Notch1介导有氧运动促进阿尔茨海默病小鼠海马神经细胞的增殖

doi:10.12307/2024.181

中国组织工程研究 ›› 2024, Vol. 28 ›› Issue (31): 4951-4957.doi: 10.12307/2024.181

• 干细胞基础实验 basic experiments of stem cells • 上一篇下一篇

Notch1介导有氧运动促进阿尔茨海默病小鼠海马神经细胞的增殖

李慧军1，李垂坤1，魏翠兰2，张业廷3

1成都大学体育学院，四川省成都市 610106；2成都理工大学体育学院，四川省成都市 610059；3中国民用航空飞行学院，四川省广汉市 618307

收稿日期:2023-04-04 接受日期:2023-07-04 出版日期:2024-11-08 发布日期:2024-01-22
通讯作者: 张业廷，博士，讲师，中国民用航空飞行学院，四川省广汉市 618307
作者简介:李慧军，男，1988年生，河南省焦作市人，汉族，2015年武汉体育学院毕业，硕士，讲师，主要从事运动与健康，体育教学与训练研究。
基金资助:

Notch1-mediated aerobic exercise promotes hippocampal nerve cell proliferation in Alzheimer’s disease mice

Li Huijun1, Li Chuikun1, Wei Cuilan2, Zhang Yeting3

1College of Physical Education, Chengdu University, Chengdu 610106, Sichuan Province, China; 2Sports Institute of Chengdu University of Technology, Chengdu 610059, Sichuan Province, China; 3Civil Aviation Flight University of China, Guanghan 618307, Sichuan Province, China

Received:2023-04-04 Accepted:2023-07-04 Online:2024-11-08 Published:2024-01-22
Contact: Zhang Yeting, PhD, Lecturer, Civil Aviation Flight University of China, Guanghan 618307, Sichuan Province, China
About author:Li Huijun, Master, Lecturer, College of Physical Education, Chengdu University, Chengdu 610106, Sichuan Province, China

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：

阿尔茨海默病：是一种进行性神经系统退行性疾病。它的症状包括记忆丧失、判断力下降、语言障碍、认知能力衰退等，这些症状会逐渐恶化，最终可能导致患者失去独立生活的能力。其原因是大脑神经元的死亡和神经元间连接的破坏，这通常与淀粉样蛋白质斑块和神经原纤维交织物的形成有关。阿尔茨海默病目前没有根治方法，但早期诊断和治疗可以帮助减缓疾病的进展，通过体力锻炼和认知训练结合起来可延缓认知功能下降，并改善患者的生活质量。
神经细胞增殖：是指在神经系统中产生新的神经细胞。在成年人中，神经细胞增殖通常发生在2个特定的区域：大脑海马体和嗅觉系统。在这些区域，神经祖细胞和神经干细胞通过分裂使得神经细胞增殖。多种类型的神经细胞可以通过神经祖细胞和神经干细胞分化而来，包括少突胶质细胞、神经元及星形胶质细胞。神经细胞增殖对于学习、记忆、适应性和神经退行性疾病的治疗都有着重要的作用。

背景：阿尔茨海默病患者脑部多存在Notch1信号通路异常，但这些信号通路在阿尔茨海默病发病中的作用尚未完全明确。长期有氧运动对于Notch1信号通路的相关因子甲基化率能够产生影响，从而改变Notch1的表达。然而，有氧运动是否会通过Notch1信号通路对阿尔茨海默病小鼠海马神经细胞增殖及组织病理学特征产生影响并不清楚。

目的：观察DAPT抑制Notch1信号通路后有氧运动对阿尔茨海默病小鼠海马神经细胞增殖及组织病理学特征的影响。
方法：随机将3月龄APP/PS1双转基因阿尔茨海默病小鼠分成4组，分别为对照组、运动对照组、抑制剂组及运动抑制剂组，每组20只。采用自然喂养干预对照组，长期有氧运动干预运动组，各干预方式的周期为20周；然后在第18周对各组小鼠进行溶剂或Notch1抑制剂注射。20周后取脑组织，采用Real-time PCR、免疫荧光及Western blot技术分别检测Aβ1-42、Tau、Ki67及Notch1表达。

结果与结论：与对照组小鼠相比，抑制剂组小鼠海马齿状回区Ki67、Notch1的表达显著降低(P < 0.05)，Aβ1-42、Tau没有显著差异；运动对照组小鼠海马齿状回区Ki67表达显著高于对照组，而Aβ1-42、Tau、Notch1表达显著低于对照组(P < 0.05)；运动抑制剂组小鼠海马齿状回区Aβ1-42、Tau、Ki67、Notch1表达与抑制剂组相比没有显著差异。由此可见，Notch1信号通路可能介导运动改善阿尔茨海默病小鼠海马神经细胞增殖及组织病理学特征的过程。

https://orcid.org/0000-0003-0031-2891 (张业廷)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

关键词: 阿尔茨海默病, 有氧运动, Notch1, 神经细胞增殖

Abstract: BACKGROUND: Abnormal Notch1 signaling pathway is mostly found in the brain of Alzheimer’s disease patients, but the role of these signaling pathways in the pathogenesis of Alzheimer’s disease has not been fully clarified. Long-term aerobic exercise can alter the expression of Notch1 by affecting the methylation rate of factors related to the Notch1 signaling pathway. However, it is not clear whether aerobic exercise affects hippocampal nerve cell proliferation and histopathological features of Alzheimer’s disease mice through the Notch1 signaling pathway.
OBJECTIVE: To observe the effects of aerobic exercise on the proliferation and histopathological features of hippocampal nerve cells in Alzheimer’s disease mice after DAPT inhibited the Notch1 signaling pathway.
METHODS: APP/PS1 double transgenic Alzheimer’s disease mice aged 3 months were randomly divided into four groups: control group, exercise control group, inhibitor group, and exercise inhibitor group, with 20 mice in each group. The control group was fed naturally, and the exercise group received aerobic exercise intervention. Both natural feeding and exercise intervention lasted for 20 weeks. The mice were injected with solvent or Notch1 inhibitor at week 18. After 20 weeks, the brain tissue was collected, and Aβ1-42, Tau, Ki67, and Notch1 expression levels were detected by real-time PCR, immunofluorescence, and western blot assay.
RESULTS AND CONCLUSION: Compared with the control group, the expressions of Ki67 and Notch1 in the dentate gyrus region of the hippocampus were significantly decreased in the inhibitor group (P < 0.05), but there were no significant differences in Aβ1-42 and Tau. The expression of Ki67 in the dentate gyrus region of the hippocampus in the exercise control group was significantly higher than that in the control group, while the expressions of Aβ1-42, Tau, and Notch1 were significantly lower than those in the control group (P < 0.05). The expressions of Aβ1-42, Tau, Ki67, and Notch1 in the dentate gyrus region of the hippocampus of the exercise inhibitor group were not significantly different from those of the inhibitor group. In conclusion, the Notch1 signaling pathway may mediate exercise to improve the proliferation and histopathological features of hippocampal nerve cells in Alzheimer’s disease mice.

Key words: Alzheimer’s disease, aerobic exercise, Notch1, nerve cell proliferation

中图分类号:

李慧军, 李垂坤, 魏翠兰, 张业廷. Notch1介导有氧运动促进阿尔茨海默病小鼠海马神经细胞的增殖[J]. 中国组织工程研究, 2024, 28(31): 4951-4957.

Li Huijun, Li Chuikun, Wei Cuilan, Zhang Yeting. Notch1-mediated aerobic exercise promotes hippocampal nerve cell proliferation in Alzheimer’s disease mice[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2024, 28(31): 4951-4957.

图/表（结果） 12

2.1 实验动物数量分析选用 APP/PS1 双转基因 AD 小鼠共 80 只，分成 4 组，有 2 只 AD 小鼠在实验中死亡 (运动对照组及抑制剂组各 1 只 )，每组最终各选取 18 只小鼠进行取材。
2.2 小鼠海马Notch1检测结果图1A为小鼠海马Notch1 mRNA表达：运动对照组显著低于对照组(P=0.003)，运动抑制剂组与抑制剂组相比没有显著差异(P=0.331)；抑制剂组与对照组相比没有显著差异(P=0.193)，运动抑制剂组与运动对照组相比没有显著差异(P=0.304)。图1B为小鼠海马Notch1 蛋白表达：运动对照组显著低于对照组(P < 0.000 5)，运动抑制剂组与抑制剂组相比没有显著差异(P=0.198)；抑制剂组显著低于对照组(P < 0.000 5)，运动抑制剂组显著低于运动对照组(P < 0.000 5)。

DAPI 标记的细胞核在免疫荧光染色图中呈蓝色，Notch1 免疫阳性产物表达呈红色，见图2。图3A为每个视野下小鼠海马DG区Notch1阳性细胞数量：运动对照组显著低于对照组(P < 0.000 5)，运动抑制剂组与抑制剂组相比没有显著差异(P=0.76)；抑制剂组显著低于对照组(P < 0.000 5)，运动抑制剂组显著低于运动对照组(P < 0.000 5)。图3B为小鼠海马DG区Notch1荧光强度：运动对照组显著低于对照组(P=0.017)，运动抑制剂组与抑制剂组相比没有显著差异(P=0.713)；抑制剂组显著低于对照组(P < 0.000 5)，运动抑制剂组显著低于运动对照组(P=0.002)。

2.3 小鼠海马Aβ1-42检测结果图4A为小鼠海马Aβ1-42 mRNA表达：运动对照组显著低于对照组(P=0.018)，运动抑制剂组与抑制剂组相比没有显著差异(P=0.655)；抑制剂组与对照组相比没有显著差异(P=0.548)，运动抑制剂组显著高于运动对照组(P=0.013)。图4B为小鼠海马Aβ1-42 蛋白表达：运动对照组显著低于对照组(P < 0.000 5)，运动抑制剂组显著高于抑制剂组(P=0.022)；抑制剂组与对照组相比没有显著差异(P=0.102)，运动抑制剂组显著高于运动对照组(P < 0.000 5)。

图5中DAPI标记的细胞核呈蓝色，Aβ1-42免疫阳性产物呈红色。小鼠海马DG区的Aβ1-42免疫阳性产物荧光强度：运动对照组显著低于对照组(P < 0.000 5)，运动抑制剂组与抑制剂组相比没有显著差异(P=0.196)；抑制剂组与对照组相比没有显著差异(P=0.498)，运动抑制剂组显著高于运动对照组(P < 0.000 5)，见图6A。小鼠海马CA3区的Aβ1-42免疫阳性产物荧光强度：运动对照组显著低于对照组(P < 0.000 5)，运动抑制剂组与抑制剂组相比没有显著差异(P=0.519)；抑制剂组与对照组相比没有显著差异(P=0.581)，运动抑制剂组显著高于运动对照组(P < 0.000 5)，见图6B。小鼠海马CA1区的Aβ1-42免疫阳性产物荧光强度：运动对照组显著低于对照组(P < 0.000 5)，运动抑制剂组与抑制剂组相比没有显著差异(P=0.828)；抑制剂组与对照组相比没有显著差异(P=0.834)，运动抑制剂组显著高于运动对照组(P < 0.000 5)，见图6C。

2.4 小鼠海马Tau检测结果图7A为小鼠海马Tau mRNA表达：运动对照组显著低于对照组(P=0.048)，运动抑制剂组与抑制剂组相比没有显著差异(P=0.611)；抑制剂组与对照组相比没有显著差异(P=0.548)，运动抑制剂组显著高于运动对照组(P=0.03)。图7B为小鼠海马Tau 蛋白表达：运动对照组显著低于对照组(P < 0.000 5)，运动抑制剂组与抑制剂组相比没有显著差异(P=0.073)；抑制剂组与对照组相比没有显著差异(P=0.06)，运动抑制剂组与运动对照组相比没有显著差异(P=0.081)。

DAPI标记的细胞核在免疫荧光染色图中呈蓝色，Tau免疫阳性产物呈红色，见图8。小鼠海马DG区的Tau免疫阳性产物荧光强度：运动对照组显著低于对照组(P=0.014)，运动抑制剂组与抑制剂组相比没有显著差异(P=0.556)；抑制剂组与对照组相比没有显著差异(P=0.834)，运动抑制剂组显著高于运动对照组(P=0.006)，见图9A。小鼠海马CA3区及CA1区的Tau免疫阳性产物荧光强度：各组之间没有显著差异(P > 0.05)，见图9B，C。

2.5 小鼠海马Ki67检测结果图10A为小鼠海马Ki67 mRNA表达：运动对照组显著高于对照组(P=0.014)，运动抑制剂组与抑制剂组相比没有显著差异(P=0.645)；抑制剂组与对照组相比没有显著差异(P=0.913)，运动抑制剂组显著低于运动对照组(P=0.006)。图10B为小鼠海马Ki67 蛋白表达：运动对照组显著高于对照组(P < 0.000 5)，运动抑制剂组显著高于抑制剂组(P=0.009)；抑制剂组显著低于对照组(P=0.015)，运动抑制剂组显著低于运动对照组(P < 0.000 5)。

DAPI标记的细胞核在免疫荧光染色图中呈蓝色，Ki67免疫阳性产物呈红色，见图11。图12A为每个视野下小鼠海马DG区Ki67阳性细胞数量：运动对照组显著高于对照组(P < 0.000 5)，运动抑制剂组与抑制剂组相比没有显著差异(P=0.09)；抑制剂组显著低于对照组(P=0.012)，运动抑制剂组显著低于运动对照组(P < 0.000 5)。图12B为小鼠海马DG区Ki67荧光强度：运动对照组显著高于对照组(P=0.021)，运动抑制剂组与抑制剂组相比没有显著差异(P=0.217)；抑制剂组与对照组相比没有显著差异(P=0.217)，运动抑制剂组显著低于运动对照组(P=0.032)。

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引言

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)是最常见的与年龄相关的神经退行性疾病，是老年人痴呆的主要原因。AD的主要病理标志包括β-淀粉样蛋白(amyloid β-protein，Aβ)沉积形成的老年斑、过度磷酸化Tau 蛋白聚集形成的神经纤维缠结、神经炎症、突触功能障碍和神经元丢失等[1]。Aβ肽(如 Aβ1–42)在AD的发生和发展中起重要作用。许多研究已经证实，老年斑绝大多数由Aβ1–42组成， Aβ1–42低聚物比Aβ原纤维具有更强的神经毒性[2]。 Aβ1–42可以引发广泛的行为和病理生理改变，如学习/记忆障碍、神经元损伤、神经炎症、微血管异常和Tau蛋白错误聚集[3]。有研究应用深度RNA-seq方法检测到APP/PS1小鼠海马中长链非编码RNA的异常表达，初步证明了Notch1信号通路在AD中的重要调控作用[4]。Notch1信号通路在AD患者脑部多存在异常，其在神经系统中的功能和AD发病中的作用还未明确[5]。有研究认为，γ分泌酶对Notch1蛋白的水解可能与AD发病有密切关系[6]。因此，为了阐明AD的多种发病机制以及治疗和预防AD，有必要加强对AD中Notch1信号通路的研究。

在前期研究中，作者发现长期有氧运动干预在改善AD小鼠海马神经发生过程及病理过程的同时，也在一定程度上改善了其学习记忆能力[7]。Notch1信号介导了有氧运动对AD小鼠海马超微结构及空间记忆能力的改善作用。但是，Notch1信号是否介导了有氧运动对AD小鼠海马神经细胞增殖及组织病理学特征的改善还不清楚。Ki67是细胞增殖相关蛋白，常被作为有丝分裂的标记物[8]。在前期研究中发现，长期有氧运动可以提高AD小鼠海马神经细胞Ki67的表达[7]。早期研究表明，Ki67可能在异常磷酸化的Tau蛋白产生过程中起作用，从而参与了AD的神经纤维变性等机制[9]。因此，该研究将对有氧运动是否通过Notch1信号通路改善AD小鼠海马神经细胞增殖及组织病理学特征进行探究。

材料方法

1.1 设计随机对照动物实验。
1.2 时间及地点实验于2019年10月至2020年12月在成都体育学院完成。
1.3 材料健康3月龄雄性APP/PS1双转基因AD小鼠(品系为C57BL/6Jnju)80只，体质量25-30 g，购于南京大学-南京生物医药研究院，许可证号：苏ICP备10073918号-3，饲养于成都体育学院SPF级标准动物实验房。动物实验经过成都体育学院伦理委员会批准，审批号为[2021]21号。
1.4 方法
1.4.1 实验动物分组将AD小鼠适应性喂养1周后随机分为4组：对照组，运动对照组，抑制剂组与运动抑制剂组，每组20只。对照组自然喂养不进行运动，运动组进行有氧运动干预。在自然喂养或运动干预17周后，在第18周注射溶剂或Notch1抑制剂(DAPT，美国Adoop)，第18-20周同样对运动组小鼠进行运动干预。
1.4.2 有氧运动方案首先，小鼠连续适应跑步机环境2 d(第1天速度为5 m/min，第2天速度为8 m/min)，每天10 min。适应结束后，正式进行跑台运动干预，每周持续5 d，30 min/d，分别为10 m/min跑5 min-15 m/min跑20 min-10 m/min跑5 min，连续进行5个月。当小鼠在运动过程中停止不动时，通过轻柔地触摸小鼠的尾巴让小鼠继续运动[10]。
1.4.3 DAPT注射方法 DAPT已被证实可以抑制Notch1信号通路[11]。DAPT溶于二甲基亚砜中(< 0.1%)，在第18周，抑制剂组和运动抑制剂组连续7 d以10 mg/(kg·d)的剂量对小鼠进行DAPT腹腔注射。对照组和运动对照组连续7 d以相同的剂量对小鼠进行二甲基亚砜溶剂腹腔注射[4]。
1.4.4 脑组织取材和相关指标检测运动干预结束后24-48 h内，进行大脑及海马组织取材。每组随机取6只小鼠脑组织进行免疫荧光观察分析，6只小鼠脑组织用于提取mRNA进行Real-time PCR检测、6只小鼠脑组织用于提取蛋白进行Western blot检测。

(1)免疫荧光染色观察海马蛋白(Aβ1-42、Tau、Ki67及Notch1)表达：取出脑组织，制备冰冻切片，片厚5 μm，放入40 g/L多聚甲醛溶液中固定10 min，PBS清洗2次，体积分数3%过氧化氢溶液封闭25 min，滴加一抗4 ℃孵育过夜，PBS清洗，滴加二抗(1∶100) 37℃孵育1 h，滴加DAPI进行核染色，使用Image-Pro+6.0软件分析荧光强度(AU/μm2)。抗体信息见表1。

(2) Real-time PCR检测相关基因(Aβ1-42、Tau、Ki67及Notch1)的mRNA表达：采用RNAzol®RTRNAIsolatton Reagent试剂提取海马组织RNA，然后反转录为cDNA，按照试剂盒说明配制反应液进行PCR扩增，反应体系为25 μL。引物序列见表2。数据处理采用2-ΔΔCT(Livak)方法。

(3) Western blot检测分析观察海马蛋白(Aβ1-42、Tau、Ki67及Notch1)相对表达水平：用蛋白裂解试剂冰上裂解提取海马组织蛋白，取适量蛋白样品进行SDS-PAGE，转至PVDF膜上，脱脂牛奶封闭1 h，用特异性一抗在4 ℃环境孵育过夜，一抗名称见表1。TBST液洗膜后用二抗(山羊抗鼠IgG，1∶2 000，北京中杉)室温孵育1 h；TBST液洗膜，加入适量的显影液，对条带进行曝光显影，利用Gelproplus软件分析内参蛋白和目的蛋白的吸光度值。
1.5 主要观察指标有氧运动后各组AD小鼠海马组织Aβ1-42、Tau、Ki67及Notch1的表达。
1.6 统计学分析所有定量数据用x±s表示，运用SPSS 19.0统计分析软件进行分析处理。该实验包含2个因素，进行2(运动干预方式) × 2(注射药剂)的两因素被试间方差分析(two-way between-subjects ANOVA)。整个分析过程中，对不满足球形检验的统计量采用Greenhouse Geisser法矫正，事后比较采用Bonferroni检验，显著性水平设定为P < 0.05。文章统计学方法已经通过学校生物统计学专家审核。

讨论

众所周知，久坐的生活方式与AD人群的认知功能受损有关，因此改善AD的一种可能方法是定期进行体育锻炼。据报道，有规律的体育活动在缓解AD症状方面具有多重益处[12]。例如，体育活动通过增加长时程增强效应和海马神经发生来改善学习和记忆能力，这表明体育活动也可能与大脑的结构和功能变化有关[13]。另外，研究发现5个月的自主跑轮可降低3xTG转基因AD小鼠脑内Aβ1–40和Aβ1–42水平[14]。同样，3个月龄APP/PS1转基因小鼠在跑步机上跑步5个月后，大脑中Aβ1–42的积累也显著减少[15]。运动除了可以降低转基因小鼠β-分泌酶的表达水平外，还可以改变γ-分泌酶的活性[16]。该研究发现，经过20周跑步机跑步运动干预，APP/PS1双转基因AD小鼠海马中Aβ1-42和Tau蛋白的表达显著降低，表明AD小鼠海马神经细胞的病理学特征得到了改善。
在成年期，海马中的神经干细胞能够不断增殖分化生成新的神经元，称为成年海马神经发生，其与学习记忆能力密切相关[17]。成年海马神经发生仅存在于哺乳动物大脑海马组织的室下区和亚颗粒区，可以提高成年期大脑的可塑性，新生成的神经元可以重建受损神经元之间的连接[18]。在经典AD小鼠模型中，成年海马神经发生在发病前就已经出现了受损[19]。3xTG-AD小鼠海马组织中未成熟神经元的数量与野生型小鼠相比明显减少，甚至导致海马的依赖性记忆受损[20]。该研究发现，长期有氧运动能够显著提高AD小鼠海马神经细胞Ki67的表达，从而促进AD小鼠海马神经细胞的增殖，而这可能对调控AD小鼠成年海马神经发生有重要作用。
Notch信号在大脑的发育过程、神经突触可塑性和神经胶质细胞活化中发挥重要作用[21-22]。有研究表明，增强的Notch信号通路可能与神经细胞增殖受损相关[6，23]。然而，Notch信号介导的神经发生微调的机制尚不完全清楚。有研究表明，Notch1可以介导包括AD在内的神经退行性进展[24]。
深入研究AD中Notch信号通路对于阐明AD的多种发病机制以及治疗和预防AD可能具有重要的意义。Notch能够通过ADAM10/17和γ-分泌酶的裂解参与调节淀粉样蛋白前体蛋白的水解过程[25]。同样的，Notch1能够被γ-分泌酶蛋白水解裂解，并释放其结构域(notch intracellular domain，NICD)进入细胞质，NICD转运到细胞核后，会调节包括Hey1和Hes5在内的几个基因的表达，从而影响成年海马神经发生过程[26]。有报道称，AD患者脑中Notch1蛋白表达显著升高，Notch1沉积于Aβ1–42阳性斑块中[27]。在AD患者脑脊液中发现Notch1的水平降低，提示其在脑实质中可能存在蓄积情况[27]。这些研究表明Notch1信号通路与AD中观察到的神经元功能障碍有明显关系。该研究也发现AD小鼠海马中Notch1的表达显著高于野生型小鼠，且伴随海马神经Ki67表达的下降。因此，AD的神经增殖过程会随着Notch1信号的增强而降低。但是，AD的病理生理过程与Notch1信号通路的改变是否相关，仍需进一步确定。
由于γ-分泌酶复合物能够催化Notch受体跨膜区蛋白裂解，从细胞膜内释放NICD[28]。因此，γ-分泌酶抑制剂可以特异性抑制Notch信号的激活[29]。DAPT对蛋白的膜内区域具有高度的偏好，其进入位点位于PS1的TM2和TM3之间，DAPT与活性位点的相互作用会导致与γ-分泌酶底物的识别和内化相关的关键PS1区域的灵活性降低[30]。因此，DAPT可以通过抑制γ-分泌酶活性进而抑制Notch1及其配体在γ位裂解，是Notch信号的抑制剂[31]。利用双光子共聚焦显微镜观察发现，急性注射DAPT可以降低野生型小鼠的树突棘密度[32]。AD 小鼠 Aβ 的产生会虽然会因为 DAPT 干预而降低，但是正常的海马突触可塑性和传递活动也会同时受影响，这也就使得认知功能在一定程度上会受影响[33]。DAPT抑制 Notch1 信号通路后，神经干细胞增殖受抑制，海马的突触可塑性降低，从而使得啮齿类动物出现学习记忆认知障碍[34]。该研究发现，AD 小鼠海马的 Notch1 表达在注射DAPT后会显著降低，同样的，这些AD小鼠海马的Ki67表达也显著下降，这表明Notch1信号通路能够通过调控Ki67而影响海马神经增殖。值得注意的是，随着皮下注射DAPT剂量(10，30，100 mg/kg)的增高，会使得脑脊液中Aβ1-42的含量随之降低，这表明Aβ1-42的含量具有明显的DAPT剂量依赖性[35]。另有研究发现，幼年AD小鼠海马Aβ的产生受到了DAPT的影响，而成年AD小鼠Aβ的产生并没不受DAPT影响[36]。该研究也发现，注射DAPT后，AD小鼠Tau及Aβ1-42蛋白并没有显著降低，这可能与该研究采用的较低DAPT注射剂量(10 mg/kg)有一定关系。然而，AD小鼠海马Notch1的表达在注射DAPT后显著减少。该研究同时也发现运动能够降低AD小鼠海马的Aβ1-42和Tau蛋白的表达水平，但是这一改变在注射DAPT后并没有发生。由此可见，运动改善AD小鼠的病理表现可能与Notch1 信号通路密切相关。
结论：该研究结果表明注射DAPT降低了Notch1的表达，成功抑制了Notch1信号通路。抑制Notch1信号通路可能降低了运动对AD小鼠海马神经细胞增殖及组织病理学的改善作用。这些结果可以表明，Notch1信号通路在运动改善AD小鼠海马神经细胞增殖及组织病理学特征过程中发挥着重要的作用。那么，运动是如何通过影响Notch1信号通路来影响AD小鼠病程的，其机制还需要进一步的研究。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

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Notch1介导有氧运动促进阿尔茨海默病小鼠海马神经细胞的增殖

Notch1-mediated aerobic exercise promotes hippocampal nerve cell proliferation in Alzheimer’s disease mice

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