嗅鞘细胞治疗晚期脊髓损伤短期与长期疗效的Meta分析

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.1595

中国组织工程研究 ›› 2019, Vol. 23 ›› Issue (9): 1468-1476.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.1595

• 干细胞循证医学 evidence-based medicine of stem cells • 上一篇

嗅鞘细胞治疗晚期脊髓损伤短期与长期疗效的Meta分析

陈慧靖¹，陈雲¹，邓煜二¹，甘燕玲¹，詹文刚²，谭齐家²，谢才军²，李聪²，张志强²

¹广州中医药大学第二临床医学院，广东省广州市 510006；²广东省中医院(广州中医药大学第二附属医院)，广东省广州市 510120

修回日期:2018-11-20 出版日期:2019-03-28 发布日期:2019-03-28
通讯作者: 张志强，广东省中医院(广州中医药大学第二附属医院)，广东省广州市 510120
作者简介:陈慧靖，女，1993年生，广东省广州市人，广州中医药大学在读硕士，主要从事神经修复方面的研究。
基金资助:
广东省科技计划项目(2014A020212411)，项目负责人：张志强

Short- and long-term effects of olfactory ensheathing cells in the treatment of chronic spinal cord injury: a meta-analysis

Chen Huijing¹, Chen Yun¹, Deng Yuer¹, Gan Yanling¹, Zhan Wengang², Tan Qijia², Xie Caijun², Li Cong², Zhang Zhiqiang²

¹Second Clinical Medical College, Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510006, Guangdong Province, China; ²Guangzhou Hospital of Traditional Chinese Medicine (Second Affiliated Hospital of Guangzhou University of Chinese Medicine), Guangzhou 510120, Guangdong Province, China

Revised:2018-11-20 Online:2019-03-28 Published:2019-03-28
Contact: Zhang Zhiqiang, Guangzhou Hospital of Traditional Chinese Medicine (Second Affiliated Hospital of Guangzhou University of Chinese Medicine), Guangzhou 510120, Guangdong Province, China
About author:Chen Huijing, Master candidate, Second Clinical Medical College, Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510006, Guangdong Province, China
Supported by:
the Guangdong Province Scientific Plan Project, No. 2014A020212411 (to ZZQ)

摘要/Abstract

摘要：

文章快速阅读：

文题释义：
晚期脊髓损伤：通常认为，晚期脊髓损伤是指脊髓外伤时间大于3个月，除原发性损伤外不存在其他压迫性因素，神经功能稳定3个月以上者。该时期脊髓的自身神经修复功能丧失，传统的药物及康复治疗难以促进其功能改善。
短期疗效：文中的短期疗效是指在嗅鞘细胞移植后，手术伤口基本愈合，晚期脊髓损伤患者可配合检查时作出的疗效评价。可能影响短期疗效的因素有术区局部炎症反应、注射部位组织水肿等脊柱手术反应，故不能客观反映嗅鞘细胞对晚期脊髓损伤的临床疗效。
长期疗效：文中的长期疗效是指在嗅鞘细胞移植术后3个月以上，脊柱创伤完全恢复，患者神经功能稳定时作出的疗效评价。长期疗效没有术区局部炎症反应、脊髓水肿等脊柱手术的影响，可能是嗅鞘细胞对晚期脊髓损伤临床疗效的客观反应。

摘要
背景：世界上已开展多项嗅鞘细胞治疗晚期脊髓损伤的临床试验，但其有效性及安全性仍有争议。
目的：综合评价嗅鞘细胞移植治疗晚期脊髓损伤安全性及可行性，比较其治疗短期疗效与长期疗效。
方法：于2018-07-23检索PubMed、Cochrane图书馆、EMBASE、知网、万方数据库，纳入嗅鞘细胞治疗晚期脊髓损伤的临床研究。安全性研究试验应详细记录不良事件的种类与例数。纳入疗效评价的研究均使用ASIA量表，评估移植前后脊髓损伤患者的运动、轻触觉及针刺觉功能，并记录随访时间。运用Review Manager 5.3对疗效数据进行系统评价。
结果与结论：无论短期评价还是长期随访，与嗅鞘细胞移植前相比，患者神经功能均有明显提高(P < 0.05)，且研究结果具有同质性(Ι² < 50%且P > 0.1)。然而长期疗效不如短期，这可能与慢性排斥反应及嗅鞘细胞存活率相关。嗅鞘细胞治疗晚期脊髓损伤的总不良事件发生率为8.99%，未发现与嗅鞘细胞本身相关的并发症。结果表明，嗅鞘细胞移植治疗晚期脊髓损伤疗效明确，安全可行，但仍需要探索更微创的移植方式，以减少手术并发症。另外，影响嗅鞘细胞长期疗效的因素需要大量高质量的基础及临床试验予以证实。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程
ORCID: 0000-0001-8785-3062(陈慧靖)

关键词: 嗅鞘细胞, 脊髓损伤, 晚期脊髓损伤, 细胞移植, 人类, 神经修复, ASIA评分, 短期疗效, 长期疗效, 安全性, Meta分析

Abstract:

BACKGROUND: A number of clinical trials addressing olfactory ensheathing cells for the treatment of chronic spinal cord injury have been conducted in the world, but the efficacy and safety are still controversial.
OBJECTIVE: To evaluate the safety and efficacy of olfactory ensheathing cell transplantation for chronic spinal cord injury, and to further compare its short- and long-term efficacy.
METHODS: PubMed, Cochrane Library, EMBASE, CNKI and WanFang databases were searched at July 23, 2018 for retrieval of clinical trials addressing olfactory ensheathing cells in the treatment of chronic spinal cord injury. Types and cases of adverse events during the safety trial should be recorded in detail. In the enrolled studies, American Spinal Injury Association scale was used to assess the motor, light touch, and pinprick scores of spinal cord injury patients before and after cell transplantation. The follow-up time was recorded. Systematic evaluation of efficacy data was performed using Review Manager 5.3.
RESULTS AND CONCLUSION: Both short- and long-term follow-up data showed that the neurological function of patients was significantly improved after olfactory ensheathing cell transplantation (P < 0.05), and the results were homogeneous (I²< 50% and P > 0.1). However, the long-term efficacy was not as good as the short-term efficacy, which may be related to chronic rejection and olfactory ensheathing cell survival. The overall adverse event rate was 8.99%, and no complications associated with olfactory ensheathing cells occurred. These findings show that olfactory ensheathing cell transplantation is effective and safe in the treatment of chronic spinal cord injury, but it is still necessary to explore more minimally invasive approaches to reduce surgical complications. In addition, a large number of high-quality experiments and clinical trials are warranted to confirm factors affecting the long-term efficacy of olfactory ensheathing cell transplantation.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

Key words: Spinal Cord Injuries, Cell Transplantation, Recovery of Function, Tissue Engineering

中图分类号:

R459.9

陈慧靖，陈雲，邓煜二，甘燕玲，詹文刚，谭齐家，谢才军，李聪，张志强. 嗅鞘细胞治疗晚期脊髓损伤短期与长期疗效的Meta分析[J]. 中国组织工程研究, 2019, 23(9): 1468-1476.

Chen Huijing, Chen Yun, Deng Yuer, Gan Yanling, Zhan Wengang, Tan Qijia, Xie Caijun, Li Cong, Zhang Zhiqiang. Short- and long-term effects of olfactory ensheathing cells in the treatment of chronic spinal cord injury: a meta-analysis[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2019, 23(9): 1468-1476.

图/表（结果） 5

2.1 文献检索结果及纳入研究的基本特征 搜索PubMed，EMBASE和CochraneLibrary数据库，纳入328篇论文，排除重复文献、回顾性文献、个案报道、综述、动物实验及不相关文献304篇。另外，研究员手动搜索中英文数据库，纳入3篇英文文献及4篇中文文献。在仔细阅读文献中，研究员发现6篇疗效数据不适用于此次研究，3篇数据重复，详见图1。

此次研究选择了包含2 636例患者的11项研究进行短期疗效分析(术后2-8周)^[15-25]，选择了包含570例患者的6项研究进行长期疗效分析(术后1年以上)^[11^，^24-28]。安全性分析方面，纳入15篇文献^[10-11^，^21-33]，即14个临床试验里面包含946例脊髓损伤患者。纳入文献的基本特征见表2。

2.2 纳入疗效性评价文献的质量评价 纳入15个疗效性评价文献，按改良后的NOS量表评价，具体结果见表3。

2.3 Meta分析结果

2.3.1 疗效性分析

(1)短期疗效结果：异质性检验显示移植术后，短期运动及轻触觉功能改变在各研究间具有同质性(运动评分I²=0%，P=0.67；轻触觉评分I²=13%，P=0.31)，采用固定效应模型进行分析提示：脊髓损伤患者在嗅鞘细胞移植前后运动、轻触觉功能评分差异有显著性意义[WMD_运动= 4.62，95% CI(3.22，6.01)，P < 0.000 01；WMD_轻触觉=8.49，95%CI(6.76，10.22)，P < 0.000 01]，见图2，3。说明嗅鞘细胞移植后脊髓损伤患者的运动、轻触觉均有明显改善。

针刺觉功能的亚组内各研究间具有中度异质性(I²= 52%，P=0.01)，见图4A。根据Cochrane手册，该研究不能接受I² ≥ 50%的异质性结果。

为确定短期针刺觉评分变化的异质性来源，对结果进行了敏感性分析：逐一删除单项研究结果再行Meta分析后发现，剔除Chen等^[22]的研究后，异质性明显降低(I²=21%，P=0.23)。考虑该试验例数只有3例，明显小于其他研究，固将其剔除后采用固定效应模型进行分析：脊髓损伤患者在嗅鞘细胞移植前后针刺觉功能评分差异有显著性意义[WMD_针刺觉=9.30，95%CI(7.58，11.02)，P < 0.000 01]，见图4B。说明嗅鞘细胞移植后脊髓损伤患者的针刺觉在短期内有明显改善。

对嗅鞘细胞治疗晚期脊髓损伤的短期运动、轻触觉及针刺觉Meta分析结果绘制漏斗图，可见散点均匀分布在无效线两侧，提示发表偏倚的可能性很低，见图5。

(2)长期疗效结果：异质性检验显示移植术后，长期运动、轻触觉、针刺觉功能改变在各研究间具有同质性(运动评分I²=0%，P=0.95；轻触觉评分I²=0%，P=0.76；针刺觉评分I²=0%，P=0.91)，采用固定效应模型进行分析提示：脊髓损伤患者在嗅鞘细胞移植前后运动、轻触觉、针刺觉功能评分差异有显著性意义[WMD_运动=3.53，95%CI (0.71，6.34)，P=0.01；WMD_轻触觉=8.34，95%CI(4.65，12.03)，P < 0.000 01；WMD_针刺觉=7.09，95%CI(3.27，10.91)，P < 0.000 3]，见图6。说明嗅鞘细胞移植后长期随访(≥1年)显示，脊髓损伤患者的运动、轻触觉及针刺觉均有明显改善。

对嗅鞘细胞治疗晚期脊髓损伤的长期运动、轻触觉及针刺觉Meta分析结果绘制漏斗图，可见散点均匀分布在无效线两侧，提示发表偏倚的可能性很低，见图7。

2.3.2 安全性分析 安全性观察随访时间从2周到63个月不等。总体而言，不良事件发生率约为8.99%。Huang 等^[21^，^24]的2项试验中有5例患者分别死于脑出血、严重的肺部感染和呼吸循环衰竭。Dong等^[25]、Huang等^[24]和Lima等^[28]试验中共有10例脊髓损伤患者症状加重，其中4例感觉恶化，2例运动恶化，3例感觉、运动均恶化，1例四肢频发性痉挛经治疗未见好转。另外，有1例患者因高血压导致丘脑出血。其余不良事件详见表4。

参考文献

[1] Holmes D. Repairing the neural highway. Nature. 2017;552(7684): S50-S51.

[2] Barber PC, Lindsay RM. Schwann cells of the olfactory nerves contain glial fibrillary acidic protein and resemble astrocytes. Neuroscience. 1982;7(12):3077-3090.

[3] Ranmón-Cueto A, Valverde F. Olfactory bulb ensheathing glia: a unique cell type with axonal growth-promoting properties. Glia. 1995; 14(3):163-173.

[4] Doucette R. Glial influences on axonal growth in the primary olfactory system. Glia.2010;3(6):433-449.

[5] 朱海涛,朱悦,孙德日. 嗅鞘细胞抑制脊髓损伤后硫酸软骨素蛋白聚糖表达的实验研究[J]. 中国医科大学学报, 2007, 36(3):244-246.

[6] Doucette R. Glial cells in the nerve fiber layer of the main olfactory bulb of embryonic and adult mammals. Microsc Res Tech. 1993; 24(2):113-130.

[7] Khankan RR, Griffis KG, Haggerty-Skeans JR, et al. Olfactory Ensheathing Cell Transplantation after a Complete Spinal Cord Transection Mediates Neuroprotective and Immunomodulatory Mechanisms to Facilitate Regeneration. J Neurosci. 2016;36(23): 6269-6286.

[8] Pérez-Bouza A, Wigley CB, Nacimiento W, et al. Spontaneous orientation of transplanted olfactory glia influences axonal regeneration. Neuroreport.1998;9(13):2971-2975.

[9] Ranmón-Cueto A, Cordero M I, Santosbenito F F, et al. Functional recovery of paraplegic rats and motor axon regeneration in their spinal cords by olfactory ensheathing glia. Neuron. 2000; 25(2): 425-435.

[10] Féron F, Perry C, Cochrane J, et al.Autologous olfactory ensheathing cell transplantation in human spinal cord injury.Brain. 2005;128(Pt 12):2951-2960.

[11] Lima C, Escada P, Pratas-Vital J,, et al. Olfactory mucosal autografts and rehabilitation for chronic traumatic spinal cord injury. Neurorehabil Neural Repair. 2010;24(1):10-22.

[12] Li L, Adnan H, Xu B, et al. Effects of transplantation of olfactory ensheathing cells in chronic spinal cord injury: a systematic review and meta-analysis. Eur Spine J. 2015;24(5):919-930.

[13] Huang H, Chen L, Wang H, et al.Influence of patients' age on functional recovery after transplantation of olfactory ensheathing cells into injured spinal cord injury.Chin Med J (Engl). 2003; 116(10): 1488-1491

[14] Zheng Z, Liu C, Zhang L, et al. Olfactory ensheathing cell transplantation in 106 patients with old spinal cord injury Differences in ages, sexes, disease courses, injured types and sites. Neural Regen Res.2007;2(6):380-384.

[15] Wu J, Sun T, Ye C, et al. Clinical observation of fetal olfactory ensheathing glia transplantation (OEGT) in patients with complete chronic spinal cord injury. Cell Transplantation. 2012;21 Suppl 1(1):S33-7.

[16] 张磊,郑遵成,刘超,等.嗅鞘细胞移植部位与剂量的选择对陈旧性脊髓损伤患者60例神经恢复的影响[J].中国民康医学,2008, 20(9): 870-871.

[17] 刘超,郑遵成,高瑞,等. 嗅鞘细胞移植术后脊髓损伤患者功能的评价[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2008,12(16):3037-3040.

[18] 郑遵成,刘超,高瑞,等.移植时间对嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤效果的影响[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2008,12(3):583-586.

[19] Zheng Z, Liu G, Chen Y, et al.Olfactory ensheathing cell transplantation improves sympathetic skin responses in chronic spinal cord injury.Neural Regen Res.2013;8(30):2849-2855.

[20] 黄红云,王洪美,陈琳,等. 胚胎嗅鞘细胞移植治疗晚期脊髓损伤影响功能恢复的因素[J]. 中国修复重建外科杂志, 2006,20(4):434-438.

[21] 黄红云,陈琳,王洪美,等.嗅鞘细胞移植改善晚期脊髓损伤患者神经功能的近期效应[J]. 中国临床康复,2006,10(13):190-192.

[22] Chen L, Huang H, Xi H, et al. A prospective randomized double-blind clinical trial using a combination of olfactory ensheathing cells and Schwann cells for the treatment of chronic complete spinal cord injuries. Cell Transplantation. 2014;23 Suppl 1:S35.

[23] 保国锋,崔志明,李卫东,等. 嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤5例报告[J].中国组织工程研究与临床康复,2007,11(3):512-514.

[24] Huang H, Chen L, Xi H, et al. [Olfactory ensheathing cells transplantation for central nervous system diseases in 1,255 patients. Zhongguo Xiu Fu Chong Jian Wai Ke Za Zhi. 2009; 23(23):14-20.

[25] Wang D, He X, Li H, et al. Five years follow-up observation on patients with spinal cord injury treated with olfactory ensheathing cell transplantation. J Investigative Med. 2013:S5-S6.

[26] Huang H, Xi H, Chen L, et al. Long-term outcome of olfactory ensheathing cell therapy for patients with complete chronic spinal cord injury.Cell Transplantation.2012;21 Suppl 1(1):S23.

[27] Rao Y, Zhu W, Guo Y, et al. Long-term outcome of olfactory ensheathing cell transplantation in six patients with chronic complete spinal cord injury. Cell Transplantation. 2013;22(1): S21-S25.

[28] Lima C, Pratas-Vital J, Escada P, et al.Olfactory mucosa autografts in human spinal cord injury: a pilot clinical study.J Spinal Cord Med. 2006;29(3):191-203.

[29] Mackay-Sim A, Féron F, Cochrane J, et al. Autologous olfactory ensheathing cell transplantation in human paraplegia: a 3-year clinical trial. Brain.2008;131(Pt 9): 2376-2386.

[30] Tabakow P, Jarmundowicz W, Czapiga B, et al. Transplantation of autologous olfactory ensheathing cells in complete human spinal cord injury. Cell Transplantation.2013; 22(9):1591-1612.

[31] 张志成,孙天胜,叶超群,等. 胸脊柱脊髓损伤的治疗[J]. 中国康复理论与实践, 2006, 12(4):336-338.

[32] Rao Y, Zhu W, Liu H, et al. Clinical application of olfactory ensheathing cells in the treatment of spinal cord injury. J Int Med Res. 2013;41(2):473-481.

[33] Rao YJ, Zhu WX, Du ZQ, et al. Effectiveness of olfactory ensheathing cell transplantation for treatment of spinal cord injury. Genet Mol Res. 2014;13(2):4124-4129.

[34] Hagell P, Brundin P. Cell survival and clinical outcome following intrastriatal transplantation in Parkinson disease. J Neuropathol Exp Neurol. 2001;60(8):741-752.

[35] Kordower JH, Styren S, Clarke M, et al. Fetal grafting for Parkinson's disease: expression of immune markers in two patients with functional fetal nigral implants. Cell Transplantation. 1997; 6(3):213.

[36] Louveau A, Smirnov I, Keyes TJ, et al.Structural and functional features of central nervous system lymphatic vessels. Nature. 2015,523(7560):337-341

[37] 陈琳,方明俊,黄红云,等.人胚胎嗅鞘细胞移植供、受者HLA配型方法介绍[J].中国医疗前沿,2009,4(22):20-20.

[38] Xiao J, Chen L, Mao G, et al. Neurorestorative clinical application standards for the culture and quality control of olfactory ensheathing cells. J Neurorestoratol,2017; 5:175-179.

[39] Nakhjavan-Shahraki B; Yousefifard M; Rahimi-Movaghar V, et al.Transplantation of olfactory ensheathing cells on functional recovery and neuropathic pain after spinal cord injury; systematic review and meta-analysis.Sci Rep.2018;8(1):325

[40] Jiang Y, Zhu J, Xu G; et al.Intranasal delivery of stem cells to the brain.Expert Opin Drug Deliv.2011;8(5):623-32

[41] Ninomiya K, Iwatsuki K, Ohnishi Y, et al.Intranasal delivery of bone marrow stromal cells to spinal cord lesions.J Neurosurg Spine.2015;23(1):111-119

[42] Nijboer CH; Kooijman E, van Velthoven CT, et al. Intranasal Stem Cell Treatment as a Novel Therapy for Subarachnoid Hemorrhage. Stem Cells Dev.2018;27(5):313-325

[43] Salama M, Sobh M, Emam M, et al.Effect of intranasal stem cell administration on the nigrostriatal system in a mouse model of Parkinson's disease. Exp Ther Med. 2017;13(3):976-982

[44] Assinck P, Duncan GJ, Hilton BJ, et al.Cell transplantation therapy for spinal cord injury.Nat Neurosci. 2017;20(5):637-647.

引言

脊髓损伤是一种具有高致残率的神经损伤性疾病，其发生率逐年增高，现全球每年约新增50万脊髓损伤患者^[1]，这不仅给患者本人带来巨大身心伤害，还给社会带来巨额经济负担。与众多中枢神经损伤性疾病一样，目前脊髓损伤缺乏疗效确切的临床治疗措施，许多脊髓损伤患者即便接受积极的康复锻炼，仍遗留不同程度的神经功能障碍。晚期脊髓损伤是指脊髓外伤时间大于3个月，除原发性损伤外不存在其他压迫性因素，神经功能稳定3个月以上者。该时期脊髓的自身神经修复功能丧失，传统的药物及康复治疗难以促进其功能改善。这促使相关的研究人员探索安全有效的脊髓损伤的治疗方法。

既往认为，哺乳动物的中枢神经系统没有再生能力，但其嗅觉通路具有的终生持续分化和再生能力否定了该观点。英国Barber等^[2]惊讶地发现嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells，OECs)与嗅神经的永久再生能力密切相关。在分子生物学、形态学等相关领域发现，嗅鞘细胞是一种特殊类型的胶质细胞^[3]，其功能上介于许旺细胞和少突胶质细胞之间，具有神经营养^[4]、抑制胶质增生及瘢痕形成^[5]、成鞘作用^[6]、免疫调节作用^[7]、较强的迁移性等神经修复作用^[8]。多个动物实验证实，嗅鞘细胞具有修复除嗅觉系统外其他损伤神经的能力。在Ranmón-Cueto等^[9]的实验中，将嗅鞘细胞注射到大鼠脊髓损伤区域中，结果显示脊髓损伤区域有轴突再生，大鼠模型有运动、触觉、本体感觉恢复。

人类对有效神经修复手段的追求和探索从未停止，中国的黄红云教授团队于2001年首先在世界上开展嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的临床研究，纳入的23例脊髓损伤患者均有神经功能改善，开创了神经修复临床细胞治疗的新时代。2001年至今，在世界范围内已有多项嗅鞘细胞治疗脊髓损伤的临床试验，但并不是每项临床试验结果是阳性的，如Féron等^[10]和Lima等^[11]及国内部分临床试验结果提示未能发现嗅鞘细胞在治疗脊髓损伤上的明显疗效。尽管Li等^[12]对11篇不同来源的嗅鞘细胞移植治疗晚期脊髓损伤的临床文献进行综合评价后，提出嗅鞘细胞移植可能是脊髓损伤有效、安全的治疗方法，但其结果存在普遍异质性，这使嗅鞘细胞的神经修复临床疗效受到质疑。能引起差异性的因素可能有很多，如不同的年龄段、性别、种族等，但目前的文献未发现导致疗效差异的确切因素^[13-14]。嗅鞘细胞疗效的差异性也可能与随访的时间相关，而目前尚未有统计数据考虑到此差异性的存在。

此次研究回顾了嗅鞘细胞移植治疗晚期脊髓损伤的临床试验，对其中的短期及长期疗效分别进行分析，同时对其不良事件进行系统统计，以得出嗅鞘细胞治疗晚期脊髓损伤的可行性及安全性的确切证据。其中，短期疗效是指在手术伤口基本愈合，患者可配合神经系统检查时作出的疗效评价。长期疗效是指在术后3个月以上，脊柱创伤完全恢复，患者神经功能稳定时作出的疗效评价。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

材料方法

1.1 文献检索 2018年7月23日，研究员在PubMed、Cochrane图书馆、EMBASE、知网、万方数据库对嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的临床试验相关文献进行检索，检索语言不限。在检索过程中，研究员在部分文献的参考文献中筛选出符合标准的文献，并将其纳入。中文数据库中检索的关键词为“嗅鞘细胞”、“脊髓损伤”，英文数据库检索词及检索方法详见表1。

1.2 纳入与排除标准 为了评估嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的安全性和长期、短期疗效，所有纳入的研究都要求满足以下标准：①纳入病例为晚期脊髓损伤患者，并接受嗅鞘细胞移植治疗；②纳入疗效评价的文献均报告了ASIA运动、轻触觉及针刺觉评分，并清楚地记录随访时间。此次系统评价把“短期”定义为术后2-8周，“长期”定义为术后1年以上。时间节点选取的依据：脊柱手术术后2-8周患者伤口愈合，可配合行神经系统评估。正常情况下脊柱手术术后3个月基本恢复正常，术后6个月可完全恢复正常，而搜索的临床试验中术后大于1年随访的数据较多，故将长期定义为术后1年以上；③纳入安全性评估文献应详细记录不良事件的种类、例数。

2位研究员仔细翻阅所有文献，以确定相关临床试验。为了避免统计数据重复，他们去除了不同期刊中的相同文献，最后由第3方核对。

1.3 文献质量评价 纳入的疗效评价文献均记录了受试者移植前后的ASIA评分，故研究将脊髓损伤患者移植前神经功能状态列为暴露组，移植后神经功能状态列为非暴露组。所有疗效性文献由2位研究员分别进行评估，采用的标准为改良后的Newcastle-Ottawa Scale(NOS)量表，2位研究员达成一致意见后决定文献质量。

1.4 结局指标 疗效指标主要为不同随访时间的AISA运动、轻触觉及针刺觉评分，以及各种不良事件的数量和比例。由第3方进行信息核对，如有需要，联系研究者以获得更详细信息。

1.5 统计学分析 由第一作者负责统计数据处理，在疗效评价方面，采用Review Manager 5.3程序分别对2个随访阶段的AISA运动、轻触觉及针刺觉评分进行Meta分析。因为ASIA评分为计量资料，故采用加权均数差WMD (95%CI)作为统计分析量，用Meta森林图展示结果。当I² < 50%且P > 0.1时认为研究结果具有同质性，选择固定效应模型分析；若I² > 50%，P < 0.05时则尚不能认为各研究存在同质性，如果临床研究情况相同，则采用随机效应模型分析。如果无法判断异质性来源，则不予行Meta分析。

在安全性评价方面，从记录不良事件的文献中提取不良事件的数目及种类，并按不同种类进行数量累加，以获得总体不良事件发生率。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

讨论

综合分析的结果提示，在短期随访中，运动评分平均提高4.62分(3.22，6.01)，轻触觉评分提高8.49分(6.76，10.22)，针刺觉评分提高9.30分(7.58，11.02)；长期随访中，运动评分平均提高3.53分(0.71，6.34)，轻触觉评分提高8.34分(4.65，12.03)，针刺觉评分提高7.09分(3.27，10.91)。无论短期还是长期随访，与嗅鞘细胞移植术前相比，晚期脊髓损伤患者ASIA评分均有明显提高，而且分析结果的异质性非常低，因此嗅鞘细胞对晚期脊髓损伤的神经修复疗效得到最终肯定。然而，这种好转趋势似乎不能一直保持，长期随访功能评分较短期评分略有下降。如果长期疗效确实不如短期，作者认为与其他影响嗅鞘细胞疗效的因素相比，如年龄、受伤时间、性别、损伤程度和损伤水平等，导致嗅鞘细胞移植后晚期脊髓损伤患者长期随访神经功能下降的因素最有可能的是慢性免疫排斥反应及嗅鞘细胞存活率的下降，因为其他因素对疗效的影响会更早，而且目前的研究未发现其他因素导致的疗效差异的证据^[13-14]。

Hagell等^[34]与Kordower等^[35]的研究发现移植物在术后18个月仍很好存活，并且患者的临床症状好转，但停止免疫抑制药物后，移植局部可观察到T细胞，这提示存在慢性排斥反应。既往认为，中枢神经系统无淋巴系统参与免疫应答，因此具有免疫特赦性，但近年来发现中枢神经系统也具有淋巴系统，其免疫特赦性也是相对的^[36]。在一项动物实验中，Khankan等^[7]发现一种免疫抑制剂CSA治疗可改善嗅鞘细胞的存活率，这暗示了通过免疫抑制的方法可以使嗅鞘细胞持久地发挥神经修复疗效，同时避免慢性排斥反应对长期疗效的影响。为了提高移植细胞存活率、减低移植物宿主反应，陈琳等^[37]曾对一组肌萎缩侧索硬化患者行HLA配型后移植嗅鞘细胞，并与未配型患者比较，结果显示HLA配型后可进一步延缓肌萎缩侧索硬化患者病情进行性恶化的趋势，但可能因样本量小，统计学上差异尚未达到显著性。根据此次研究结果，建议除进一步扩大样本量外，可对肌萎缩侧索硬化患者进行长期追踪，明确HLA配型在嗅鞘细胞移植的作用。

有人认为，自体嗅黏膜来源的嗅鞘细胞无免疫排斥的缺陷，是修复脊髓最佳的细胞来源。但目前未见统一标准的自体嗅鞘细胞培养制备及移植操作流程，且累计例数太少，Lima等^[28]和Mackay-Sim等^[29]未能显示出显著的结果。而大部分中国临床试验使用人胚胎嗅鞘细胞，病例总量庞大，多个临床试验提示嗅鞘细胞移植疗效明显。2017年Xiao团队^[38]在多个临床试验的基础上，制定人类胚胎嗅球嗅鞘细胞培养操作规范，该标准为目前人类胚胎嗅球嗅鞘细胞培养最权威、最具体的细胞培养和质量控制标准，可操作性及重复性强，但是否需要规避免疫排斥反应及如何避免仍有待研究。

安全性方面，临床研究中未发现与嗅鞘细胞本身相关的成瘤性、细胞毒性、明显免疫排斥及无法控制的发热、感染等问题。因此，一篇2015年Meta分析将不同嗅鞘细胞类型的临床试验进行安全性分析^[12]，目前看来这种的亚组分析是没有意义的。近日，一篇针对嗅鞘细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的Meta分析提示嗅鞘细胞移植有可能导致过敏^[39]。Lima等^[28]和张志成等^[31]试验中有6例患者术后发生疼痛现象，这与术中牵拉及注射等操作关系密切，庆幸的是所有疼痛都只是暂时的，经一定时间或药物干预后疼痛可消除。Dong等^[25]认为无效及症状加重的原因可能与瘢痕、注射操作、术中出血及免疫排斥相关。从目前的安全性综合评估看来，所有的不良事件均与脊髓手术损伤相关。此次研究检索出的临床试验均使用经脑实质或脊髓实质移植嗅鞘细胞，该途径创伤大，对患者身体素质要求较高，若对患者一般状态评估有误，甚至导致死亡。因此，为了减少嗅鞘细胞移植的不良反应，未来的临床研究应在做好手术前准备与评估的基础上，重点探索出一种微创有效的移植途经。目前已有大量动物研究表明，经鼻黏膜下入路是一种安全、微创、可重复操作的细胞移植方法^[40-43]，但临床尚未见报道。最近，由中国医师协会神经修复学专业委员会牵头的经鼻黏膜下入路嗅鞘细胞移植多中心随机对照临床试验已在全国各地开展，期待相关研究结果的公布。

此次系统评价的文献部分是自身对照试验，证据级别较低，但文献的移植时间窗口为3个月以上，大多数在6个月以上，故可排除脊髓神经自我修复的影响，肯定嗅鞘细胞移植在脊髓损伤治疗的临床疗效。另外，长期随访神经功能评分较短期下降，但由于两组数据纳入病例来源不同，不足以证明嗅鞘细胞在治疗脊髓损伤患者的长期效果减弱，因此需要更多临床数据支持该结论。

近日，Assinck等^[44]提出嗅鞘细胞是治疗脊髓损伤的备选细胞之一。根据此次系统评价的结果，移植嗅鞘细胞已经成为晚期脊髓损伤患者的安全、有效的治疗方法。未来可通过更可靠的嗅鞘细胞移植随机对照试验(randomized controlled trial，RCT)，寻找精准治疗组合方案，给全世界脊髓损伤患者带来更多希望和曙光。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

嗅鞘细胞治疗晚期脊髓损伤短期与长期疗效的Meta分析

Short- and long-term effects of olfactory ensheathing cells in the treatment of chronic spinal cord injury: a meta-analysis

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[1]	闵友江, 姚海华, 孙洁, 周璇, 余航, 孙前谱, 洪恩四. 磁共振评价“三通针法”对脊髓损伤患者脑功能的影响[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(在线): 1-8.
[2]	陈俊名, 岳辰, 何沛霖, 张俊涛, 孙墨渊, 刘又文. 髋关节置换与股骨近端防旋髓内钉内固定修复高龄股骨转子间骨折效果的Meta分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(9): 1452-1457.
[3]	陈进平, 李奎, 陈骞, 郭浩然, 张映波, 蔚芃. 开放性脊柱手术应用氨甲环酸的疗效及安全性的Meta分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(9): 1458-1464.
[4]	胡凯, 乔晓红, 张永红, 王栋, 秦泗河. 空心螺钉和钢板内固定修复移位型跟骨关节内骨折：基于15篇随机对照试验的Meta分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(9): 1465-1470.
[5]	黄登承, 王志科, 曹学伟. 体外冲击波疗法治疗中老年膝骨关节炎短期疗效对比的荟萃分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(9): 1471-1476.
[6]	蒋红英, 朱亮, 余曦, 黄靖, 向小娜, 兰正燕, 何红晨. 富血小板血浆干预脊髓损伤患者压力性损伤的作用[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1149-1153.
[7]	王永生, 吴旸, 李燕春. 急性大强度运动对成年人食欲激素影响的Meta分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1305-1312.
[8]	万然, 史旭, 刘京松, 王岩松. 间充质干细胞分泌组治疗脊髓损伤的研究进展[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1088-1095.
[9]	孔德胜, 何晶晶, 冯宝峰, 郭瑞云, Asiamah Ernest Amponsah, 吕飞, 张舒涵, 张晓琳, 马隽, 崔慧先. 间充质干细胞修复大动物模型脊髓损伤疗效评价的Meta分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1142-1148.
[10]	李琰, 王佩, 邓东焕, 严伟, 李磊, 姜红江. 电针干预全膝关节置换后疼痛的Meta分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(6): 957-963.
[11]	何祥忠, 陈海云, 刘军, 吕阳, 潘建科, 杨文斌, 何静雯, 黄俊翰. 富血小板血浆联合微骨折对比微骨折治疗膝关节软骨病变的Meta分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(6): 964-969.
[12]	化昊天, 赵文宇, 张磊, 白文博, 王新卫. 抗生素人工骨治疗慢性骨髓炎疗效和安全性的Meta分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(6): 970-976.
[13]	马斌祥, 何万庆, 周广超, 关永林. 雷公藤内酯醇改善大鼠脊髓损伤后的运动障碍[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(5): 701-706.
[14]	聂慧娟, 黄织春. 转化生长因子β1诱导心肌成纤维细胞转分化过程中Hedgehog信号通路的作用机制[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(5): 754-760.
[15]	李洋, 张明勇. 双Endobutton与锁骨钩钢板治疗肩锁关节脱位疗效比较的Meta分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(3): 463-470.