2.1  回顾性分析结果

2.1.1  患者数量分析  患者22例均进入结果分析，无脱落，见图2。

2.1.2  创面愈合情况分析  术后1个月观察，患者22例中，11例伤口经富血小板血浆治疗完全获得愈合，5例患者伤口面积较原来缩小50%以上再行周围组织皮瓣转移达到完全愈合，6例观察创基肉芽组织新鲜渗血行游离植皮治疗获得愈合。观察中见富血小板血浆凝胶牢固粘合创缘，创面渗出显著减少，治疗三四次后，创面有新鲜肉芽组织大量生长，创缘上皮生长，且愈合后3-12个月随访无明显瘢痕组织增生。

2.1.3  典型病例  男性67岁患者，右足糖尿病足溃疡植皮术后3个月，术区远端破溃2个月余，潜行腔隙约2.0 cm×  1.5 cm，深约1.0 cm，常规换药治疗1个月未见明显疗效，经评估全身情况及签署知情同意书后于医院输血科采集1个治疗量的血小板，提取富血小板血浆分成4份。开始应用自体富血小板血浆凝胶，其后每间隔1周更换1次富血小板血浆凝胶，在应用3次富血小板血浆后患者创口完全修复，患者痊愈出院，共住院21 d；术后3个月随访，未复发，且愈合处皮肤质地柔软，未见增生性瘢痕形成，见图3。

2.2  自体富血小板血浆修复慢性难愈性创面的文献总体趋势分析

2.2.1  发表文献数量分析  在2010至2019年万方数据库纳入的32篇文献中，发表文献量最多的是2018年8篇，最少的是2014年和2015年各2篇，从2016年到2018年发文量逐年升高，说明近年来人们对自体富血小板血浆在慢性难愈性创面的研究逐渐重视起来，见图4。

2.2.2  机构发表文献分布情况  纳入的32篇文章中，冀中能源邢台矿业集团总医院、南方医科大学、广州番禺中心医院和武汉大学人民医院各发表2篇，其他机构各发表1篇，具体见图5。

2.2.3  文献来源分布  在32篇文献中《临床外科杂志》《中国输血杂志》及《中华关节外科杂志电子版》各发表2篇，其他杂志各发表1篇，见图6。

2.2.4  基金支持  在32篇文献中基金项目主要包括10项，其中来自广东省的基金有5项，见表2。

2.2.5  文献内容分析  在纳入的32篇文献中，邬佳敏等^[11]发现，与外用富血小板血浆凝胶相比，自体富血小板血浆局部注射修复创伤后难愈创面的疗效较好，病程缩短，所需费用降低。陈大康等^[17]研究显示，自体富血小板血浆移植治疗四肢难治性创面，能抑制创面细菌生长，有效促进软组织缺损修复，缩短四肢骨、肌腱创面的愈合时间。何丽苇等^[18]研究发现，富血小板血浆治疗能促进难愈性创面的愈合，缩短治疗期，尤其是促进新生肉芽的产生效果明显好于上皮组织的生成速度。郭荣等^[26]研究显示，蝎肽凝胶联合富血小板血浆凝胶能增加创面血运，加速愈合，适合于溃疡创面修复治疗。黄山东等^[30]研究显示，经清创、换药、负压封闭引流等方法治疗后仍不能愈合的合并深部组织外露的外伤性难愈性创面，富血小板血浆治疗能获得创面的上皮化愈合。以上研究均证实了富血小板血浆对难愈性创面的治疗有效性，但尚缺乏大样本的随机对照试临床验证实其结论的准确性。

慢性难愈性创面目前没有明确的定义，通常把各种内外因作用下创面不能通过正常的创面愈合过程而达到愈合，呈现病理性炎症反应状态，从而导致创面经久难愈的称为慢性难愈性创面，具有发生机制复杂、病程长的特点，是创面修复外科长期难以解决的治疗难题，具有很高的致残率^[1-4]。而且，随着中国正在进入老龄化社会，老年疾病及代谢疾病发病率逐年增高，尤其是长期卧床导致的压疮及糖尿病溃疡等老年性问题凸显，老年人组织修复更加缓慢，加大了伤口愈合与软组织修复的难度，现有的常规治疗手段多基于普通创面治疗，而非慢性难愈性创面^[5]。关于如何促进慢性难愈性创面愈合与软组织修复近年来逐渐成为研究热点。近年随着基础研究的不断深入，各种新的治疗措施也得到应用和成熟，慢性难愈性创面的治疗水平逐步提高，不同的治疗观点普遍同意愈合的过程源于细胞层面的病理性向生理性的转化。

有研究表明，应用自体富血小板血浆修复难愈性创面，可以加快软组织愈合速度，减轻局部疼痛和减少愈后瘢痕增生等^[6]。富血小板血浆是通过离心自体血而提取出的含有高浓度血小板的血浆，除血小板外，其中含有多种高浓度的生长因子及纤维蛋白，如血小板源性生长因子、转移生长因子β、血管内皮生长因子和上皮生长因子等^[7-8]，这些生长因子在软组织和骨组织的修复中起着重要作用。由于富血小板血浆制作简便，价格便宜，来源于自体，不存在免疫排斥反应和疾病传播的危险，目前在国内外已被广泛应用于颌面外科、骨科、整形外科和神经外科等领域^[1，8-10]。

试验以此观察自体富血小板血浆凝胶修复慢性难愈合创面的效果，同时文章还将通过文献检索分析以往相关临床试验结果，探讨自体富血小板血浆在慢性难愈性创面修复中的应用价值。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

1.1  回顾性病例分析

1.1.1  时间及地点  于2016年1月至12月在解放军北方战区总医院烧伤与创面修复外科完成。

1.1.2  对象  选择2016年解放军北方战区总医院接受治疗的慢性难愈性创面病例22例。试验已经通过解放军北方战区总医院医学伦理委员会批准。

纳入标准：①慢性难愈性创面者，持续存在5周未获得愈合；②创面持续时间2-26个月；③签署知情同意书者。

排除标准：年龄低于18周岁者。

患者22例中，男14例，女8例；年龄21-75岁，平均52岁，创面持续时间2-26个月。糖尿病足溃疡8例，溃疡面   1.5 cm×2.0 cm-2.0 cm×6.0 cm，创面不愈3-12个月；创伤性溃疡3例，溃疡面2.0 cm×3.5 cm-3.0 cm×6.0 cm，创面不愈3-18个月；创伤后骨不连3例，溃疡面0.5 cm×1.0 cm-  3.0 cm×5.0 cm，创面不愈2-16个月；电烧伤后骨外露2例，溃疡面1.0 cm×2.0 cm-2.0 cm×4.0 cm，创面不愈2-4个月；放射性溃疡6例，溃疡面2.5 cm×4.0 cm-5.0 cm×8.0 cm，创面不愈13-26个月，深度0.3 cm-2.0 cm，未应用富血小板血浆凝胶修复前采用皮瓣转移、常规换药、新型敷料、封闭负压引流等方法治疗，创面不愈或遗留残余创面，经患者知情同意并签署知情同意书后采用富血小板血浆治疗。见表1，2。

1.1.3  方法

      富血小板血浆的制作及应用：采集前评估患者全身状况，血常规检查：血红蛋白水平>110 g/L，血小板计数>150×  10⁹ L^-1，红细胞比积>0.35，其他血常规指标无明显异常；凝血无明显异常；有严重心功能不全、脓毒血症的不能采集。采血使用全自动血液采集装置及血液成分分离机配套管路采集血小板，持续60-80 min，过滤血量2 300-2 600 mL，平均输入速度33-37 mL/min，根据创面需求采集1个(或2个)治疗量的血小板。将采集好的血小板使用血细胞离心分离机在4 ℃恒温下进行离心(2 500 r/min)15 min，吸取出上层清亮血清，剩余底层为富血小板血浆，分为四五份，1份立即使用，其余深低温保存。

所有创面均先进行常规清创，以清除所有坏死组织创面少许渗新鲜血为适宜，清创后反复生理盐水冲洗以保证创面新鲜、干净。将分装好的富血小板血浆4.0-5.0 mL加入促凝剂(由1 mL体积分数10%的葡萄糖酸钙与1 000 U凝血酶混合而成)按照1 mL∶200 U制成富血小板血浆凝胶，取富血小板血浆凝胶根据创面及窦道大小贴敷或填塞于创腔，医用安普贴薄膜封闭创面，每间隔5-7 d换药，清除坏死组织后更换1次富血小板血浆凝胶，换药随访1-3个月，主要观察创面愈合情况。

1.2  文献检索分析

1.2.1  资料来源  由第一作者采用计算机在万方数据库进行检索，中文检索词为“富血小板血浆、难愈合创面”，纳入文献时间为2010至2019年。

1.2.2  纳入标准  与富血小板血浆治疗难愈合创面相关的临床研究文章。

1.2.3  排除标准  排除与文章内容无关的及重复性文献。

1.2.4  文献提取  初检得到中文文献62篇，按照题目及相关度逐次浏览，阅读文题及摘要，再根据入组标准筛查，最终选取中文文献32篇^[11-42]。见图1。

1.2.5  文献分析方法  从万方数据库检索近10年有关富血小板血浆治疗难愈合创面相关的临床研究数据，分别从年份发表文献量、发表机构、发表期刊及项目支持基金进行总体趋势分析。

3.1  研究背景分析  慢性难愈性创面是临床棘手问题，常见于老年患者，按照发生诱因可包括复杂外伤后的外伤性溃疡、长期卧床引起的压迫性溃疡(压疮)、肿瘤放疗后引起的放射性溃疡、下肢深静脉栓塞和原发性下肢静脉瓣膜闭锁不全引起的静脉淤血性溃疡、动脉缺血性溃疡、感染性溃疡及恶性肿瘤溃疡等原因。本组病例有糖尿病血管病变引起的、有创伤后或电烧伤后的难愈性创面^[4，10]。虽然难愈性创面不会立即威胁生命，但因长期经久不愈的创面，严重影响患者的生活质量，给家人带来沉重的护理与经济负担，伤残率高。除全身营养支持、预防感染及血糖等代谢指标控制常规全身治疗手段外^[43]，加强局部换药及处置是创面愈合的关键，虽然国内外对慢性难愈性创面治疗方法研究很多，包括持续负压吸引治疗^[44]、干细胞治疗及手术植皮等等^[4，10]，但效果都不能满意，对难愈创面的研究从未中断。

正常生物组织都具备一定的自身修复能力，而生物组织的修复能力主要是通过生长因子得以实现的。既然生物组织具备修复的潜能，是否有办法将组织自身修复能力调动出来，而为生物体自身修复所用呢？富血小板血浆正是这一类技术，在动物实验及临床骨科领域已广泛应用^{[2-3，45-46]}，中国有学者在烧伤创面的应用也取得良好效果^[47]。

富血小板血浆是通过离心自体全血而得到的含高浓度血小板的血浆。现已证实富血小板血浆中含有大量的血小板源性生长因子、转化生长因子β1、转化生长因子β2、类胰岛素生长因子、表皮生长因子和血管内皮细胞生长因子^[7，46]。外源性生长因子的介入用于组织修复已有很多年历史。大量实验数据表明，血小板源性生长因子、转移生长因子β、血管内皮生长因子和上皮生长因子在组织修复中可以促进修复细胞的增殖分化，增强细胞外基质的合成，加速骨组织及软组织的修复^[48-51]。但生长因子大多是从动物身上提取，用于人体存在一定的排异反应和疾病传播的可能；另外纯化的生长因子价格昂贵，限制了其广泛使用；且多为液态，在临床应用上易流失和挥发，作用效果不尽人意。而富血小板血浆来源于自体，不会出现免疫排斥及传播疾病的危险之虞，而且制作简单，价格低廉，内含有多种高浓度的生长因子，是临床上治疗慢性难愈合伤口的有效手段。据文献报道，多种生长因子修复伤口的效果好于单一的生长因子，这可能与多种生长因子之间有联合促进作用且能作用于伤口愈合过程的多个阶段有关^{[8，47，52]}。而且，作为自体血小板浓缩物，富血小板血浆中所含的多种生长因子与正常生理浓度比例相近，各生长因子之间能起到较好的协同作用。另外，富血小板血浆中含有大量的纤维蛋白，为伤口修复细胞提供了良好的支架，还可以收缩创口^[2-3，52]。

富血小板血浆促进慢性难愈合创面修复的前提条件是彻底外科清创和重视创面抗感染治疗，依赖富血小板血浆中含有高浓度的激活的生长因子加速创面愈合。富血小板血浆凝胶可以防止血小板的流失，使血小板在局部长时间存活并分泌生长因子^[53]。

3.2  回顾性结果分析  该回归性分析结果显示，富血小板血浆修复的22例慢性难愈性创面病例，创面完全愈合11例，创面缩小后经皮瓣转移后愈合5例，行游离植皮治疗获得愈合6例，说明富血小板血浆凝胶对慢性难愈合伤口有明显的修复作用，且对患者损伤小，无疾病传播及免疫排斥反应，临床效果较好。

该课题组于2014年开始应用富血小板血浆治疗多种复杂难愈性创面，取得良好治疗效果。富血小板血浆具有如下优势：①自体血小板浓缩物，其所含的各种生长因子成分及比例与正常生理状态下浓度接近；因此各生长因子之间能够最符合人体天然修复需求进行协同作用，这可能是富血小板血浆可更快促进组织修复的一个重要因素；②富血小板血浆含有大量的纤维蛋白，在组织修复过程中为细胞提供良好的支架，还可以起到收缩创面、缩小创面面积的作用^[3，54]；③富血小板血浆可用凝血酶凝固成胶状，敷于伤口，不仅为肉芽生长提供湿润的再生环境，有利于伤口愈合，还可以使生长因子长时间局限作用于创面局部，避免了目前其他外源性液态重组生长因子制剂在伤口易流失及易蒸发的缺点，外用安普帖更能很好地维持近似人体自身的内环境及湿度；④富血小板血浆是自源性的，这从根本上避免了外源性生长因子引起免疫排斥问题，避免了传播疾病以及异种重组基因产品可能改变人类遗传结构的担忧，伦理学争议小；⑤单核细胞及白细胞与血小板在血液中的沉降系数相近，因此经离心法制作的富血小板血浆中还含有较大量的白细胞及单核细胞，这可以更好地起到防止感染的作用^[55]；⑥富血小板血浆还可以通过调动机体自身修复能力和启动免疫防御系统2个途径，预防和治疗感染^[56]；⑦富血小板血浆制作简单，对患者创伤小，而且成本较低，可以减轻患者医疗费用。

3.3  文献分析结果分析  从文章文献分析结果来看，富血小板血浆用于慢性创面的治疗尚处于实验或临床试验阶段，虽然这些研究已对其制备方法和临床治疗潜力进行了探索，但从循证医学角度分析，现有证据尚缺乏说服力。目前LI等^[57-58]采用了随机对照试验分析了自体富血小板血浆在慢性难愈性创面的修复作用，并取得了一定效果，但受限于样本量较小，结果尚需进一步证实，具体见表3。但目前大部分富血小板血浆使用的研究缺乏大规模、多中心、前瞻性随机对照研究，且至今尚无统一的富血小板血浆提取标准、质量控制体系及创面使用指南等。因此，如何规范富血小板血浆的制备及使用过程以保证疗效的稳定性还有待进行更多的探索。

3.4  小结  总之，富血小板血浆凝胶可加速局部损伤组织的修复过程，因而具有非常良好的临床应用前景，但仍存在很多有待解决的问题。例如目前对局部应用生长因子促进创面愈合过程中，因子与因子之间的调控关系，因子对修复细胞，特别是表皮干细胞与间质干细胞分化的调控等均有待进一步研究阐明。此外，富血小板血浆对促进不同创面愈合的最佳环境、最佳时间以及最佳剂量均有待进一步深入研究，但是由于富血小板血浆的制备方法仍未有统一的标准，还有其作用机制及作用途径仍未清楚，故临床上对使用富血小板血浆仍未得到普及，仍需未来进行大量的研究来证实。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

文题释义：
慢性难愈性创面：通常把各种内外因作用下创面不能通过正常的创面愈合过程而达到愈合，呈现病理性炎症反应状态，从而导致创面经久难愈的称为慢性难愈性创面。
富血小板血浆：是通过离心自体血而提取出的含有高浓度血小板的血浆，除血小板外，其中含有多种高浓度的生长因子及纤维蛋白。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

富血小板血浆制作简便，价格便宜，来源于自体，不存在免疫排斥反应和疾病传播的危险，目前在国内外已被广泛应用于颌面外科、骨科、整形外科和神经外科等领域。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程