基质结构蛋白在脑血管畸形中的表达差异

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2014.24.003

中国组织工程研究 ›› 2014, Vol. 18 ›› Issue (24): 3785-3790.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.24.003

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基质结构蛋白在脑血管畸形中的表达差异

杨振村，王增亮，党木仁，林令超，赛力克•对山拜

新疆医科大学第一附属医院神经外科，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830054

修回日期:2014-05-16 出版日期:2014-06-11 发布日期:2014-06-11
通讯作者: 赛力克?对山拜，博士，主任医师，新疆医科大学第一附属医院神经外科，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830054
作者简介:杨振村，男，1986年生，山东省阳信县人，回族，2014年新疆医科大学毕业，硕士，医师，主要从事脑血管病治疗工作。
基金资助:
新疆医科大学第一附属医院院内基金项目(2012YFY20)

Differential expression of matrix structural proteins in cerebrovascular malformations

Yang Zhen-cun, Wang Zeng-liang, Dang Mu-ren, Lin Ling-chao, Serick Duysenb

Department of Neurosurgery, First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China

Revised:2014-05-16 Online:2014-06-11 Published:2014-06-11
Contact: Serick Duysenb, M.D., Chief physician, Department of Neurosurgery, First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China
About author:Yang Zhen-cun, Master, Physician, Department of Neurosurgery, First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China
Supported by:
a grant from the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, No. 2012YFY20

摘要/Abstract

摘要：

背景：有研究表明脑血管畸形中存在管壁结构基质蛋白的表达差异，但血管畸形间结构基质蛋白的差异及结构蛋白差异与畸形血管管壁异形关系少有报道。
目的：观察基质结构蛋白在脑血管畸形中的差异性表达。
方法：对50例脑血管畸形手术标本和34例正常颞浅动脉标本进行苏木精-伊红染色，并应用美国Santa Cruz公司生产单/多克隆抗体对4种基质结构蛋白-Ⅳ型胶原蛋白、a-血管平滑肌蛋白、层粘连蛋白和纤维连接蛋白免疫组织化学染色。
结果与结论：苏木精-伊红染色显示，脑血管畸形壁结构与正常血管相比呈现明显紊乱和构成异形性；且脑血管畸形中，脑动静脉畸形与海绵状血管瘤结构存在明显差异。免疫组织化学染色显示：正常颞浅动脉和畸形血管中Ⅳ型胶原和a-血管平滑肌蛋白全部呈阳性表达且无显著性差异，但结构排列差异明显；正常颞浅动脉与畸形血管层粘连蛋白和纤维连接蛋白表达阳性率差异有显著性意义(P < 0.05)，正常血管表达更多层粘连蛋白，畸形血管表达更多纤维连接蛋白；畸形血管中脑动静脉畸形和海绵状血管瘤间层粘连蛋白和纤维连接蛋白的阳性率表达差异有显著性意义(P < 0.05)，脑动静脉畸形血管表达更多层粘连蛋白，海绵状血管瘤血管表达更多纤维连接蛋白。结果证实：与正常血管相比，脑血管畸形者管壁结构存在明显异形性，结构蛋白Ⅳ型胶原和a-血管平滑肌蛋白结构明显紊乱，且低表达层粘连蛋白而高表达纤维连接蛋白，这种差异可能是导致脑血管壁结构异常的原因。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

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关键词: 组织构建, 组织工程, 组织构建细胞学实验, 脑血管畸形, 基质结构蛋白, 免疫组织化学, Ⅳ型胶原蛋白, a-血管平滑肌蛋白, 层粘连蛋白, 纤维连接蛋白

Abstract:

BACKGROUND: Studies have shown that the wall structure matrix protein expression has some differences in brain vascular malformations, but the difference between the structure matrix proteins of vascular malformations and the correlation between structural protein difference and vascular malformations are rarely reported.
OBJECTIVE: To evaluate the differential expression of matrix structural proteins in vascular malformations of the brain.
METHODS: Fifty surgical specimens of cerebral vascular malformation and 34 normal specimens of superficial temporal artery were subject to hematoxylin-eosin staining. Single/polyclonal antibodies, produced by Santa Cruz, USA against four structural proteins matrix (IV collagen, a-smooth muscle protein, laminin, fibronectin) were applied for immunohistochemical staining.
RESULTS AND CONCLUSION: Hematoxylin-eosin staining showed that, cerebral vascular malformations showed significant disorder and constitute heteromorphism compared with normal vascular wall structure; in vascular malformations, there were obvious differences in cerebral arteriovenous malformations and cavernous hemangioma structure. Immunohistochemical staining showed that, in the normal temporal artery and vascular
malformations, IV collagen and smooth muscle actin-a were both positively expressed, and the positive rate had no difference, but the differences were significant in the structural arrangement. Laminin and fibronectin expression rate showed statistically significant differences between normal temporal artery and vascular malformations (P < 0.05), normal vascular wall expressed more laminin, while vascular malformations expressed more fibronectin. Laminin and fibronectin expression rate also had significant differences between cerebral arteriovenous malformation and cavernous hemangioma (P < 0.05), cerebral arteriovenous malformation expressed more laminin, while cavernous hemangioma expressed more fibronectin. The results confirmed that, compared with normal cerebral vessels, cerebral vascular malformations’ wall structure appears obvious heteromorphism, IV collagen and smooth muscle actin-a have apparent structural disorder, with low expression of laminin and high expression fibronectin, this difference may be the cause of abnormal cerebral wall structure.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

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Key words: intracranial arteriovenous malformations, hemangioma, cavernous, extracellular matrix proteins, tissue engineering

中图分类号:

R318

杨振村，王增亮，党木仁，林令超，赛力克•对山拜. 基质结构蛋白在脑血管畸形中的表达差异[J]. 中国组织工程研究, 2014, 18(24): 3785-3790.

Yang Zhen-cun, Wang Zeng-liang, Dang Mu-ren, Lin Ling-chao, Serick Duysenb. Differential expression of matrix structural proteins in cerebrovascular malformations[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2014, 18(24): 3785-3790.

图/表（结果） 2

2.1 受试者数量分析 此次研究中的研究对象为病理标本，所有标本均纳入结果分析，无脱落。

2.2 受试者基线分析 脑血管畸形患者50例中男23例，女27例，平均年龄36岁。首发症状为脑出血36例，癫痫8例，头痛5例，局部神经功能障碍1例。所有患者均在发病3 d内完善检查并行手术取得标本。脑血管畸形多在青年人中发生，男女比例无明显差异，主要的首发症状为脑出血，病程无明显差异。正常血管组与畸形血管组及畸形血管组内的动静脉畸形组和海绵状血管瘤组患者的年龄、性别和病程差异无显著性意义(P > 0.05)，具有可比性。

2.3 脑血管畸形患者和正常人脑血管形态 正常血管内膜层、肌层和外膜层结构紧密，层次分明，排列规则。动静脉畸形血管内膜疏松，平滑肌层结构排列紊乱，平滑肌间和外膜见胶原纤维沉积。海绵状血管瘤血管内膜层紊乱，未见明显平滑肌层，被大量胶原纤维代替，并见胶原玻璃样变性。苏木精-伊红染色显示，畸形血管与正常血管相比显现明显异形性，且海绵状血管瘤的血管壁结构组成异常更明显。见图1。

2.4 脑血管畸形患者和正常人脑血管组织中Ⅳ型胶原蛋白、a-血管平滑肌蛋白、层粘连蛋白和纤维连接蛋白的表达 Ⅳ型胶原蛋白在正常血管壁中均表达(+)，位于内皮细胞下层；在动静脉畸形中的表达均(+)，位于内皮细胞下层和血管中层；在海绵状血管瘤中表达均(+)，位于海绵间腔内、内皮细胞下层。正常血管和畸形血管Ⅳ型胶原蛋白染色阳性率均为100%，其阳性率差异比较无显著性意义(P > 0.05)。Ⅳ型胶原蛋白在畸形血管中全部阳性表达，但结构紊乱，排列不齐，管壁厚薄不均，与正常血管相比结构排列差异明显。畸形血管中海绵状血管瘤较脑动静脉畸形血管Ⅳ型胶原排列更加紊乱，结构异形性更加明显。见图2。

a-平滑肌肌动蛋白在正常血管壁中均表达(+)，位于内皮细胞下层；在动静脉畸形中的表达均(+)，位于内皮细胞下层和血管中层；在海绵状血管瘤中表达均(+)，位于海绵间腔内、内皮细胞下层。正常血管和畸形血管a-平滑肌肌动蛋白染色阳性率均为100%，其阳性率差异比较差异无显著性意义(P > 0.05)。a-平滑肌肌动蛋白在畸形血管中全部阳性表达，但a-平滑肌肌动蛋白结构不规则，排列疏松不均匀，与正常血管相比结构排列差异明显。畸形血管中海绵状血管瘤a-平滑肌肌动蛋白染色不明显，仅于内膜下层线性染色，且排列疏松不连续，较脑动静脉畸形血管异形性更明显。见图3。

纤维连接蛋白在正常血管中表达1例呈(+)32例呈(-)，阳性率为1/34(3%)，分布内膜细胞下层；在动静脉畸形中表达10例呈(+)20例呈(-)，阳性率为10/30(33%)，分布内皮细胞层和内膜细胞下层；在海绵状血管瘤中表达19例呈(++)1例呈(-)，阳性率为19/20(95%)，分布于血管壁全层。畸形血管与正常血管比较纤维连接蛋白染色阳性率差异有显著性意义(P < 0.05)，畸形血管纤维连接蛋白染色更加明显；畸形血管中脑动静脉畸形和海绵状血管瘤间纤维连接蛋白染色阳性率差异也有显著性意义(P < 0.05)，海绵状血管瘤血管表达更多的纤维连接蛋白基质。见图4。

层粘连蛋白在正常血管壁中表达均为(+)，阳性率为100%，分布内膜下层；在动静脉畸形中的表达20例呈(+)10例呈(-)，阳性率为20/30(67%)，分布内膜下层；在海绵状血管瘤中表达3例呈(+)17例呈(-)，阳性率为3/20(15%)，分布内膜下层。血管畸形与正常血管比较层粘连蛋白染色阳性率差异有显著性意义(P < 0.05)，正常血管层粘连蛋白染色更加明显；畸形血管中脑动静脉畸形和海绵状血管瘤间层粘连蛋白染色阳性率差异也有显著性意义(P < 0.05)，脑动静脉畸形血管表达更多的层粘连蛋白基质。见图5。

参考文献

[1] 赛力克•对山拜,周凯,党木仁,等.血管生长因子和结构基质蛋白在新疆哈萨克族破裂和未破裂颅内动脉瘤中的表达[J].中华神经外科杂志,2011,27(11):1157-1160.
[2] Cloft HJ, Kallmes DF. Aneurysm packing with HydroCoil Embolic System vers-us platinum coils: initial clinical experience. J AJNR Am J Neuroradiol. 2004;25(6):60-62.
[3] Al-Shahi Salman R, Hall JM, Horne MA, et al. Untreated clinical course of cerebral ca-vernous malformations: a prospective, population-based cohort study. J Lancet Neurol. 2012;11(3):150-156.
[4] Wouters V, Limaye N. Hereditary cutaneomucosal venous malformati-ons are caused by TIE2 mutations with widely variable hyper-phosphorylating effects. J Eur J Hum Genet. 2010;18(4):414-420.
[5] Nishida T, Faughnan ME, Krings T, et al. Brain arteriovenous malformations associated with hereditary hemorrhagic telangiectasia: gene-phenotype correlations. J Am J Med Genet A. 2012;(11):2829-2834.
[6] Warlow C. Management of brain arteriovenous malformations. J Lancet. 2014;383(9929):1632-1633.
[7] Classen CF, Haffner D, Hauenstein C, et al. Long-time octreotide in an adolescent wi-th severe haemorrhagic gastrointestinalvascular malformation. J BMJ Case Rep 2011;2(1):87-92.
[8] Choi JH1, Pile-Spellman J, Brisman J. Trends in the management of intracranial vascular malformations in the USA from 2000 to 2007. J Troke Res Treat. 2012;35(5): 348-369.
[9] TamakiM, Mc Donald W, Del Maestro RF. Release of collagen type IV degradin-g activity from C6 astrocytom a cells and celldensity. J Neurosurg. 1996;84(6):1013-1019.
[10] Plasencia AR, Santillan A. Embolization and radiosurgery for arteriovenous malformations. J Surg Neurol Int. 2012;3(2): 90-104.
[11] Wong JH, Awad IA, Kim JH. Ultrastructural pathological features of cerebrovascular malformations: a preliminary report. J Neurosurg. 2000;46(6):1454-1459.
[12] 赵明光,王晨,高永中,等.脑动静脉畸形血管生成素表达与血管超微结构的观察[J].中华实验外科杂志,2003,20(8):689-690.
[13] 宋建蓉,杨志健,张馥敏,等.人血管内皮细胞生长因子-165和人血管生成素-1促进大鼠缺血下肢血管新生[J].中国介入心脏病学杂志, 2003,13(1):103-107.
[14] 赵明光,陈游力,宋振全,等.血管生成因子在脑动静脉血管畸形发生发展过程中的生物学效应[J].中国临床康复,2003,9(1):73-75.
[15] Adams JC, Watt FM. Regulation of development and differentiation by the extracellular matrix. J Devebpment, 1993;117:1183-1198.
[16] Risau W, Lemmon V. Changes in the vascular extracellular matrix during embryonic vasculogenesis and angiogenesis. J Dev Biol. 1988;125(2):441-150.
[17] Streeter I, de Leeuw NH. Atomistic Modeling of Collagen Proteins in Their Fibrillar Environment. J Phys Chem B. 2010; 114(41):13263-13270.
[18] 陈光忠,李铁林,姜晓丹,等.TGF-β1及MMP-2,9在脑动静脉畸形中的表达及意义[J].中国神经精神疾病杂志,2006,32(1):48-52.
[19] 袁葛,赵继宗.结构基质蛋白在脑血管畸形的表达[J].首都医科大学学报,2000,21(1):53-55.
[20] 李宝山,王喆.层粘连蛋白和血管内皮生长因子受体-2在脑动静脉畸形出血中的表达及意义[J].潍坊医学院学报, 2010,33(3): 189-192.

引言

材料方法

设计：病例-对照研究。

时间及地点：于2013年11月至2014年2月于北京三博脑科医院病理科完成。

对象：选择2010年7月至2013年7月新疆医科大学第一附属医院50例脑血管畸形患者，将取得的脑血管畸形团标本作为研究对象，其中脑动静脉畸形患者30例，海绵状血管瘤患者20例。选取同期与以上50例患者在年龄、性别和病程等类似人群34例相关翼点手术过程中取得的颞浅动脉作为对照组。

脑血管畸形患者纳入标准：①经头部MRI和脑血管造影确诊为脑动静脉畸形患者。②手术所取标本病理证实为脑血管畸形。

脑血管畸形患者排除标准：单纯血肿、静脉畸形及脑动脉瘤患者。

材料：

实验方法：

标本制备：将所有的脑血管畸形标本和颞浅动脉标本用体积分数10%甲醛固定24 h。将标本置入莱卡ASP-200S自动组织脱水机脱水，浸入60 ℃液体石蜡，行包埋固定，应用莱卡CM 1850冰冻切片机将蜡块5 μm厚度进行连续切片(6-8张)。切片脱蜡固定于黏附载玻片上，行蒸馏水冲洗、磷酸缓冲液和抗原修复液浸泡消除过氧化物酶活性，水化备用染色。

苏木精-伊红染色：所有标本各取1张切片，采用Elastica van Gieson染色方法(滴加试剂浸润30 min，3次磷酸缓冲液冲洗。二氨基联苯胺显色，苏木精复染，脱水透明后封固)，行苏木精-伊红染色。随机用显微镜取5个高倍视野观察脑血管畸形和正常脑血管染色情况。

免疫组织化学染色：每个标本各取4张切片。胶原Ⅳ和层粘连蛋白在行免疫组织化学前为去除蛋白干扰杂质，应用37 ℃胃蛋白酶液浸润50 min。纤维连接蛋白用37 ℃胰蛋白酶液浸润30 min消化蛋白。平滑肌肌动蛋白α免疫组织化学染色前无需特殊处理。在相关预备工作完成后，将84例标本切片滴加37 ℃经稀释到一抗工作液(人抗人Ⅳ型胶原单克隆抗体、人抗人平滑肌肌动蛋白单克隆抗体、人抗人纤维连接蛋白多克隆抗体和人抗人层粘蛋白多克隆抗体；1∶1 000)，孵育1 h，行4种结构蛋白(Ⅳ型胶原蛋白、平滑肌肌动蛋白α、纤维连接蛋白、层粘连蛋白)免疫组织化学染色。染色完成后再行磷酸缓冲液冲洗3次，每次相隔2 min。滴加适当比例的聚合物辅助剂，再次磷酸缓冲液3次冲洗。应用二氨基联苯胺滴液显色，苏木精复染，脱水后封固。随机选取显微镜下5个高倍视野观察脑血管畸形和正常脑血管染色情况。

主要观察指标：苏木精-伊红染色主要观察正常血管和畸形血管管壁的基本结构和排列顺序。免疫组织化学染色主要观察4种结构蛋白(Ⅳ型胶原蛋白、平滑肌肌动蛋白α、纤维连接蛋白、层粘连蛋白)在正常血管和畸形血管管壁中的染色情况。以光镜观察切片中3.0灰度单位/μm²作为分界点，大于该值为阳性，小于该值为阴性，测算阳性率。

统计学分析：应用SPSS 13.0软件处理所有统计数据。计数资料用百分率表示，统计正常血管和畸形血管免疫组织化学染色阳性情况，测算染色阳性率，组间数据差异比较用χ²检验法，P < 0.05为差异有显著性意义。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

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讨论

通过现代分子生物学的不断研究发现，脑血管畸形在细胞分子水平上最可能发生的改变是血管内生长因子与血管壁的细胞外基质^[5]。有学者认为脑血管畸形可能的发生机制为：先天性因素导致局部脑血管生成或发育异常而形成的局部畸形血管团，在局部血管微环境改变、内皮细胞活化和促血管生长因子及相关受体表达异常影响下，脑血管的血管壁及其细胞外基质的构成和分布发生异常改变，在脑血管血液高流量和高流速的特殊血管动力冲击下，可能引起脑血管畸形的发生和进一步进展^[6]。

实验具有一定的综合性和创新性。实验选择血管壁组成中最重要的组织蛋白Ⅳ型胶原蛋白和a-平滑肌肌动蛋白，胞外基质中对血管壁构成和生物学功能有重要作用的层粘连蛋白和纤维连接蛋白作为免疫组织化学检测因子。将正常血管、脑动静脉畸形血管和海绵状血管瘤血管在组织结构形态和结构基质蛋白表达差异性进行综合阐述，并综合文献探寻两者可能存在的关系为实验着重点。

Ⅳ型胶原蛋白、a-血管平滑肌蛋白、层粘连蛋白和纤维连接蛋白维持血管壁结构和功能的重要蛋白。血管中膜平滑肌层和细胞外基质是血管壁构成的最重要组成成分，主要由Ⅵ型胶原、平滑肌蛋白、层粘连蛋白和纤维连接蛋白构成^[7]。细胞外基质的构成包括网状纤维、弹性纤维、胶原纤维及多种非胶原糖蛋白，使血管壁在血流高压冲击下维持一定的形状，并保持一定的弹性和抗扩张性^[8]。弹性纤维和胶原纤维是细胞外基质最主要的组成部分，其中90%的弹性纤维为弹性蛋白，主要作用为调节平滑肌细胞的表型及增殖活性并赋予血管舒缩必要的弹性，而占胶原纤维90%的Ⅳ型胶原在基底膜上^[9]。非胶原糖蛋白中纤连蛋白和层粘连蛋白等虽然所占比例较小，但在维持血管稳定性起至关重要作用^[10]。

许多研究认为在脑血管畸形中Ⅳ型胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白在血管壁中表达存在差异。Ⅳ型胶原蛋白构成毛细血管基底膜，α-平滑肌肌动蛋白(α-平滑肌肌动蛋白)位于血管内皮下肌细胞构成的血管中层，Ⅳ型胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白是构成血管壁基膜基本结构。Wong 等^[11]应用透射电镜系统观察脑动静脉畸形病灶内的血管显示，血管壁内皮细胞下的基质胶原纤维和平滑肌细胞杂乱排列。海绵状血管瘤标本内基底膜完好，但内皮细胞排列疏松，内皮细胞下缺乏排列有序的胶原纤维，平滑肌细胞的表达不典型。赵明光等应用电镜观察到相似结果^[12]。

本次实验中，苏木精-伊红染色显示脑血管畸形的血管壁结构排列紊乱，层次不清，平滑肌和弹力纤维较少且厚薄不均，被大量的胶原组织沉积取代，并可见明显的胶原玻璃样变性。Ⅳ型胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白免疫组织化学染色显示，在正常血管中阳性并规律排列的Ⅳ型胶原蛋白和 α-平滑肌肌动蛋白，在脑血管畸形中全部阳性表达，但Ⅳ型胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白结构紊乱，管壁厚薄不均，排列疏松甚至呈断裂状。实验证实脑血管畸形结构存在明显异形性，Ⅳ型胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白在畸形血管中结构排列明显异常，且海绵状血管瘤中Ⅳ型胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白比脑动静脉畸形结构异常更明显。

Ⅳ型胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白表达异常可能是导致基膜和平滑肌层结构紊乱的原因。在正常血管的血管壁中极少表达的血管内皮生长因子及其受体，病理状态下可在血管壁及血管腔中高表达^[13]。赵明光等^[14]研究发现血管内皮生长因子及其受体在正常人脑血管内皮细胞中表达微弱，而在脑动静脉畸形血管标本中表达较高。在血管生成活跃的机体中，血管内皮生长因子作用使内皮细胞间隙变宽，使血管壁通透性增高^[12]。纤溶酶等活性物质可透过内皮细胞分解并破坏血管平滑肌和结构弹力纤维等基质成分。Ⅳ型胶原蛋白是构成基膜的基本结构，α-平滑肌肌动蛋白是维持平滑肌细胞最重要蛋白，Ⅳ型胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白的破坏使血管壁骨架受损，管壁弹性和抗扩张性损害。

许多研究发现脑血管畸形中纤维连接蛋白和层粘连蛋白表达异常。纤维连接蛋白是一种将内皮细胞、内弹力层和平滑肌细胞连接在一起的蛋白质，可刺激血管内皮细胞生成毛细血管样的结构^[15]。层粘连蛋白在血管细胞表面形成网络结构，作用于基膜的组装过程，是血管发育成熟的早期指征^[16]。Strecter等^[17]提出脑动静脉畸形是由于胚胎早期血管发生不良引起，而海绵状血管瘤是由于进行性血管生成不良所致。陈光忠等^[18]研究发现脑动静脉畸形管壁高表达纤维连接蛋白，低表达层粘连蛋白且在血管连接和排列中存在紊乱。袁葛等^[19]对22例海绵状血管瘤病理标本血管壁基质进行免疫组织化学，结果显示：海绵状血管瘤富含纤维连接蛋白基质，缺乏层粘连蛋白成分。

此次实验研究中，在正常血管中低表达的纤维连接蛋白和高表达的层粘连蛋白，在脑血管畸形中高表达纤维连接蛋白并低表达层粘连蛋白，畸形血管中海绵状血管瘤比脑动静脉畸形表达更多的纤维连接蛋白和更少的层粘连蛋白。纤维连接蛋白是一种不成熟的基质，而层粘连蛋白是一种成熟的基质，畸形血管中富含纤维连接蛋白且缺乏层粘连蛋白。说明畸形血管为不成熟的血管。畸形血管中海绵状血管瘤比脑动静脉畸形表达更多的纤维连接蛋白和更少的层粘连蛋白，说明海绵状血管瘤比脑动静脉畸形成熟度更低。脑动静脉畸形血管较高表达层粘连蛋白与血管团中高血液动力学相关^[20]。

脑血管畸形层粘连蛋白和纤维连接蛋白的异常表达可能与脑血管畸形结构异常相关。畸形血管缺乏层粘连蛋白基质，可导致基膜组装过程中出现障碍，使Ⅳ型胶原失去附着点不能形成网状结构，血管壁基膜失去半透性滤过作用，致溶酶体外漏及胶原蛋白沉积内膜下，可能会导致弹力蛋白和平滑肌蛋白破坏及胶原沉积变性。同样畸形血管

高表达纤维连接蛋白基质可能说明畸形血管处于较为活跃的血管生成状态，内皮细胞通透性增高，血管平滑肌和结构弹力纤维等基质成分遭到破坏，可能引起畸形血管基膜和平滑肌层结构紊乱，呈现明显异形性。

脑血管畸形中，脑动静脉畸形与海绵状血管瘤结构存在明显差异，结构基质蛋白表达也存在差异。脑血管畸形中，苏木精-伊红染色显示海绵状血管瘤血管比脑动静脉畸形血管结构异常更加明显，海绵状血管瘤血管无明显平滑肌且胶原沉积和胶原变性明显。Ⅳ型胶原蛋白和平滑肌蛋白-α免疫组织化学染色显示：海绵状血管瘤血管的比脑动静脉畸形血管基质蛋白染色结构更加紊乱，排列更加不齐，甚至平滑肌蛋白-α在海绵状血管瘤中仅见线性不连续染色。在纤维连接蛋白和层粘连蛋白的免疫组织化学染色中，海绵状血管瘤血管比脑动静脉畸形血管表达更少的成熟基质层粘连蛋白和更多的不成熟基质纤维连接蛋白。

综上所述，实验苏木精-伊红染色显示：脑血管畸形壁结构与正常血管相比呈现明显紊乱和构成异形性；且脑血管畸形中，脑动静脉畸形与海绵状血管瘤结构存在明显差别。免疫组织化学染色显示：脑血管畸形与正常血管相比基质结构蛋白表达存在明显差异；脑血管畸形中，脑动静脉畸形与海绵状血管瘤结构基质蛋白表达也存在差异。脑血管畸形结构基质蛋白表达异常可能是导致脑血管畸形结构异形性原因。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

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[1]	张同同, 王中华, 文杰, 宋玉鑫, 刘林. 3D打印模型在颈椎肿瘤手术切除与重建中的应用[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(9): 1335-1339.
[2]	李静, 谢建山, 崔慧林, 曹锡梅, 杨艳萍, 李海荣. 不同毛色小鼠背部皮肤中甘油二酯激酶ζ和蛋白激酶CβⅡ的表达和定位[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1196-1200.
[3]	曾燕华, 郝延磊. 许旺细胞体外培养及纯化的系统性综述[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1135-1141.
[4]	徐东紫, 张婷, 欧阳昭连. 心脏组织工程领域全球专利竞争态势分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(5): 807-812.
[5]	吴子健, 胡昭端, 谢有琼, 王峰, 李佳, 李柏村, 蔡国伟, 彭锐. 3D打印技术与骨组织工程研究文献计量及研究热点可视化分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(4): 564-569.
[6]	常文辽, 赵杰, 孙晓亮, 王锟, 吴国锋, 周剑, 李树祥, 孙晗. 人工骨膜的材料选择、理论设计及生物仿生功能[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(4): 600-606.
[7]	刘旒, 周箐竹, 龚桌, 刘博言, 杨斌, 赵娴. 胶原/无机材料构建组织工程骨的特点及制造技术[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(4): 607-613.
[8]	刘飞, 崔宇韬, 刘贺. 局部抗生素递送系统治疗骨髓炎的优势与问题[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(4): 614-620.
[9]	李晓壮, 段浩, 王伟舟, 唐志宏, 王旸昊, 何飞. 骨组织工程材料治疗骨缺损疾病在体内实验中的应用[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(4): 626-631.
[10]	张振坤, 李喆, 李亚, 王莹莹, 王亚苹, 周馨魁, 马珊珊, 关方霞. 海藻酸盐基水凝胶/敷料在创面愈合中的应用：持续、动态与顺序释放[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(4): 638-643.
[11]	陈佳娜, 邱燕玲, 聂敏海, 刘旭倩. 组织工程支架材料修复口腔颌面部软组织缺损[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(4): 644-650.
[12]	邢浩, 张永红, 王栋. 长骨大段骨缺损修复方法的优势与不足[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(3): 426-430.
[13]	杨彩会, 刘启成, 董明, 王丽娜, 左美娜, 陆颖, 牛卫东. 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶促进慢性根尖周炎模型小鼠的骨破坏[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(23): 3654-3659.
[14]	闫鹏, 马玉斐, 崔京福, 郝少飞, 刘金辉, 关春雷, 王潇燃, 杨小玉. 阳极阻滞电刺激骶神经根重构膀胱功能的作用机制[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(23): 3684-3689.
[15]	陈思奇, 先德彬, 徐荣胜, 覃中杰, 张磊, 夏德林. 羟基磷灰石-磷酸三钙支架复合骨髓间充质干细胞和人脐静脉内皮细胞对大鼠颅骨缺损修复早期成血管的影响[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(22): 3458-3465.