重组人生长素在毛囊生长与毛囊促生长因子表达中的作用

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.0838

中国组织工程研究 ›› 2018, Vol. 22 ›› Issue (20): 3167-3171.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.0838

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重组人生长素在毛囊生长与毛囊促生长因子表达中的作用

张友来，辛国华，曾元临，江澜，王晓，邹立津

Zhang You-lai, Xin Guo-hua, Zeng Yuan-lin, Jiang Lan, Wang Xiao, Zou Li-jin

收稿日期:2018-01-24 出版日期:2018-07-18 发布日期:2018-07-18
通讯作者: 邹立津，博士，副主任医师，南昌大学第一附属医院烧伤科，江西南昌市 330006
作者简介:张友来，男，1983年生，江西吉安市人，汉族，山东大学在读临床在职博士，主治医师，主要从事创面修复与组织工程皮肤研究。
基金资助:
江西省卫计委科技支撑计划(12010637)

Effect of recombinant human growth hormone on the growth of hair follicle and the expression of related growth factors

南昌大学第一附属医院烧伤科，江西省南昌市 330006

Department of Burn, the First Affiliated Hospital of Nanchang University, Nanchang 330006, Jiangxi Province, China

Received:2018-01-24 Online:2018-07-18 Published:2018-07-18
Contact: Zou Li-jin, M.D., Associate chief physician, Department of Burn, the First Affiliated Hospital of Nanchang University, Nanchang 330006, Jiangxi Province, China
About author:Zhang You-lai, Doctoral candidate, Attending physician, Department of Burn, the First Affiliated Hospital of Nanchang University, Nanchang 330006, Jiangxi Province, China
Supported by:
the Science and Technology Supporting Plan Project of Health and Family Planning Commission of Jiangxi Province, No. 12010637

摘要/Abstract

摘要：

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文题释义：
重组人生长激素：由重组DNA技术生产而得。其化学结构包括氨基酸序列、氨基酸组成经鉴定与脑垂体生长激素完全相同。分子式是一条由191个氨基酸组成的多肽链。在53位与165及182与189之间由二硫键连接。
毛囊的作用：通常在每个毛孔或毛囊内生长一根头发(但也有生长两三根的)。毛囊向下伸入真皮约有1 cm深度，它是由包绕毛发与表皮相连的上皮鞘，以及皮脂腺和立毛肌所组成的一个结构比较复杂的器官附件组织。毛囊实际上是由结缔组织和上皮两部分所组成，除了具有结缔组织和血管的真皮乳头(毛乳头)外，毛囊其余部分都是由表皮细胞分化而来。毛囊开口起始于皮肤表面，而每个毛囊又和一个或多个腺胞相连。每个腺胞解离成富含脂质的物质，却又通过一个共同和毛囊相通连的皮脂腺导管将分泌物运送到皮肤表面排出。在毛囊发育和周期性生长调控中起主导作用的毛球的基底部向内凹陷的部分叫毛乳头。

摘要
背景：有研究显示脱发区域中的毛囊干细胞并未消失，只是处于异常的休止状态而无法产生毛发。
目的：通过观察重组人生长素对体外毛囊培养中的效果，以证实重组人生长素对毛发再生的有效性，并拟从蛋白表达角度探讨可能的作用机制。
方法：将分离完整的毛囊随机分成实验组与对照组，实验组分别置入重组人生长素浓度分别为0.01，0.1，1，10，20与40 IU/L无血清毛囊生长培养液中，对照组则置入不含生长素的培养液中。每孔放入6根完整毛囊，置37 ℃、体积分数5%CO2培养箱中培养，在倒置显微镜下用目镜测微尺每天测量每根毛囊的长度并记录；并检测应用生长素后的生长因子表达。
结果与结论：①与对照组相比，实验各组不同时间段毛囊生长速度均有不同程度的增快，有一定的浓度依赖性，10 IU/L时达到较好效果浓度，随后减弱。1 IU/L组、10 IU/L组生长长度显著长于对照组(P < 0.05)；②生长素毛囊生长曲线显示，各组均呈不同角度向上，0.1、40 IU/L组效果相近，而且6 d前生长斜度最大， 6 d后生长斜度减小；③蛋白成分分析显示，应用生长因子后成纤维细胞生长因子、转化生长因子、肿瘤坏死因子β与白细胞介素21表达下降；表皮生长因子、胰岛素样生长因子2、神经生长因子、肝细胞生长因子、干细胞因子等蛋白因子均表达增强；④结果说明，重组人生长素对毛囊的生长有较好的促进作用，可能是通过促进激活多种促毛囊生长因子起作用。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程
ORCID: 0000-0001-6853-5544(张友来)

关键词: 重组人生长激素, 毛囊, 生长因子, 脱发, 组织构建

Abstract:

BACKGROUND: Alopecia has been shown to be caused by the abnormally inactive state of hair follicle stem cells but not their death.
OBJECTIVE: To confirm the effectiveness of recombinant human growth hormone (rhGH) in promotion of hair regeneration by observing rhGH acting on the hair follicle cultured in vitro, and to explore the possible mechanism at protein level.
METHODS: The individual hair follicle was separated and was randomized into two groups, and then cultured in the serum-free medium containing 0.01, 0.1, 1, 10, 20 and 40 IU/L rhGH, respectively. The cells were cultured in the normal medium served as the control growp. Six individual hair follicles were added into each pore, and incubated in an incubator at 37 ℃ and 5% CO2. Its length was measured using ocular micrometer under inverted contrast microscope daily. Additionally, the expression levels of growth factors were tested after rhGH application.
RESULTS AND CONCLUSION: Compared with the control group, the growth speed of hair follicle was increased at different degrees after different concentrations of rhGH was applied. The optimal concentration of rhGH was 10 IU/L, and then decreased. The length of hair follicle in the 1, and 10 IU/L groups was significantly longer than that in the control group (P < 0.05). The growth curve of hair follicle showed a rising tendency in each group, and 0.1 and 40 IU/L rhGH revealed the similar effect. The largest growth gradient appeared before day 6, followed by a slight increase. rhGH downregulated the expression levels of fibroblast growth factor, transforming growth factor, tumor necrosis factor β and interleukin-21, and upregulated the levels of epidermal growth factor, insulin-like growth factor 2, nerve growth factor, hepatocyte growth factor, and stem cell factor. In summary, rhGH exerts a positive effect on the growth of hair follicle possibly by activating a variety of related growth factors.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

Key words: Human Growth Hormone, Hair Follicle, Cytokines, Alopecia, Tissue Engineering

中图分类号:

R318

张友来，辛国华，曾元临，江澜，王晓，邹立津. 重组人生长素在毛囊生长与毛囊促生长因子表达中的作用[J]. 中国组织工程研究, 2018, 22(20): 3167-3171.

Zhang You-lai, Xin Guo-hua, Zeng Yuan-lin, Jiang Lan, Wang Xiao, Zou Li-jin. Effect of recombinant human growth hormone on the growth of hair follicle and the expression of related growth factors[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2018, 22(20): 3167-3171.

图/表（结果） 2

参考文献

[1] Br?ni?teanu DE,Voicu CM,Br?ni?teanu DC.Alopecia--a challenge for dermatologists.Rev Med Chir Soc Med Nat Iasi. 2014;118(1):11-18.

[2] Falto-Aizpurua L,Choudhary S,Tosti A.Emerging treatments in alopecia.Expert Opin Emerg Drugs.2014;19(4):545-556.

[3] 季江,谢晓明,何兆贤,等.毛囊干细胞及其微环境在毛囊衰老中作用的研究进展[J].中国皮肤性病学杂志,2017,30(8):905-908.

[4] Iorizzo M,Tosti A.Treatments options for alopecia.Expert Opin Pharmacother.2015;16(15):2343-2354.

[5] Hu R,Xu F,Sheng Y,et al.Dermatol Ther Combined treatment with oral finasteride and topical minoxidil in male androgenetic alopecia: a randomized and comparative study in Chinese patients. Dermatol Ther. 2015;28(5):303-308.

[6] 张瑛.男性脱发症病变毛囊与正常毛囊的差异性研究[D].第二军医大学, 2016.

[7] Rompolas P,Greco V.Stem cell dynamics in the hair follicle niche. Semin Cell Dev Biol.2014;25-26:34-42.

[8] 金建波,章建华.脱发实验模型及其药物治疗学现状[J].中国临床药理学与治疗学,2017,22:115-120.

[9] Langan EA,Philpott MP,Kloepper JE, et al.Human hair follicle organ culture: theory,application and perspectives.Exp Dermatol. 2015; 24(12):903-911.

[10] Hou C,Miao Y,Wang J,et al.Collagenase IV plays an important role in regulating hair cycle by inducing VEGF,IGF-1,and TGF-β expression. Drug Des Devel Ther.2015;9:5373-5383.

[11] 刘海静,刘海英,杨桂芹,等.LiCl对绒山羊毛囊生长和β-catenin表达的影响[J].沈阳农业大学学报,2016,47(6):722-727.

[12] Su Y,Liu H,Wang J,et al.Antimicrobial peptide lysozyme has the potential to promote mouse hair follicle growth in vitro.Acta histochemica.2015;117(8):798-802.

[13] 弓慧敏,白瑞,贾宗菲,等.两种培养基对羊驼毛囊干细胞生长和增殖的影响[J].山西医科大学学报.2016,47(5):424-428.

[14] 陈贤燕,刘本,李英,等.双氢睾酮对人毛囊生长影响的初步研究[J].皮肤性病诊疗学杂志, 2016,23(30):156-160.

[15] 李凡,唐铱,陈杏晔,等.龙血素A对体外培养的毛囊干细胞增殖分化的影响[J].广州中医药大学学报.2016,23(3):156-160.

[16] Branski LK,Herndon DN,Barrow RE, et al.Randomized controlled trial to determine the efficacy of long-term growth hormone treatment in severely burned children. Ann Surg. 2009;250(4):514-523.

[17] 李亮,程三放,乔万海.生长激素释放抑制激素联合重组人生长激素治疗重症急性胰腺炎临床研究[J].解放军医药杂志, 2016,28(7):82-85.

[18] Lucas-Herald AK,Kinning E,Iida A,et al.A case of functional growth hormone deficiency and early growth retardation in a child with IFT172 mutations. J Clin Endocrinol Metab. 2015;100(4):1221-1224.

[19] Calzada-León R.Use of recombinant Human Growth Hormone (rHGH). Rev Med Inst Mex Seguro Soc. 2017;55(2):196-213.

[20] Akiyama M, Smith LT, Holbrook KA.Growth factor and growth factor receptor localization in the hair follicle bulge and associated tissue in human fetus.J Invest Dermatol. 1996;106(3):391-396.

[21] 李桂芳,黄斌,杨武.表皮生长因子(EGF)对绵羊毛囊体外培养影响的研究[J].中国草食动物科学,2007,27(3):12-14.

[22] Li J,Yang Z,Li Z,Exogenous IGF-1 promotes hair growth by stimulating cell proliferation and down regulating TGF-β1 in C57BL/6 mice in vivo. Growth Horm IGF Res.2014;24(2-3):89-94.

[23] Panchaprateep R,Asawanonda P.Insulin-like growth factor-1: roles in androgenetic alopecia.Exp Dermatol. 2014;23(3):216-218.

[24] Sriwiriyanont P,Hachiya A,Pickens WL,et al.Effects of IGF-binding protein 5 in dysregulating the shape of human hair.J Invest Dermatol. 2011;131(2):320-328.

[25] 李知勉.毛囊相关生长基因的表达对绵羊毛囊生长的影响[D].石河子大学. 2006

[26] He X,Chao Y,Zhou G,et al.Fibroblast growth factor 5-short (FGF5s) inhibits the activity of FGF5 in primary and secondary hair follicle dermal papilla cells of cashmere goats.Gene.2016; 575(2 ):393-398.

引言

近年来因社会、环境与个人等原因，越来越多群体不同程度承受着脱发、秃顶的困扰。文献统计显示，脱发困扰着中国超过1亿的成年男性，且发病率随着社会生活的快节奏化和人口老龄化，而呈现逐渐上升的趋势。男性脱发的主要诱因是雄激素双氢睾酮体内浓度改变，另外遗传背景、营养状况、精神压力、衰老程度、免疫反应与外来损伤等因素也在脱发的发生和发展中发挥了重要作用^[1-3]。但这种疾病的具体发病机制至今仍不完全清楚，治疗上也较麻烦，效果也欠理想^[4]。目前临床上可用于治疗脱发的药物仅有抑制雄激素双氢睾酮生成的Finasteride和血管扩张剂Minoxidil两种^[5]。

毛发生长由毛囊内部的毛囊干细胞驱动，并随着这些干细胞在激活与静止状态之间的来回切换而呈现出生长-退行-休止的周期性循环，发病过程中毛囊逐步萎缩，生长期缩短，休止期延长，最终失去再生毛发的能力。但是对毛囊干细胞在这个疾病过程中的病理转变过程及其机制仍然缺乏了解。有研究显示脱发区域中的毛囊干细胞并未消失，只是处于异常的休止状态而无法产生毛发^[6-7]。毛囊是一种结构复杂的皮肤附属器官，由激素、细胞因子与受体等相互作用，共同调控着毛囊的周期性循环和毛发的生长^[8-10]。

目前为此，有较多文献报道体外促进毛囊生长的研究^[11-15]。长期临床观察发现，重组人生长素对促进毛发生长能起十分明显的效果，重组人生长素促进毛囊生长的效果与可能的作用机制研究未见文献报道。该研究通过观察重组人生长素对体外毛囊培养中的效果，以证实重组人生长素对毛发再生的有效性，并拟从蛋白表达角度探讨可能的作用机制。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

材料方法

1.1 设计细胞学实验观察。

1.2 时间及地点实验于2015年6月至2016年3月在南昌大学第一附属医院烧伤研究所完成。

1.3 材料人头皮取自南昌大学第一附属医院脑外科手术切除的头皮，排除毛囊受损伤疾病，年龄33-45岁，头皮离体小于6 h。患者对切除头皮完全知情同意，并签署知情同意书。

1.4 实验方法

1.4.1 头皮来源与毛囊分离、培养头皮切取后反复用生理盐水冲洗，手工剃净毛发，碘伏浸泡5 min后再用体积分数75%的乙醇浸泡15 min，用含青霉素1 000 U/mL、链霉素1 000 mg/L的无菌PBS清洗数遍，用烧伤手动取皮刀在真皮和皮下组织交界处分开，取皮下组织置于装有Williams E条件培养基的3.5 mm塑料平皿中，在显微镜下用显微器械沿毛发生长的方向逆行拔出皮下脂肪中的毛囊，取完整的Ⅳ期毛囊备用。培养采用24孔板，每孔置一完整毛囊，每孔加入500 μL Williams E培养液，置37 ℃、体积分数5%CO₂孵箱中培养。

1.4.2 分组将分离完整的毛囊随机分成实验组与对照组，实验组分别置入重组人生长素[安徽安科生物工程(集团)股份有限公司，国药准字20093034]浓度分别为0.01，0.1，1，10，20与40 IU/L无血清毛囊生长培养液中，对照组则置入不含生长素的培养液中。每孔放入6根完整毛囊，置 37 ℃、体积分数5%CO₂培养箱中培养。分别在研究当天，第2，4，6与8天在显微镜下测量毛囊生长长度(从毛球到毛干顶部，单位：mm)。

1.4.3 应用生长素前后毛囊生长因子的表达差异

(1)将加10 IU/L生长素毛囊培养与未加生长素毛囊分为实验组与对照组。

(2)蛋白芯片检测样品的准备：于冰面上分别取两组培养6 d毛囊。

(3)样品透析：将得到的组织裂解液在生物素标记前需要利用透析管进行透析(Item A)。取200 μL加入到透析管中，然后在4 000 mL的1×PBS(pH=8)中4 ℃边搅拌边透析。间隔3 h更换透析液1次。

(4)蛋白浓度测定：样品透析后，需要测定蛋白浓度(BCA法Pierce公司，货号：23227)。

配制BSA标准液：取9个干净的离心管，分别标记为A，B，C，D，E，F，G，H，I，分别向B，C，D，E，F，G，H，I中加入125，325，175，325，325，325，400，400 μL pH为8.0的PBS。取试剂盒中BSA标准品储存液，向A，B，C管中分别加入300，375，325 μL，混匀后即浓度为2 000，1 500，1 000 mg/L的标准品。抽取B管中的标准品175 μL加入D管中，混匀后得750 mg/L的标准品D，抽取C管中的标准品325 μL加入E管中，混匀后得 500 mg/L的标准品E，抽取E管中的标准品325 μL加入F管中，混匀后得250 mg/L的标准品F，抽取F管中的标准品325 μL加入G管中，混匀后得125 mg/L的标准品G，抽取G管中的标准品100 μL加入H管中，混匀后得25 mg/L的标准品H，I管蛋白质浓度为0。见表1。

表1 标准品系列稀释

Table 1 Dilute standards

标准品编号	稀释液PBS 体积(μL)	标准品蛋白来源及体积(μL)	标准品蛋白质终浓度(mg/L)
A	0	300 μL BSA标准品储存液	2 000
B	125	375 μL BSA标准品储存液	1 500
C	325	325 μL BSA标准品储存液	1 000
D	175	175 μL 标准品B	750
E	325	325 μL标准品C	500
F	325	325 μL标准品E	250
G	325	325 μL标准品F	125
H	400	100 μL标准品G	25
I	400	0	0

配制BCA工作液：计算所需要的总BCA工作液体积。总BCA工作液体积=(标准品+待测样品)×重复孔数×200 μL配制BCA工作液：50体积的BCA试剂A中加入1体积的BCA试剂B(A∶B=50∶1)，充分混匀。注意：BCA试剂B加入BCA试剂A中后，迅速浑浊，通过混匀后立即变澄清。

检测方法：各取10 μL标准品或者待测样品加入微孔板中。每孔加入200 μL BCA工作液，轻微震荡充分混匀， 37 ℃放置30 min。冷却到室温，在酶标仪上的540-595 nm波长范围处检测吸光度，其中562 nm波长为最佳。根据BSA 标准品的吸光度，绘制标准曲线。依据标准曲线和样品的稀释倍数计算样品蛋白质浓度，测定结果如下： 48 h样品蛋白质浓度为11 596.67 mg/L，72 h为 8 296.667 mg/L。

(5)生物素标记样品：在整个生物素标记样品的过程，避免任何试剂受到胺类物质或叠氮钠(例如Tris，甘氨酸)的污染。使用标记试剂前，将标记试剂小管快速离心后，管中加入100 μL 1×PBS溶解粉末，上下吹打将标记试剂混匀，制备成1×标记试剂溶液。向装有样本的离心管中加入适当量的标记试剂。快速混匀，摇床上室温孵育30 min。每5 min轻弹离心管，混合反应试剂。在上步反应液中加入3 μL终止液，然后用透析管去除未结合生物素；分别取样品各150 μL加入到透析管中，加入透析管中，然后在 4 000 mL的1×PBS(pH=8)中4 ℃边搅拌边透析。间隔3 h更换透析液1次。

(6)玻片芯片的完全干燥：将玻片芯片从盒子中取出来，在室温平衡20-30 min后，将包装袋打开，揭开密封条，然后将芯片放在真空干燥器或者室温干燥1.0-2.0 h。

(7)封闭和孵育：每个芯片孔中加入400 µL的1×封闭液，室温摇床上孵育1 h，避免产生气泡；抽去封闭液，每个孔中添加400 μL样品，一个阵列一个样品，4 ℃振荡过夜孵育。用封闭液60倍稀释生物素标记的样品。抽去样品，每个孔中加入约1 mL的1×洗液Ⅰ(20×洗液用去离子水稀释)室温振荡，洗玻片4次，每次5min；抽去1×洗液Ⅰ，加入1×洗液Ⅱ室温振荡，洗玻片3次，每次5 min抽去1×洗液Ⅱ，每孔加入400 μL用封闭液1 500倍稀释的Cy3-链霉亲和素。室温避光振荡孵育2 h。按照步骤洗玻片。

(8)荧光检测：采用激光扫描仪例如InnoScan 300扫描信号，采用Cy3或者绿色通道(激发频率=532 nm)；仪器型号：InnoScan 300 Microarray Scanner；厂家: Innopsys，3；产地：Parc d'Activités Activestre；31390 Carbonne- France4；扫描参数：WaveLengh：532 nm；Resolution：10 μm 采用仪器自带分析软件提取数据，采用AAM-BLG-1的数据分析软件来进行数据预分析。

1.5 主要观察指标测量并比较不同浓度生长素下毛囊的长度；检测应用生长素后的生长因子表达差异。

1.6 统计学分析采用SPSS 19.0统计软件包处理，计量数据以x(_)±s表示，采用t 检验比较两组之间的差异。P < 0.05为差异有显著性意义。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

讨论

资料表明脱发困扰着中国超过1亿的成年男性，且发病率呈现逐渐上升的趋势。男性脱发诱因众多，但具体发病机制至今仍不完全清楚，目前治疗上也没有十分理想的方法。因此寻找毛囊生长的办法仍在努力进行中。

毛囊是控制毛发周期性生长的结构，是由一个多层细胞组成的特殊器官，由上皮和真皮组成大多数哺乳动物的毛囊具有3个阶段的生长周期(生长期、退行期与休止期)^[8]，如何在生长期促进快速生长或延长生长期是防止脱发、促进再生可行途径之一。

重组人生长激素由重组DNA技术生产而得，具有促进组织生长、调节代谢等多种生理作用，对促进创面愈合、特发性矮小儿童生长发育与急性胰腺炎等均有较好的效果^[16-19]，但应用于毛囊生长未见文献报道。该研究结果表明，重组人生长激素对促进毛囊生长有一定的作用，而且具有浓度依赖性，此外与应用时间长短也有一定的相关性，例如应用前6 d内效果最佳，生长最快。应用重组人生长素后蛋白成分分析显示，除成纤维细胞生长因子、肿瘤坏死因子β与白细胞介素21表达下降外，表皮生长因子、胰岛素样生长因子2、神经生长因子、肝细胞生长因子、干细胞因子等蛋白因子等蛋白因子均表达增强。表皮生长因子、转化生长因子等是较早发现的生长因子之一，成熟的毛囊外皮根鞘有该些生长因子与其受体，对毛囊生长具有较好的促进作用，而成纤维细胞生长因子、肿瘤坏死因子与白细胞介素等对毛囊的生长有一定的抑制作用，许多学者通过原位杂交、免疫组织化学等方法在皮肤和毛囊的组织结构中发现，多种生长因子及其受体在毛乳头、毛球基质母细胞、内外根鞘、皮脂腺与真皮成纤维细胞中表达，生长因子主要通过自分泌、近分泌与旁分泌等起作用，具体机制目前不十分清楚^[20]。

表皮生长因子在体外研究中发现，可以促进毛囊真皮源性细胞的增殖，毛囊外根鞘和毛球细胞的合成，并诱导毛球部细胞的定向分化，使其出现类似体内的毛囊退行性改变，但文献报道，在毛囊发育早期阶段，表皮生长因子对毛囊形成有一定的抑制作用，但主要作用仍是促进毛囊上皮的生长^[21]，但此次研究发现应用生长激素后表皮生长因子值并未很大增加。胰岛素样生长因子1，2广泛分布于毛囊、毛乳头与真皮纤维中，对毛囊的上皮和真皮成分均有较好的促进作用。肝细胞生长因子对不同的细胞都有促分裂等作用，因最初在肝细胞中鉴定而得名，研究发现对上皮细胞、毛发的生长有促进作用，在毛囊的毛乳头细胞表达，通过旁分泌调节毛囊上皮的增殖与分化。神经生长因子在毛囊的上皮部分和神经组织中表达，对毛囊发生初期有促进作用，在毛囊生长期表达最强。干细胞因子对体外毛囊培养有较好的促进作用，由毛乳头细胞分泌，对黑素细胞、上皮细胞具有调节作用^[22-24]。

白细胞介素21可引起生长期毛囊营养不良，对毛囊和毛发纤维的生长具有抑制作用。成纤维细胞生长因子分类分时期表达，部分可抑制毛囊生长，部分则可以抑制毛囊进入休止期。肿瘤坏死因子β在毛囊内主要有肿瘤坏死因子β1，肿瘤坏死因子β2与肿瘤坏死因子β3三种形式，对毛囊生长具有可逆抑制生长作用，毛囊未成熟时，肿瘤坏死因子β1在毛乳头细胞和内根鞘表达，而肿瘤坏死因子β2与肿瘤坏死因子β3则仅在内根鞘表达，在成熟了的毛囊里，3种亚形均呈强阳性表达^[25]。

该研究结果发现，与对照组相比，实验各组不同时间段生长速度均有不同程度的增快，有一定的浓度依赖性，0.01，0.1，1，10，20，40 IU/L平均生长长度分别为(0.75± 0.29)，(0.92±0.30)，(1.20±0.38)，(1.32±0.34)，(1.03± 0.27)，(0.88±0.24) mm。10 IU/L时达到较好效果浓度，随后减弱。1 IU/L组(1.20±0.38) mm、10 IU/L组(1.32±0.34) mm与对照组(0.65±0.20) mm比较，差异有统计学意义(P < 0.05)；生长素毛囊生长曲线显示，各组均呈不同角度向上，0.1、40 IU/L组效果相近，而且6 d前生长斜度最大，6 d后生长斜度减小；蛋白成分分析显示，应用生长因子后除成纤维细胞生长因子、转化生长因子、肿瘤坏死因子β与白细胞介素21表达下降外，表皮生长因子、胰岛素样生长因子2、神经生长因子、肝细胞生长因子、干细胞因子等蛋白因子均表达增强。

研究发现生长激素对毛囊有促进作用主要机制可能是重组人生长素对利于促进毛囊生长的因子有较有好的激活效果，抑制或诱导毛囊进休止期的因子表达下降，这与文献报道的促生长因子大体一致^[26]，但从研究结果看重组人生长素可能主要通过神经生长因子、肝细胞生长因子等因子激发毛囊的生长。该研究初步探讨了重组人生长激素在毛囊生长中的应用效果与对部分生长因子的影响，应用效果仍需大样本继续进一步观察，具体机制也仍有待进一步研究。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

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[1]	吴训, 孟娟红, 张建运, 王亮. 浓缩生长因子修复兔髁突全层软骨损伤[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1166-1171.
[2]	李静, 谢建山, 崔慧林, 曹锡梅, 杨艳萍, 李海荣. 不同毛色小鼠背部皮肤中甘油二酯激酶ζ和蛋白激酶CβⅡ的表达和定位[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1196-1200.
[3]	侯婧瑛, 于萌蕾, 郭天柱, 龙会宝, 吴浩. 缺氧预处理激活HIF-1α/MALAT1/VEGFA通路促进骨髓间充质干细胞生存和血管再生[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 985-990.
[4]	李偲, 赵婷, 谭戈, 郑雨林, 张若男, 吴艳, 唐俊明. 血小板源生长因子BB可促进骨骼肌成肌细胞增殖、分化与迁移[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1050-1055.
[5]	罗选翔, 经历, 潘彬, 冯虎. 甲钴胺联合鼠神经生长因子促进脊髓型颈椎病术后神经功能的恢复[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(5): 719-722.
[6]	聂慧娟, 黄织春. 转化生长因子β1诱导心肌成纤维细胞转分化过程中Hedgehog信号通路的作用机制[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(5): 754-760.
[7]	张振坤, 李喆, 李亚, 王莹莹, 王亚苹, 周馨魁, 马珊珊, 关方霞. 海藻酸盐基水凝胶/敷料在创面愈合中的应用：持续、动态与顺序释放[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(4): 638-643.
[8]	姜涛, 马磊, 李志强, 寿玺, 段明军, 吴硕, 马创, 魏琴. 血小板衍生生长因子BB诱导骨髓间充质干细胞向血管内皮细胞分化[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(25): 3937-3942.
[9]	郝晓娜, 张英杰, 李玉云, 许涛. 过表达脯氨酰寡肽酶的骨髓间充质干细胞修复肝纤维化模型大鼠[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(25): 3988-3993.
[10]	刘金伟, 陈允震, 万春友. 应力作用下骨不连断端组织中成骨因子的变化[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(23): 3619-3624.
[11]	周武, 王彬娉, 王雅雯, 程亚楠, 黄谢山. 转化生长因子β和骨形成蛋白2联合诱导小鼠成骨细胞系MC3T3-E1细胞的增殖与分化[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(23): 3630-3635.
[12]	谢阳, 吕志宇, 张淑江, 龙婷, 李作孝. 重组腺病毒介导神经生长因子转染实验性自身免疫性脑脊髓炎模型小鼠少突胶质细胞的凋亡及髓鞘化[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(23): 3678-3683.
[13]	杨莉, 李雪莉, 宋静卉, 禹卉千, 王伟霞. 隐丹参酮抑制模型兔耳增生性瘢痕的作用及机制[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(20): 3150-3155.
[14]	魏琴, 张雪, 马磊, 李志强, 寿玺, 段明军, 吴硕, 贾麒钰, 马创. 血小板衍生生长因子BB诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(19): 2953-2957.
[15]	张圣敏, 曹长红, 刘超. 浓缩生长因子负载脂肪干细胞预防SD大鼠双膦酸盐类药物相关性颌骨骨坏死[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(19): 2982-2987.