲运动组骨密度显著高于与模型组，说明杜仲摄入对于骨密度增加具有良好效应，此结果与骆瑶等^[8]的研究结果一致。运动组杜仲运动组骨密度高于杜仲组，差异接近显著水平，这现象说明运动对于骨密度的增加较为有效，在之前研究中也被多次验证。该研究中运动结合杜仲摄入骨密度具有良好促进作用，在跑步运动与杜仲摄入联合干预下，去卵巢大鼠股骨骨密度与假手术组骨密度接近。

3.2 跑步运动结合摄取杜仲提取物对抗氧化伤害影响在正常生理状态下，机体内氧化自由基和抗氧化系统保持动态平衡，高强度运动会打破机体内氧化自由基和抗氧化系统保持平衡态，导致氧化伤害的发生。生物体内会产生抗氧化酶如超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化酶、过氧化氢酶及还原型谷胱甘肽等，使细胞免于因自由基所带来的氧化伤害^[9-10]。从此次实验得知，大鼠运动至力竭时间约 48 min，当时坡度10°，根据以往研究可了解其力竭时的运动强度已达90% 最大摄氧量以上，因此杜仲组和杜仲运动组的超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化酶活性显著高于模型组、假手术组，且此结果与Ma等^[11]发现大白鼠在单次力竭运动后，摄入杜仲大鼠的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性和FSH/FSSF比值皆显著高于控制组的研究结果相似。杜仲组和杜仲运动组间数据，超氧化物歧化酶与谷胱甘肽过氧化酶活性没有显著差异，有可能是因杜仲补给的关系，减缓因力竭运动引发的氧化伤害。模型组超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化酶活性显著低于假手术组，这说明卵巢功能衰退会影响抗氧化能力，说明绝经后妇女更容易被抗氧化物活性较低。

丙二醛为自由基造成的脂质过氧化物之一，于此次实验中做为氧化伤害指标。Alessio等^[12]研究发现，坐式生活的大鼠经由64%耗氧运动、持续20 min后就会导致肝脏及白肌内丙二醛浓度显著增加。实验结果在激烈的运动后，发现所有大鼠的血清丙二醛浓度均显著增加，杜仲组和杜仲运动组大鼠体内丙二醛浓度显著低于模型组和假手术组。Yang等^[13]研究以高剂量杜仲喂食大鼠30 d并使之跑至力竭后，发现可减少脂质过氧化物产生的实验结果与本文结果类似。同样饲养条件，模型组大鼠血清丙二醛浓度显著高于假手术组，这证明去卵巢后，收雌激素水平较低可能会增加氧化伤害程度，许多后续研究证实，女性在进入绝经期后身体更容易受到氧化伤害^[14-15]。摄入杜仲的杜仲组、杜仲运动组大鼠，肌酸激酶、乳酸脱氢酶、丙二醛、超氧歧化酶和谷胱甘肽过氧化酶数据显著优于未摄入喂杜仲的模型组和假手术组，这表明杜仲的摄入有助于降低过量运动对机体造成的氧化伤害，这对于处于绝经期的机体是非常重要的。冯晗等^[16]的研究中明确指出杜仲具有抗炎、抗氧化的作用。杜仲中富含的香豆酸、原儿茶酸、绿原酸、焦棓酸、桃叶珊瑚苷、芦丁、阿魏酸和咖啡酸被认为是其能够清除活性氧自由基，增强超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性的主要作用成分^[17-19]。

3.3 结论与不足

结论：长期进行跑步运动并结合摄取杜仲提取物或单纯摄取杜仲提取物均可以显著提升切除卵巢骨质疏松大鼠的骨密度、血清雌激素水平，并可以促进骨代谢平衡，降低骨转换率和因卵巢功能降低导致的体质量增加，能够起到维护骨量、防止骨质疏松的作用。

不足：此次实验中只分假手术组、模型组、杜仲组、杜仲运动组，没有对杜仲剂量、运动强度进行细分，未来的研究中可以将运动强为高、中、低强度、将杜仲分为高、中、低剂量进行不同处方搭配，探究最佳效果组合。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程