Sonic Hedgehog信号通路在胚胎发育及神经修复中的现状与进展

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2015.46.026

摘要/Abstract

摘要：

背景：多项研究表明Sonic Hedgehog (Shh)信号通路可调控神经细胞的增殖、分化和轴突形成，参与脑损伤后的神经再生。
目的：总结Shh信号通路在胚胎发育及出生后神经修复中的作用。
方法：由第一作者检索PubMed 数据库及CNKI全文数据库1980年1月至2015年7月的相关文献，并进行筛选，归纳和总结。英文检索词为“Shh signal pathway, embryogenesis，neural regeneration”，中文检索词为“Shh信号通路，胚胎发育，神经修复”，选择有关Shh在胚胎期细胞分化、组织发育中的研究及出生后参与神经修复，轴突迁移导向及肿瘤发生发展的相关研究，共检索38篇。
结果与结论：近年来Shh信号通路因与脑损伤后神经组织修复的密切关系而备受关注。Shh在Hedgehog (Hh)家族中具有最广泛表达，在胚胎发育、器官形成中起着重要的作用，参与神经系统模式发生、调控前体细胞的分化和迁移、控制轴突的生长和导向，且与肿瘤的发生密切相关。相关研究表明Shh能缩减脑卒中大鼠的脑梗死体积并改善行为学预后。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

关键词: 组织构建, 组织工程, 胚胎发育, Shh；神经修复, 细胞增殖, 肿瘤, 轴突, 迁移导向, 血管再生

Abstract:

BACKGROUND: Many studies have showed that Sonic Hedgehog (Shh) signal pathway regulates the proliferation and differentiation of nerve cells, axon guidance and neural regeneration after brain injury.
OBJECTIVE: To summarize the role of Shh signal pathway in embryonic development and post-natal nerve repair.
METHODS: A computer-based retrieval was performed by the first author in PubMed and CNKI database to search related papers published from January 1980 to July 2015 using the keywords of “Shh signal pathway, embryogenesis, neural regeneration” in English and Chinese, respectively. Articles related to Shh signal pathway in embryonic cells differentiation, tissue development, post-natal neural regeneration, axon migration and tumor formation. A total of 38 relevant literatures were retrieved.
RESULTS AND CONCLUSION: Recently, Shh signal pathway has become an issue of concern because this signal pathway is closely related with neural regeneration after brain injury. Shh is widely expressed in Hedgehog (Hh) family and plays a crucial role in embryogenesis and organogenesis. Shh is well known to contribute to the patterning of neural tube system, regulate the proliferation and migration of progenitor cells, and control axonal
growth and guidance. In addition, Shh is closely related to tumor formation. Studies have shown that Shh can reduce infarct volume and improve behavior prognosis of stroke rats.
中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

Key words: Embryonic Development, Nerve Regeneration, Cell Differentiation

王苏平，吴晓君，闫旭，赵红. Sonic Hedgehog信号通路在胚胎发育及神经修复中的现状与进展[J]. 中国组织工程研究, 2015, 19(46): 7523-7528.

Wang Su-ping, Wu Xiao-jun, Yan Xu, Zhao Hong. Role of Sonic Hedgehog signal pathway in embryogenesis and neural regeneration[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2015, 19(46): 7523-7528.

图/表（结果） 1

2.1 Shh信号通路概述及其在胚胎发育中的作用 1980年，Nusslein-Volhard和Wieschaus在研究果蝇的基因突变时发现了Hh基因，该基因编码高度保守的糖蛋白，其调控的信号通路称为Hh信号通路^[1]。在果蝇中仅有一种形式的Hh基因，在哺乳动物中则存在3种同源基因：Sonic hedgehog(Shh)、Indian hedgehog(Ihh)和Desert hedgehog(Dhh)，分别编码3种相应蛋白。其中Ihh特征性地参与软骨发育；Dhh在生殖细胞的发育中起关键作用；Shh在Hh家族中具有最广泛表达，在胚胎发育过程中对各器官的分化成形起重要调节作用，可调控多种生物学行为，如神经干形成、中轴骨和体节的衍生、干细胞的分化增殖、四肢骨骼发育、牙胚发育等^[2]。

Shh作为形态发生素，是一种促有丝分裂的信号，诱导各种类型细胞的分化。在中枢神经系统发育的早期，神经管腹侧的脊索和底板分泌Shh，以浓度梯度分布，诱导产生腹侧不同类型中间神经元前体细胞，同时又诱导背侧细胞分化形成运动神经元。如果阻断Shh的作用，这部分神经元就会停止分化^[3]。Shh不同的浓度阈值导致不同的细胞命运，低浓度产生腹侧中间神经元，高浓度产生运动神经元，更高浓度导致底板细胞产生^[4]。Shh在各器官早期发育中的表达具有时间和空间特异性，通过自分泌和旁分泌作用于上皮组织以及周围的间充质细胞，调控各器官的形态发生。Shh诱导中枢神经系统的极性如脊髓背腹两侧分区和大脑半球分化，参与神经模式发生，前体细胞定位，细胞表型的定向诱导；调节胚胎及出生后多区域神经前体细胞的增殖和分化，在脊髓运动神经元、大脑皮质GABA中间神经元的分化中起到重要所用；维持大脑神经干细胞生存的微环境^[5-7]。

研究发现，Shh表达在皮质分化中晚期的背侧端脑，调控皮质结构的发育，并与出生后以至成年干细胞库的产生和维持密切相关^[8]。选择性的基因敲除背侧端脑的Shh或Shh的受体导致前体细胞数量减少，神经发生减少，细胞死亡数增多，提示Shh信号通路在皮质的神经发生中具有重要的调控作用^[9]。然而，这种作用背后的分子机制仍未阐明。另有研究发现，Shh信号通路对于神经发生微环境的建立至关重要，Shh通过调整微环境的变化调整发育中大脑皮质细胞增殖与分化的内在平衡^[6]。

Shh是中枢神经系统的多效性因子，参与胚胎发育的多个过程，能促进发育中脑和脊髓的细胞增殖、分化和轴突的靶向性生长，对于神经前体细胞分化为神经元还是胶质细胞有命运决定作用^[10]。胚胎发育必需有Shh信号通路的参与，此外，Shh还与其他信号分子如成纤维细胞生长因子，骨形态发生蛋白等共同调控发育过程。Shh信号通路的调控作用与Shh蛋白的分泌、吸收和转化密切相关。Shh通路异常导致出生缺陷，组织重构，干细胞再生和肿瘤生长。小鼠Shh基因敲除导致独眼畸形，Shh基因隐性突变导致严重的前脑无裂畸形^[11]。Shh在胚胎期的细胞分化，组织发育和器官形成中扮演着重要的角色，它的缺失或者失活会导致一系列严重的遗传疾病。当胚胎发育和器官形成结束后Shh又发挥何种作用，是否在胚胎期和出生后Shh信号通路有着相同的作用。研究发现，出生后Shh调控脑内两个主要神经生发区的细胞增殖和分化，参与脑损伤后的神经修复过程，在组织器官的完整和功能的发育保持中起到重要作用^[12]。

2.2 Shh信号通路组成及在神经修复中的作用 Shh通路是分子形成的复杂网络，主要由分泌型糖蛋白Shh配体，跨膜蛋白受体Ptched(Ptc)和另一跨膜蛋白Smoothened(Smo)组成的复合物，以及下游转录因子Gli蛋白组成。Shh对靶细胞的作用是通过膜上Ptc和 Smo两个转录元件所介导的。当不存在Shh时，Ptc抑制Smo的活性，从而抑制目标基因的表达；当Shh与Ptc结合时，Ptc对Smo的抑制作用解除，Smo的功能被释放出来，将信号传递并激活下游的Gli，后者进入细胞核内，启动多种目的基因的表达^[13-14]。Gli作为核转录作用因子，在该通路中起着承上启下的作用。

至今发现的Gli锌指蛋白家族有3个成员，即Gli1， Gli2和Gli3，各成员的功能不尽相同。Gli2，Gli3同时具有转录激活和抑制作用。Gli1由于缺乏N端的转录抑制区域，只能发挥核转录激活功能，是一种典型的正性调控作用因子，其激活直接导致Shh信号通路下游目的基因转录水平的改变。Gli1既是Shh信号的靶基因，又是Shh信号通路被激活的标志。Gli1蛋白作为Shh信号通路末端的转录激活因子，是Shh信号的最终响应者和功能执行者，通过对下游靶基因的激活或抑制决定着细胞的命运并且调控其生长。

Shh参与神经前体细胞的增殖、分化及损伤组织的修复。研究者观察到成年鼠海马和从海马区分离出的神经前体细胞均高表达Shh的受体Ptc。用腺病毒载体输注Shh cDNA到海马，细胞增殖3倍；Shh抑制剂Cyclopamine抑制Shh后，海马神经前体细胞的增殖显著减少^[15]；体外培养神经前体细胞、神经元和星形胶质细胞中，证实细胞缺氧后Shh 表达增加、神经前体细胞数目增加，而在外源性加入Shh 激活Shh信号通路后，神经前体细胞的迁移和增殖更加明显^[16]。

最近研究表明，在胚胎期中枢神经系统内的参与神经发生的一系列塑型因子，在成体神经损伤后重新激活，参与神经组织的修复重建。Shh信号通路，特别是Gli1在完成胚胎的体节发育和细胞定位后，处于失活状态，损伤后导致其重新激活。脑损伤后可以激发一系列有自限性的自我修复和更新的过程，Shh参与了这个过程的调控。有报道多发性硬化的实验性动物模型和患者中Shh表达水平发生改变；Sims等^[16]在研究脑缺血模型中发现缺血可刺激Shh信号通路的开放，缺血后Shh， Gli mRNA表达增高，提示Shh信号通路在脑损伤后发生了激活。

研究发现在损伤的心肌、肝脏和骨骼肌等的组织中Shh信号通路分子的表达增高，并且在这些损伤的组织中发现细胞增殖，而应用Shh信号通路抑制剂后细胞的增殖受到抑制，说明Shh信号通路在损伤性疾病中起到了促细胞增殖的作用^[17-18]。在成年大鼠面神经横断模型中，面神经运动神经元内观察到损伤后Shh和Smo的转录水平的上调，将过表达Shh的腺病毒导入后，对离断造成的神经损伤具有修复作用，在同样的模型中加入了Cyclopamine 后能促进运动神经元凋亡^[19]。

动物的体内实验中，针对脑卒中模型和脑冰冻损伤模型的研究^[16]，均发现Shh及其下游的Gli表达增加，而在应用Shh信号通路的特异性抑制剂Cyclopamine后，Shh、Gli以及细胞的增殖均受到抑制；体内实验脊髓损伤大鼠局部给予Shh或Shh信号通路的激活将会加速神经前体细胞的增生、分化和成熟，并促进脊髓功能的恢复^[20]；脑缺血模型大鼠，缺血后24 h鞘内给予Shh蛋白能促进神经前体细胞的增殖，减少梗死灶体积并促进神经功能恢复^[21]。Shh在大脑皮质的急性损伤和脑缺血过程中有一过性高表达，且与神经细胞的损伤修复紧密关系。有研究者发现在PD模型动物中，其黑质区也有Shh信号通路的激活，可能与多巴胺能神经元的损伤修复有关^[22]，见图1。可见，Shh 在脑损伤后表达增加，能促进神经前体细胞增殖、分化和迁移，在脑和脊髓损伤后的再生和修复中起到重要作用。

2.3 Shh信号通路在血管再生中的作用 Shh信号通路与很多胚胎组织中血管形成有关。Pepicelli等^[23]研究发现Shh缺陷的小鼠肺组织血管结构存在障碍，而Shh过表达会导致血管形成过度出现；Rowitch等^[24]发现在转基因小鼠中，背侧神经管Shh过表达可出现神经外胚层的高度血管化。Shh信号通路不仅与胚胎时期血管形成有关，还有病理性的血管新生有关。Shh信号通路可以促进损伤组织微血管内皮增殖，诱导血管再生重建，从而恢复损伤区域的血流供应。Kusano等^[25]研究表明在糖尿病大鼠的周围神经病变中加入外源性的Shh蛋白可诱导神经血管再生。另外Pola等^[26]在研究大鼠后肢的缺血新生血管模型中发现Shh信号可以上调血管内皮生长因子、血管生成素等血管再生因子的表达，诱导血管新生。Shh能促进血管内皮细胞增殖，加速血管平滑肌细胞的分化发育，促进脑梗死后缺血脑组织区域血管新生和血管的成熟。Shh通路抑制剂Cyclopamine可以抑制急性脑梗死大鼠缺血半暗带区的血管再生^[27]。可见，在缺血模型中，如脑缺血，心肌缺血和肢体缺血模型，Shh信号通路有明显的促进血管形成的能力。因此，针对Shh基因治疗缺血性疾病将成为新的热点。然而，Shh信号通路对血管再生的具体机制仍未阐明，这些新生的血管是否发育成熟，能否适应脑内血流环境，能否像正常血管一样等问题均不明确，仍需进一步研究探讨。

2.4 Shh信号通路调控轴突及神经细胞迁移导向胚胎期Shh是促进腹侧神经管pMN区少突胶质谱系发育的主要信号分子。转录因子Olig1/2对于少突胶质细胞的发育非常重要，Shh通过浓度依赖的方式诱导Olig1/2的表达，从而调节少突胶质细胞的发育。体外研究证实，给予Shh导致Olig2阳性表达的前体细胞增加，然而给予Shh抑制剂Cyclopamine不能减少Olig2阳性细胞表达数目，提示除Shh信号通路外，还有其他的信号分子参与少突胶质细胞发生^[28]。在这之后，Shh是轴突的导向因子，准确引导轴突生长并到达其特异的终止区和相关突触^[29]。除了Shh，其他与轴突导向有关的因子如Wnt，转化生长因子和成纤维细胞生长因子也相继发现，这些导向分子如何引领轴突到正确的方向仍是值得探讨的问题。

Shh是促神经发生因子，调整脑内神经前体细胞的增殖。成年哺乳动物脑内终身存在两个能产生大量神经元的生发区，侧脑室的脑室下带和海马的颗粒下带，分别参与海马和嗅球神经的神经再生。侧脑室的脑室下带区和海马的颗粒下带区细胞表达Shh及其下游转录因子Gli1受体。敲除Shh及其信号通路成分Smo导致侧脑室的脑室下带和海马的颗粒下带的神经前体细胞减少^[30]。Shh不仅仅是促神经发生因子，也是神经前体细胞的化学诱导剂，调整他们的长距离迁移^[31]。侧脑室的脑室下带区的神经前体细胞在Shh作用下经嘴侧迁移流长距离迁移至嗅球，经由增殖、分化等过程后成为新的嗅觉中间神经元，不断补充凋亡或损伤的细胞，整合进嗅觉通路而发挥作用。

研究发现，Shh基因敲除导致神经前体细胞数量减少，细胞死亡增多，向嗅球迁移的细胞明显减少。Shh作为丝裂原与表皮生长因子共同作用调整侧脑室的脑室下带区前体细胞的增殖和更新以及这些细胞的迁移，外源性给予Shh可增加侧脑室的脑室下带区的神经发生，但具体的机制尚未阐明^[32]。Shh参与细胞增殖分化和迁移的功能调节，能修复损伤的组织，用于损伤性疾病的治疗。然而，如果导致过度增殖，就有可能演变成难以制约的肿瘤。了解调节Shh信号通路的分子机制，通过改变Shh信号来精确调控神经前体细胞向功能细胞分化的过程和比例，使其更好的发挥再生功效，防止其成为肿瘤的根源。

2.5 Shh信号通路与肿瘤 Shh影响细胞的存活，细胞周期进程，细胞生长和细胞分裂模式。Shh信号通路的失活导致胚胎发育障碍，而过表达可导致细胞异常增生，参与肿瘤的发生与发展。多种肿瘤中均发现Shh信号通路的异常激活，使用抑制剂阻断Shh信号通路可抑制肿瘤的生长^[33]。研究表明，胃癌的原代细胞系GAM-016和MKN-45中Shh信号通路分子(Shh， Ptc， Smo， Gli)激活，Shh抑制剂Cyclopamine通过调节周期因子Cycline的表达阻断细胞周期，诱导细胞凋亡，从而抑制胃癌细胞生长。在体胃癌小鼠模型中，Cyclopamine可以阻止肿瘤的生长和发育^[34]。乳腺癌患者肿瘤切除后，Shh，Ptc，Gli1 mRNA的高表达与肿瘤复发密切相关，Shh可否作为肿瘤术后复发的新的标志物仍需进一步证实^[35]。

另外，Shh信号通路在脑肿瘤特别是脑胶质瘤的发生中起重要作用。胶质瘤是脑内最常见的肿瘤，神经干细胞中Gli阳性细胞被认为是胶质瘤肿瘤干细胞的起源。一些胶质瘤和相应模型系统的维持和存活需要Shh信号通路的参与。Shh信号通路中Gli蛋白在神经胶质瘤的发生中起了重要作用。Gli蛋白的表达水平与胶质细胞瘤的分级有关。有报道在神经胶质瘤患者体内发现Shh/Gli通路的持续激活，表明Shh信号通路对胶质瘤发生和发展必不可少。研究者通过PCR检测人脑胶质细胞瘤组织中Shh mRNA高于肿瘤周围的组织^[36]，这表明Shh信号通路与胶质细胞瘤的产生有关系。Smo的特异性阻断剂Cyclopamine可以抑制胶质瘤细胞的生长和肿瘤集落的形成。内源性的Shh分泌可以促进少突胶质瘤和星形胶质瘤的形成。

姜黄素通过抑制Shh/Gli1信号通路诱导细胞凋亡来抑制神经胶质瘤的生长。离体实验证实姜黄素对于胶质瘤细胞系具有细胞毒性作用，以剂量依赖和时间依赖方式下调Shh信号通路各因子(Shh， Smo， Gli1)mRNA和蛋白的表达，同时阻断Gli1向细胞核内转移，抑制目的基因表达。一些Gli1依赖的靶基因(CyclinD1， Bcl-2， Foxm1)表达也下调。裸鼠皮下接种脑胶质瘤细胞U87的移植瘤模型，腹腔内注射姜黄素能减少Gli1表达，缩小肿瘤体积，与对照组相比，能延长生存时间^[37]。Shh信号通路分子还与其他信号通路之间存在联系，在肿瘤形成的初始阶段发挥较大作用。肿瘤微环境被认为是肿瘤治疗的重要方面。在胃部肿瘤的微环境中，干扰素γ和Shh的表达增多。干扰素γ通过激活Shh信号通路促进肿瘤细胞增殖，通过调控肿瘤微环境抑制肿瘤生长仍是肿瘤治疗方向^[38]。了解Shh信号途径与肿瘤的关系，有助于更好地调控Shh信号，为肿瘤诊断提供新的标记物，为肿瘤的治疗寻求新的靶点。

参考文献

[1] Nüsslein-Volhard C, Wieschaus E. Mutations affecting segment number and polarity in Drosophila. Nature. 1980; 287(5785):795-801.

[2] Choudhry Z, Rikani AA, Choudhry AM, et al. Sonic hedgehog signalling pathway: a complex network. Ann Neurosci. 2014; 21(1):28-31.

[3] Jessell TM. Neuronal specification in the spinal cord: inductive signals and transcriptional codes. Nat Rev Genet. 2000; 1(1):20-29.

[4] Briscoe J, Ericson J. The specification of neuronal identity by graded Sonic Hedgehog signalling. Semin Cell Dev Biol. 1999; 10(3):353-362.

[5] Briscoe J, Pierani A, Jessell TM, et al. A homeodomain protein code specifies progenitor cell identity and neuronal fate in the ventral neural tube. Cell. 2000; 101(4):435-445.

[6] Podolska K, Lipiec A, Hajdukiewicz K, et al. Sonic hedgehog stimulates the recruitment of endothelial progenitor cells. Med Wieku Rozwoj. 2013; 17(2):151-156.

[7] Han YG, Spassky N, Romaguera-Ros M, et al. Hedgehog signaling and primary cilia are required for the formation of adult neural stem cells. Nat Neurosci. 2008; 11(3):277-284.

[8] Komada M. Sonic hedgehog signaling coordinates the proliferation and differentiation of neural stem/progenitor cells by regulating cell cycle kinetics during development of the neocortex. Congenit Anom (Kyoto). 2012; 52(2):72-77.

[9] Komada M, Saitsu H, Kinboshi M, et al. Hedgehog signaling is involved in development of the neocortex. Development. 2008; 135(16):2717-2727.

[10] Martí E, Bovolenta P. Sonic hedgehog in CNS development: one signal, multiple outputs. Trends Neurosci. 2002; 25(2): 89-96.

[11] Chiang C, Litingtung Y, Lee E, et al. Cyclopia and defective axial patterning in mice lacking Sonic hedgehog gene function. Nature. 1996; 383(6599):407-413.

[12] Hor CH, Tang BL. Sonic hedgehog as a chemoattractant for adult NPCs. Cell Adh Migr. 2010; 4(1):1-3.

[13] Feijóo CG, Oñate MG, Milla LA, et al. Sonic hedgehog (Shh)-Gli signaling controls neural progenitor cell division in the developing tectum in zebrafish. Eur J Neurosci. 2011; 33(4): 589-598.

[14] Traiffort E, Angot E, Ruat M. Sonic Hedgehog signaling in the mammalian brain. J Neurochem. 2010; 113(3): 576-590.

[15] Lai K, Kaspar BK, Gage FH, et al. Sonic hedgehog regulates adult neural progenitor proliferation in vitro and in vivo. Nat Neurosci. 2003; 6(1):21-27.

[16] Sims JR, Lee SW, Topalkara K, et al. Sonic hedgehog regulates ischemia/hypoxia-induced neural progenitor proliferation. Stroke. 2009; 40(11): 3618-3626.

[17] Bijlsma MF, Leenders PJ, Janssen BJ, et al. Endogenous hedgehog expression contributes to myocardial ischemia-reperfusion-induced injury. Exp Biol Med (Maywood). 2008; 233(8): 989-996.

[18] Falcón-Urrutia P, Carrasco CM, Lois P, et al. Shh Signaling through the Primary Cilium Modulates Rat Oligodendrocyte Differentiation. PLoS One. 2015; 10(7):e0133567.

[19] Akazawa C, Tsuzuki H, Nakamura Y, et al. The upregulated expression of sonic hedgehog in motor neurons after rat facial nerve axotomy. J Neurosci. 2004; 24(36):7923-7930.

[20] Bambakidis NC, Wang X, Lukas RJ, et al. Intravenous hedgehog agonist induces proliferation of neural and oligodendrocyte precursors in rodent spinal cord injury. Neurosurgery. 2010; 67(6):1709-1715.

[21] Bambakidis NC, Petrullis M, Kui X, et al. Improvement of neurological recovery and stimulation of neural progenitor cell proliferation by intrathecal administration of Sonic hedgehog. J Neurosurg. 2012; 116(5):1114-1120.

[22] 何穗芬,董为人,郝彦利,等.Sonic Hedgehog蛋白在帕金森病模型大鼠黑质中的表达[J].解剖学研究,2008; 30(5):321-328.

[23] Pepicelli CV, Lewis PM, McMahon AP. Sonic hedgehog regulates branching morphogenesis in the mammalian lung. Curr Biol. 1998; 8(19):1083-1086.

[24] Rowitch DH, S-Jacques B, Lee SM, et al. Sonic hedgehog regulates proliferation and inhibits differentiation of CNS precursor cells. J Neurosci. 1999; 19(20):8954-8965.

[25] Kusano KF, Allendoerfer KL, Munger W, et al. Sonic hedgehog induces arteriogenesis in diabetic vasa nervorum and restores function in diabetic neuropathy. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2004; 24(11):2102-2107.

[26] Pola R, Ling LE, Aprahamian TR, et al. Postnatal recapitulation of embryonic hedgehog pathway in response to skeletal muscle ischemia.Circulation. 2003; 108(4):479-485.

[27] 张沛琳,娄季宇,范波胜,等.环巴明对急性脑梗死大鼠血管再生的影响[J]. 西安交通大学学报:医学版,2013; 34(3):357-360.

[28] Ortega JA, Radonji? NV, Zecevic N. Sonic hedgehog promotes generation and maintenance of human forebrain Olig2 progenitors. Front Cell Neurosci. 2013; 7(254):1-12.

[29] Falcón-Urrutia P, Carrasco CM, Lois P, et al. Shh Signaling through the Primary Cilium Modulates Rat Oligodendrocyte Differentiation. PLoS One. 2015;10(7):e0133567.

[30] Balordi F, Fishell G.Hedgehog signaling in the subventricular zone is required for both the maintenance of stem cells and the migration of newborn neurons. J Neurosci. 2007; 27(22): 5936-5947.

[31] Angot E, Loulier K, Nguyen-Ba-Charvet KT, et al. Chemoattractive activity of sonic hedgehog in the adult subventricular zone modulates the number of neural precursors reaching the olfactory bulb. Stem Cells. 2008; 26(9):2311-2320.

[32] Machold R, Hayashi S, Rutlin M, et al. Sonic hedgehog is required for progenitor cell maintenance in telencephalic stem cell niches. Neuron. 2003; 39(6):937-950.

[33] Gomes DC, Jamra SA, Leal LF, et al. Sonic Hedgehog pathway is upregulated in adamantinomatous craniopharyngiomas. Eur J Endocrinol. 2015;172(5):603-608.

[34] Wan J, Zhou J, Zhao H, et al. Sonic hedgehog pathway contributes to gastric cancer cell growth and proliferation. Biores Open Access. 2014; 3(2):53-59.

[35] Jeng KS, Sheen IS, Jeng WJ, et al. High expression of Sonic Hedgehog signaling pathway genes indicates a risk of recurrence of breast carcinoma. Onco Targets Ther. 2013; 7:79-86.

[36] Ehtesham M, Sarangi A, Valadez JG, Chanthaphaychith S, et al. Ligand-dependent activation of the hedgehog pathway in glioma progenitor cells. Oncogene. 2007; 26(39):5752-5761.

[37] Du WZ, Feng Y, Wang XF, et al. Curcumin suppresses malignant glioma cells growth and induces apoptosis by inhibition of SHH/GLI1 signaling pathway in vitro and vivo. CNS Neurosci Ther. 2013;19(12):926-936.

[38] Donnelly JM, Chawla A, Houghton J, et al. Sonic hedgehog mediates the proliferation and recruitment of transformed mesenchymal stem cells to the stomach. PLoS One. 2013; 8(9):e75225.