细菌纤维素敷料制备及对手术伤口的促愈合作用

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.0923

摘要/Abstract

摘要：

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文题释义：

细菌纤维素敷料：是一种非常理想的生物敷料，它具有良好的亲水、抑菌特性和良好的生物兼容性，与传统的干性敷料和其他新型敷料相比，在促进伤口愈合中体现出明显的优越性。

传统干性伤口敷料：包括纱布、绷带及脱脂棉等，保湿效果差，容易与伤口皮肤发生粘连，导致伤口愈合缓慢、二次伤害和形成瘢痕。

背景：目前市场上医用伤口敷料种类繁多，不同伤口敷料也各有优劣。有大量研究已证实细菌纤维素作为伤口敷料的可行性，但未见其与其他敷料在促进伤口愈合中的对比研究报道。

目的：通过与干性纱布敷料和水胶体辅料的对比，研究细菌纤维素敷料(BC-HEC-1)在促进大鼠伤口愈合中的优势。

方法：采用木葡糖酸醋杆菌浅盘发酵得到细菌纤维素膜，对该纤维素膜进行一系列的后处理步骤得到无菌的BC-HEC-1，对其细胞毒性、含水量及pH值进行检测，红外图谱和扫描电子显微镜进行鉴定。采用SD大鼠进行动物实验，手术制造2 cm×2 cm皮肤伤口，随机分为3组：①纱布组采用传统的无菌纱布进行包扎，并用黏性无纺布固定；②水胶体敷料组采用市售的水胶体敷料包扎；③BC-HEC-1敷料组采用自制细菌纤维素敷料进行包扎，并用黏性无纺布进行固定。术后每日更换敷料，隔日测量1次伤口长度和宽度，计算伤口面积和伤口愈合率，并于术后第4，7，14，21天分别取动物的伤口皮肤制作病理切片，检测血清中转化生长因子β1和血小板源性生长因子水平。

结果与结论：①制备的细菌纤维素无细胞毒性，含水量95%-98%，pH值=6.5，红外扫描图谱与标准细菌纤维素一致，扫描电镜图谱显示BC-HEC-1为纳米级细菌纤维素材料；②动物实验中，水胶体敷料组和BC-HEC-1敷料组动物伤口保湿和防粘连效果要明显均优于传统的干性无菌纱布敷料，伤口面积较小；BC-HEC-1敷料组在术后第4-14天的伤口愈合率均明显高于纱布组与水胶体敷料组(P < 0.05)；在术后第7天伤口愈合初期，BC-HEC-1敷料组血清中血小板源性生长因子水平高于纱布组和水胶体敷料组(P < 0.05)；③病理切片观察，各组在第14天时均可见明显的肉芽组织，其中纱布组和水胶体敷料组肉芽组织相对较薄，且结构疏松，排列无规则，BC-HEC-1敷料组肉芽组织厚且致密，排列规则。④以上实验结果表明，BC-HEC-1具有明显优于传统敷料的保湿效果和促进伤口愈合效果。

ORCID: 0000-0002-2409-1803(许玲华)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

关键词: 细菌纤维素, 纳米材料, 生物材料, 膜生物材料, 湿性敷料, 伤口愈合, 转化生长因子β1, 血小板源生长因子, 肉芽组织, 红外扫描图谱, 电镜扫描图谱, 细胞毒性, 组织工程

Abstract:

BACKGROUND: There are various wound dressings with their own merits and demerits in the market. Increasing studies have confirmed the feasibility of bacterial cellulose as wound dressing, while few reports has been published to compare bacterial cellulose with other kinds of wound dressings in promoting wound healing.

OBJECTIVE: To study the wound healing effect of bacterial cellulose wound dressing (BC-HEC-1) in comparison with gauze and hydrocolloid in rats.

METHODS: BC-HEC-1 was sterilely prepared by Gluconacetobacter xylinus fermenting followed by a series of process steps. The cytotoxicity, moisture content and pH were examined. In addition, the component and surface morphology of BC-HEC-1 were examined by infrared spectroscopy and scanning electron microscope respectively. Sprague-Dawley rats were anesthetized and a 2 cm×2 cm skin wound was made in each rat by sterile surgery. All the animals were thereafter divided into three groups (n=20 per group): gauze group, hydrocolloid group and BC-HEC-1 group, wrapped with the corresponding dressing, respectively. The dressing in each group was changed every day. Wound area was calculated by measuring wound length and width every other days after surgery. Wound samples from each rat were taken for histological observation at 4, 7, 14, 21 days after surgery. Meanwhile, serum levels of transforming growth factor beta 1 and platelet-derived growth factor were detected.

RESULTS AND CONCLUSION: BC-HEC-1 was proved to have good hydrophilic property and no cytotoxicity. The water content was between 95%-98% and the pH was 6.5. The structure of BC-HEC-1 was identified by the infrared spectrum. Scanning electron microscope results showed that BC-HEC-1 is a nanoscale biomaterial. Compared with the traditional gauze dressing and hydrocolloid dressing, BC-HEC-1 wound dressing significantly increased the wound healing rate at 4-14 days after surgery (P < 0.05), and showed better moisturizing and anti-sticking effect as well as smaller wound area. The wound healing rate in the BC-HEC-1 group was significantly higher than that in the gauze and hydrocolloid groups at 4-14 days after surgery. The serum level of platelet-derived growth factor in the BC-HEC-1 group was also significantly increased compared with the gauze and hydrocolloid groups at 7 days after surgery (P < 0.05). Histopathological observation indicated BC-HEC-1 could promote the granulation tissue growth moderately and orderly, while the granulation tissues in the other groups had relative thin thickness, loose structure, and irregular arrangement. In conclusion, the BC-HEC-1 can effectively promote wound healing, and meanwhile, it shows better moisturizing effects.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

Key words: Tissue Engineering, Biocompatible Materials, Transforming Growth Factor beta1, Platelet-Derived Growth Factor

中图分类号:

R318

许玲华，江晓梅，鲍素敏，胡雪峰，刘权，吴波，肖瑛，李静. 细菌纤维素敷料制备及对手术伤口的促愈合作用[J]. 中国组织工程研究, 2018, 22(26): 4150-4155.

Xu Ling-hua, Jiang Xiao-mei, Bao Su-min, Hu Xue-feng, Liu Quan, Wu Bo, Xiao Ying, Li Jing. Preparation of bacterial cellulose dressing and its effect on accelerating wound healing[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2018, 22(26): 4150-4155.

图/表（结果） 8

2.1 细菌纤维素的理化性质鉴定结果细胞毒性观察结果如表1所示，结果显示空白和高密度聚乙烯阴性对照显示无毒性，质量浓度5 g/L苯酚溶液作为阳性对照具有严重的细胞毒性，BC-HEC-1细菌纤维素敷料细胞毒性计分为0，按照标准判定，为无细胞毒性。

含水量测试：95%-98%。pH值测定：均为6.5，呈弱酸性。红外光谱，如下图1所示。结果显示BC-HEC-1细菌纤维素与标准对照品相比，红外光谱大体相同，仅在第3主峰处有一点差别，推测是两者干燥后水分不同所致。

扫描电镜结果如图2所示。表明HEC产品纤维素的直径为30-60 nm，为纳米级别纤维素。

2.2 动物伤口愈合结果

2.2.1 实验动物数量分析纳入大鼠60只，无脱失，无意外或感染导致死亡，均计入结果分析。

2.2.2 伤口保湿效果如图3所示，对各实验组大鼠的一般观察如下：第4天时，明显观察到纱布组伤口粘连、结痂和出血，伤口面积仍较大；水胶体敷料组伤口湿润效果较好，无粘连，但伤口愈合慢；BC-HEC-1敷料组伤口保湿效果均较好，并在伤口表面形成可见保护层，伤口面积明显减小，愈合率在30%以上。

术后第7天，各组伤口愈合率为40%-70%，纱布组仍有观察到伤口结痂、渗血；水胶体敷料组伤口保湿效果较好，但敷料与周围未受损皮肤粘连过于紧密，导致伤口周围皮肤和毛发污垢堆积，伤口轻微发臭；BC-HEC-1敷料组保湿效果好，与伤口及周围皮肤未见黏连，伤口较好清理。

术后第14-21天，各组大鼠伤口愈合率均在90%以上，纱布组伤口仍可见明显结痂；水胶体敷料组伤口外观良好，但个别动物伤口处有明显的凸起瘢痕和色素沉积；BC-HEC-1组伤口外观良好，颜色均呈粉红色，与正常皮肤组织接近，无瘢痕和结痂。

总体而言，水胶体敷料组和BC-HEC-1敷料组伤口保湿效果均优于传统的干性无菌纱布。BC-HEC-1还能有效预防伤口与皮肤粘连而对伤口造成二次损伤(在临床上可减轻更换敷料时产生的疼痛，并且可防止伤口出血)；水胶体敷料虽然保湿效果好，但与伤口周围皮肤粘连过于紧密导致黏附大量污垢和皮肤分泌物不便清理，伤口有异味，可能增加伤口感染风险。

2.2.3 伤口愈合率手术后前2周为伤口愈合的快速期，同时也是伤口愈合的关键时期。从表2及图4中各组大鼠伤口愈合率来看，纱布组和水胶体敷料组在第4天时愈合率均较低，分别为19.59%和12.36%。第7天时，水胶体敷料组伤口愈合率高于纱布组(P < 0.05)；在第4-14天内，BC-HEC-1敷料组均能显著的促进大鼠手术伤口面积减小，在第4天时愈合率达到36.22%(与纱布组相比，P < 0.001)，随后一直保持较高的愈合率，总体效果优于水胶体敷料组和纱布组。

2.2.4 各组生长因子水平变化第4，7，14，21天各组大鼠血清中转化生长因子β1和血小板源性生长因子检测结果如图5所示。转化生长因子β1和血小板源性生长因子在血清中第7天时都有增加趋势，之后都明显下降。在术后第14天时，BC-HEC-1敷料组转化生长因子β1水平明显低于纱布组和水胶体对照组(P < 0.01)。另有文献报道称伤口愈合后期转化生长因子β1降低可预防伤口过度愈合^[23]，减少瘢痕形成。

血小板源性生长因子检测结果显示，第7天时，BC-HEC-1敷料组血清血小板源性生长因子水平略高于纱布组和水胶体敷料组(P < 0.05)。之后各组血小板源性生长因子水平均下降，到第21天时，各组均恢复到较低水平。

2.2.5 病理切片形态病理结果如图6所示，在第4天时，可明显看到各组皮肤组织(包括表皮和真皮)缺损，而在第14天时均可见明显的肉芽组织增生，其中纱布组和水胶体组肉芽组织相对较薄，且结构疏松，排列无规则；BC-HEC-1组肉芽组织厚且致密，排列规则。

参考文献

[1] Gurtner GC, Werner S, Barrandon Y, et al. Wound repair and regeneration. Nature. 2008;453(7193):314-321.

[2] 刘德伍.现代敷料研究现状[J].中国临床康复,2002,6(22): 3436-3437.

[3] 冯正,李江萍,李红.新型敷料与传统干纱布换药在外科切口感染中的应用效果对比[J].当代护士,2016,23(12):100-102.

[4] 廖敏,梁文卿,袁先容.新型敷料在伤口护理中的应用[J].中国保健营养,2016,26(27):206.

[5] Chaudhari AA, Vig K, Baganizi DR, et al. Future prospects for scaffolding methods and biomaterials in skin tissue engineering: a review. Int J Mol Sci. 2016;17(12):1974.

[6] 刘公洪,廖毅.湿性敷料治疗在烧伤创面的应用进展[J].西南军医, 2012,14(1):113-114.

[7] Field CK, Kerstein MD. Overview of wound healing in a moist environment. Am J Surg. 1994;167(1A):2S.

[8] Sood A, Granick MS, Tomaselli NL. Wound Dressings and Comparative Effectiveness Data. Adv Wound Care. 2014;3(8): 511.

[9] 李晓明,刘苹,张波.创面敷料的研究现状[J].重庆医学,2017,46(20): 2851-2853.

[10] 张劲峰,郝建波,张劲鹏,等.生物敷料的研究进展[J].中国修复重建外科杂志,2015,29(2):254-259.

[11] 李晶,薛斌.新型医用敷料的分类及特点[J].中国组织工程研究, 2013,17(12):2225-2232.

[12] Bäckdahl H, Helenius G, Bodin A, et al. Mechanical properties of bacterial cellulose and interactions with smooth muscle cells. Biomaterials. 2006;27(9):2141.

[13] Helenius G, Bäckdahl H, Bodin A, et al. In vivo, biocompatibility of bacterial cellulose. J Biomed Mater Res Part A. 2006;76(2):431.

[14] Czaja WK, Young DJ, Kawecki M, et al. The future prospects of microbial cellulose in biomedical applications. Biomacromolecules. 2007;8(1):1.

[15] 李莹.基于细菌纤维素的皮肤伤口敷料的制备和评价[D].武汉:中科技大学,2015.

[16] 南方,赖琛,奚廷斐.细菌纤维素与纳米银复合制备创伤敷料[J].中国组织工程研究,2015,19(43):7023-7028.

[17] Khalid A, Khan R, Ul-Islam M, et al. Bacterial cellulose-zinc oxide nanocomposites as a novel dressing system for burn wounds. Carbohydr Polym. 2017;164:214.

[18] Pandey M, Mohamad N, Low W L, et al. Microwaved bacterial cellulose-based hydrogel microparticles for the healing of partial thickness burn wounds. Drug Deliv Transl Res. 2017; 7(1):1-11.

[19] 蒋琪霞,张晓霞,刘亚红,等.伤口护理中不同敷料的疗效观察[J].解放军护理杂志,2000,17(6):10-11.

[20] 首家保,陈彬,芦慎,等.不同敷料修复创面的实验研究及临床应用评价[J].中国组织工程研究,2012,16(8):1479-1482.

[21] 马霞,陈世文,王瑞明,等.纳米材料细菌纤维素对大鼠皮肤创伤的促愈作用[J].中国组织工程研究,2006,10(37):45-47.

[22] 汪涌,何清濂.生长因子与皮肤伤口愈合[J].中华整形外科杂志, 1999,(6):462-464.

[23] 蔡泽浩,刘伟,钱云良,等.TGF-β细胞内信号转导与伤口过度愈合[J].上海交通大学学报(医学版),2004,24(7):587-589.

[24] 谷庆阳.TGF-β及其信号分子SMAD3在伤口愈合过程中的作用[J].国外医学:生理、病理科学与临床分册,2002,22(1):67-69.

[25] Darby IA, Laverdet B, Bonté F, et al. Fibroblasts and myofibroblasts in wound healing. Clin Cosmet Investig Dermatol. 2014;7(default):301-311.

[26] Pierce G F, Mustoe T A, Altrock B W, et al. Role of platelet-derived growth factor in wound healing. J Cell Biochem. 1991;45(4):319.

[27] 何亮家.结肠伤口愈合模型中TGF-β1、EGF和PDGF-BB的时序表达[J].国际骨科学杂志,1999,(2):124-125.

[28] 王雪,牛星焘,陈东明.PDGF在大鼠断层供皮区创面愈合过程中表达变化的研究[J].中国组织化学与细胞化学杂志,1997,(3):76-79.

引言

皮肤创伤是一种十分常见的疾病。近年来，关于皮肤创伤修复的研究已经取得重大进展，人们对其理论基础认识以及临床治疗水平都有了显著提高。但是，目前创伤修复的机制尚未完全明确，在现有的治疗水平下，常出现各种急、慢性难愈性创伤，让医生和患者都难以应对。寻求一种更加理想的创伤修复手段依然是医学研究的一大热点。在皮肤创伤修复过程中，创面敷料起到非常重要的作用。传统干性伤口敷料，包括纱布、绷带及脱脂棉等，保湿效果差，容易与伤口皮肤发生粘连，导致伤口愈合缓慢、二次伤害和形成瘢痕^[1-2]。随着现代医学的发展，人们已普遍关注到伤口敷料不仅仅是用来覆盖伤口，更加应该具有伤口的保湿、防粘连、抗菌以及促进愈合等特性^[3-5]。

有研究于1962年提出了“湿性伤口愈合”这一概念，其中指出湿润环境促进伤口愈合的机制包括：形成低氧环境，促进新生血管形成；加快坏死组织和毒素的清除；强化生长因子与靶细胞的相互作用；避免新生上皮组织与敷料粘连，减轻患者痛苦^[6-8]。自20世纪90年代以来，出现许多密闭性敷料就是利用了上述原理^[9]，这些敷料包括薄膜类、水胶体类、水凝胶类、海藻酸盐类及泡沫类等，这些敷料也都各自具有其优缺点^[10-11]。以水胶体敷料为例，虽然它能吸收伤口处少至中量渗液，有部分清创作用，但密闭性敷料存在透气性差、伤口积液、换药时有异味及创面残留污垢不便于清理等问题。

细菌纤维素(bacterial cellulose，BC)具有优异的生物亲和性、生物相容性^[12-13]、保湿与透气性和良好的生物可降解性的特点^[7]，是世界上公认的性能优异的新型生物学材料。在生物医药与组织工程领域，细菌纤维素膜因具有以上特性以及良好柔韧性，使其成为了一种可用作伤口敷料的理想材料^[14]。国内、外关于细菌纤维素作为伤口敷料已有大量研究。李莹等^[15]系统研究和优化了细菌纤维素膜的结构和性能，以达到提高孔隙率、透气性和保湿性等多种理化特性。以细菌纤维素为基础的复合材料也成为国内外科学家研究的热点，南方等^[16]将细菌纤维素与纳米银颗粒结合形成复合抗菌敷料，动物实验证明其可减少伤口感染和愈合时间。Khalid等^[17]通过小鼠烫伤实验和体外抑菌实验证明细菌纤维素-氧化锌纳米颗粒复合物具有良好的抑菌特性和治疗烫伤效果。Pandey等^[18]利用微波处理细菌纤维素膜与聚丙烯酰胺得到水凝胶复合膜，并研究了其用于局部深度烫伤治疗的可行性。细菌纤维素及其复合材料在伤口敷料应用中正展现出强大潜力，也越来越引起国内外专家的关注。

尽管目前细菌纤维素促进伤口愈合有许多临床前及临床文献报道，但很少有学者将其与目前市场上的诸多伤口敷料进行对比研究^[19-20]。因此，实验结合湿性伤口愈合的理论基础，以自制的细菌纤维素敷料BC-HEC-1为主要材料，对其在SD大鼠手术伤口的愈合过程中起到的促进作用及其机制进行初步探讨。通过伤口愈合率、细胞因子检测以及组织病理等指标综合评价，比较了细菌纤维素敷料与传统干性敷料、密闭性水胶体敷料在促进伤口愈合中各自的特点和差异，从而发掘细菌纤维素在医用敷料领域中的优势和发展潜力。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

材料方法

1.1 设计随机对照动物实验。

1.2 时间及地点于2016年9月至2017年1月在东莞东阳光药物研发有限公司完成。

1.3 材料

1.3.1 培养基

种子培养基：体积分数0.1%-0.2% Na₂HPO₄·12H₂O，0.01%-0.03%MgSO₄·7H₂O，0.1%-0.2%柠檬酸，0.5%- 2.0%葡萄糖，0.2%-0.4%(NH₄)₂HPO₄，1%-2%玉米浆干粉。

发酵培养基：体积分数0.2%KH₂PO₄，0.2% Na₂HPO₄?12H₂O，0.03%MgSO₄?7H₂O，0.2%柠檬酸，4%蔗糖，1%大豆蛋白胨，0.2% (NH₄)₂SO₄。

1.3.2 菌种和细胞株高产细菌纤维素的木葡糖酸醋杆菌(Gluconacetobacter xylinus)由东莞东阳光药物研发有限公司经过筛选优化获得；小鼠成纤维细胞株L929为ATCC购买。

1.3.3 动物 SPF级7至8周龄雄性SD大鼠60只，体质量240-280 g，从湖南斯莱克景达实验动物有限公司购买，动物许可证号：43004700025929。

1.3.4 其他试剂材料手术器械、生理盐水、无菌纱布、市售水胶体敷料、医用无纺布及医用胶带等。转化生长因子β1、血小板源性生长因子细胞因子检测试剂盒(从R&D research购买，货号分别为：MB100B及MBB00)。

1.4 实验方法

1.4.1 细菌纤维素的制备

种子培养：将斜面菌种刮下打散，接入种子罐，动态培养20-28 h，培养条件为通气量设为0.3-0.8 vvm，罐压30-50 kPa，温度控制在28-31 ℃，得种子液。

发酵培养：将上述种子罐种子液与产膜培养基在无菌条件下混合，接种量10%-20%，在发酵罐内动态培养24-28 h，培养温度控制在28-31 ℃，得发酵料液。

灌注浅盘：将发酵罐内的发酵料液灌注到浅盘内，灌注量为400 mL，然后于培养中28-31 ℃静置培养4 d。

收纤维素膜：静置培养三四天后，将浅盘内形成的细菌纤维素膜收集。

纯化处理：将收取的细菌纤维素膜放入体积分数4%-5%氢氧化钠溶液内浸泡4-10 h，使基膜结构变疏松，同时杀灭膜内及表面的菌体；然后用体积分数0.5%的双氧水溶液中处理4-10 h进行漂白；最后用醋酸溶液进行中和，并用去离子水反复冲洗至pH 5.8-7.8。

产品成型：采用自动化设备将纤维素膜进行压水，使纤维膜内吸附的水分控制在95%-99%，压水的同时上下面附上无纺布，根据需要裁剪成不同形状的产品。

产品包装：将成型的产品用包装袋密封真空包装；产品灭菌：采用湿热高压灭菌。

1.4.2 细菌纤维素敷料理化性质鉴定

体外细胞毒性：体外细胞毒性检测由广州医疗器械质量监督检测中心完成，具体方法参照GB/T16886.5-2003医疗器械生物学评价第5部分-体外细胞毒性试验。简单描述如下：无菌操作下取细菌纤维素膜以3 cm²/mL比例混入含有体积分数10%血清的DMEM培养基，37 ℃浸提24 h。空白对照采用不含细菌纤维素敷料浸提的含体积分数10%血清DMEM培养基，阴性对照为高密度聚乙烯，阳性对照采用5 g/L的苯酚溶液。L929细胞接种于96孔板，浓度为1×10⁸ L^-1，加空白含体积分数10%血清的DMEM培养基于37 ℃，体积分数5%CO₂培养。待细胞生长至接近铺满96孔板底后，吸去空白培养基，加入空白对照、阴性对照、阳性对照和细菌纤维素敷料浸提液于37 ℃，体积分数5% CO₂培养72 h。将各组细胞置于显微镜下观察培养结果。

含水量测试：取5块细菌纤维素敷料，拆封后放入敞口的培养皿内，称质量，然后置于105 ℃烘箱烘干至恒重后再次称质量，通过质量降低计算含水量。

pH测定：收集细菌纤维素膜渗出液，测定其pH值。

傅里叶红外光谱分析：采用创舒^TM细菌纤维素伤口敷料(北京鼎瀚恒海生物科技发展有限公司生产，批号01150301)作为标准细菌纤维素进行对比，简单步骤如下：样品烘干研磨碎，然后用溴化钾压片，检测时以溴化钾为空白扣除背景。

扫描电镜观察：干燥后的细菌纤维素敷料进行扫描电镜观察，检测仪器为JSM-6330F冷场发射扫描电镜；检测条件：加速电压15 kV；工作距离16 mm；物镜光阑30 μm。

1.4.3 动物伤口愈合实验动物造模参考马霞等^[21]的方法，取成年健康SD大鼠60只，腹腔注射30 mg/kg 体积分数10%水合氯醛麻醉，背部剃毛，暴露皮肤。背部胸段为中心，按2 cm×2 cm大小切除全层皮肤至深筋膜，形成正方形创面。将手术后动物随机分为纱布组、水胶体敷料组、BC-HEC-1敷料组，每组20只。同时采用与组别对应的敷料进行包扎。术后每天更换于组别相对应的敷料，观察和记录伤口外观，每周一、三、五测量伤口长度和宽度，计算伤口面积和伤口愈合率，公式如下：

并于术后第4，7，14，21天分别取伤口皮肤制作苏木精-伊红染色病理切片，采血取血清检测转化生长因子β1，血小板源性生长因子等与伤口愈合相关炎症因子^[22]。

1.5 主要观察指标 ①BC-HEC-1理化性质；②动物伤口愈合率；③动物血清转化生长因子β1、血小板源性生长因子水平；④伤口皮肤病理切片。

1.6 统计学分析所有统计学处理均在SPSS 19.0以及EXCEL 2010软件中完成。数据用x(_)±s表示，组间数据差异比较用单因素方差分析及LSD法，P < 0.05即差异有显著性意义。

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讨论

实验通过大鼠手术伤口愈合实验对比研究了细菌纤维素敷料与传统的干性敷料和密闭性水胶体敷料，可初步认为细菌纤维素敷料能够更有效地促进大鼠手术伤口愈合，在伤口保湿、防粘连以及预防瘢痕等方面也具有明显的优势。与传统的纱布敷料相比，细菌纤维素敷料能明显提高伤口愈合率，有效预防组织粘连和伤口结痂；与密闭性水胶体敷料相比，细菌纤维素敷料在兼具良好保湿性和抑菌性的同时，能够更加有效的预防组织黏连，也具有更好的透气性，防止伤口产生异味。组织病理观察也表明细菌纤维素敷料更能促使肉芽组织适度、有序的排列和生长。

细胞因子在伤口愈合中起到非常重要的作用。其中以转化生长因子β作用最广泛，它可根据细胞的种类不同和分化状态不同而对细胞趋化、增殖或黏附等起不同的作用(刺

激或抑制)。体内实验表明转化生长因子β1对基质产生具有强大的刺激作用，并可诱导局部肉芽组织形成和胶原沉积，能够有效促进伤口愈合^[24-25]。血小板源性生长因子由血小板等多种细胞产生，在伤口愈合初期能促进纤维母细胞、巨噬细胞等增殖分化，对伤口愈合起促进作用^[26]。实验中细胞因子检测结果也表明，在伤口愈合初期第4-7天，转化生长因子β1和血小板源性生长因子有大幅度的升高，在第14-21天则恢复至正常水平，这与现有资料报道相符^[27-28]。其中第7天时，细菌纤维素组血小板源性生长因子水平高于纱布组和水胶体敷料组，表明细菌纤维素敷料能更快加速伤口愈合。此外，在第14天时，细菌纤维敷料组转化生长因子β1低于纱布组和水胶体组，提示细菌纤维素敷料能更快加速伤口愈合，同时较低的转化生长因子β1水平可以防止肉芽组织过度增生形成瘢痕^[23]。

因此，实验在以往研究基础上进一步对细菌纤维素敷料的安全性和理化性质进行初步鉴定，同时结合湿性伤口愈合的理论基础，通过干性纱布、水胶体敷料和细菌纤维素敷料之间的对比更加突出了细菌纤维素敷料在促进伤口愈合中的优越性能和发展潜力，同时也为临床伤口敷料的选择提供借鉴。

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