1.1 设计 自身前后对照。
1.2 时间及地点 试验于2013年7月于兰州石化总医院口腔科完成。
1.3 对象 收集于2009年9月至2013年4月在兰州石化总医院口腔科就诊的正畸口腔患者。
纳入标准:①健康状况良好,无全身系统性疾病。②近半年未服用抗炎药物及抗生素。③牙周健康,牙周探诊深度≤3 mm,全口曲面断层片未见牙槽骨丧失。④无正畸治疗史。⑤正畸矫治需要拔除上下颌双侧第一双尖牙且双侧上颌尖牙需向远中移动。
排除标准:所有存在全身或局部感染,以及其他系统性疾病的患者被排除于本试验。
剔除标准:对已被选入本临床研究,属于以下情况之一者,作为剔除病例。①不符合纳入标准,或符合排除标准者。②无任何记录者。
脱落标准:对已被选入本临床研究,属于以下情况之一者,作为脱落病例。①受试者依从性差。②使用其他影响耐受性判断的药物。③受试者不愿意继续进行临床试验,向主管医生提出退出者。
共收集21例正畸口腔患者,其中男7例,女14例,年龄(19.8±2.1)岁。所有患者及其家属均同意参加本次试验,并签署知情同意书。为进一步研究正畸治疗过程中龈沟液髓过氧化物酶、可溶性细胞间黏附分子1水平与正畸力值的关系,试验按照正畸力值的不同,将所有患者分为2组分别加载150 g和100 g拉力[150 g组(n=12)和100 g组(n=9)],分析在尖牙远中移动过程中不同正畸力对龈沟液中髓过氧化物酶、可溶性细胞间黏附分子1及正五聚蛋白3的影响。
1.4 材料 MBT直丝托槽及镍钛拉簧购自上海埃蒙迪材料公司。
1.5 方法
1.5.1 正畸治疗 所有患者均采用直丝弓矫治技术,采用MBT直丝托槽,第一磨牙粘结带环。患者拔牙后,常规粘贴托槽,使用0.030-0.046 cm镍钛圆丝及0.046 cm×0.064 cm的镍钛方丝排齐整平牙列后,换0.046 cm不锈钢圆丝,随机选取患者的一侧上颌尖牙,以第一磨牙为作用点,采用镍钛拉簧0.025 cm以100 g/150 g的起始正畸力,使其向远中方向移动。
1.5.2 龈沟液的收集 分别于尖牙受力前及受力后4,12,24 h及7,14 d收集患者尖牙近中龈沟液。所有患者在采集龈沟液前禁食禁饮1 h,生理盐水漱口,放置开口器,无菌棉球拭干尖牙移动侧,气枪吹干牙面及周围牙龈黏膜,将消毒后的Wharman 3型滤纸条(上海索莱宝生物科技公司)轻轻插入患牙尖牙近中邻面的龈沟内至阻力停止,静止30 s后取出,取出滤纸放于龈沟测量仪Periotein 8000(O raflow PO Box,219,Pl ainview,美国)中测量,通过标准曲线计算出龈沟液体积,然后将其迅速放入200 μL含有体积分数0.1%胎牛血清的PBS中,-80 ℃冻存待用。
1.5.3 ELISA法检测龈沟液中髓过氧化物酶、可溶性细胞间黏附分子1及正五聚蛋白3的表达水平 人髓过氧化物酶、可溶性细胞间黏附分子1及正五聚蛋白3 ELISA试剂盒购于上海博迈生物科技公司,通过双抗体夹心法测定龈沟液中髓过氧化物酶、可溶性细胞间黏附分子1及正五聚蛋白3浓度。将冻存的龈沟液室温溶解,旋涡混合器中振荡2 min中,于4 ℃下高速离心10 min,按照ELISA试剂盒的说明书进行检测,根据标准曲线计算个样本中髓过氧化物酶、可溶性细胞间黏附分子1及正五聚蛋白3的表达水平。
1.6 主要观察指标 3类炎症因子(髓过氧化物酶、可溶性细胞间黏附分子1及正五聚蛋白3)的质量浓度。
1.7 统计学分析 数据采用
x±s表示,采用单因素方差分析判断各个时间点之间差异;如数据满足正态分布及方差齐性后采用两独立样本t 检验判断2个时间点的差异是否有显著性意义;以上所有统计过程均在SPSS 18.0中完成,检验水准均设为0.05。