膨体聚四氟乙烯与人脂肪干细胞的体外生物相容性

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2014.12.021

中国组织工程研究 ›› 2014, Vol. 18 ›› Issue (12): 1932-1937.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.12.021

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膨体聚四氟乙烯与人脂肪干细胞的体外生物相容性

杨柳，姜南，徐扬阳，朱梦琳，曹菁

郑州大学第五附属医院整形美容科，河南省郑州市 450052

修回日期:2014-01-13 出版日期:2014-03-19 发布日期:2014-03-19
通讯作者: 姜南，主任医师，硕士生导师，郑州大学第五附属医院整形美容科，河南省郑州市 450052
作者简介:杨柳，女，1988年生，河南省安阳县人，汉族，郑州大学在读硕士，主要从事整形美容的基础与临床研究。
基金资助:
河南省科技厅项目(041000531010)

In vitro biocompatibility of expanded polytetrafluoroethylene scaffold and human adipose-derived stem cells

Yang Liu, Jiang Nan, Xu Yang-yang, Zhu Meng-lin, Cao Jing

Department of Plastic and Aesthetic Surgery, the Fifth Affiliated Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, Henan Province, China

Revised:2014-01-13 Online:2014-03-19 Published:2014-03-19
Contact: Jiang Nan, Chief physician, Master’s supervisor, Department of Plastic and Aesthetic Surgery, the Fifth Affiliated Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, Henan Province, China
About author:Yang Liu, Studying for master’s degree, Department of Plastic and Aesthetic Surgery, the Fifth Affiliated Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, Henan Province, China
Supported by:
the Program of Henan Provincial Science and Technology Bureau, No. 041000531010

摘要/Abstract

摘要：

背景：膨体聚四氟乙烯多孔高分子聚合材料是临床常用的植入假体，具有良好的生物相容性，不易变形、变质，不产生炎症吸收反应，可允许细胞游走和组织向内生长。
目的：观察人脂肪干细胞与膨体聚四氟乙烯材料的生物相容性。
方法：将第4代人脂肪干细胞与膨体聚四氟乙烯体外复合培养，采用倒置相差显微镜观察细胞在支架上黏附、生长及增殖情况，计算细胞黏附率，MTT比色法检测细胞增殖率。
结果与结论：刚接种的细胞呈圆形透亮，在支架材料表面分布均匀，细胞活性佳，3 h后大量细胞贴壁，24 h后可见少量呈短梭形的脂肪干细胞贴壁，3 d首次换液，细胞清晰可见，低密度生长时呈短梭形或多角形，分布均匀，种植7 d后细胞数量明显增加，极少细胞从支架上掉落，细胞黏附率平均达95.7%，并且细胞仍保持正常的分裂增殖速度。说明膨体聚四氟乙烯材料具有良好的细胞相容性，可作为脂肪组织工程的种子。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

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关键词: 生物材料, 材料相容性, 聚四氟乙烯, 人脂肪干细胞, 支架, 组织工程, 生物相容性

Abstract:

BACKGROUND: Expanded polytetrafluoroethylene is a kind of porous polymer materials which is commonly used as clinical implants, and it has good biocompatibility, and is not easy to deformation or metamorphism. There is no existence of inflammation absorption reaction, and it allows the cell migration and tissue ingrowth.
OBJECTIVE: To study the biocompatibility of expanded polytetrafluoroethylene scaffold and human adipose-derived stem cells.
METHODS: The passage 4 human adipose-derived stem cells were co-cultured with expanded polytetrafluoroethylene scaffold in vitro. The morphology and function of cells adhered to the scaffold were observed by inverted phase contrast microscope, and cell adhesive rates and proliferation rates were also calculated by MTT assay.
RESULTS AND CONCLUSION: The inoculated cells were round and bright, distributed on the surface of scaffolds uniformly, with good cell viability. After 3 hours a large number of adherent cells were observed from the micrograph; after 24 hours there were a small amount of short-spindle adipose-derived stem cells. After cultured for 3 days, the short fusiform or polygon cells could be seen clearly. After cultured for 7 days, the number of cells increased significantly, few cells fell off from the scaffold, and cell adhesion rate was up to an average of 95.7%. Meanwhile, the cells revealed normal splitting proliferation rate. These findings indicate that human adipose-derived stem cells are able to attach, grow and proliferate well on the scaffold. Expanded polytetrafluoroethylene reveals excellent cellular compatibility and can be used as a vehicle for adipose tissue engineering.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

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Key words: biocompatible materials, polytetrafluoroethylene, stem cells, materials testing

中图分类号:

R318

杨柳，姜南，徐扬阳，朱梦琳，曹菁. 膨体聚四氟乙烯与人脂肪干细胞的体外生物相容性[J]. 中国组织工程研究, 2014, 18(12): 1932-1937.

Yang Liu, Jiang Nan, Xu Yang-yang, Zhu Meng-lin, Cao Jing . In vitro biocompatibility of expanded polytetrafluoroethylene scaffold and human adipose-derived stem cells [J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2014, 18(12): 1932-1937.

图/表（结果） 3

2.1 原代培养人脂肪干细胞的生长、形态特点及表现 人脂肪来源干细胞原代提取后细胞呈颗粒状悬浮于培养液中，3 h后开始出现部分细胞贴壁。培养72 h后镜下为成纤维细胞样形态贴壁生长，呈涡旋状集落分布，培养至第7天细胞生长融合至80%-90%(图1)。传代细胞生长速度明显快于原代细胞，呈长梭形编织状，局部呈漩涡状生长，细胞排列更加整齐有序，形态单一，极少见杂质细胞。表明脂肪干细胞能在支架上良好的附着、生长和增殖。

刚接种的细胞镜下呈圆形透亮，在支架材料表面分布均匀，细胞活性佳，3 h后大量细胞贴壁，24 h后可见少量呈短梭形的脂肪干细胞贴壁，3 d首次换液，细胞清晰可见，低密度生长时呈短梭形或多角形，分布均匀，种植7 d后，细胞数量明显增加，极少细胞从支架上掉落。

2.2 流式细胞仪分析人脂肪干细胞的表型特征 流式细胞仪分析显示第3代的脂肪干细胞的表面抗原CD105表达阳性(86.60±1.37)%，而CD45(7.50±0.67)%、CD34(7.71± 0.17)%、CD31(0.70±0.26)%、CD117(0.63±0.07)%、HLA-DR(0.50±0.45)%、CD14(8.40±0.09)%、CD11b (0.42±0.04)%表达阴性(图2)。

2.3 人脂肪干细胞的成脂、成骨诱导分化 人脂肪干细胞经诱导后向成脂细胞分化，细胞体积增大，胞质中可见许多大小不一的脂滴，脂滴多者可占整个细胞体积的80%-90%，细胞核体积缩小或消失，脂滴最早出现在诱导后五六天，诱导2周时，细胞分化达高峰，细胞体积达到最大，胞质内脂滴数量最多，油红O染色为阳性；人脂肪干细胞经成骨诱导后由长梭形逐渐变为多角形或不规则形，细胞质中可见较多细小颗粒，诱导7 d时细胞外出现细小矿化结节，21 d时可见明显钙结节形成，茜素红染色为阳性(图3)。

2.4 细胞黏附率检测 经检测，10块复合材料中，每块细胞黏附率均达90%以上，平均达95.7%，说明该支架对细胞有良好的黏附性。

2.5 MTT法检测材料上人脂肪干细胞的增殖情况 从活细胞吸光度值数据来看，细胞接种后，实验组和空白对照组随时间延长细胞活性逐渐增加，仍可保持正常的分裂增殖速度，两组之间相比差异无显著性意义(P > 0.05，表1)。

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引言

人脂肪干细胞与骨髓间充质干细胞在细胞形态、生长动力学、细胞衰老性、表面标志、多向分化潜能等方面没有明显区别^[1]，其具有的增殖能力和多向分化潜能，对多种组织的损伤具有良好的修复作用，而且具有取材方便、创伤小、细胞获取量大等优点，因而成为组织工程研究中的重要种子细胞之一^[2]。理想的种植材料应具有良好的生物相容性，对细胞、组织等无毒性。不同材料对细胞的生长、分化和黏附均会产生不同的影响，选择良好的细胞外基质作为细胞培养用的支架，可以减少种子细胞的流失和死亡。细胞只有吸附于理想的支架上才能进行细胞迁移、增殖^[3]，因而种子细胞能否在支架材料上良好生长并表达自身特异性功能是目前组织工程研究的一个热点^[4]。

膨体聚四氟乙烯是一种多孔高分子聚合材料，是近年来临床常用的植入假体，具有良好的生物相容性，且不变形、不变质、不产生炎性吸收反应，其体积的80%为纤维间隙，可容许细胞游走及组织向内生长，不形成纤维囊，在外科领域有重要的应用价值^[5]。因此，自20世纪70年代开始膨体聚四氟乙烯的人造血管被首先应用于临床，在20世纪80年代初期一些发达国家已将其应用于整形美容外科^[6]，尤其是以隆鼻^[7]、面部凹陷畸形修复、唇线增高、唇加厚、鼻唇沟过深的整形美容、耳郭缺损修复及颏成形等的报道较为多见^[8-9]。实验用人脂肪干细胞与膨体聚四氟乙烯支架材料进行体外复合培养，观察支架材料对细胞黏附、生长、增殖等功能的影响，以便寻找适宜的脂肪组织工程细胞载体，为进一步的体内实验提供理论基础。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程
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材料方法

设计：细胞学体外对比观察实验。

时间及地点：于2012年10月至2013年9月在郑州大学第五附属医院中心实验室完成。

材料：

组织来源：脂肪组织取自郑州大学第五附属医院整形美容科行抽脂手术的女性，共4例，年龄35-50岁，术前检查排除冠心病、高血压、糖尿病、传染病等。取材前与患者谈话，征得其同意获取脂肪组织进行实验。

实验方法：

人脂肪干细胞的分离培养及传代^[8-9]：将脂肪抽吸手术获取的脂肪组织约10 mL，用PBS反复冲洗，去除红细胞和组织碎片，剔除脂肪组织中肉眼可见的血管、筋膜，再用PBS反复冲洗，将脂肪颗粒挑出，用眼科剪充分剪碎，1 000 r/min离心5 min，离心半径13 cm，去除上层油脂及下层灌洗液，将其中3 mL脂肪颗粒用0.1%Ⅰ型胶原酶37 ℃恒温振荡消化50 min，期间每15 min颠倒混匀1次，用等量体积的完全培养基(DMEM/F12+体积分数10%胎牛血清+1%双抗)中和终止消化，1 000 r/min离心5 min，离心半径13 cm，离心后去除悬浮的脂肪细胞、脂滴、细胞杂质及上清。以完全培养基重悬沉淀，得到人脂肪干细胞悬液，100目筛网过滤后，用捉虫蓝染色显微镜下检测细胞活性并计数，按5×10⁷L^-1细胞浓度接种入无菌培养瓶。在37 ℃、体积分数5%CO₂、饱和湿度的培养箱中孵育，3 d后首次换液，之后3 d换液1次，待原代细胞达80%-90%融合时进行传代。0.25%胰蛋白酶(含0.02%EDTA)将贴壁细胞消化分离，然后按1∶2的比例进行传代。倒置相差显微镜下观察细胞生长及形态特征。

流式细胞仪检测脂肪干细胞相关抗原^[10-11]：流式细胞仪对第3代脂肪干细胞表面相对特异性抗原进行检测。待细胞生长至90%融合时，0.25%胰蛋白酶消化待检细胞，完全培养基终止消化，1 000 r/min离心5 min，离心半径13 cm，吸去上清液，PBS重悬细胞，于每个样品管内加入细胞悬液。采用抗体直接标记法，在200 μL细胞沉淀中(细胞数量约1×10⁹L^-1)分别加入小鼠抗人CD34-FITC、CD117-PE、CD45-FITC、CD31-PE、HLA-DR-FITC、CD105-PE、CD14-FITC、CD11b-PE等荧光抗体，各20 μL，室温避光孵育20 min，再用PBS清洗1遍，上机测定抗原的阳性率。

脂肪干细胞成脂诱导检测：将第3代脂肪干细胞按2×10⁸L^-1细胞浓度接种于6孔板中，在37 ℃、体积分数为5%CO₂、饱和湿度的培养箱中孵育，待细胞生长融合为90%时更换为成脂诱导培养基(含体积分数10%胎牛血清，1 µmol/L地塞米松，10 µmol/L胰岛素，200 µmol/L吲哚美辛，0.5 mmol/L的IBMX，1%双抗)，每3 d换液1次，加入普通培养基的孔作为阴性对照。继续培养2周，分别对诱导后的细胞和阴性对照细胞进行油红O染色。油红O染色具体步骤：分化诱导完成后，去除成脂诱导培养基，加入40 g/L多聚甲醛，室温固定30 min，PBS洗2遍，加入5%油红O工作液，室温孵育1 h，PBS洗2遍，晾干后显微镜下观察并照相。

脂肪干细胞成骨诱导检测：选取第3代在含体积分数10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中增殖的人脂肪干细胞，以每孔2×10⁴个细胞接种到6孔板中，在37 ℃、体积分数为5%CO₂、饱和湿度的培养箱中孵育过夜，待细胞生长融合为60%时加入成骨诱导培养基(含体积分数10%胎牛血清，0.1 µmol/L地塞米松，50 mg/L抗坏血酸，10 µmol/L的β-磷酸甘油，1%双抗)，每3 d换液1次，并设只加入普通培养基的孔为阴性对照孔，继续培养至21 d后进行茜素红染色。染色步骤如下：去除成骨诱导培养基，用40 g/L多聚甲醛固定30 min，PBS洗2遍，加入1%茜素红染液(pH值8.3，Tris-HCl配制)，室温孵育30 min，PBS洗2遍，晾干后显微镜下观察并照相。

细胞-支架复合物的形成：将膨体聚四氟乙烯材料裁制成大小约10 mm×10 mm×2 mm的大方块和5 mm×5 mm×2 mm的小方块，用体积分数为75%乙醇浸泡30 min，于超净台上过夜晾干，紫外线照射30 min，DMEM培养液平衡24 h后待用。将第4代脂肪干细胞消化后制成细胞悬液，细胞浓度为1×10⁸L^-1，在材料表面接种0.2 mL细胞悬液置于12孔培养板中，静置4 h后，加入含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养液，置于37 ℃、体积分数为5%CO₂、饱和湿度的培养箱中孵育。细胞接种支架后，倒置显微镜动态观察细胞在支架上黏附、伸展、生长、分裂情况。

细胞黏附率检测：根据Yoshimura等^[12]报道的方法，取24孔板培养板，在孔内植入备用的膨体聚四氟乙烯材料10块，大小约10 mm×10 mm×2 mm。将浓度为1×10⁸L^-1的细胞悬液0.2 mL滴加到材料上，静置4 h后，换于另一培养板，加入含体积分数10%胎牛血清的DMEM/F12培养基，将原培养板中细胞消化收集，细胞计数仪计数，得出流失的细胞数；细胞材料复合物培养24 h后，在培养液中轻轻晃动，换于另一培养板，重复上述步骤，得出未黏附细胞数。黏附率=(接种细胞数-流失细胞数-未黏附细胞数)/(接种细胞数-流失细胞数)×100%。

MTT比色法检测细胞增殖情况：将膨体聚四氟乙烯材料10块(5 mm×5 mm×2 mm)分别置于96孔培养板中，并设10孔为不加材料的空白对照组，各3个复孔。将浓度为1×10⁸L^-1的细胞悬液按每孔100 μL接种于材料及空白孔，置于37 ℃、体积分数为5%CO₂、饱和湿度的培养箱中孵育3，5，7 d。以主波长490 nm，参比波长630 nm在酶标仪上比色，测定吸光度A值。

主要观察指标：人脂肪干细胞接种于膨体聚四氟乙烯材料前后的形态、增殖及黏附。

统计学分析：所得数据以x(_)±s表示，采用统计软件SPSS 17.0进行统计分析，P < 0.05为差异有显著意义。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

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讨论

膨体聚四氟乙烯是一种多孔的高分子聚合材料，是临床常用的植入假体，具有良好的生物相容性，且不变形、不变质、不产生炎症吸收反应，其体积的80%为纤维间隙，允许细胞游走和组织向内生长^[13]。一直是临床上理想的软组织填充材料，排斥反应的发生率低，周围组织能够长入移植物内，不形成纤维囊，也能够整块的取出^[15-20]。1983年，Neel^[20]首次进行了膨体聚四氟乙烯材料用于面部充填实验论证，此后它开始被用于面部整形及美容手术中，目前已广泛应用于血管外科、普外科、妇科、胸外科、口腔外科、整形外科等临床各科。王贺宾等^[16]探讨对鼻整形手术患者采用自体耳软骨与膨体聚四氟乙烯的临床效果，试验选择需要行鼻整形手术的患者43例，所有患者均采用鼻正中蝶型切口联合双侧鼻翼缘切口入路进行自体耳软骨与膨体聚四氟乙烯鼻整形术，针对所有患者手术资料及术后效果等情况进行回顾性分析。结果显示本组所有患者均完成手术，其中39例手术完成度良好，整形后鼻形态美观，患者对手术效果满意，且术后无并发症发生，总治疗有效率为90.7%，患者总体满意率为95.3%，提示采用自体耳软骨与膨体聚四氟乙烯在鼻整形手术中效果显著，且手术安全有效，术后患者满意率良好。李春光等^[17]为分析膨体聚四氟乙烯(Gore-Tex)补片在胸壁重建中的注意事项，回顾性分析了33例使用膨体聚四氟乙烯补片进行修复巨大胸壁缺损的临床资料，其中男19例，女14例；平均年龄45.7岁；根据肿瘤位置、大小选择不同的手术切口；术中尽量保留正常的胸壁软组织，骨性胸壁缺损采用膨体聚四氟乙烯补片进行重建，软组织直接对拢缝合，全层胸壁缺损采用转移肌皮瓣覆盖创面。结果显示全组33例均手术顺利，围术期无死亡患者；恶性肿瘤25例，良性肿瘤8例，均被完整切除，切除瘤体直径8-20 cm。随访5-60个月，失访3例，无排斥反应及反常呼吸，无异物感，感染率3%，说明膨体聚四氟乙烯补片具有极佳的生物相容性，是安全有效的胸壁重建材料。袁义等^[18]评价自行研制的带腱索的超微孔膨体聚四氟乙烯人工无支架二尖瓣在体动物实验的血流动力学结果，实验选择健康绵羊8只，在体外循环下经左心耳切口显露二尖瓣，切除瓣叶、腱索及部分乳头肌，保留乳头肌根部，将带腱索的人工柔性无支架瓣膜置入二尖瓣位置，人工腱索固定在乳头肌上。术中测定心率、血压及心排血量等循环指标，用导管直接测定左房压、左室压，计算出平均跨瓣压差，用心脏彩超测定瓣膜的平均跨瓣压差，对两种方法测定的平均跨瓣压差进行比较。实验羊术后3周，用不同剂量多巴酚丁胺模拟不同运动状况下，分别测量以上指标。结果显示计算出的平均跨瓣压差为(3.25±0.77) mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)，心脏彩超测得平均跨瓣压差为(3.43±0.54) mm Hg，两种方法测的平均跨瓣压差差异无显著性意义；多巴酚丁胺模拟运动状态下，心排血量差异有显著性意义；平均跨瓣压差、有效开口面积随心排血量变化差异有显著性意义；返流百分比随心排血量增加而减少，统计学差异有显著性意义；平均跨瓣压差显著小于国家人工瓣膜标准(< 10 mm Hg)，有效开口面积显著大于国家人工瓣膜有效开口面积标准(> 1.5 cm²)，返流百分比显著低于国家质量检测标准(< 10%)，说明自行研制的带腱索的人工柔性无支架二尖瓣血流动力学指标满意，与体外脉动流测试结果一致，膨体聚四氟乙烯人工无支架二尖瓣在体血流动力学特性符合国家质量人工瓣膜检测标准。田田等^[19]为了解高分子材料膨体聚四氟乙烯(ePTFE)作为创面覆盖材料的可行性，将45只SD大鼠背部制成全层皮肤至筋膜层损伤创面后分为：自体移植组，创面行自体皮片回植；异体移植组，以15只Wistar大鼠为供皮鼠，将皮片移植于SD大鼠创面；实验组，在创面上覆盖膨体聚四氟乙烯，每组15只SD大鼠。肉眼观察各组大鼠创面愈合情况，于术后3，7，14 d切取各组大鼠创面组织标本行苏木精-伊红染色，光学显微镜下观察组织切片中巨噬细胞、Fb、淋巴细胞数量；免疫组织化学法检测γ-干扰素和白细胞介素2表达水平。自体移植组、实验组大鼠创面愈合良好，未见红肿及感染征象；异体移植组大鼠术后8 d出现排斥反应，表皮有不同程度的变性坏死，创缘红肿；各时相点异体移植组镜下可见巨噬细胞、Fb、淋巴细胞数量均高于实验组和自体移植组(P < 0.01)；免疫组织化学染色可见，术后7 d异体移植组γ-干扰素和白细胞介素2表达均明显低于自体移植组(P < 0.01)和实验组(P < 0.01)，提示膨体聚四氟乙烯可引起较小的炎性反应及异物反应，置于受损创面上未见不良反应，可以将其作为创面覆盖材料。

脂肪组织是一种能量储存的结构，同时具有调节体温、保护脏器等作用。相对于人体其他组织，脂肪干细胞更易于通过脂肪抽吸术等方式大量获得，患者痛苦小，不会对人体产生明显的生物学和解剖学不良后果。研究发现200 mL脂肪抽吸组织可产生超过10⁶个细胞，并且这种细胞来自自体，不会产生排斥反应和伦理学问题，在不同的诱导条件下可以向不同的细胞分化，从而可作为组织工程的种子细胞。

软组织缺失是整形外科关注的焦点问题之一，传统的组织重建方法存在供皮区缺损、植入物吸收以及产生异物反应，近年来干细胞被认为可能是一种新颖的治疗方法，而脂肪组织工程也一直在探索寻找适合的载体材料。支架的化学组成成分、表面理化特性、机械稳定性和三维空间支架结构均是重要因素，而且必须保证移植后细胞的渗透、足够的增值和细胞在构建物中完全分化。目前已用于脂肪组织工程的生物材料有胶原微粒、透明质酸基材料、聚乳酸-羟基乙酸共聚物及丝纤蛋白-壳聚糖复合材料等，虽然这些支架的生物性相容性较好，但仍存在不足，如对缺损组织的修复不足，随时间增长材料逐渐降解等，因此，仍需要进一步探索出一种适用于脂肪组织工程的载体材料。而膨体聚四氟乙烯材料在临床被广泛用于软组织填充、隆鼻、隆颏等，将膨体聚四氟乙烯支架材料与人脂肪干细胞复合，可以增加脂肪干细胞的成活及增殖，进一步促进膨体聚四氟乙烯支架材料的生物相容性。

作者利用脂肪抽吸术所得脂肪成功地分离培养出人脂肪干细胞，检测了体外培养的第3代脂肪干细胞的表面抗原，结果显示为CD105阳性。由于目前还没有特异性的间充质干细胞表面标志，流式细胞仪的检测结果对干细胞的确认只能起到辅助作用^[20-23]。为进一步确认实验所得细胞具有干细胞特性，对细胞进行了多系定向诱导分化，经特殊染色证实其可向成脂、成骨方向分化。考虑其来源丰富、取材容易、创伤小、能够进行自体移植、无免疫排斥反应等优点^[20-23]，人脂肪干细胞可能是将来最理想的组织工程和细胞疗法的种子细胞，具有广阔的应用前景。

实验利用人脂肪干细胞作为种子细胞，进行体外细胞种植膨体聚四氟乙烯支架，通过倒置显微镜观察细胞伸展、黏附和生长过程。细胞生长状态良好，无明显细胞毒性表现，说明该支架对细胞有良好的亲和力。MTT法常用于体外细胞增殖的检测，通过测定活细胞光吸收值，间接反映活细胞数量。实验中细胞支架复合培养后，材料接种组细胞的增殖未受不良影响。这为临床上进一步运用膨体聚四氟乙烯支架材料复合人脂肪干细胞进行软组织填充、面部凹陷、体表凹陷缺损的修复提供了研究基础。

综合以上，实验表明膨体聚四氟乙烯支架材料与人脂肪干细胞具有良好的体外生物相容性，可作为构建脂肪组织工程的细胞载体。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程
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膨体聚四氟乙烯与人脂肪干细胞的体外生物相容性

In vitro biocompatibility of expanded polytetrafluoroethylene scaffold and human adipose-derived stem cells

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