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随着科学技术的发展、医疗水平的提高，器官移植的成功率不断提高，而需要移植的患者数量和日益缺乏的可供移植的器官之间的矛盾更加严重。肝移植是惟一能从根本上解决终末性肝功能衰竭的办法。在脑死亡未立法的国家，移植器官不可避免的存在热缺血、冷保存、再灌注过程，随着保存液UW液的应用，大多数移植器官的保存是满意的，如肝脏单纯冷保存可延长至24 h^[1-2] ，但是移植物原发性无功能的发生率仍较高，有报道为5%~10%^[3-4] 。如何降低移植物原发性无功能，在器官短缺的今天显得尤为重要。本文试探讨高氧液灌注对肝移植的保护作用。

器官的短缺是制约移植发展的最大瓶颈。目前国内主要的器官来源为尸体器官，均存在缺血再灌注损伤过程。缺血再灌注损伤引起无氧代谢，导致Ca ²⁺超载^{[7-9 ]} 、氧自由基的损伤^[10-11] 、线粒体受损、内皮素和一氧化氮浓度失衡、微循环功能障碍、细胞因子的改变、Kupffer细胞和中性粒细胞活化等，其核心问题为组织细胞缺血缺氧。
现已证实长时间冷缺血后的缺血再灌注损伤和初期的及严重急性排斥反应有关，是导致移植物衰竭的主要原因。初期的免疫反应的意义及其与获得性免疫反应的关系目前较清楚，初期免疫反应的初始信号的激活由树突细胞递呈，一些抑制性蛋白，表达危险信号，被称为热休克蛋白，作为Toll样受体的内源性配体^[12] 。细胞损伤造成胞外热休克蛋白释放，通过TLRS，诱导抗原递呈细胞(特别是树突细胞)的激活和成熟^[13-14] 。
另外一些研究证明，活性氧不仅诱导TLRS内源性配体的产生，同时是TLR4在肝IPRI中的核心因素^[15] 。IPRI引起组织损伤，导致移植物抗原递呈细胞及进入移植物的受体抗原递呈细胞的激活，激活的抗原提呈细胞迁移至二级淋巴组织，与T细胞作用后产生排斥反应。激活的抗原递呈细胞同时可以通过CD4^-CD25^- T细胞克服T辅助细胞的抑制作用，产生获得性免疫反应^[16] 。
有人认为，减少IPRI和TLRS的激活可以使抗原提呈细胞处在非激活状态，导致抗原特异性免疫耐受^[17] 。Matzinger’s伤害理论认为组织损伤与原始免疫是通过机体识别自我与非我或受损的自我来实现的，危险信号通过T淋巴细胞和抗原提呈细胞启动获得性免疫^[18] 。在缺血再灌注期间，危险信号包括移植物来源的DNA和RNA、被氧化的蛋白质、HMGB1等^[19] 。肝细胞缺血再灌注中，HMGB1的分泌可能通过自由基本依赖途径，这个过程需要完整的TLR4信号和钙依赖性蛋白激酶^[20-21] 。当TLR4或其信号通道蛋白缺乏时，器官将减小缺血再灌注损伤^[22] 。
根据伤害理论，原始损伤越小，激活的获得性免疫反应就越小，对移植物早期和晚期的排斥就越小。Land等^[23]利用超氧化物歧化酶复合物，能较好延迟移植肾的功能，也证实了这个观点，因此减少移植器官的缺血再灌注损失有重要的作用和意义。
目前，对保存液的研制改进仍是国内外学者研究的重点^[24-25] 。Belzer等^[26]指出，成功的器官保存液应满足5个要求：①减少因低温保存导致的细胞水肿。②防止细胞酸化。③防止灌注保存过程中细胞间隙膨胀。④防止氧自由基损伤，尤其在再灌注过程中。⑤提供再生高能磷酸化合物的底物。但目前的器官保存液还很难完全满足上述要求。
为了减轻脏器冷保存过程的缺血再灌注损伤，国内学者进行了大量的研究。张伯等^[27]认为川芎嗪可能通过促进抑制凋亡基因bcl-2的表达来抑制冷保存再灌注导致的肝细胞凋亡。刘洪涛等[28]研究表明钙通道阻滞剂对肝移植中冷保存再灌注损伤的肝脏有保护作用。孙长滨等[29]发现牛磺酸能减少心肌酶(乳酸脱氢酶、磷酸肌酸激酶及谷草转氨酶)的漏出，减轻线粒体的损伤，对心肌的冷缺血损伤具有保护作用。李立等^[30]认为三七总皂甙可减轻大鼠肝脏在低温保存再灌注期间肝细胞凋亡，可能与通过抑制钙超载、抗氧自由基损伤、提高Bcl-2蛋白表达作用有关。李军尧等^[31]以腺苷A1受体激动剂能诱导预处理的延迟效应，改善低温St Thomas液保存离体大鼠心脏的保存效果，认为该效应的信号传递与心肌核转录因子κB的活化有关。范莹等^[32]认为二氮嗪能通过激活mito KATP通道来减少Fas和FasL蛋白表达，从而减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤后的心肌细胞凋亡。
然而，这些成分作用机制以及是否确定有效仍不十分清楚，同时，这些成分都未涉及到一个基本问题：器官保存、再灌注期间缺氧的问题。
高氧液是利用量子化溶氧机制,以临床常用的生理盐水、乳酸钠林格氏液等晶体为载体，这种液体对心肌、脑等组织的缺血有明显的保护作用，并发现高氧液能发挥晶体液之优点，量子处理可使3O₂→2O₃。O3溶于水的能力在0 ℃时为O₂的10倍，并能很快由2O₃→3O₂，输入后可立即提高氧分压和氧饱和度，改善组织供养并能调节细胞内Ca ²⁺的浓度；O还能降低血小板聚集力，减少纤维蛋白原的含量，增加纤维蛋白的溶解度，有利于进一步改善微循环。研究表明，门静脉低温高氧液灌注可能对肝硬化肝脏的肝功能有一定的保护作用^[33] 。黄长文等^[34]的研究表明，高氧保存液对供肝有更好的保存作用。Philipp等^[35]使用低温高氧液灌注，能显著提高移植动物的存活率。
胞间的透明质酸仅存在肝脏的窦内皮细胞，因此血清中透明质酸的水平是检测内皮细胞活性和功能的指标。研究表明，大鼠肝脏保存不同时限后，再灌注和移植后肝脏透明质酸的清除率下降，血清透明质酸的水平升高，且变化幅度和内皮细胞活性相平行。在临床肝移植中，检测血清透明质酸水平和再灌注肝脏流出液中的透明质酸含量是判断移植肝脏功能的指标。本实验中，使用高氧液灌注后，下腔静脉流出液透明质酸含量明显低于普通灌注液组，移植后第1，3天血清透明质酸含量亦低于普通灌注液组，同期谷丙转氨酶高氧液组低于普通灌注液组。
机体对同种异体抗原的识别有两种机制，即直接识别和间接识别。直接识别是指受体的T细胞直接识别由移植物中的供体抗原提呈细胞提呈的供体抗原，间接识别是指受体T细胞识别由自身抗原提呈细胞提呈的供体抗原。直接识别和间接识别在同种异体移植排斥的不同阶段起着不同的作用。尽管两种识别方式的机制仍待进一步明确，但多数观点认为直接识别在急性排斥中起主要作用，而间接识别是慢性排斥的主要原因。
当T细胞受体与同种抗原接触后，便产生白细胞介素2，共刺激分子能使激活的T细胞产生最大量的白细胞介素2。最重要的共刺激分子为CD28，绝大多数CD4⁺T细胞和约50%CD8+T细胞表面表达CD28，CD28的缺失不能使T细胞产生免疫反应。抑制直接识别的CD8⁺CD28^- Ts细胞主要是具有MHC-Ⅰ类分子限制性、通过与抗原提呈细胞直接接触而发挥作用的Ts细胞^[36] 。抗原特异性Ts细胞MHC-Ⅰ限制性的特点，提示其可以特异性地与来自同种异体移植物的供体抗原提呈细胞结合，从直接识别的途径诱导针对供体组织的特异性免疫耐受，减少移植后急性排斥的发生。
项华等^[37]检测了肾移植后患者的CD8⁺CD28^- Ts细胞，发现有排斥反应的患者CD8⁺CD28^- Ts含量低于无排斥反应患者。本实验中，高氧乳酸林格液灌注组肝移植后第1，3天CD8⁺CD28^- Ts含量高于普通乳酸林格灌注组，表明高氧液降低了缺血再灌注损伤，降低了移植后免疫排斥的发生，其可能的机制为减少了氧自由基、一氧化氮、蛋白酶、花生四烯酸、肿瘤坏死因子α和其他细胞因子的产生，降低了炎症反应。
总之，高氧液的灌注对大鼠移植肝有一定的益处，能否作为现今使用的保存、灌注液的补充，值得进一步研究。

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