中国组织工程研究 ›› 2011, Vol. 15 ›› Issue (45): 8447-8450.doi: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.45.019
• 脐带脐血干细胞 umbilical cord blood stem cells • 上一篇 下一篇
郭继强,刘爱兵,沈 丹
Guo Ji-qiang, Liu Ai-bing, Shen Dan
摘要:
背景:如何获得较为纯化、高活性的干细胞,目前未见深入研究报告,也未见一个标准化操作流程方案。 目的:探讨两步法分离人脐血单个核细胞最佳分离条件。 方法:观察羟乙基淀粉在20,30,40,50,60,70 min不同时间沉淀脐血中红细胞的效果;使用人淋巴细胞分离液,分别在800,700,600,500,400 g/min,离心30,25,20 min的条件下分离人脐血单个核细胞。 结果与结论:6%羟乙基淀粉沉淀脐血60 min效果最好;使用密度为(1.077 0±0.000 1) g/mL人淋巴细胞分离液,在4 ℃条件下以700 g/min离心力,离心30 min,洗涤3次,这样获得的人脐血单个核细胞效果最好,所得细胞沉淀中混杂细胞如红细胞及其他细胞碎片较少,人脐血单个核细胞的细胞得率及活力比较高。提示应用羟乙基淀粉沉淀和人淋巴细胞分离液分离两步法,在最佳时间条件下可提高脐血干细胞的回收率。
中图分类号: