第三趾趾深屈肌腱Ⅱ区损伤模型肌腱粘连的功能锻炼

doi:10.12307/2023.871

中国组织工程研究 ›› 2024, Vol. 28 ›› Issue (8): 1161-1167.doi: 10.12307/2023.871

• 肌肉肌腱韧带组织构建 tissue construction of the muscle, tendon and ligament • 上一篇下一篇

第三趾趾深屈肌腱Ⅱ区损伤模型肌腱粘连的功能锻炼

程杰1，王继宏2，张沛3

内蒙古医科大学第二附属医院，1创伤外科中心C区，2手足显微外科中心B区，3脊柱外科中心A区，内蒙古自治区呼和浩特市 010030

收稿日期:2022-10-26 接受日期:2022-12-24 出版日期:2024-03-18 发布日期:2023-07-18
通讯作者: 张沛，硕士，主任医师，教授，内蒙古医科大学第二附属医院脊柱外科中心A区，内蒙古自治区呼和浩特市 010030
作者简介:程杰，男，1983年生，山东省菏泽市人，汉族，硕士，副主任医师，主要从事四肢创伤外科研究。
基金资助:
内蒙古医科大学科技百万工程联合项目(YKD2018KJBW(LH)012)，项目负责人：程杰；内蒙古自治区高等学校科学研究项目(NJZY22673)，项目负责人：程杰

Functional exercise for tendon adhesion in a model of deep flexor tendon II injury of the third toe

Cheng Jie1, Wang Jihong2, Zhang Pei3

1Department of Trauma Area C, 2Department of Hand and Foot Microsurgery Area B, 3Department of Spinal Surgery Area A, the Second Affiliated Hospital of Inner Mongolia Medical University, Hohhot 010030, Inner Mongolia Autonomous Region, China

Received:2022-10-26 Accepted:2022-12-24 Online:2024-03-18 Published:2023-07-18
Contact: Zhang Pei, Master, Chief physician, Professor, Department of Spinal Surgery Area A, the Second Affiliated Hospital of Inner Mongolia Medical University, Hohhot 010030, Inner Mongolia Autonomous Region, China
About author:Cheng Jie, Master, Associate chief physician, Department of Trauma Area C, the Second Affiliated Hospital of Inner Mongolia Medical University, Hohhot 010030, Inner Mongolia Autonomous Region, China
Supported by:
Science and Technology Million Joint Project of Inner Mongolia Medical University, No. YKD2018KJBW(LH)012 (to CJ); Scientific Research Project of Higher Education Institutions in Inner Mongolia Autonomous Region, No. NJZY22673 (to CJ)

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：

改良津下缝合法：将套圈缝合线于肌腱的一侧距断端1 cm处横行进针，再将针由线圈处套入后抽紧，在附近穿入肌腱，穿过两侧的肌腱断面，在另一侧距肌腱断端0.8 cm穿出，在出针点附近横行进针并随即出针，出针后不拉紧缝线，再将针由从肌腱断端0.8 cm处穿出的缝线下面绕过并拉紧，使二线交叉后形成“+”字形状，在“+”字附近进针，在距肌腱断端1 cm处穿出，肌腱断端靠拢后将缝线抽紧，将套圈线剪断一条线后，将带针线经肌腱穿出后与断端的另一条线打结。肌腱横轴的另一侧以同样步骤操作，使两根缝线位于肌腱内且将肌腱的宽度3等分。
肌腱组织胶原纤维：肌腱组织中最主要的是肌腱细胞，其细胞外基质主要是胶原纤维，在含量上Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维最多，Ⅰ型胶原主要是维持正常肌腱的功能，Ⅲ型胶原主要存在于病变的肌腱和正常的腱鞘中。

背景：前期研究显示，改良津下缝合法可用于修复鸡肌腱损伤，由于未进行修复后的功能锻炼，使得肌腱出现较明显的粘连，体现了肌腱修复术后进行功能锻炼的重要性。

目的：探讨预防改良津下缝合法修复鸡屈趾肌腱断裂模型肌腱粘连被动功能锻炼的方案。
方法：取10月龄三黄鸡100只，建立右足第三趾Ⅱ区趾深屈肌腱断裂模型后，采用随机数字表法分为5组，每组20只：A组术后石膏固定3周，并且每天给予1次的被动功能锻炼，连续3周；B组术后石膏固定3周，并且每天给予2次的被动功能锻炼，连续3周；C组术后石膏固定3周，并且每天给予3次的被动功能锻炼，连续3周；D组术后石膏固定3周；E组不进行石膏固定也不进行被动功能锻炼。3周后，观察鸡爪的大体形态、肌腱吻合端的形态及腱周粘连程度，检测第三趾屈趾深肌腱滑移距离和所有关节的屈曲角度、肌腱吻合端病理形态和羟脯氨酸含量。

结果与结论：①E组肌腱在术后6 d左右完全断裂，从实验中剔除；B、C组鸡爪有较好的抓握形态，D组鸡爪几乎无抓握形态，A组鸡爪抓握形态差于B、C组；②B、C组肌腱吻合端膨大不明显，质地和正常腱性组织差别不大，相对于C组，B组肌腱粘连程度相对轻；D组肌腱吻合端膨大明显，质地较硬，腱周组织瘢痕明显，粘连程度重；A组的表现介于B、C组和D组之间；③B、C组鸡第三趾屈趾深肌腱滑移距离和所有关节的屈曲角度均优于A、D组(P < 0.05)，B组鸡肌腱中羟脯氨酸含量高于A、C、D组(P < 0.05)；④苏木精-伊红与天狼星红染色显示，A、C、B组肌腱胶原纤维排列逐渐有方向性，鲜红粗大的Ⅰ型胶原纤维逐渐增多，绿色细小的Ⅲ型胶原纤维逐渐减少；E组肌腱胶原纤维排列方向性差，Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维交叉分布；⑤结果表明，改良津下缝合法修复鸡屈趾肌腱断裂模型术后，每天2次充分的被动功能锻炼既能有效减轻肌腱粘连又能减少肌腱断裂的发生。

https://orcid.org/0000-0001-8051-7584(程杰)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

关键词: 腱损伤, 动物实验, 肌腱粘连, 被动功能锻炼, 趾深屈肌腱, 石膏固定

Abstract: BACKGROUND: Previous studies have shown that the modified Tsuge suture method can be used to repair chicken tendon injuries. However, the lack of post-repair functional exercise leads to obvious tendon adhesions. Therefore, a functional exercise after tendon repair is very important.
OBJECTIVE: To explore a scheme for passive functional exercise against tendon adhesion in a chicken model of flexor toe tendon rupture following repair using the modified Tsuge suture method.
METHODS: A total of 100 Sanhuang chickens, 10 months of age, were taken to make animal models of deep flexor tendon II rupture of the third toe of the right foot. Animal models were randomized into five groups (n=20 per group): groups A, B, C and D were given plaster immobilization for 3 weeks after surgery, and were simultaneously given passive functional exercise 1, 2, 3, and 0 times a day for 3 weeks, respectively; group E had neither plaster immobilization nor passive functional exercise after surgery. The gross morphology of the chicken claw, the morphology of the tendon anastomosis end and the degree of peritendinous adhesion were observed. The slipping distance of the deep flexor tendon of the third toe, the flexion angles of all joints, the pathological morphology of the tendon at the anastomotic end and the hydroxyproline content were measured.
RESULTS AND CONCLUSION: The tendon of group E was completely ruptured around 6 day after surgery and was removed from the experiment. The chicken claws in groups B and C had better grasping morphology, group D had almost no grasping morphology, and group A had worse grasping morphology than groups B and C. In groups B and C, the tendon anastomosis end was not obviously expanded, with the texture similar to that of normal tendon tissue. Compared with group C, tendon adhesion was relatively mild in group B. In group D, the tendon anastomosis end was obviously expanded, with the hard texture, obvious peritendinous scar and serious adhesion. Expansion at the tendon anastomosis end was more obvious than groups B and C but less severe than group D. The slipping distance and the related flexion angles of the deep flexor tendon of the third toe were better in groups B and C than groups A and D (P < 0.05). The content of hydroxyproline in the tendon of chickens in group B was higher than those in groups A, C and D (P < 0.05). Findings from hematoxylin-eosin and Sirius red staining showed that collagen fibers of the tendon in groups A, C and B were gradually arranged in a directional manner, where the number of bright red and thick type I collagen fibers was gradually increased and the number of tiny green type III collagen fibers was gradually decreased. In group E, collagen fibers of the tendon were poorly arranged in a directional manner and type I and type III collagen fibers were cross-distributed. To conclude, adequate passive functional exercises twice a day following repair with the modified Tsuge suture method could effectively alleviate tendon adhesion and reduce tendon rupture in the chicken model of deep flexor tendon rupture.

Key words: tendon injury, animal experiment, tendon adhesion, passive functional exercise, deep flexor tendon, plaster immobilization

中图分类号:

程杰, 王继宏, 张沛. 第三趾趾深屈肌腱Ⅱ区损伤模型肌腱粘连的功能锻炼[J]. 中国组织工程研究, 2024, 28(8): 1161-1167.

Cheng Jie, Wang Jihong, Zhang Pei. Functional exercise for tendon adhesion in a model of deep flexor tendon II injury of the third toe[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2024, 28(8): 1161-1167.

图/表（结果） 12

2.1 实验动物数量分析术后5-7天发现，E组所有鸡右足第三趾伸直畸形，不能屈曲，通过解剖发现所有标本屈趾深肌腱断裂(图3)，而鸡等实验动物不能配合，在日常生活中鸡有拔地的习惯，不能主动制动，导致了标本肌腱吻合端的断裂，说明肌腱修复术后合理制动的必要性，E组不给予其余指标的检测。在对鸡进行被动功能锻炼时，一定要尽可能地减少鸡的恐惧，如：平时多到鸡舍、让鸡不感到陌生感；在进行功能锻炼之前根据鸡的状态进行一定的安抚，待鸡的情绪平稳后再行功能锻炼；对于特别不配合的鸡，可给予镇静药物等。其余各组把与同组相比屈伸功能差异较大的样本给予剔除，后期切开发现这些剔除的样本屈肌腱断裂，最终A组17份、B 组19份、C组14份、D组20份标本进行指标的检测。

2.2 各组鸡爪的抓握形态术后3周取下石膏，可见A、B、C组鸡部分右足第三趾有轻度屈曲挛缩，整体主动屈曲形态较好，鸡爪有较好抓握形态，这3组鸡爪抓握形态较好的是B、C组；D组鸡所有第三趾因屈曲挛缩明显而不能主动抓握木棍，无抓握形态；A组鸡爪抓握形态位于B、C组与D组之间，见图4。

2.3 各组鸡第三趾趾深屈肌腱滑移距离和所有关节屈曲角度经SNK法分析得出，B、C组鸡第三趾趾深屈肌腱滑移距离比较差异无显著性意义(P > 0.05)，B、C组鸡第三趾趾深屈肌腱滑移距离大于A、D组(P < 0.05)，A组鸡第三趾趾深屈肌腱滑移距离大于D组(P < 0.05)，见表1，2。第三趾所有关节屈曲角度的总活动度，A组的优良率为82.4%，B组的优良率为94.7%，C组的优良率为85.7%，D组的优良率为42.9%，见表3，此指标经χ2检验分析得出各组间优良率比较差异均有显著性意义(P < 0.05)。

2.4 各组鸡肌腱吻合端形态及腱周粘连度分级评定 B、C组吻合端膨大不明显，质地和正常腱性组织差别不大，腱周组织瘢痕不多，相对于C组，B组的粘连程度相对轻；C组有5份标本的吻合端有分离，断端间是瘢痕组织连接；D组吻合端膨大明显，质地较硬，腱周组织瘢痕明显，粘连程度重；A组的表现介于B、C组和D组之间，见表4。此指标经χ2分析得出，各组间腱周粘连度分级结果比较差异有显著性意义(P < 0.05)。

2.5 各组鸡肌腱吻合端苏木精-伊红染色和天狼星红染色的观察苏木精-伊红染色可见，A、C、B组的腱细胞排列顺序逐渐好转，数量逐渐接近正常，细胞核的形态逐渐向梭形发展、染色逐渐浅染，C组可见正常的肌腱组织和瘢痕组织有明显的交界区；D组的腱细胞排列较紊乱，细胞核的大小和染色差异较大，见图5。

天狼星红染色可以很好地显示Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维。天狼星红染色染色可见，A、C、B组胶原纤维排列逐渐有方向性，鲜红粗大的Ⅰ型胶原纤维逐渐增多，绿色细小的Ⅲ型胶原纤维逐渐减少；E组胶原纤维排列方向性差，Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维交叉分布，见图6。

各组鸡肌腱吻合端腱细胞数量及Ⅰ型和Ⅲ型胶原含量，见表1。经方差分析及SNK法分析，4组间腱细胞数量及Ⅰ型和Ⅲ型胶原含量两两比较差异均有显著性意义(P < 0.05)，见表5-7。

2.6 各组鸡肌腱吻合端羟脯氨酸含量测定各组鸡肌腱吻合端羟脯氨酸含量见表1。经方差及SNK法分析，4组间羟脯氨酸含量两两比较差异均有显著性意义(P < 0.05)，见表8。

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引言

随着社会的发展，大量的机械化工具投入到工厂和田间中，双手在操作过程中就非常容易发生意外，并且在面临外部危险因素时，因生理反射双手成为阻挡危险因素的主要器官，因此，双手就成为最易损伤的部位之一。通过研究发现，国外手外伤在急诊创伤中的受伤比例占10%-30%，国内的受伤比例占30%-40%[1-5]。
肌腱修复后一般需要3周左右的制动，如果制动时间不够，过早的进行正常活动，势必会引起肌腱吻合端的分离甚至缝线的断裂，导致修复失败；若长时间制动不进行功能锻炼，则会导致肌腱的粘连。有学者总结，肌腱修复后有4%-10%发生断裂，10%左右发生粘连，严重影响了患者手功能的恢复[6]。
随着组织工程学的发展，为了减少肌腱损伤后的并发症，国内外学者从手术技巧、缝合方式、缝合材料、细胞因子、基因水平和阻隔材料等多方面进行研究，并取得了良好的研究效果，但肌腱粘连的机制仍未明确，并且新的研究内容只是应用在动物模型上，缺乏临床应用证据[7-10]。
屈指肌腱Ⅱ区因其独特的结构，狭窄的腱鞘包绕指深和指浅屈肌腱，该部位肌腱断裂的修复过程中即使给予多层面预防肌腱粘连的措施，修复后肌腱粘连的发生率仍在12%左右，其中约半数患者发生指间关节不同程度的关节僵硬，严重影响手指功能[11]。
肌腱断裂修复术后严重影响功能恢复的常见问题是吻合端的粘连，大量的实验和临床研究认为，预防肌腱粘连重要的方法是术后早期给予功能锻炼[12-14]。陈东生等[15]通过回顾性研究认为，在手部肌腱损伤的患者中，进行系统功能锻炼的肌腱粘连率要比不进行功能锻炼的肌腱粘连率明显降低，肌腱损伤患者术后给予功能锻炼能很好地改善术后手指的僵硬、减轻肌腱的粘连，更好地恢复手指功能。
缝合后肌腱断端较高的抗张强度是能早期功能锻炼的前提[16-17]，否则有引起肌腱裂隙形成甚至吻合端再断裂等情况，这对缝合法提出了较高的要求。前期生物力学研究发现，津下缝合法较易的断裂部位是打结处的单线，对此缺点进行优化的改良津下缝合法，其缝线较易断裂部位是在单线打结处的前方双线十字交叉部位，通过对这两种缝合法进行生物力学比较得出，改良津下缝合法产生的力学特性要优于津下缝合法；前期也将这两种缝合法进行动物实验研究，未发现用改良津下缝合法修复术后出现肌腱吻合端坏死的情况，验证了改良津下缝合法修复鸡肌腱损伤修复的可行性[18]。但前期动物实验没有进行规范的功能锻炼，使得肌腱有较明显的粘连，也从另一角度验证了肌腱修复术后进行功能锻炼的重要性。因鸡不能配合进行主动功能锻炼，若探索出取得良好肌腱修复效果的被动功能锻炼方案，不但可进一步验证改良津下缝合法的实用性，也为以鸡为研究对象进行肌腱修复方向的研究提供验证效果的重要措施。因此，对前期研究进行分析和整改，研究改良津下缝合法修复后被动功能锻炼合适的频率和强度，在防止肌腱粘连及断端分离的前提下最大程度地减轻肌腱粘连。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

材料方法

1.1 设计随机对照动物实验，组间比较采用χ2检验、方差分析及SNK法分析。
1.2 时间及地点实验于2021年1-12月在内蒙古医科大学基础实验室完成。
1.3 材料
1.3.1 实验动物与分组 10月龄健康三黄鸡100只，雌性，体质量2.0-2.2 kg，购自呼和浩特市永安养鸡厂，生产许可证号：SCXK蒙2002-0052。通过随机数字表法将100只鸡分成A、B、C、D、E 5组，每组20只。在内蒙古医科大学基础实验室室外场地喂养，自由进食、进水，自然光照。
实验方案经内蒙古医科大学第二附属医院动物实验伦理委员会批准，批准号：EFY20220012。实验过程遵循了国际兽医学编辑协会《关于动物伦理与福利的作者指南共识》和本地及国家法规。
1.3.2 主要材料和试剂非吸收套圈缝合线(宁波市成和显微器械厂)；戊巴比妥钠(呼和浩特市动物医院)；苏木精溶液(福州迈新生物技术公司)；水溶性伊红溶液、DAB显色试剂(南京建成科技有限公司)；天狼星红试剂(美国SIGMA公司)；苦味酸(台山市众城化工有限公司)。
1.3.3 主要仪器组织脱水机、包埋机、切片机(德国SM公司)；免疫荧光显微镜(德国LEICA公司)；偏振光显微镜(德国Carl Zeiss公司)。
1.4 实验方法

1.4.1 鸡屈趾肌腱断裂造模与分组干预取100只三黄鸡，将3%的戊巴比妥钠(30 mg/kg)缓慢注射一侧的翅根静脉进行诱导麻醉，根据麻醉效果适当增减麻药量[19]。麻醉成功后，在相当于人手Ⅱ区平面横断右足第三趾趾深屈肌腱，皮肤切口和腱鞘切口不在同一平面，制备成鸡屈趾肌腱断裂模型，采用改良津下缝合法缝合肌腱断端，缝线为5-0非吸收套圈缝线，见图1，2；腱鞘给予无张力缝合，A-D组术后右足石膏固定踝关节于跖屈 90°、跖趾关节和跖间关节屈曲30°位，石膏固定约3周，E组不给予石膏固定也不给予功能锻炼。A组每天被动功能锻炼1次(上午7点)；B组每天被动功能锻炼2次(上午7点，下午7点)；C 组每天被动功能锻炼3次(上午7点，下午3点，晚上11点)；D组给予石膏固定但不行被动功能锻炼。每次功能锻炼被动牵拉肌腱5次，锻炼后继续石膏固定，每次被动功能锻炼要求动作轻柔，锻炼的幅度使踝关节活动到中立位、跖趾关节和趾间关节到伸直位。从术后第1天开始被动功能锻炼，锻炼时间为3周，必要时行趾根神经阻滞。

1.4.2 鸡爪的抓握形态把鸡放在圆形木棍上，观察右足第三趾抓握木棍的形态，并与健侧对比。
1.4.3 第三趾趾深屈肌腱滑移距离和所有关节屈曲角度在右膝处离断右下肢，游离出第三趾趾深屈肌腱的近端，给予0.5 kg的拉力，测量其滑移距离。第三趾所有关节屈曲角度的测量选用手指关节总活动度系统评定方法，手指关节总活动度值为测量掌指关节、近侧指间关节、远侧指间关节三者主动屈曲角度之和减去三者主动伸直受限角度之和，3个关节伸直位以0°为准，过伸角度不计。
评定标准：优，活动范围正常；良，手指关节总活动度>健侧的75%；可，手指关节总活动度>健侧的50%；差，手指关节总活动度<健侧的50%。
1.4.4 肌腱吻合端形态及腱周粘连度分级评定观察肌腱吻合端的形态、质地，腱周粘连度，根据汤锦波等[20]的分级评定法进行评定。
评定标准：Ⅰ级，肌腱周围无粘连；Ⅱ级，薄膜状粘连，薄膜状粘连对腱滑动无影响；Ⅲ级，疏松粘连，粘连处纤维质软和肌腱表面易分离；Ⅳ级，中等致密粘连，粘连处纤维质地中等，有一定移动性；Ⅴ级，致密粘连，粘连处纤维质地较硬，和腱周组织不易分离。
1.4.5 肌腱苏木精-伊红染色和天狼星红染色观察将肌腱吻合端进行苏木精-伊红染色，观察肌腱纤维的走行和每高倍视野下腱细胞的形态，通过Image J软件计算每高倍视野下腱细胞的数量；进行天狼星红染色法染色[21]，将载玻片上黏附的石蜡切片给予烘干、脱水、冲洗，苦昧酸天狼星红液(0.1 g天狼星红溶于100 mL饱和苦味酸液中)37 ℃温箱中浸染1 h，冲洗后改良苏木精液(先将2 g苏木精溶于250 mL无水乙醇，再将17.68 g硫酸铝溶于750 mL蒸馏水中。两液溶解后将其混合，加入0.2 g碘酸钠，最后加入20 mL冰醋酸)染核、自来水反蓝，脱水、透明、封固，观察肌腱纤维的类型和每高倍视野下Ⅰ型、Ⅲ型胶原纤维的含量。
1.4.6 肌腱吻合端羟脯氨酸含量测定采用微量羟脯氨酸测定法测定肌腱吻合端的羟脯氨酸含量[22]。在吻合处两端横形切断肌腱，取包含肌腱断端长约5 mm的肌腱组织，分别浸泡在体积分数10%甲醛中固定过夜、新鲜丙酮过夜，再更换乙醇∶乙醚(1∶1)过夜。60 ℃干燥至恒质量。每一样品取10 mg，在EP管中研磨碎，加入0.3 mL纯水和0.3 mL浓盐酸离心混匀，120 ℃水解2 h。用40%NaOH调pH值至6左右，再用蒸馏水稀释至1.5 mL，12 000 r/min离心15 min，取上清液稀释5倍，按校正曲线，计算羟脯氨酸百分含量。
1.5 主要观察指标各组鸡鸡爪形态、肌腱吻合端形态及腱周粘连程度、第三趾屈趾深肌腱滑移距离和所有关节屈曲角度、肌腱病理形态和羟脯氨酸含量。
1.6 统计学分析应用SPSS 16.0统计学软件进行分析，腱周粘连度分级采用χ2检验，其余检测指标采用方差分析，组间的两两比较采用SNK法分析。P < 0.05为差异有显著性意义。该文统计学方法已经内蒙古医科大学生物统计学专家审核。

讨论

术后预防肌腱粘连最重要的机制是促进内源性愈合[23]，也有研究通过减少外源性愈合以达到预防肌腱粘连的目的，如使用有屏障作用的生物膜性材料、能减少肌腱粘连重要措施的早期功能锻炼[24]，不但促进断端腱细胞的增殖以促进内源性愈合，而且能减少瘢痕长入以减少外源性愈合[25-29]。
肌腱断裂常伴有腱鞘损伤，腱鞘的修复不但为术后功能锻炼提供肌腱滑动基底床、减少瘢痕的长入，而且肌腱在被动功能锻炼时由于肌腱的滑动可以刺激腱鞘分泌滑液，能为肌腱提供高水平的蛋白多糖、细胞因子、补体蛋白和糖酵解酶的环境，从而刺激肌腱断端腱细胞分裂增殖、合成和分泌胶原蛋白，促进肌腱的修复[30-33]。在临床上，腱鞘的损伤有的是由钝器损伤而致，如果有腱鞘部分缺损或挫伤明显，需要清创切除部分腱鞘，这个时候不可强行缝合腱鞘，否则腱鞘会对肌腱有卡压，可用防粘连膜或移植的腱周组织进行修复[34-35]。
腱细胞分泌的细胞外基质最主要是胶原纤维，其中Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维含量最高，在维持肌腱正常的功能中Ⅰ型胶原纤维的作用最大，而Ⅲ型胶原纤维存在于正常肌腱和病变肌腱中[36]，肌腱的修复初期是以细小的Ⅲ型胶原纤维为主，随着修复的逐渐进行，根据吻合端愈合的质量情况逐渐形成粗大的Ⅰ型胶原纤维，如果吻合端进行良好的内源性愈合，断端就如同正常肌腱组织几乎是由粗大的Ⅰ型胶原纤维组成，因此，可以通过吻合端胶原纤维的类型和含量大体判断肌腱的修复情况[21]。羟脯氨酸是脯氨酸经羟基化酶催化而成的，是胶原蛋白特有的氨基酸，其含量可以反映胶原蛋白的合成、代谢情况，通过测量肌腱吻合端羟脯氨酸的含量得知吻合端胶原蛋白的含量，能间接反映肌腱吻合端愈合的情况[22]。
肌腱损伤在愈合过程中有多种生长因子的参与，使得肌腱断端逐渐形成胶原蛋白纤维[36-41]，适度的应力刺激可以促进肌腱干细胞的分化和增殖，增加Ⅰ型胶原纤维的合成[42]；通过鼠在跑步机上训练的模型研究中发现，经过应力训练的老鼠，成纤维细胞被应力刺激转变成了纤维母细胞，从而参与损伤的修复和结构的重建，但如果超负荷或零负荷应力会使肌腱产生分解代谢反应，这样的应力刺激是有害的[43]。肌腱修复后不进行功能锻炼就会像D组的标本，腱周粘连明显、吻合处的组织增生明显。虽然C组通过被动功能锻炼取得了良好的功能，但进行指标检测之前有6例标本与同组相比屈伸功能差异较大，经解剖发现这些样本屈肌腱断裂，断裂率高于其他3组；在观察肌腱缝合端形态时，C组有5例标本的吻合端有分离，断端间是瘢痕愈合，考虑是1 d 3次的被动功能锻炼频率偏高引起的。因此，适当的应力刺激是必须的，但在最低和最高应力负荷之间达到一个平衡是肌腱损伤修复的难题，能够在最佳时间对肌腱施加最佳应力是促进肌腱损伤修复的关键。
陈建海等[44]以三黄鸡为研究对象，通过肌腱修复后的生物力学研究认为，缝合断端的抗张强度在术后4-14 d显著降低，此次实验中的E组没有对鸡爪进行相应的制动，术后5-7 d发现该组全部标本的屈肌腱断裂，也验证了肌腱修复早期抗张强度明显下降的理论。因此，即使缝合法能提供非常大的抗张力，在以鸡为研究对象进行肌腱愈合实验的早期制动是非常有必要的。
在减少肌腱粘连的众多措施中，能提供较大抗张强度的缝合法是最直接、最有效的方法，也是能早期进行功能锻炼的前提条件，每种缝合法都有其优点，但随着医疗理念的进步和医患要求的提高，逐渐暴露出各自的缺点，对缺点进行改良就能优化原来的缝合法。对于跟腱断端多为马尾状的急性跟腱断裂，用传统Giftbox缝合法手术缝线需要锁边缝合，不但对软组织产生绞榨样作用，影响血供，而且会影响跟腱修复后的有效长度、强度以及愈合后的瘢痕。范家强等[45]对传统Giftbox缝合法进行改良，使用改良Giftbox技术治疗急性跟腱断裂的效果确切，跟腱长度和强度恢复良好。随着微创理念的深入，为了在达到尽可能小的影响软组织损伤的前提下能有更好的吻合质量，有学者为了减少手术的创伤将B超技术应用于肌腱缝合的治疗过程中，在超声的监控下不但能使直视缝合法的每一步操作的步骤更为精确，也能更加有效观察断端的缝合质量[46-47]，为断端愈合创造更好的条件，有效短缩了康复时间，减少术后并发症。但传统的缝合方法需要术野足够大才能进行缝合操作，为了适应在超声下操作的微创要求，需要对原有缝合法进行改良，使改良后的缝合法能在较小的术野中进行操作，满足微创的要求。
综合上述，通过动物实验研究改良津下缝合法修复肌腱断端的愈合情况，A、B、C、D组样本未发现有肌腱断端坏死的情况，有力地验证了改良津下缝合法不但能提供较大的抗张力，而且对肌腱断端的血运干扰较小，为缝合法的改良提供了新的思路，并为该缝合法应用于临床提供了关键性的佐证。通过相应指标的检测，进行功能锻炼的A、B、C组都明显好于不行功能锻炼的E组，被动的功能锻炼可以激发吻合端腱性组织蛋白的表达，促进肌腱的愈合，也使得肌腱吻合端的纤维走向更加有序，减少肌腱断端的粘连。进行功能锻炼的A、B、C组中，B组肌腱吻合端的粘连最轻，吻合端的结构接近正常的肌腱组织，因此，改良津下缝合法修复肌腱断端术后的功能锻炼应遵循动作要轻柔、幅度要充分的原则，锻炼方案以早晚各一次，每次5回左右为宜。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

第三趾趾深屈肌腱Ⅱ区损伤模型肌腱粘连的功能锻炼

Functional exercise for tendon adhesion in a model of deep flexor tendon II injury of the third toe

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