人脐带间充质干细胞过表达白细胞介素8受体可抑制炎症反应和促进血管修复

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2124

中国组织工程研究 ›› 2021, Vol. 25 ›› Issue (1): 61-66.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2124

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人脐带间充质干细胞过表达白细胞介素8受体可抑制炎症反应和促进血管修复

朱兵兵，何海斌，邓江华，王文强，慕晓玲

石河子大学医学院，新疆维吾尔自治区石河子市 832000

收稿日期:2019-11-01 修回日期:2019-11-12 接受日期:2020-01-07 出版日期:2021-01-08 发布日期:2020-10-29
通讯作者: 慕晓玲，博士，教授，石河子大学医学院，新疆维吾尔自治区石河子市 832000
作者简介:朱兵兵，女，1995年生，新疆维吾尔自治区沙湾县人，汉族，在读硕士，主要从事干细胞的基础与应用研究。
基金资助:
新疆兵团社会发展科技攻关与成果转化计划(2016AD013)；自治区研究生教育创新计划科研创新项目(XJGRI201604)

Human umbilical cord mesenchymal stem cells overexpressing interleukin 8 receptor inhibit inflammation and promote vascular repair

Zhu Bingbing, He Haibin, Deng Jianghua, Wang Wenqiang, Mu Xiaoling

School of Medicine, Shihezi University, Shihezi 832000, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China

Received:2019-11-01 Revised:2019-11-12 Accepted:2020-01-07 Online:2021-01-08 Published:2020-10-29
Contact: Mu Xiaoling, MD, Professor, School of Medicine, Shihezi University, Shihezi 832000, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China
About author:Zhu Bingbing, Master candidate, School of Medicine, Shihezi University, Shihezi 832000, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China
Supported by:
新疆兵团社会发展科技攻关与成果转化计划(2016AD013)，项目负责人：慕晓玲；自治区研究生教育创新计划科研创新项目(XJGRI201604)

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：
脐带间充质干细胞：具有自我更新和多向分化潜能，免受异体移植排斥反应，通过旁分泌和自分泌作用释放多种生物活性因子，抑制炎症反应，进行免疫调节，促进缺血组织的再生和修复。
白细胞介素8受体：存在于多种细胞膜表面，包括内皮细胞、上皮细胞、单核细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞和成纤维细胞等多种细胞，当球囊损伤颈动脉后释放大量白细胞介素8，白细胞介素8受体能够与白细胞介素8结合，继而产生一系列生物学反应。

摘要
背景：血管损伤是球囊扩张术后常见的并发症，脐带间充质干细胞的发展为治疗血管损伤提供了新方法。
目的：探讨转染白细胞介素8受体(IL-8RA/B)腺病毒的人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUCMSCs)修复损伤血管的机制。
方法：培养原代人脐带间充质干细胞与脐静脉内皮细胞，转染含白细胞介素8重组腺病毒荧光载体。建立大鼠颈动脉损伤模型，将SD大鼠随机分为4组：IL-8RA/B-hUCMSCs组、IL-8RA/B-hUVECs组、Null-hUCMSCs组、对照组，手术后1，3，5 h分别从尾静脉输入0.5×106相应细胞(500 μL)，对照组输注同等剂量的生理盐水，30 min后取颈动脉血管，观测绿色荧光蛋白的表达；24 h后采用ELISA测定血清中炎性因子和抗炎因子水平；24 h后采用免疫组化观察中性粒细胞和单核/巨噬细胞的浸润；14 d后伊文思蓝染色观察血管再内皮化及纤维化；28 d后采用苏木精-伊红染色观察血管新内膜增生。
结果与结论：①移植细胞后30 min，观察到损伤血管内膜有绿色荧光蛋白的表达，IL-8RA/B-hUCMSCs组荧光表达量高于其他3组；②移植细胞后24 h，IL-8RA/B-hUCMSCs组血清中炎性因子水平明显低于其他3组，而抗炎因子白细胞介素10水平高于其他3组(P < 0.05)，并且IL-8RA/B-hUCMSCs 组炎性细胞浸润明显减少；③移植细胞后14 d，过表达白细胞介素8受体的hUCMSCs促进损伤血管再内皮化，减少血管纤维化；④移植细胞后28 d，IL-8RA/B-hUCMSCs明显减少损伤血管新内膜增生；⑤结果表明，白细胞介素8受体提高hUCMSCs的靶向归巢能力，使hUCMSCs能定向迁移至血管损伤部位，抑制炎症，促进血管再内皮化，减少新内膜增生，促进血管修复。

ORCID:0000-0003-3713-7468(朱兵兵)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

关键词: 人脐带间充质干细胞, 白细胞介素8受体, 血管损伤, 炎性因子, 血管内皮

Abstract: Abstract
BACKGROUND: Vascular injury is a common complication after balloon dilatation. The development of umbilical cord mesenchymal stem cells (UC-MSCs) provides a new method for treating vascular injury.
OBJECTIVE: To investigate the mechanism underlying the repair of damaged blood vessels by human UC-MSCs (hUC-MSCs) transfected with interleukin-8RA/B (IL-8RA/B) adenovirus.
METHODS: hUC-MSCs and human umbilical vein endothelial cells (hUVECs) were collected and transfected with adenovirus vectors containing human IL-8RA and/or IL-8RB cDNAs and green fluorescent protein. A rat model of carotid artery injury was established. Sprague-Dawley rats were randomly divided into four groups: IL-8RA/B-hUCMSCs group, Il-8ra/B-hUVECs group, Null-hUCMSCs group, and control group, followed by injection of 0.5×106 corresponding cells
(500 μL) and same volume of normal saline via the tail vein respectively at 1, 3, and 5 hours post-surgery. After 30 minutes of injection, the carotid artery was taken and the expression of green fluorescent protein was observed. After 24 hours, the serum levels of inflammatory and anti-inflammatory factors were measured by ELISA; and the infiltration of neutrophil cells and mononuclear macrophages was observed by immunohistochemistry. After 14 days, Evans blue staining was used to observe vascular endothelialization and fibrosis. After 28 days, the neointimal hyperplasia was observed by hematoxylin-eosin staining.
RESULTS AND CONCLUSION: (1) After 30 minutes of IL-8RA/B-hUC-MSCs infusion, the expression of green fluorescent protein was observed in the injured vascular intima, and the fluorescence expression was higher than that of the other three groups. (2) After 24 hours of IL-8RA/B-hUC-MSCs infusion, the expression of inflammatory factors in the serum was significantly lower than that of the other three groups, while the expression of anti-inflammatory factor interleukin-10 was higher than that of the other three groups (P < 0.05). In addition, inflammatory cell infiltration in the IL-8RA/B-hUC-MSCs group decreased significantly. (3) hUC-MSCs overexpressing interleukin-8 receptor promoted re-endothelialization of injured vessels and reduced vascular fibrosis after 14 days of infusion. (4) IL-8RA/B-hUC-MSCs reduced vascular neointimal hyperplasia after 28 days of infusion. (5) Interleukin-8 receptor enhances the targeted homing ability of hUC-MSCs, allowing MSCs to migrate to the site of vascular injury, inhibit inflammation, reduce neointimal hyperplasia, and promote vascular repair.

Key words: human umbilical cord mesenchymal stem cells, interleukin-8RA/B, vascular injury, inflammatory factor, vascular endothelium

中图分类号:

朱兵兵, 何海斌, 邓江华, 王文强, 慕晓玲. 人脐带间充质干细胞过表达白细胞介素8受体可抑制炎症反应和促进血管修复[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(1): 61-66.

Zhu Bingbing, He Haibin, Deng Jianghua, Wang Wenqiang, Mu Xiaoling. Human umbilical cord mesenchymal stem cells overexpressing interleukin 8 receptor inhibit inflammation and promote vascular repair[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2021, 25(1): 61-66.

图/表（结果） 8

2.1 实验动物数量分析随机选取100只雄性大鼠，4只造模失败，96只大鼠造模成功。
2.2 原代hUCMSCs和hUVECs及过表达IL-8受体的细胞形态原代hUCMSCs在培养14 d后开始贴壁生长，第3代细胞呈长梭形，排列紧密，典型集落生长，增殖能力旺盛，待3-5 d融合生长至80%-90%时可用于实验。hUVECs呈贴壁生长，扁平短梭形。细胞转染IL-8RA/B腺病毒(MOI=100)后，在倒置荧光显微镜下观测发现85%左右的细胞表达GFP，见图1。

2.3 构建颈动脉内膜损伤模型正常颈动脉内膜凹凸不平，内膜呈“波浪形”，有内皮细胞单层排列。颈动脉球囊扩张术后颈动脉内膜剥脱，大部分内皮细胞丢失，提示成功构建颈动脉损伤模型，见图2。

2.4 过表达IL-8受体促进hUCMSCs向损伤血管的归巢移植细胞后30 min， IL-8RA/B-hUCMSCs组颈动脉中绿色荧光表达最多，为(67.04±2.97)%，IL-8RA/B-hUCECs组和Null-hUCMSCs组荧光表达较低，分别为(51.88±4.37)%和(40.43±3.76)%，对照组未发现绿色荧光表达，各组之间差异有显著性意义
(P < 0.05)，见图3。

2.5 过表达IL-8RA/B-hUCMSCs抑制炎症因子的表达通过ELISA检测腹主动脉血中炎性因子水平。与对照组比较，3个细胞治疗组炎性因子白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、血管细胞黏附分子1、P-选择素、白细胞介素1β、中性粒细胞趋化因子2β、核糖体蛋白S9和单核细胞趋化因子水平均明显降低，其中IL-8RA/B-hUCMSCs组最低。IL-8RA/ B-hUCMSCs组抗炎因子白细胞介素10水平最高。结果表明IL-8RA/B-hUCMSCs能够显著抑制炎症反应，见图4。

2.6 过表达IL-8RA/B-hUCMSCs减少损伤血管炎性细胞的浸润在移植细胞后24 h，对照组中性粒细胞和单核/巨噬细胞浸润明显增多，IL-8RA/B-hUVECs组和Null- HucMSCs组比较无明显差异。过表达IL-8RA/B-hUCMSCs组中性粒细胞和单核/巨噬细胞浸润最少，见图5。

2.7 过表达IL-8RA/B-hUCMSCs促进血管的再内皮化移植细胞后14 d进行伊文思蓝染色，IL-8RA/B-hUCMSCs组(2.34±0.29)染色最浅，对照组(6.98±0.38)蓝色最深，而IL-8RA/B-hUCECs组(3.37±0.41)和Null-hUCMSCs组(4.92±0.96)之间差异无显著性意义，见图6。

2.8 过表达IL-8RA/B-hUCMSCs减少损伤血管纤维化移植细胞后14 d，纤维粘连蛋白在IL-8RA/B-hUCMSCs组表达明显减少，对照组表达最多，而IL-8RA/B-hUCECs组和Null-hUCMSCs组之间差异无显著性意义，见图7。

2.9 过表达IL-8RA/B-hUCMSCs减少血管新内膜的增生在大鼠输注细胞后28 d进行苏木精-伊红染色，与对照组(58.09±0.74)比较，Null-hUCMSCs组(14.73±1.08)、IL-8RA/B-hUVECs组(10.83±1.93)、过表达IL-8RA/ B-hUCMSCs组(3.75±1.70)新内膜/中膜(I/M)面积分别减少了71.6%，78.3%和88.3%，过表达IL-8RA/B-hUCMSCs组明显减少新内膜增生，其他组内膜纤维化明显，见图8。

参考文献

引言

心血管疾病的发病率逐年升高，成为中国居民死亡的主要原因[1]，多种因素造成血管内皮损伤，引发炎症，导致血管再狭窄及血管功能障碍，诱发心血管疾病，包括心脑血管病变和血管栓塞性病变[2]，因此抑制损伤介导的炎症反应是防止血管疾病发展的关键，也是治疗损伤的根源。现如今，药物治疗如他汀类、阿司匹林等药物不能从根本上治疗血管损伤[3]；手术方法如经皮冠状动脉成形术和血管支架术等创伤性治疗虽成为主要的治疗手段，但会造成血管内膜再次损伤及血管过度增生导致管腔进一步狭窄。干细胞移植是抑制炎症、治疗内皮损伤最有前景的方案。
间充质干细胞被认为是再生医学领域最有潜力的细
胞[4]。人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal
stem cells，hUCMSCs)具备许多优点，例如来源广泛、容易获取、成本低廉、低免疫原性[5]、无排斥反应、无伦理争议、体外增殖和分化能力强，参与血管形成及多种组织的修复，具有免疫调节作用[6-7]。移植到体内的间充质干细胞可以分泌大量的细胞因子，加速细胞迁移到损伤部位，促使细胞的增殖和分化，加快伤口愈合。
白细胞介素8(Interleukin-8，IL-8)属于炎性因子，由多种细胞产生，包括成纤维细胞、内皮细胞、血单核细胞
等[8]。在组织损伤早期，会产生大量的IL-8因子，IL-8与其受体结合可以产生特异性的生物学功能，包括促进炎性细胞迁移、黏附，引发炎症反应，影响损伤血管的愈合。中性粒细胞是进行免疫应答最早的细胞，其膜表面含有大量的IL-8受体，当血管损伤时，释放大量的IL-8，诱导中性粒细胞向损伤处迁移、浸润，产生炎症[9]。研究表明，过表达IL-8
RA/B的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells，hUVECs)可以模仿中性粒细胞，浸润到损伤血管，与中性粒细胞竞争性结合损伤部位的IL-8，从而减少中性粒细胞浸润和局部炎症反应，促进血管内皮再生和组织修复[10]。过表达IL-8RA/B的细胞可以抑制损伤区域的炎症反应，减少炎性细胞的分泌，抑制血管纤维化增生，维持血管内皮的完整性，促进组织修复。内皮细胞是血管内的单层细胞，呈扁平短梭形，促进相邻细胞之间的连接，从而将血管及血液分隔，并在血管内进行物质信息交流。当血管发生损伤、炎症、衰老、心血管疾病等病理生理过程时，内皮细胞的屏障功能发生障碍，促炎递质表达增多，提高毛细血管的通透性，延缓组织愈合[11]。血管修复依赖内皮细胞的增殖和迁移，但是内皮细胞来源局限，体内移植存活率低，迁移能力弱，不能有效治疗血管损伤，影响血管修复。因此推测hUCMSCs装载IL-8受体后能促进向损伤血管的归巢和加速血管内皮的修复。
该实验将hUCMSCs装载IL-8受体，静脉输注给血管损伤动物，研究IL-8受体对hUCMSCs生物活性及修复血管内皮功能的影响。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

材料方法

1.1 设计动物体内实验。
1.2 时间及地点实验于2017年9月至2019年9月在石河子大学医学院重点实验室完成。
1.3 材料
1.3.1 实验动物雄性健康SD大鼠100只，购买于新疆医科大学动物实验中心，10-12周龄，体质量为(300±50) g，适应性饲养7-10 d。
1.3.2 实验试剂和仪器 DMEM低糖培养基、胎牛血清、Ⅱ型胶原酶(美国Gibco公司)；青霉素和链霉素、ECM培养基(上海索莱宝生物科技有限公司)；MPM 6酶标仪(美国Bio-RAD公司)；普通离心机(中国飞鸽牌系列)。
1.4 方法
1.4.1 hUCMSCs的分离和培养脐带来源于石河子大学第一附属医院产科健康剖宫产产妇，获得石河子大学第一附属医院伦理委员会批准和产妇的知情同意。取新鲜脐带，剔除中间的3根血管，取中间的华通胶组织(Wharton jelly)，剪碎成1.0-2.0 mm3的小块，放置于培养皿中，将皿倒置放入37 ℃、体积分数为5%CO2恒温箱培养24 h，组织块附着在皿底，添加含体积分数为10%胎牛血清的低糖DMEM培养基，培养4 d进行首次换液，待细胞长至85%左右，用0.125%胰蛋白酶消化传代，取第3代细胞备用。
1.4.2 hUVECs的分离和培养将10-20 cm的脐带放入PBS中清洗，找到脐静脉，注入Ⅱ型胶原酶消化12 min，加入内皮细胞培养基终止反应，900 r/min离心5 min，将细胞沉淀吹打混匀后，收集到细胞培养瓶，37 ℃、体积分数为5%CO2恒温箱培养，待细胞长至85%左右，用胰酶按 1∶2或1∶3进行消化传代，取第3代细胞备用。
1.4.3 重腺病毒转染细胞重组腺病毒由美国阿拉巴马大学医学院赠送。取第3代hUCMSCs和hUVECs，按1×106密度接种6孔板中，细胞长至65%-75%时，将IL-8受体荧光腺病毒(pAd-IL-8RA-GFP、pAd-IL-8RB-GFP)和空载体荧光腺病毒(pAd-Null-GFP)分别与细胞共培养(病毒的滴度为1.58×
1010 PFU/mL)，加入无血清DMEM培养基，培养过夜，换液后再加入含体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12培养基继续培养48 h，在荧光显微镜下观测GFP的表达。
1.4.4 颈动脉内膜损伤模型制备及细胞移植实验前大鼠空腹8 h，10%水合氯醛腹腔注射麻醉，无菌操作剥离出颈总、颈内和颈外动脉，在距离血管分叉0.5 cm处结扎颈外动脉，同时颈内动脉和颈总动脉用大鼠动脉夹固定，在颈外剪一小口，插入2F(直径2.0 cm)球囊导管至颈总动脉，给予2个大气压后反复牵拉，之后缓慢放气10 s，重复3次，造成血管内膜损伤。
实验造模成功96只大鼠分为4组，分别为过表达IL-8受体的hUCMSCs组(IL-8RA/B-hUCMSCs)，过表达IL-8受体的hUVECs组(IL-8RA/B-hUVECs)，转染空载体的hUCMSCs组(Null-GFP-hUCMSCs)和对照组(生理盐水)，每组24只。手术后1，3，5 h分别从尾静脉输入0.5×106相应细胞
(500 μL)，共1.5 mL，对照组输注同等剂量的生理盐水，分别于3次输注细胞完成后30 min，24 h，14 d和28 d取材，每个时间点每组6只大鼠。
1.4.5 苏木精-伊红染色造模手术后取损伤血管，石蜡切片，脱蜡，乙醇脱水，二甲苯脱蜡，苏木精蓝染两三分钟，伊红染液染1 min，中性树胶封固，在显微镜下查看血管内膜损伤程度，采集图像观察造模是否成功。在移植细胞后 28 d，通过苏木精-伊红染色观察血管新内膜增生情况。
1.4.6 观察血管损伤处的荧光表达在3次输注细胞完成后
30 min，处死大鼠，取下损伤颈动脉，用PBS和肝素冲洗残余血液，浸泡在生理盐水中，在荧光显微镜下观察过表达IL-8受体的细胞迁移、黏附情况。
1.4.7 酶联免疫吸附实验在3次输注细胞完成后24 h，采集大鼠腹主动脉血，在常温中静置20-30 min，3 000 r/min离心10 min，分离出上层血清，检测炎性因子诱导的中性粒细胞趋化因子2β(neutrophil chemotactic factor-2β，CINC-2β)、
P-选择素(P-selectin)、血管细胞黏附分子1(vascular cell
adhesion molecule-1，VCAM-1)、肿瘤坏死因子α (tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白细胞介素1β(Interleukin-1β，IL-1β)、单核细胞趋化因子(monocyte chemotactic factor，MCP-1)、白细胞介素6(interleukin-6，IL-6)、白细胞介素10
(interleukin-10，IL-10)及核糖体蛋白S9(Ribosomal protein-S9，
RPS9)的表达水平，按照试剂盒(上海恒远)说明书进行。
1.4.8 免疫组化染色在3次输注细胞完成后24 h和14 d，取损伤颈动脉，进行包埋，切片，脱蜡，孵育一抗[髓过氧化物酶(MPO)浓度为1∶200，ED1浓度为1∶100，纤维连接蛋白(FN)浓度为1∶200]，4 ℃冰箱过夜，第2天复温 30 min，孵育二抗，进行DAB染色，在显微镜下观察并拍照，采用Image Pro Plus软件进行定量分析。
1.4.9 伊文思蓝染色移植细胞后14 d，在处死大鼠前
30 min，经大鼠尾静脉注入2%伊文思蓝染料，再从左心耳输注生理盐水进行冲洗，取下颈动脉进行分析。将蓝染血管浸泡甲酰胺溶液中，放入60 ℃水浴锅内24 h，3 000 r/min离心20 min，取上清，使用酶标仪检测620 nm波长处的吸光度值。
1.5 主要观察指标 ①荧光细胞靶向定位表达；②免疫组化染色结果；③伊文思蓝染色结果；④苏木精-伊红染色结果。
1.6 统计学分析应用SPSS 16.0和Image ProPlus、Microsoft excel 2003、Graphpad prism 6统计软件进行数据统计和图形分析，计量数据以x±s表示，组间比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA)，Bonferron’s或Dunnett’s T3检验，P < 0.05为差异有显著性意义。

讨论

hUCMSCs具有自我更新和多向分化能力，在组织损伤或炎症反应区域聚集，可抑制炎症反应、加速组织再生[12]。研究表明，hUCMSCs可以靶向归巢、迁移至损伤组织，参与修复[13-14]。内皮细胞具有许多缺点，移植到体内具有免疫排斥和成瘤特性，移植率降低，甚至出现细胞死亡。该实验将过表达IL-8受体的hUCMSCs对损伤颈动脉进行治疗，结果显示：通过尾静脉输注细胞后30 min，发现损伤颈动脉有GFP的表达，表明IL-8受体促进了hUCMSCs靶向归巢到损伤颈动脉，这为预防和治疗心血管疾病提供了新策略。IL-8RA/B-hUVECs也能靶向迁移至损伤血管，但迁移细胞数量减少，相对IL-8RA/B-hUCMSCs荧光表达弱。在血管内皮损伤时，白细胞会大量聚集，如中性粒细胞、单核/巨噬细胞，也会导致炎性因子表达升高，如白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、白细胞介素8等；增加细胞黏附分子及趋化因子的表达，促进炎性细胞浸润到血管内膜，使损伤加重，从而促进动脉粥样硬化的形成和发展[15-18]。在氧化应激模型中，核糖体蛋白S9表达增多[19]，诱发炎性反应，延缓损伤修复。白细胞介素10是一种有效的抗炎因子，能够治疗血管功能障碍和阻止炎症发生，参与免疫调节[16]；其与hUCMSCs联合治疗，可在一定程度上治疗肝损伤[20]。犬脐带间充质干细胞可以归巢到损伤部位，抑制炎症[21]，促进皮肤愈合和血管再生，减少纤维细胞的增殖，从而修复损伤[22]。这与作者的研究结果一致，与IL-8RA/B-hUVECs相比，IL-8RA/ B-hUCMSCs能够快速迁移到血管损伤部位，提高抗炎因子白细胞介素10表达，抑制炎性因子的产生，进一步证实了hUCMSCs装载IL-8受体后具有抑制损伤血管炎症的作用。实验结果表明，在输注细胞后14 d，过表达IL-8受体的hUCMSCs促进血管再内皮化，加速损伤修复。在IL-8RA/ B-hUCMSCs治疗后，免疫组化发现纤维蛋白染色表达明显减少，抑制血管的纤维化，IL-8RA/B-hUVECs治疗效果相对较差，伤口修复延迟。研究表明，内皮细胞因血液湍流而减少在损伤血管的黏附，细胞存活率较低，减少血管再内皮化[22]。在输注细胞后28 d，过表达IL-8RA/B的hUCMSCs能够明显减少新内膜增生，减少血
管再狭窄。过表达IL-8RA/B的hUCMSCs模拟靶向和黏附于受损组织中性粒细胞的行为，与游离的IL-8结合，抑制损伤部位的炎症反应，加速血管的再内皮化并减少新内膜的形成。研究表明，hUCMSCs能治疗血管内皮功能障碍，抑制损伤组织局部炎症的级联反应，修复损伤内膜，并分化为结缔组织细胞类型，改善损伤区域血管重建，加快损伤修复[23-25]，进一步证实过表达IL-8受体可以抑制炎症，加速损伤内皮的修复。所以，通过旁分泌途径辅助抗炎是hUCMSCs的重要特性[26]。
内皮修复方法有很多，药物治疗如他汀类，不仅可以降低胆固醇[27]，预防冠状动脉疾病，改善血管受损的内皮功能，减少氧化应激，还具有抗炎作用[28]，但是并不能改善四肢外周血管疾病；阿司匹林对心脏具有保护功能，可能与抗血小板有关，但不是直接发挥抗炎作用。因此，药物治疗无法从根本上治疗血管损伤，抑制炎症。目前，临床上多采用细胞移植进行干细胞疗法，从而促进损伤血管内皮的修复，维持内皮结构的完整性，从而抑制炎症和氧化应激。实验结果显示，IL-8RA/B能够促进hUCMSCs定向迁移并黏附到血管损伤部位，抑制炎症反应，减弱损伤部位的氧化应激，减少新内膜增生，从而加快hUCMSCs增殖，修复血管内膜。实验结果还表明过表达IL-8RA/B的hUCMSCs比hUVECs治疗损伤血管效果更明显。通过体内移植过表达IL-8RA/ B-hUCMSCs，与中性粒细胞竞争性结合损伤部位的IL-8，抑制损伤部位的炎症应答，减少炎性因子的释放和炎性细胞的表达，促进损伤组织愈合及血管再生。hUCMSCs异体移植免疫排斥低，输注安全，不良反应小。装载IL-8RA/B受体可以加快hUCMSCs靶向迁移至损伤血管，更容易发挥细胞的生物学效应，促进血管修复。
综上所述，过表达IL-8RA/B-hUCMSCs可以靶向迁移至血管损伤部位，抑制损伤组织的炎症反应，减少新内膜增生，抑制血管纤维化，促进血管修复，但其中具体机制尚不清楚，需要进一步研究。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

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人脐带间充质干细胞过表达白细胞介素8受体可抑制炎症反应和促进血管修复

Human umbilical cord mesenchymal stem cells overexpressing interleukin 8 receptor inhibit inflammation and promote vascular repair

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