氯倍他索干预鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞向少突胶质样细胞分化及机制

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.1542

中国组织工程研究 ›› 2019, Vol. 23 ›› Issue (5): 779-783.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.1542

• 干细胞培养与分化 stem cell culture and differentiation • 上一篇下一篇

氯倍他索干预鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞向少突胶质样细胞分化及机制

王秋平¹，徐众华¹，卞璐¹，赵俊¹，陈昌胜¹，王震¹，史文涛¹，张志坚²

¹南京市高淳人民医院骨科，江苏省南京市 211302；²江苏大学医学院，江苏省镇江市 212001

修回日期:2018-09-07 出版日期:2019-02-18 发布日期:2019-02-18
通讯作者: 张志坚，教授，江苏大学医学院，江苏省镇江市 212001
作者简介:王秋平，男，1984年生，江苏省南京市人，汉族，2007年江苏大学医学院毕业，主治医师，主要从事脊髓损伤和间充质干细胞研究。
基金资助:
国家自然科学基金地区科学基金项目(81571830)；镇江市科技局社会发展项目(SH2008044)

Effect of clobetasol propionate on the differentiation of nasal mucosa-derived ectomesenchymal stem cells into oligodendrocyte-like cells and its mechanism

Wang Qiuping¹, Xu Zhonghua¹, Bian Lu¹, Zhao Jun¹, Chen Changsheng¹, Wang Zhen¹, Shi Wentao¹, Zhang Zhijian²

¹Nanjing Gaochun People’s Hospital, Nanjing 211302, Jiangsu Province, China; ²School of Medicine, Jiangsu University, Zhenjiang 212001, Jiangsu Province, China

Revised:2018-09-07 Online:2019-02-18 Published:2019-02-18
Contact: Zhang Zhijian, Professor, School of Medicine, Jiangsu University, Zhenjiang 212001, Jiangsu Province, China
About author:Wang Qiuping, Attending physician, Nanjing Gaochun People’s Hospital, Nanjing 211302, Jiangsu Province, China
Supported by:
the National Natural Science Foundation of China (Regional Fund), No. 81571830; the Social Development Project of Zhenjiang Municipal Science and Technology Department, No. SH2008044

摘要/Abstract

摘要：

文章快速阅读：

文题释义：
少突胶质细胞：主要分布于中枢神经系统，少突胶质细胞比星形胶质细胞小，其细胞学形态特点为胞突短而少，细胞核呈圆形，小而致密。在灰质中，少突胶质细胞主要位于核周体附近；在白质中，它们并排存在于有髓神经纤维之间，并构成髓鞘。
音猬因子(sonic hedgehog，SHH)：是哺乳动物音猬因子信号通路家族中3种蛋白质之一，音猬因子是hedgehog信号通路的最佳研究配体。它在调节脊椎动物器官发生成体干细胞分裂中起着关键作用。

摘要
背景：氯倍他索是临床工作中常用的糖皮质激素类药物，鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞在体外具有向少突胶质样细胞分化的潜能，氯倍他索能否促进其向少突胶质样细胞分化及其潜在的机制尚不得知。
目的：观察氯倍他索对鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞向少突胶质样细胞分化的影响，探讨其可能的机制。
方法：贴壁筛选法分离培养获取SD大鼠鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞，免疫荧光法鉴定其特性和纯度。MTT法检测0-10 μmol/L氯倍他索对鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞增殖能力的影响。取生长良好的第3代鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞，用含氯倍他索的无血清诱导分化培养液使其向少突胶质样细胞分化，氯倍他索浓度为0，2.5和5 μmol/L。倒置显微镜观察细胞形态的变化，免疫荧光和免疫印迹方法检测少突胶质细胞相关蛋白MBP和OLIG2的表达，免疫印迹法检测SHH信号通路相关蛋白SHH表达水平。
结果与结论：①体外培养的鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞高表达vimentin和nestin；②低浓度的氯倍他索可促进细胞增殖；高浓度的氯倍他索则抑制细胞增殖，其中5 μmol/L可能为最适增殖浓度；③鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞成少突胶质样细胞诱导3 d后，氯倍他索组出现多极化形态，少突胶质细胞相关蛋白MBP、OLIG2以及SHH信号通路相关蛋白SHH的表达明显高于对照组；④结果表明，氯倍他索可能通过SHH信号通路促进鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞向少突胶质样细胞分化。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程
ORCID: 0000-0001-8812-2886(王秋平)

关键词: 鼻黏膜, 间充质干细胞, 氯倍他索, 少突胶质样细胞, 细胞分化, 鼻黏膜来源细胞, 国家自然科学基金

Abstract:

BACKGROUND: Clobetasol propionate is a commonly used glucocorticoid in clinics. Nasal mucosa-derived ectomesenchymal stem cells (EMSCs) have the potential to differentiate into oligodendrocyte-like cells in vitro. However, the underlying mechanisms by which clobetasol propionate promote the differentiation into oligodendrocyte-like cells are unknown as yet.
OBJECTIVE: To observe the effect of clobetasol propionate on the differentiation of nasal mucosa-derived EMSCs into oligodendrocyte-like cells and to explore its possible mechanisms.
METHODS: Nasal mucosa-derivedEMSCs were isolated and cultured by adherent screening method, and cell properties and purity were identified using immunofluorescence staining. Cell proliferation of EMSCs was detected by MTT after intervention with 0-10 μmol/L clobetasol propionate. Passage 3 nasal mucosa-derived EMSCs grew well and were induced to differentiate into oligodendrocyte-like cells in the serum-free medium containing clobetasol propionate (0, 2.5 and 5 μmol/L). Cell morphology was then observed by inverted microscope. Expression of oligodendrocyte-associated proteins, myelin basic protein and oligodendrocyte transcription factor 2, was measured by immunofluorescence and western blot assay. Expression of SHH related to the SHH signaling pathway was detected by western blot assay.
RESULTS AND CONCLUSION: EMSCs cultured in vitro highly expressed vimentin and nestin. Clobetasol propionate at a low concentration promoted the proliferation of EMSCs; and on the contrary, clobetasol propionate at a high concentration inhibited the cell proliferation. Therein, 5 μmol/L was the best concentration of clobetasol propionate for cell proliferation. After 3 days of induction, a multi-polarization pattern appeared in the clobetasol propionate group, and the expressions of MBP, OLIG2 and SHH were significantly higher than those in the control group. To conclude, clobetasol propionate may promote the differentiation of EMSCs into oligodendrocyte-like cells via the SHH signaling pathway.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

Key words: Clobetasol, Nasal Mucosa, Mesenchymal Stem Cells, Oligodendroglia, Cell Differentiation, Tissue Engineering

中图分类号:

王秋平，徐众华，卞璐，赵俊，陈昌胜，王震，史文涛，张志坚. 氯倍他索干预鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞向少突胶质样细胞分化及机制[J]. 中国组织工程研究, 2019, 23(5): 779-783.

Wang Qiuping, Xu Zhonghua, Bian Lu, Zhao Jun, Chen Changsheng, Wang Zhen, Shi Wentao, Zhang Zhijian. Effect of clobetasol propionate on the differentiation of nasal mucosa-derived ectomesenchymal stem cells into oligodendrocyte-like cells and its mechanism[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2019, 23(5): 779-783.

图/表（结果） 1

参考文献

[1] 崔学文,史文涛,戴瑶,等.TG2基因修饰的鼻粘膜间充质干细胞向神经样细胞分化的研究[J].神经解剖学杂志, 2018,34(3): 297-304.

[2] 刘洋,王文己.硬膜切开减压术实施时间对急性脊髓损伤的影响[J].西安交通大学学报:医学版,2018,39(2):237-240,244.

[3] Marques S, Zeisel A, Codeluppi S, et al. Oligodendrocyte heterogeneity in the mouse juvenile and adult central nervous system.Science. 2016;352(6291):1326-1329.

[4] Hamilton NB, Clarke LE, Arancibia-Carcamo IL, et al. Endogenous GABA controls oligodendrocyte lineage cell number, myelination, and CNS internode length.Glia. 2017; 65(2):309-321.

[5] Zhou Q, Anderson DJ.The bHLH transcription factors OLIG2 and OLIG1 couple neuronal and glial subtype specification. Cell. 2002;109(1):61-73.

[6] Huang TN, Yen MI, Nelson DW, et al. Monoacylglycerol Acyltransferase (MGAT) 1 and 2 Play Divergent Roles in Adipogenesis/Lipogenesis in Mice. FASEB J. 2017;31 (1_supplement):781. 6.

[7] Zhang Z, He Q, Deng W, et al. Nasal ectomesenchymal stem cells: multi-lineage differentiation and transformation effects on fibrin gels.Biomaterials. 2015;49:57-67.

[8] 张新萍,彭立新,高影,等.复方丙酸氯倍他索软膏治疗神经性皮炎和慢性湿疹疗效观察[J].临床皮肤科杂志,2015,44(5):320-322.

[9] Najm FJ, Madhavan M, Zaremba A, et al. Drug-based modulation of endogenous stem cells promotes functional remyelination in vivo.Nature. 2015;522(7555):216-220.

[10] 毕志刚,倪容之,秦万章,等.复方丙酸氯倍他索软膏治疗寻常性银屑病临床疗效观察[J].临床皮肤科杂志,2004,43(5):310-312.

[11] Wang J, Lu J, Bond MC, et al. Identification of select glucocorticoids as Smoothened agonists: potential utility for regenerative medicine.Proc Natl Acad Sci U S A. 2010;107 (20):9323-9328.

[12] 王振超,黄壮雄,许建鹏,等.复方丙酸氯倍他索乳膏对小型猪皮肤长程涂布的毒性观察[J].广东医学院学报,2004,22(6):563-565.

[13] 黄秋生,陆汉强,周月鹏,等.成人鼻黏膜间充质干细胞的体外培养和多向诱导分化[J].临床耳鼻咽喉头颈外科杂志, 2012,26(11): 490-493,498.

[14] Kim YC, Zhang AH, Yoon J, et al. Engineered MBP-specific human Tregs ameliorate MOG-induced EAE through IL-2-triggered inhibition of effector T cells.J Autoimmun. 2018; 92:77-86.

[15] Takebayashi H, Yoshida S, Sugimori M, et al. Dynamic expression of basic helix-loop-helix Olig family members: implication of Olig2 in neuron and oligodendrocyte differentiation and identification of a new member, Olig3.Mech Dev. 2000;99(1-2):143-148.

[16] Rowitch DH, Lu QR, Kessaris N, et al. An 'oligarchy' rules neural development.Trends Neurosci. 2002;25(8):417-422.

[17] Farreny MA, Agius E, Bel-Vialar S, et al. FGF signaling controls Shh-dependent oligodendroglial fate specification in the ventral spinal cord.Neural Dev. 2018;13(1):3.

[18] Chen Q, Zhang Z, Liu J, et al. A fibrin matrix promotes the differentiation of EMSCs isolated from nasal respiratory mucosa to myelinating phenotypical Schwann-like cells.Mol Cells. 2015;38(3):221-228.

[19] Yao X, Su T, Verkman AS.Clobetasol promotes remyelination in a mouse model of neuromyelitis optica.Acta Neuropathol Commun. 2016;4(1):42.

[20] Porcu G, Serone E, De Nardis V, et al. Clobetasol and Halcinonide Act as Smoothened Agonists to Promote Myelin Gene Expression and RxRγ Receptor Activation.PLoS One. 2015;10(12):e0144550.

引言

脊髓损伤是脊椎骨骨折最严重的并发症，常导致脊椎损伤部位以下的肢体瘫痪，高位脊髓损伤甚至会导致患者四肢全瘫^[1]。脊髓损伤及其并发症不仅给患者带来极大的身心痛苦，同时也给社会带来巨大的经济负担。现阶段治疗脊髓损伤的医疗措施较为局限，一般治疗方法包括急性损伤期使用大剂量的糖皮质激素冲击疗法和急诊手术摘除脊椎骨碎片以解除其对脊髓的压迫^[2]。

少突胶质细胞在脊髓损伤修复过程中起着支撑神经轴突和神经再生的作用^[3]，同时也是形成髓鞘的主要细胞，研究表明移植外源性少突胶质细胞可促进脊髓损伤的修复^[4]；然而，目前想要获取大量的少突胶质细胞仍然较为困难^[5]。鼻黏膜来源的外胚层间充质干细胞(ectomesenchymal stem cells，EMSCs)是分布于头面部黏膜内的特殊类型的干细胞，主要来源于神经嵴，具有自我增殖和多向分化潜能^[6]，在体外诱导环境中可定向分化为神经样细胞和胶质样细胞；课题组以往研究报道该细胞还可向其他胚层细胞定向诱导分化^[7]；因此，诱导外胚层间充质干细胞向少突胶质样细胞分化可能成为治疗脊髓损伤的潜在新方法。

氯倍他索是强效的局部皮质类固醇激素，被临床上广泛应用于治疗湿疹和硬化性苔癣^[8]。课题组以往的研究表明，外胚层间充质干细胞可在体外向神经谱系细胞分化^[6]。Najm等^[9]在体外以及体内证明，氯倍他索可促进少突胶质细胞前体细胞向成熟的少突胶质细胞分化。然而，氯倍他索是否可以促进外胚层间充质干细胞向少突胶质样细胞分化，一直是一项空白。在该研究中，首先在体外培养外胚层间充质干细胞；然后用不同浓度的氯倍他索作用于外胚层间充质干细胞，并通过免疫荧光和免疫印迹方法观察外胚层间充质干细胞是否向少突胶质样细胞分化；最后发现氯倍他索可通过上调内源性的音猬因子促进外胚层间充质干细胞向少突胶质细胞分化。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

材料方法

1.1 设计 细胞学体外实验。

1.2 时间及地点 实验于2017年8月至2018年2月在江苏大学医学院基础研究所2408实验室完成。

1.3 材料

1.3.1 实验动物 SPF级SD大鼠5只，体质量50 g左右，雌雄不限，由江苏大学动物实验中心提供，机构许可证号：2013-0036。

1.3.2 实验试剂和仪器 氯倍他索(美国Selleck公司)；DMEM/F12和胎牛血清(Gibco公司)；实验所使用的一抗：羊抗兔vimentin、nestin、MBP和β-actin(武汉博士德公司)；兔抗山羊SHH和OLIG2(B&D公司)；免疫荧光二抗和免疫印迹二抗(武汉博士德公司)；文中所使用的生化试剂及实验所需仪器均为江苏大学基础研究所2408实验室提供。

1.4 实验方法

1.4.1 外胚层间充质干细胞的分离、培养及鉴定 将SD大鼠麻醉后颈椎脱臼处死，无菌条件下暴露鼻中隔，取出鼻中隔置预冷处理的PBS中，分离鼻黏膜，弃去鼻中隔软骨，PBS漂洗3次后眼科剪剪碎，洗去红细胞；37 ℃培养箱中胰酶消化15 min，1 000 r/min离心弃上清后将碎组织块接种于密闭培养瓶，内含有体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12培养基，置于细胞培养箱中培养；待大部分组织块贴壁后，PBS轻轻漂洗，弃去上清；以后3 d换液1次，当细胞铺满瓶底80%时进行传代。

将第3代细胞接种于1块48孔培养板，分别用干细胞标志nestin和vimentin抗体进行免疫荧光染色，鉴定外胚层间充质干细胞的特性和纯度。免疫荧光染色步骤：细胞用含40 g/L多聚甲醛的PBS固定6 h，分别于0.1% Triton X-100和3% bovineserum albumin中封闭30 min，加入相应的nestin和vimentin一抗，于4 ℃孵育过夜，PBS漂洗3遍，加入羊抗兔或鼠IgG-Cy3(1∶200) 37 ℃孵育1 h，PBS漂洗3遍，Hochest/33342复染细胞核30 min，PBS漂洗3遍，甘油封固，于Leica荧光显微镜下观察并摄片。

1.4.2 MTT法检测外胚层间充质干细胞增殖活性 将生长良好的第3代外胚层间充质干细胞接种于96孔板，将氯倍他索溶于含体积分数为10%胎牛血清的完全培养基，使其浓度分别为0，1，2，4，5，6，7，8，9，10 μmol/L，培养2 d后，PBS洗去未贴壁的细胞，然后每孔加入0.01 mol/L MTT溶液100 μL，37 ℃孵育4 h；移除培养基后每孔加入二甲基亚砜500 μL，充分震荡10 min，选择波长490 nm测定各孔吸光度值，每组4个复孔，以上实验重复至少3遍。

1.4.3 外胚层间充质干细胞的诱导分化 取生长良好的第3代外胚层间充质干细胞，接种于6孔板，将氯倍他索溶于少突胶质样细胞无血清诱导分化培养液(α-MEM，2 μmol/L Forskolin，20 μg/L脑源性神经营养因子，20 μg/L血小板衍生生长因子，1 μmol/L全反式维甲酸，20 μg/L胰岛素生长因子和2% N₂)，使氯倍他索最终浓度为0，2.5和5 μmol/L，无血清诱导分化培养液诱导3 d后，改为普通培养液持续培养4 d。

1.4.4 免疫荧光染色检测少突胶质细胞相关蛋白的表达 收集诱导后的外胚层间充质干细胞，用含40 g/L多聚甲醛的PBS固定6 h，分别于0.1% Triton X-100和3% bovineserum albumin中封闭30 min；随后孵以相应的OLIG2和MBP一抗于4 ℃过夜；PBS漂洗3遍后用羊抗兔或鼠IgG-Cy3(1∶200) 37 ℃孵育1 h，PBS漂洗3遍，Hochest/33342复染细胞核30 min，PBS漂洗3遍，甘油封固，于Leica荧光显微镜下观察并摄片。

1.4.5 免疫印迹方法检测少突胶质细胞相关蛋白和音猬因子SHH的表达 收集诱导后的外胚层间充质干细胞，PBS漂洗3次，6孔板中加入含有1%蛋白酶抑制剂的裂解液100 μL置于冰上1 h，然后刮取细胞蛋白置于EP管中，10 000 r/min离心10 min，超声破碎，煮沸后置于-80 ℃冰箱保存待用。

取各组蛋白样品于10% SDS-PAGE电泳分离蛋白样品，350 mA恒流转膜90 min，PVDF膜用3%脱脂奶粉封闭30 h，将膜分别孵育相对应的OLIG2、MBP、SHH一抗(1∶500)，4 ℃过夜，TBST漂洗3次，10 min/次；然后，加入抗兔或抗鼠IgG-HRP(1∶5 000)，37 ℃孵育1 h，TBST漂洗3次，10 min/次；超敏型ECL发光液显示阳性条带，在Typhoon系统上扫描结果，Image J软件分析灰度值。

1.5 主要观察指标 ①外胚层间充质干细胞形态及免疫荧光鉴定结果；②不同浓度氯倍他索对外胚层间充质干细胞增殖的影响；③氯倍他索诱导外胚层间充质干细胞向少突胶质样细胞分化过程中的形态学变化；④氯倍他索诱导外胚层间充质干细胞向少突胶质样细胞分化后OLIG2、MBP和SHH表达。

1.6 统计学分析 计量资料用x(_)±s表示，统计学方法采用单因素方差分析(ANOVA)，两组间对比采用t 检验，P < 0.05为差异有显著性意义。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

讨论

外胚层间充质干细胞属于多功能干细胞，可向其他谱系细胞分化。课题组发现大鼠鼻黏膜来源的外胚层间充质干细胞具有取材简便、纯度高等特点^[7]。氯倍他索是临床上常用的皮质类固醇激素，常用于治疗牛皮癣、湿疹等皮肤疾病^[10-11]。Wang等^[11]报道氯倍他索可通过激活SHH信号通路促进神经祖细胞的增殖。此次研究中，MTT实验结果表明相对低浓度的氯倍他索可有效促进外胚层间充质干细胞增殖，其最适浓度可能为5 μmol/L；较高浓度的氯倍他索则会抑制外胚层间充质干细胞增殖，这可能与药物毒性有关^[12]。Najm等^[9]报道氯倍他索可通过糖皮质激素受体促进少突胶质细胞前体细胞向成熟少突胶质细胞分化。人下鼻甲呼吸黏膜部位同样存在该细胞，并且该细胞取材对供体鼻部及嗅觉系统没有破坏性损伤^[13]，作者以往的研究发现外胚层间充质干细胞在特定的诱导环境中可向神经谱系细胞分化；然而，氯倍他索是否可以促进外胚层间充质干细胞向少突胶质样细胞分化，尚不得知。

在该研究中，不同浓度的氯倍他索诱导外胚层间充质干细胞向少突胶质样细胞分化培养3 d后，倒置显微镜观察到氯倍他索组细胞发生典型的少突胶质细胞形态学改变，对照组细胞形态则改变不明显。通过免疫荧光标记少突胶质细胞相关蛋白MBP和OLIG2，其中MBP是成熟少突胶质细胞标志性蛋白^[14-15]，转录因子OLIG2参与少突胶质细胞前体细胞的定向分化，并且在髓鞘形成的过程中起关键性的作用^[16-17]。实验结果表明，氯倍他索组外胚层间充质干细胞表达MBP和OLIG2较对照组高，这说明氯倍他索可在一定程度上促进外胚层间充质干细胞向少突胶质样细胞分化，但是2.5 μmol/L氯倍他索组和5 μmol/L氯倍他索组无明显差异。实验进一步发现，氯倍他索组外胚层间充质干细胞表达SHH高于对照组，且随浓度的升高SHH表达水平同样是增高的；这说明，氯倍他索组可能具有激活SHH信号通路的能力，SHH信号通路的激活可促进间充质干细胞和少突胶质样细胞前体细胞向成熟型少突胶质细胞分化^[18]。Yao等^[19]和Porcu等^[20]发现氯倍他索可作为SHH信号通路中smoothened受体的竞争性激动剂而激活SHH信号通路。

综上所述，该研究报道了一种简单有效促进外胚层间充质干细胞向少突胶质样细胞分化的方法，这可能为细胞移植治疗脊髓损伤提供新的治疗理念。然而，研究尚有不足之处，比如缺乏动物体内实验，诱导而来的少突胶质样细胞是否具有功能性，氯倍他索促进外胚层间充质干细胞表达内源性SHH的具体机制则需进一步探讨；关于应用氯倍他索治疗脊髓损伤的相关研究，课题组将继续深入探讨。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

氯倍他索干预鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞向少突胶质样细胞分化及机制

Effect of clobetasol propionate on the differentiation of nasal mucosa-derived ectomesenchymal stem cells into oligodendrocyte-like cells and its mechanism

PDF

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

图/表（结果） 1

参考文献

相关文章 15

引言

材料方法

讨论

文章快阅

延伸阅读

编辑推荐

Metrics

本文评价

[1]	林清凡, 解一新, 陈婉清, 叶振忠, 陈幼芳. 人胎盘源间充质干细胞条件培养液可上调缺氧状态下BeWo细胞活力和紧密连接因子的表达[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(在线): 4970-4975.
[2]	蒲锐, 陈子扬, 袁凌燕. 不同细胞来源外泌体保护心脏的特点与效应[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(在线): 1-.
[3]	侯婧瑛, 于萌蕾, 郭天柱, 龙会宝, 吴浩. 缺氧预处理激活HIF-1α/MALAT1/VEGFA通路促进骨髓间充质干细胞生存和血管再生[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 985-990.
[4]	史洋洋, 秦英飞, 吴福玲, 何潇, 张雪静. 胎盘间充质干细胞预处理预防小鼠毛细支气管炎[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 991-995.
[5]	梁学奇, 郭黎姣, 陈贺捷, 武杰, 孙雅琪, 邢稚坤, 邹海亮, 陈雪玲, 吴向未. 泡状棘球绦虫原头蚴抑制骨髓间充质干细胞向成纤维细胞的分化[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 996-1001.
[6]	樊全宝, 罗惠娜, 王丙云, 陈胜锋, 崔连旭, 江文康, 赵明明, 王静静, 罗冬章, 陈志胜, 白银山, 刘璨颖, 张晖. 低氧培养犬脂肪间充质干细胞的生物学特性[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1002-1007.
[7]	耿瑶, 尹志良, 李兴平, 肖东琴, 侯伟光. hsa-miRNA-223-3p调控人骨髓间充质干细胞成骨分化的作用[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1008-1013.
[8]	伦志刚, 金晶, 王添艳, 李爱民. 过氧化物还原酶6干预骨髓间充质干细胞增殖及体外向神经谱系诱导分化[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1014-1018.
[9]	朱雪芬, 黄成, 丁健, 戴永平, 刘元兵, 乐礼祥, 王亮亮, 杨建东. 胶质细胞神经营养因子诱导骨髓间充质干细胞向功能性神经元分化的机制[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1019-1025.
[10]	段丽芸, 曹晓沧. 人胎盘间充质干细胞来源细胞外囊泡调节肠炎小鼠肠黏膜胶原的沉积[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1026-1031.
[11]	裴丽丽, 孙贵才, 王弟. 丹酚酸B抑制骨髓间充质干细胞氧化损伤及促进分化为心肌样细胞[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1032-1036.
[12]	邹刚, 徐志, 刘子铭, 李豫皖, 杨继滨, 金瑛, 张骏, 葛振, 刘毅. 人脱细胞羊膜支架促进Scleraxis修饰人羊膜间充质干细胞体外成韧带分化[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1037-1044.
[13]	李偲, 赵婷, 谭戈, 郑雨林, 张若男, 吴艳, 唐俊明. 血小板源生长因子BB可促进骨骼肌成肌细胞增殖、分化与迁移[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1050-1055.
[14]	汪显耀, 关亚琳, 刘忠山. 提高间充质干细胞治疗难愈性创面的策略[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1081-1087.
[15]	万然, 史旭, 刘京松, 王岩松. 间充质干细胞分泌组治疗脊髓损伤的研究进展[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1088-1095.