2.1 一般情况观察 造模时,所有大鼠暴露脊髓时平均出血0.3-0.4 mL,术后将生理盐水0.2-0.3 mL注入腹腔中,以补充血容量。造模后,由于大鼠的脊髓所受打击力不同,各组SD大鼠的局部充血程度表现不同。整个实验中SD大鼠死亡24只,其中打击势能100 gcf 组2只,死亡率为8%(2/25);打击势能200 gcf组死亡4只,死亡率为16%(4/25);打击势能300 gcf组8只,死亡率为32%(8/25);脊髓全切组死亡10只,其中因尿路感染死亡4只,术后出现血尿3只,死亡率为40%(10/25)。打击势能300 gcf组、脊髓全切组,每时间点仅存活3只或4只,脊髓全切组的死亡率和并发症最高,可能和其脊髓所受损伤最重有关。
2.2 模型创新性或者材料、方法的改进 用自制的NYU撞击器进行打击,冲击棒直径约3 mm,致伤能量分别100,200,300 gcf,打击效率更高,形成了轻、中、重度脊髓损伤模型,与假手术组、脊髓全切组相对比,探讨更适合基础实验研究的动物模型。
2.3 模型更接近人类或临床实践或者模型稳定性 致伤势能为100,200,300 gcf,可模拟SD大鼠轻、中、重度脊髓损伤模型的微环境,模型稳定。不同势能的改良Allen’s模型较脊髓横断模型并发症低,更符合脊髓损伤病理特点,更适合基础实验的要求。
2.4 SD大鼠行为学测试分析 不同损伤程度对SD大鼠后肢功能恢复的影响不同,损伤越重,恢复越差。随着时间的推移,5组BBB分数逐渐增高,提示脊髓损伤后大鼠后肢功能都能得到逐渐恢复。经统计学分析,假手术组与打击势能100,200,300 gcf组、脊髓全切组各对应时间点比较,差异有显著性意义(
P < 0.05),打击势能100,200,300 gcf组各对应时间点比较,差异有显著性意义(
P < 0.05),打击势能100 gcf组、打击势能200 gcf组、脊髓全切组各对应时间点比较,差异有显著性意义(
P < 0.05),打击势能300 gcf组和脊髓全切组比较差异无显著性意义(
P > 0.05),见
表1,
图1。
2.5 损伤后脊髓组织学变化 SD大鼠脊髓损伤后1-28 d,假手术组苏木精-伊红染色为正常的脊髓,可见组织结构形态规则,纤维排列整齐;灰白质分界清楚,灰质细胞分布均匀,胞体大,核仁明显,神经元丰富,白质内神经纤维沿脊髓纵轴方向排列有序(图2)。
损伤后第1天(图3):打击势能100 gcf 组表现灰白质内神经元细胞及胶质细胞丰富,灰白质界限能区分,可见有少许红细胞渗出。打击势能200 gcf组、打击势能300 gcf组、脊髓全切组均见灰、白质分界不清,神经细胞减少,灰质中可见有大量红细胞渗出,部分胶质细胞和神经元出现胞体缩小,核固缩,核碎裂,凋亡小体形成等凋亡特征。
损伤后第5天(图4):灰质前后角区域可见神经元的神经细胞体和神经胶质细胞减少,甚至坏死,渗出增加,红细胞分布面积扩大,白质的后方结构出现损伤,有少量的炎性细胞浸润和点状出血现象,以打击势能200 gcf组、打击势能300 gcf组、脊髓全切组表现为甚。
![](https://www.cjter.com/fileup/2095-4344/FIGURE/20160325090641.jpg)
损伤后第7天(
图5):水肿和出血得到改善,较前明显减少,神经元细胞继续减少,出现坏死组织细胞碎片,灰质和白质区域有空洞形成,部分区域可见胶质细胞增生,毛细血管形成,炎性细胞浸润明显。以打击势能200 gcf组、打击势能300 gcf组、脊髓全切组表现为甚。
![](https://www.cjter.com/fileup/2095-4344/FIGURE/20160325090651.jpg)
损伤后第14天(
图6):脊髓组织排列疏松,神经元细胞进一步减少,可见空洞及胶质瘢痕形成,以打击势能200 gcf组、打击势能300 gcf组、脊髓全切组表现为甚。
损伤后第28天(图7):脊髓断端大部分被瘢痕侵蚀,连接。瘢痕内未见再生的的神经纤维,脊髓全切组完全被瘢痕填充。以打击势能200 gcf组、打击势能300 gcf组、脊髓全切组的神经元细胞数减少更加明显,且变性细胞及红细胞数量明显多于假手术组、打击势能100 gcf组。
2.6 SD大鼠脊髓损伤后各组运动诱发电位检测比较
SD大鼠脊髓损伤后,每组的运动诱发电位潜伏期都有不同程度改变。在各个时间点打击势能200 gcf组、打击势能300 gcf组、脊髓全切组比假手术组、打击势能100 gcf 组的运动诱发电位潜伏期都长,打击势能100 gcf 组在损伤后即刻,打击势能200 gcf组在损伤后12 h,打击势能300 gcf组、脊髓全切组在损伤后1 d前均未测出运动诱发电位。5-7 d时,打击势能100 gcf 组运动诱发电位潜伏期与假手术组比较,差异无显著性意义(
P > 0.05),但打击势能200 gcf组、打击势能300 gcf组、脊髓全切组的运动诱发电位潜伏期与假手术组相比较差异有显著性意义(
P < 0.05),打击势能300 gcf组、脊髓全切组之间的运动诱发电位潜伏期在相应时间点比较差异无显著性意义(
P > 0.05)。脊髓损伤后1 d,打击势能300 gcf组、脊髓全切组波幅消失,均在术后第5天才能检测出,在各时间点波幅下降程度比较,以打击势能200 gcf组、打击势能300 gcf组、脊髓全切组较假手术组、打击势能100 gcf 组为甚,差异有显著性意义(
P < 0.01),打击势能300 gcf组、脊髓全切组在各个时间点比较差异无显著性意义(
P > 0.05),见
表2,
3和
图8,
9。
![](/UserFiles/Image/t8(3).jpg)