同种异体骨髓间充质干细胞输注对MRL/lpr狼疮鼠肾脏CXCL12/CXCR4表达的影响

doi:10.12307/2022.380

中国组织工程研究 ›› 2022, Vol. 26 ›› Issue (19): 3018-3023.doi: 10.12307/2022.380

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同种异体骨髓间充质干细胞输注对MRL/lpr狼疮鼠肾脏CXCL12/CXCR4表达的影响

程孟微，汤郁，马翠，史伟，郑文娟，裘影影，芮金兵，王燕茹

江苏大学附属医院风湿免疫科，江苏省镇江市 212000

收稿日期:2020-12-24 修回日期:2021-02-10 接受日期:2021-07-29 出版日期:2022-07-08 发布日期:2021-12-28
通讯作者: 汤郁，博士，主任医师，江苏大学附属医院风湿免疫科，江苏省镇江市 212000
作者简介:程孟微，女，1996年生，江苏省丰县人，汉族，江苏大学在读硕士，在江苏大学附属医院进行住院医师规范化培训，主要从事骨髓间充质干细胞输注研究。
基金资助:
国家自然科学基金(81571582)，项目负责人：汤郁；江苏省高层次卫生人才“六个一工程”拔尖人才(LGY2017101)，项目负责人：汤郁

Effects of allogeneic bone marrow mesenchymal stem cells infusion on the expression of CXCL12/CXCR4 in the kidney of MRL/lpr lupus mice

Cheng Mengwei, Tang Yu, Ma Cui, Shi Wei, Zheng Wenjuan, Qiu Yingying, Rui Jinbing, Wang Yanru

Department of Rheumatology and Immunology, Affiliated Hospital of Jiangsu University, Zhenjiang 212000, Jiangsu Province, China

Received:2020-12-24 Revised:2021-02-10 Accepted:2021-07-29 Online:2022-07-08 Published:2021-12-28
Contact: Tang Yu, MD, Chief physician, Department of Rheumatology and Immunology, Affiliated Hospital of Jiangsu University, Zhenjiang 212000, Jiangsu Province, China
About author:Cheng Mengwei, Master candidate, Department of Rheumatology and Immunology, Affiliated Hospital of Jiangsu University, Zhenjiang 212000, Jiangsu Province, China
Supported by:
the National Natural Science Foundation of China, No. 81571582 (to TY); the “Six One Project” Top-Notch Talents for High-Level Health Talents in Jiangsu Province, No. LGY2017101 (to TY)

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：
MRL/lpr鼠：是具有代表性的狼疮动物模型之一，它是由LG/J、AKR/J、C3H/Di及C57BL/6四种品系小鼠交配产生；该模型小鼠Fas基因表达缺陷，表现为与系统性红斑狼疮相似的特征，例如T、B细胞异常、淋巴结肿大、抗dsDNA以及抗Sm等抗体滴度高以及关节炎等表现；和系统性红斑狼疮患者一样，MRL/lpr也是雌性发病多，且病情更加严重，故实验采用雌性MRL/lpr狼疮鼠作为研究对象。
CXCL12/CXCR4：CXC趋化因子配体12(chemokine C-X-C motif ligand 12，CXCL12)又称基质细胞源性因子1(stromal cell derived factor-1，SDF-1)，是在多种组织和细胞中均有表达的一种小分子蛋白质，对T、B淋巴细胞以及多种炎症细胞均有较强的趋化作用；CXCR4(CXC motif chemokine receptor 4)是CXCL12的特异性受体，与CXCL12结合后可激活细胞内各种信号通路来完成细胞的迁移趋化。

背景：趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在狼疮肾炎的发病中起到一定作用，探究骨髓间充质干细胞对狼疮小鼠肾脏CXCL12/CXCR4表达的影响对于进一步研究狼疮肾炎的发病机制以及骨髓间充质干细胞对狼疮肾炎的治疗机制有一定意义。
目的：探讨同种异体骨髓间充质干细胞输注对MRL/lpr狼疮鼠外周血和肾脏CXCL12/CXCR4表达的影响。
方法：分离培养C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞，扩增至第3代，细胞浓度为1×109 L-1。选取四五周龄雌性MRL/lpr小鼠15只，分为MRL/lpr组(未进行尾静脉输注)、PBS组(12周龄末注射PBS)、骨髓间充质干细胞组(12周龄末注射骨髓间充质干细胞)，每组5只，另选取5只C57BL/6小鼠为正常对照。各组小鼠在20周龄末处死，采用ELISA法检测各组小鼠外周血血浆中CXCL12的表达；流式细胞分析外周血、肾脏中B淋巴细胞表面CXCR4的表达；免疫组化染色观察肾脏中CXCL12的表达；苏木精-伊红染色观察肾脏病理变化。
结果与结论：①与C57BL/6组相比，MRL/lpr组狼疮鼠外周血血浆和肾脏中CXCL12表达增高，且外周血以及肾脏B淋巴细胞表面CXCR4的表达均增高；②与PBS组相比，骨髓间充质干细胞组狼疮鼠外周血血浆和肾脏中CXCL12表达降低，且外周血以及肾脏B淋巴细胞表面CXCR4的表达均降低；③苏木精-伊红染色观察输注骨髓间充质干细胞后狼疮鼠肾脏炎症改善；④结果表明，MRL/lpr狼疮鼠肾脏中存在CXCL12/CXCR4表达异常，骨髓间充质干细胞输注可能通过影响CXCL12/CXCR4的表达从而起治疗作用。

https://orcid.org/0000-0001-8728-0014 (程孟微)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

关键词: 干细胞, 骨髓间充质干细胞, 狼疮肾炎, 系统性红斑狼疮, 趋化因子, CXCL12, CXCR4

Abstract: BACKGROUND: Chemokine CXCL12 and its receptor CXCR4 play a certain role in the pathogenesis of lupus nephritis, and it is of significance to explore the effect of bone marrow mesenchymal stem cells infusion on the expression of CXCL12/CXCR4 in lupus kidney for further study of the pathogenesis of lupus nephritis and the mechanism of bone marrow mesenchymal stem cells in the treatment of lupus nephritis.
OBJECTIVE: To investigate the effect of allogeneic bone marrow mesenchymal stem cell infusion on the expression of CXCL12/CXCR4 in the kidney of MRL/lpr lupus mice.
METHODS: Bone marrow mesenchymal stem cells of C57BL/6 mice were isolated and cultured, expanded to the third passage, and the cell concentration was 1×109 L-1. Totally 15 female MRL/lpr mice aged four to five weeks were selected and divided into MRL/lpr group (no tail vein infusion), PBS group (PBS injection at the end of 12 weeks), and bone marrow mesenchymal stem cell group (injection of bone marrow mesenchymal stem cells at the end of 12 weeks) (n=5 per group). An additional five C57BL/6 mice were selected as normal controls. Mice in each group were sacrificed at the end of 20 weeks of age. The expression of CXCL12 in peripheral blood plasma was detected by ELISA. The expression of CXCR4 on B lymphocyte surface in peripheral blood and kidney was analyzed by flow cytometry. The expression of CXCL12 in the kidney was demonstrated by immunohistochemistry. The pathological changes of the kidney tissue were observed by hematoxylin-eosin staining.
RESULTS AND CONCLUSION: (1) Compared with the C57BL/6 group, the expression of CXCL12 in peripheral blood plasma and kidney was increased, and the expression of CXCR4 on B lymphocyte surface in peripheral blood and kidney was also increased in the MRL/lpr group. (2) Compared with PBS group, the expression levels of CXCL12 in peripheral blood plasma and kidney of lupus mice were decreased, and CXCR4 expression levels on the surface of B lymphocytes in peripheral blood and kidney of lupus mice were similarly decreased in the bone marrow mesenchymal stem cell group. (3) Hematoxylin-eosin staining suggested that kidney injury was relieved in lupus mice after infusion of bone marrow mesenchymal stem cells. (4) It is concluded that there is abnormal expression of CXCL12/CXCR4 in the kidney of MRL/lpr lupus mice, and bone marrow mesenchymal stem cell infusion may play a therapeutic role by affecting the expression of CXCL12/CXCR4.

Key words: stem cells, bone marrow mesenchymal stem cells, lupus nephritis, systemic lupus erythematosus, chemokine, CXCL12, CXCR4

中图分类号:

程孟微, 汤郁, 马翠, 史伟, 郑文娟, 裘影影, 芮金兵, 王燕茹. 同种异体骨髓间充质干细胞输注对MRL/lpr狼疮鼠肾脏CXCL12/CXCR4表达的影响[J]. 中国组织工程研究, 2022, 26(19): 3018-3023.

Cheng Mengwei, Tang Yu, Ma Cui, Shi Wei, Zheng Wenjuan, Qiu Yingying, Rui Jinbing, Wang Yanru. Effects of allogeneic bone marrow mesenchymal stem cells infusion on the expression of CXCL12/CXCR4 in the kidney of MRL/lpr lupus mice[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2022, 26(19): 3018-3023.

图/表（结果） 4

2.1 骨髓间充质干细胞形态采用全骨髓贴壁筛选法培养骨髓间充质干细胞，培养48 h后原代细胞出现聚集贴壁生长，见图1A，当细胞生长至汇合度达80%以上进行传代，随着培养代数的增加，细胞逐渐从圆形逐渐变为梭形，至第3代时，形态呈均一的长梭形，见图1B。

.2 各组小鼠外周血血浆、肾脏中CXCL12的表达以及B淋巴细胞表面CXCR4的表达 ELISA检测结果显示，与C57BL/6组比较，20周龄MRL/lpr组小鼠外周血血浆中CXCL12表达增高[(4 669.0±145.7) ng/L vs. (3 088.0±738.6) ng/L，P < 0.05，n=5]，与PBS组相比，骨髓间充质干细胞组小鼠外周血血浆中CXCL12表达减少[(2 198±192.5) ng/L vs. (4 031.0±451.4) ng/L， P < 0.01，n=5]，见图2A。
免疫组化染色显示，与C57BL/6组相比，MRL/lpr组小鼠肾小球和肾小管中CXCL12表达均增高，骨髓间充质干细胞组小鼠肾小球和肾小管中CXCL12表达降低，见图2B。
流式细胞分析结果显示，与C57BL/6组相比，MRL/lpr组小鼠外周血B淋巴细胞CXCR4的表达增高[(86.73±1.99)% vs. (43.38±8.65)%，P < 0.01，n=5]及肾脏B淋巴细胞CXCR4的表达增高[(67.4±2.14)% vs. (59.07±1.56)%，P < 0.05，n=5]，与PBS组相比，骨髓间充质干细胞组小鼠外周血B淋巴细胞CXCR4的表达降低[(24.53±6.39)% vs. (79.28±10.87)%，P < 0.05，n=5]及肾脏中B淋巴细胞CXCR4的表达降低[(53.77±6.55)% vs. (81.15±3.20)%，P < 0.01，n=5]，见图2C，D。

2.3 骨髓间充质干细胞输注对MRL/lpr小鼠肾脏病理的影响苏木精-伊红染色显示，C57BL/6小鼠肾脏结构清晰、完整，未见明显系膜增生和炎症细胞浸润。与C57BL/6小鼠相比，MRL/lpr狼疮鼠肾脏组织结构不完整，肾小球、肾小管以及肾间质出现了不同程度的病理损伤，肾小球内系膜细胞数量增多，系膜基质略增生，部分肾小球出现硬化，肾小球毛细血管基底膜略增厚，大量炎症细胞浸润在肾间质区域，肾小管出现肿胀、坏死、萎缩等情况。与输注PBS的MRL/lpr鼠相比，骨髓间充质干细胞输注后狼疮鼠肾脏中系膜增生有所减轻，肾间质内炎性细胞浸润明显减少，肾小管肿胀程度轻，见图3。

2.4 生物相容性从输注开始至实验终点观察各组小鼠的生存情况、有无致敏反应、皮肤完整度、毛发以及活动能力，结果发现骨髓间充质干细胞输注组MRL/lpr小鼠直至20周龄均未发生死亡以及致敏反应，且与PBS组相比，骨髓间充质干细胞组小鼠出现的皮损大小以及数量、毛发量以及活动能力均无明显差异。这些观察结果可说明骨髓间充质干细胞输注与宿主呈现良好的生物相容性。

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引言

系统性红斑狼疮是一种系统性自身免疫性疾病，受多种遗传和环境因素的影响，可累及全身多个脏器，肾脏是系统性红斑狼疮最常受累的器官之一。狼疮肾炎主要表现为蛋白尿、血尿、水肿甚至肾衰竭等，患者不仅预后差，死亡风险也明显增高[1]。目前临床上对于狼疮肾炎的治疗主要是糖皮质激素、免疫抑制剂以及新型生物制剂等，治疗同时也带来了多种并发症，所以急需一种新的治疗方法[2]。经过多年动物实验取得的临床前研究结果显示同种异体间充质干细胞输注可以有效抑制狼疮鼠疾病进展[3-6]。近年来也有临床研究表明间充质干细胞治疗系统性红斑狼疮具有良好的安全性和效果[7-8]，而同种异体骨髓间充质干细胞改善难治性系统性红斑狼疮疾病活动性以及稳定狼疮肾炎患者的肾功能亦被证明安全有效[9-10]，但其作用机制尚未完全明确，目前主要的观点是骨髓间充质干细胞可能对系统性红斑狼疮及狼疮肾炎中异常增殖及活化的T、B细胞等具有免疫抑制作用[11]，或是通过分泌细胞因子影响淋巴细胞表面趋化因子的表达来达到免疫调节作用[12]，亦或是直接趋化至受损部位发挥组织修复作用[13-14]。
CXCL12是能使细胞发生趋化运动的小分子细胞因子，CXCR4是趋化因子CXCL12的受体，在B细胞、T细胞、单核细胞等多种细胞表面表达。研究表明，许多病变组织中CXCL12/CXCR4的表达均显著上调[15-16]，在调节炎症免疫反应过程中发挥着重要作用。国内外多个研究发现B淋巴细胞表面CXCR4的高表达以及肾脏中CXCL12的高表达可能参与了狼疮肾炎的发病[17-18]，CXCL12/CXCR4轴在狼疮肾炎致病过程中可能起到了促进淋巴细胞以及其他炎症细胞向肾脏募集浸润的部分作用，使用CXCR4拮抗剂AMD3100阻断CXCL12/CXCR4轴能够减轻狼疮鼠的过度免疫反应，并且能减少蛋白尿、改善肾脏病理[19]。该研究将骨髓间充质干细胞改善狼疮肾炎与CXCL12/CXCR4的异常表达联系起来，为进一步探讨狼疮肾炎的发病机制以及骨髓间充质干细胞治疗狼疮肾炎的有效性机制提供依据。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

材料方法

1.1 设计随机对照动物实验，两组样本之间外周血和肾脏CXCL12/CXCR4表达比较采用t检验分析。
1.2 时间及地点实验于2020年4-12月在江苏大学动物实验中心和江苏大学附属医院中心实验室完成。
1.3 材料
1.3.1 实验动物雌性MRL/lpr小鼠15只，SPF级，四五周龄，平均体质量约15 g，购自上海灵畅生物科技有限公司，许可证号：SCXK(沪)2018-0003。雌性C57BL/6小鼠6只，SPF 级，6周龄，平均体质量约18 g，购自江苏大学实验动物中心，许可证号：SCXK(苏)2018-0012。以上实验小鼠均于江苏大学动物实验中心SPF级饲养区饲养至20周龄。
1.3.2 实验试剂胎牛血清、低糖DMEM培养液(美国Gibco公司)；小鼠CXCL12 ELISA试剂盒(福麦斯生物科技有限公司)；兔多克隆抗CXCL12抗体(英国Abcam公司)；辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG二抗(凯基生物，中国)；PE-CD19抗体(eBioscienceTM，美国)；山羊多克隆抗鼠CXCR4(英国Abcam公司)；驴抗山羊IgG H＆L二抗(英国Abcam公司)；CANTO10C流式细胞仪(美国BD公司)；DP72正置显微镜(Olympus，日本)。
1.4 实验方法
1.4.1 细胞培养采用全骨髓贴壁筛选法分离培养骨髓间充质干细胞，将1只C57BL/6小鼠麻醉后处死，体积分数为75%乙醇浸泡30 min，无菌环境下充分暴露股骨和胫骨，PBS冲洗骨髓腔，收集冲洗液，1 200 r/min离心5 min，弃上清，加入含体积分数为20%胎牛血清、100 U/mL青霉素和链霉素的低糖DMEM培养液，置于37 ℃、体积分数为5%CO2培养箱中进行原代培养。培养48 h后首次全量换液，弃去没有贴壁的细胞，之后每3 d半量换液1次，原代细胞生长至汇合度达80%以上，2.5 g/L胰蛋白酶消化进行传代。扩增至第3代骨髓间充质干细胞进行成骨鉴定或用于骨髓间充质干细胞移植实验。

1.4.2 实验动物分组 MRL/lpr小鼠15只、C57BL/6小鼠5只均于江苏大学动物实验中心SPF级饲养区饲养至20周龄，分为4组，每组5只小鼠。①C57BL/6组：未进行尾静脉输注；②MRL/lpr组：MRL/lpr小鼠未进行尾静脉输注；③骨髓间充质干细胞组：MRL/lpr 小鼠于12周龄末经尾静脉输注骨髓间充质干细胞，输注量为0.01 mL/g，细胞浓度为1×109 L-1)；④PBS组：MRL/lpr 小鼠于12周龄末经尾静脉输注PBS，输注量为0.01 mL/g。
1.5 主要观察指标
1.5.1 ELISA检测外周血血浆中CXCL12水平各组小鼠饲养至20周龄时，通过尾静脉注射2%戊巴比妥钠进行麻醉后从各组小鼠眼眶静脉丛采集外周血约1 mL，使用EDTA抗凝，2 500 r/min离心5 min，吸取上清约200 μL，-80 ℃可暂时保存，避免反复冻融，最后使用时严格按照ELISA试剂盒说明书进行操作。
1.5.2 流式细胞术检测外周血及肾脏中CXCR4+CD19+细胞比例上述各组小鼠留取外周血上清后，剩余外周血混匀，使用红细胞裂解液裂解红细胞后进行有核细胞计数，使用含体积分数为5%胎牛血清的PBS重悬，调整终浓度为1×1010 L-1，然后注射过量戊巴比妥钠麻醉处死小鼠后留取肾脏，每只小鼠取约1/3大小的肾脏进行研磨过筛制成单细胞悬液，剩余的肾脏组织浸泡于甲醛溶液中固定，用于苏木精-伊红染色以及免疫组织化学染色，制成的细胞悬液使用含体积分数为5%胎牛血清的PBS重悬、离心、计数，调整最终浓度为1×1010 L-1，将上述外周血及肾脏细胞悬液各取100 μL与PE-CD19、山羊多克隆抗鼠CXCR4抗体避光孵育20 min，然后每管加入1 mL含体积分数为5%胎牛血清的PBS，1 000 r/min离心10 min，弃上清，再加入100 μL含体积分数为5%胎牛血清的PBS重悬并加入驴抗山羊IgG H＆L二抗避光孵育20 min，再次用1 mL含体积分数为5%胎牛血清的PBS清洗、离心、弃上清，最后加入200 μL含体积分数为5%胎牛血清的PBS重悬，上流式细胞仪检测。
1.5.3 苏木精-伊红染色观察各组小鼠肾脏组织结构及免疫组织化学染色观察肾脏中CXCL12的表达 1.5.2中所述各组小鼠剩余的肾脏组织浸泡于甲醛溶液中固定，然后分别经过脱水、浸蜡、包埋、切片处理后，每组小鼠肾脏组织切片一部分进行苏木精-伊红染色，然后脱水透明、中性树胶封固后在光学显微镜下观察各组小鼠肾脏病理变化；另一部分切片用于免疫组织化学染色，具体操作流程为：切片用二甲苯脱脂，经各级乙醇至水洗，滴加100 μL(按1∶25稀释)兔多克隆抗体抗CXCL12，室温孵育2 h，PBS冲洗，再滴加100 μL(按1∶100稀释)辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG二抗室温孵育2 h，PBS冲洗，使用DAB显色剂显色，复染，然后脱水透明、中性树胶封固，最后光学显微镜观察组织切片染色情况。
1.6 统计学分析采用SPSS 20.0软件进行分析，数据以x±s表示，两组样本之间比较采用t检验，P≤0.05为差异有显著性意义。

讨论

狼疮肾炎是系统性红斑狼疮主要发病和死亡的原因之一，约有10%的狼疮肾炎患者会发展为终末期肾衰竭[20]，肾脏高表达CXCL12后募集和激活炎症细胞进而驱动肾脏炎症可能是潜在的致病因素之一[17，21]。目前，临床上对于狼疮肾炎患者的标准治疗主要是糖皮质激素和以环磷酰胺、吗替麦考酚酯为主的免疫抑制剂，以及近年来的新型生物制剂包括利妥昔单抗、贝利木单抗等；尽管这些治疗的积极应用，仍有20%的狼疮肾炎患者对治疗无反应，且长期用药后发生感染、骨质疏松、耐药、肿瘤的概率升高[22]。一项长期的随访研究结果表明狼疮肾炎患者在骨髓间充质干细胞输注治疗后5年内蛋白尿明显减少，生存率也有所改善[10]，骨髓间充质干细胞治疗狼疮肾炎显现出了广泛前景，但治疗机制的不明确是限制其广泛临床应用的因素之一[14]。
为了研究明确骨髓间充质干细胞的治疗机制，该实验使用了MRL/lpr狼疮鼠，该小鼠模型是一种自发性狼疮模型鼠，其病理生理变化与人类系统性红斑狼疮相似[23]，通常在8-10周龄时出现多个器官的血管周围炎性变化，蛋白尿会在12周龄开始出现，16-24周龄时逐渐出现多系统慢性疾病改变[24]。课题组一直使用该模型鼠进行系统性红斑狼疮损伤机制研究及干细胞治疗的相关研究[3，25-26]。
如前所述，研究发现狼疮肾炎的发生可能与高表达CXCR4的B淋巴细胞及其他炎症细胞向肾脏趋化致病[27]，该实验结果与其基本一致，与C57BL/6小鼠相比，MRL/lpr小鼠外周血及肾脏中CXCL12表达升高，且在外周血以及肾脏中B淋巴细胞也均高表达CXCR4，推测MRL/lpr小鼠肾脏内CXCL12表达升高，通过吸引外周血中高表达CXCR4的B淋巴细胞迁移至肾脏，导致肾脏炎症。
研究表明，骨髓间充质干细胞具有向炎症部位聚集的特点[28]，炎症环境似乎可以增强骨髓间充质干细胞的作用，高表达CXCL12的肾脏可能更易吸引骨髓间充质干细胞到达炎症部位进行组织修复或分泌细胞因子进行免疫调节，从而减轻CXCL12的高表达状态，改善炎症，达到治疗效果。有人认为趋化因子CXCL12与其受体CXCR4相互作用趋化细胞至炎症部位，这一现象似乎可以通过吸引、注入或内源性诱导来增强干细胞趋化到患病区域的能力用以改善干细胞治疗结果[29]。
间充质干细胞可来源于多种组织，如骨髓、脐带、脂肪、胎盘等，目前研究显示各种组织来源的间充质干细胞均具有自我复制更新、多向分化、组织修复和免疫调节能力[30]。在动物体内及体外研究中，多种组织来源的间充质干细胞移植可降低狼疮肾脏炎症程度、改善肾功能[28，31-32]，且已有多中心临床研究提示骨髓间充质干细胞及脐带间充质干细胞移植治疗狼疮患者具有安全性和有效性[33]，而骨髓来源间充质干细胞具有较低的免疫原性[34]，更具有移植优势。目前其作用机制尚未完全明确，有学者认为骨髓间充质干细胞可以向受损器官迁移促进相应祖细胞定向分化来完成组织修复[35-36]；也有部分学者认为骨髓间充质干细胞全身输注后，能迁移到靶组织的很少，骨髓间充质干细胞的免疫调节作用可能是其治疗的主要机制[13-14]，例如通过分泌细胞因子可间接影响免疫细胞趋化因子的表达[12]，或者抑制包括T、B淋巴细胞等在内的多种炎症细胞的增殖[37]，或者减弱多种免疫细胞的分泌功能来改善自身免疫性疾病[38]；还有研究发现间充质干细胞可通过分泌细胞因子上调调节性B细胞以及调节性T细胞的数量来抑制过度炎症反应[31，39-40]。研究结果显示，与输注PBS的对照组相比，输注骨髓间充质干细胞后，不管是外周血血浆还是肾脏中CXCL12表达均降低，B淋巴细胞表面CXCR4的表达也是降低的，苏木精-伊红染色提示病理改善，肾炎病理得到改善可能是靶器官中CXCL12/CXCR4表达减低的结果。骨髓间充质干细胞输注通过影响趋化因子CXCL12及其受体CXCR4的表达改善狼疮肾炎可能是其免疫调节的机制之一。该研究结果只是说明一种现象，关于骨髓间充质干细胞是通过哪种分子机制来影响肾脏中CXCL12以及B淋巴细胞表面CXCR4的表达，课题组正在进行更深入的研究。
综上所述，研究发现MRL/lpr小鼠肾炎发病与CXCL12/CXCR4高表达相关，骨髓间充质干细胞输注后可通过影响B细胞表面CXCR4的表达和肾脏中CXCL12的表达来改善肾脏病理，为骨髓间充质干细胞输注改善狼疮肾炎的机制研究提供新的理论依据。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

同种异体骨髓间充质干细胞输注对MRL/lpr狼疮鼠肾脏CXCL12/CXCR4表达的影响

Effects of allogeneic bone marrow mesenchymal stem cells infusion on the expression of CXCL12/CXCR4 in the kidney of MRL/lpr lupus mice

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