2.1 实验动物数量分析 实验选用大白兔32只,实验过程无脱失,全部进入结果分析。
2.2 两组兔组织愈合情况 32只实验动物均未出现术后感染,处理标本时见膝关节重建的交叉韧带连续性完整,其中4只实验侧膝关节内见轻微的滑膜炎症和关节腔少量积液,未见纤维组织过度形成及关节僵直。
2.3 各时间点两组兔组织学观察结果
交叉韧带重建后2周:苏木精-伊红染色示对照组移植肌腱与骨隧道的界面由肉芽组织填充,连接组织松散,新生肉芽组织主要由成纤维细胞和炎性细胞组成,腱骨组织间可见空隙,骨隧道侧髓腔开放,有成骨活动,并可见少量类软骨样细胞,见图1a;实验组移植肌腱与骨隧道界面组织连接亦不紧密,其间填充组织成分主要由成纤维细胞和炎性细胞组成,骨隧道侧成骨活动较活跃,并可见较多类软骨样细胞增生,见图1b。
图1 交叉韧带重建后2周两组兔组织学观察(苏木精-伊红染色,×100)
Figure 1 Histological observation of rabbits at 2 wk after reconstruction of anterior cruciate ligament (Hematoxylin-eosin staining, ×100)
交叉韧带重建后4周:苏木精-伊红染色示对照组肌腱移植物与骨隧道之间组织结合较紧密,界面填充组织成纤维细胞和炎性细胞仍增多,靠近骨隧道的一侧可见细胞核呈类圆形的成软骨细胞,见图2a;实验组肌腱移植物与骨隧道之间组织连接紧密,主要为较多的成纤维细胞和少量的炎性细胞,靠近骨隧道的一侧有较多的成软骨细胞,部分区域从肌腱到骨之间形成Sharpey纤维连接,见图2b。
图2 交叉韧带重建后4周两组兔组织学观察(苏木精-伊红染色,×100)
Figure 2 Histological observation of rabbits at 4 wk after reconstruction of anterior cruciate ligament (Hematoxylin-eosin staining, ×100)
交叉韧带重建后8周:对照组肌腱与骨隧道之间的连接变得紧密,界面内成纤维细胞、胶原纤维合成增多,纤维排列较规则,见图3a;实验组肌腱与骨隧道之间的连接紧密,界面内胶原纤维大量合成,成纤维细胞、炎性细胞数量较对照组减少,胶原纤维排列亦比对照组规则,见图3b。
图3 交叉韧带重建后8周两组兔组织学观察(苏木精-伊红染色,×100)
Figure 3 Histological observation of rabbits at 8 wk after reconstruction of anterior cruciate ligament (Hematoxylin-eosin staining, ×100)
交叉韧带重建后12周:对照组腱骨结合部组织界面变模糊,可见胶原纤维-纤维软骨-钙化的软骨组织-骨组织的移行带改变,见图4a;实验组显示新生骨与肌腱界限不清,可见明显的胶原纤维-纤维软骨-钙化的软骨组织-骨组织的移行带改变,潮线清晰,软骨细胞数量较多,见图4b。
图4 交叉韧带重建后12周两组兔组织学观察(苏木精-伊红染色,×100)
Figure 4 Histological observation of rabbits at 12 wk after reconstruction of anterior cruciate ligament (Hematoxylin-eosin staining, ×100)
2.4 两组兔生物力学检测结果 为了更有效观察胫骨侧腱-骨界面的效果,实验中股骨侧采用骨块镶嵌式固定,旨在使股骨侧达到更大的固定强度,在拉伸试验中,主要观测胫骨侧腱-骨界面的抗拉伸强度。在交叉韧带重建后2,4,8周,重建韧带断裂均发生在胫骨骨道内,即韧带由骨道内拔出。交叉韧带重建后12周,对照侧有1例自肌腱部分断裂,5例从胫骨骨道拔出;实验侧有3例自肌腱部分断裂,3例从胫骨骨道拔出。所有受试对象中,均未见有完全从股骨骨道拔出者。随着时间的推移,实验侧和对照侧的抗拉断强度均有增加;交叉韧带重建后2周,两组数值差异无显著性意义;在交叉韧带重建后4,8,12周抗拉断强度的测试结果中,实验侧抗拉断强度与对照侧相比,差异有显著性意义(
P < 0.05),即实验侧抗拉断强度大于对照侧,见表1。