1，25-二羟维生素D3和地塞米松促进人颞下颌关节滑液间充质干细胞的体外成骨分化

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.0477

中国组织工程研究 ›› 2018, Vol. 22 ›› Issue (9): 1443-1449.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.0477

• 干细胞培养与分化 stem cell culture and differentiation • 上一篇下一篇

1，25-二羟维生素D3和地塞米松促进人颞下颌关节滑液间充质干细胞的体外成骨分化

刘文静^1，2，3，孙养鹏^2，3，郑有华^2，3，张志光^2，3

¹南方医科大学口腔医院修复科，广东省广州市 510280；²中山大学光华口腔医学院•附属口腔医院口腔颌面外科，广东省广州市 510055；³广东省口腔医学重点实验室，广东省广州市 510070)

修回日期:2018-02-13 出版日期:2018-03-28 发布日期:2018-04-03
通讯作者: 张志光，教授，主任医师，博士生导师，中山大学光华口腔医学院?附属口腔医院口腔颌面外科，广东省广州市 510055；广东省口腔医学重点实验室，广东省广州市 510070
作者简介:刘文静，女，1984年生，江西省南昌市人，汉族，2016年中山大学毕业，博士，主治医师，主要从事口腔修复和颞下颌关节疾病的临床和基础研究。
基金资助:
国家自然科学基金(81271115)

Combined use of 1,25-dihydroxyvitamin D3 and dexamethasone promotes osteogenic differentiation of synovial fluid mesenchymal stem cells from human temporomandibular joint

Liu Wen-jing^{1, 2, 3}, Sun Yang-peng^{2, 3}, Zheng You-hua^{2, 3}, Zhang Zhi-guang^{2, 3}

¹Department of Prosthodontics, Stomatological Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510280, Guangdong Province, China;²Department of Oral and Maxillofacial Surgery, Hospital of Stomatology, Guanghua School of Stomatology, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510055, Guangdong Province, China; ³Guangdong Key Laboratory of Stomatology, Guangzhou 510070, Guangdong Province, China

Revised:2018-02-13 Online:2018-03-28 Published:2018-04-03
Contact: Zhang Zhi-guang, Professor, Chief physician, Doctoral supervisor, Department of Oral and Maxillofacial Surgery, Hospital of Stomatology, Guanghua School of Stomatology, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510055, Guangdong Province, China; Guangdong Key Laboratory of Stomatology, Guangzhou 510070, Guangdong Province, China
About author:Liu Wen-jing, M.D., Attending physician, Department of Prosthodontics, Stomatological Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510280, Guangdong Province, China;Department of Oral and Maxillofacial Surgery, Hospital of Stomatology, Guanghua School of Stomatology, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510055, Guangdong Province, China; Guangdong Key Laboratory of Stomatology, Guangzhou 510070, Guangdong Province, China
Supported by:
the National Natural Science Foundation of China, No. 81271115

摘要/Abstract

摘要：

文章快速阅读：

文题释义：
1，25-二羟维生素D3：维生素D在脊椎动物的骨盐沉积、钙平衡、细胞增殖和间充质干细胞成骨分化等生物学过程中都起了重要作用。1，25-二羟维生素D3是维生素D3的活性代谢产物，是成骨分化转录因子RUNX2的重要调控因子，并可与RUNX2协同引导骨基质矿化重要蛋白OCN的表达；成骨细胞是表达维生素D受体的细胞之一，因而也是1，25-二羟维生素D3的功能靶标，1，25-二羟维生素D3可通过结合维生素D受体发挥作用，调节骨沉积平衡。
成骨相关标志：RUNX2是骨形成初阶段的标志基因，它的表达是成骨分化、骨生成和骨发育的标志。ALP是成骨细胞的表型标志，可以反映成骨细胞的活性。OCN是骨组织中最丰富的非胶原蛋白，由成骨细胞合成和分泌，是体外诱导间充质干细胞成骨分化更加稳定的标志。

摘要
背景：人颞下颌关节滑液间充质干细胞获取微创简便且体外扩增能力强，成为组织工程修复一重要的种子细胞来源，优化其成骨分化能力有利于在关节骨组织再生中的应用。
目的：分析1，25-二羟维生素D3和地塞米松对关节滑液间充质干细胞成骨能力的影响，获得人颞下颌关节滑液间充质干细胞成骨分化的理想条件。
方法：将获得的人颞下颌关节滑液标本进行体外培养扩增，分别加入不同组分的成骨诱导液进行成骨诱导，通过茜素红和Von kossa 染色比较各组矿化形成情况，通过RT-PCR定量比较成骨相关标志ALP、RUNX2和OCN的表达。
结果与结论：①体外培养的人颞下颌关节滑液间充质干细胞可以向成骨细胞分化，其中含有100 nmol/L地塞米松和10 nmol/L 1，25-维生素D3的成骨诱导液其矿化形成明显增强；②含有1，25-二羟维生素D3的成骨诱导液诱导后ALP、RUNX2和OCN的基因表达明显增加；③适当浓度的地塞米松和1，25-二羟维生素D3可以促进人颞下颌关节滑液间充质干细胞的成骨分化，从而可为其自体应用修复颞下颌关节组织提供依据。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程
ORCID: 0000-0002-6903-1951(刘文静)

关键词: 颞下颌关节, 滑液, 间充质干细胞, 成骨诱导, 1, 25-二羟维生素D3, 地塞米松, 干细胞, 国家自然科学基金

Abstract:

BACKGROUND: Synovial fluid mesenchymal stem cells can be amplified rapidly in vitro and collected by a minimally invasive method. Recent studies have suggested that synovial fluid mesenchymal stem cells have become an important kind of seed cells for bone tissue engineering. Osteogenic differentiation is required to be optimized prior to the application of synovial fluid mesenchymal stem cells in the bone regeneration.
OBJECTIVE: To describe a protocol to generate osteoblast-lineage cells from human synovial fluid mesenchymal stem cells of the temporomandibular joint using a cocktail that includes glutamax, dexamethasone, β-glycerophosphate, vitamin C, 1,25-dihydroxyvitamin D3, and to investigate the effect of 1,25-dihydroxyvitamin D3 and dexamethasone on the osteogenic capacity of synovial fluid mesenchymal stem cells.
METHODS: Synovial fluid mesenchymal stem cells from the human temporomandibular joint were expanded in vitro and cultured in different osteogenic induction media. The mineralization capacity of osteogenic differentiation was evaluated by alizarin red and Von kossa staining. And the osteogenic markers, including ALP, RUNX2 and OCN, were assessed by reverse transcription-PCR.
RESULTS AND CONCLUSION: The mineralization formation increased greatly in the medium with 100 nmol/L dexamethasone and 10 nmol/L 1,25-dihydroxyvitamin D3. The expression of ALP, RUNX2 and OCN was enhanced distinctly in the 1,25-dihydroxyvitamin D3-induced differentiated cells. These findings reveal that appropriate concentration of 1,25-dihydroxyvitamin D3 and dexamethasone can be ideal ingredients to induce the osteogenic differentiation of human synovial fluid mesenchymal stem cells of the temporomandibular joint. Thus, this effective condition can be used to induce the osteogenic differentiation of synovial fluid mesenchymal stem cells for the bone regeneration in the temporomandibular joint.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

Key words: Synovial Fluid, Mesenchymal Stem Cells, Cell Differentiation, Calcitriol, Dexamethasone, Tissue Engineering

中图分类号:

R394.2

刘文静，孙养鹏，郑有华，张志光. 1，25-二羟维生素D3和地塞米松促进人颞下颌关节滑液间充质干细胞的体外成骨分化[J]. 中国组织工程研究, 2018, 22(9): 1443-1449.

Liu Wen-jing, Sun Yang-peng, Zheng You-hua, Zhang Zhi-guang. Combined use of 1,25-dihydroxyvitamin D3 and dexamethasone promotes osteogenic differentiation of synovial fluid mesenchymal stem cells from human temporomandibular joint[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2018, 22(9): 1443-1449.

图/表（结果） 1

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引言

颞下颌关节骨关节炎是颞下颌关节紊乱病(temporomandibular disorder，TMD)中较常见且病程较重的类型，是由急性或慢性创伤、咬合紊乱或精神因素引起的颞下颌关节软骨和骨组织的渐进性破坏和损耗，从而引起关节区或颌面部疼痛、颞下颌关节弹响、下颌运动障碍等临床症状和体征^[1]，严重时可影响患者的生活和工作。目前，颞下颌关节紊乱病主要遵循合理的序列治疗，虽可以减缓和改善患者不适，但由于受损关节软骨和骨组织自我修复和重建功能有限，临床中治疗效果仍不甚理想^[2]。因此，组织工程再生修复成为目前治疗颞下颌关节骨关节炎疾病备受关注的方法之一^[3]。

种子细胞是组织工程的基本要素之一。通过采集颞下颌关节紊乱病患者关节灌洗液进行体外培养可获得滑液来源间充质干细胞(synovial fluid mesenchymal stem cells，SFMSCs)并证实其具有诱导成骨分化能力^[4]。人颞下颌关节SFMSCs获取较简单微创，且与颞下颌关节环境同源，因而可能成为颞下颌关节组织再生颇具应用前景的种子细胞。但是目前对间充质干细胞成骨诱导液中的部分组分和剂量仍存在争议，对于炎性微环境下SFMSCs成骨分化调控因素的相关研究也鲜有报道。

体内的维生素D3主要由皮肤中7-脱氢胆固醇经日光中的紫外线照射转化而来，也可从肝、乳、鱼肝油等食物中获取。维生素D3无生物活性，它首先在肝脏被25-羟化酶催化为具有一定生物活性的25羟基维生素D3，然后在肾近端小管1α-羟化酶的催化下生成活性更高的1，25-二羟维生素D3。1，25-二羟维生素D3能够调节骨钙的沉积和释放^[5]。有文献报道成骨诱导液中添加1，25-二羟维生素D3可以明显加强诱导多能干细胞和人间充质干细胞的成骨能力^[6-7]。Shen等^[8]通过基因敲除动物实验发现缺乏1，25-二羟维生素D3的小鼠颞下颌关节骨密度及软骨下骨体积均明显减少，同时关节软骨也发生破坏，其认为1，25-二羟维生素D3可以阻止颞下颌关节骨关节病的发生发展。因此，作者推测1，25-二羟维生素D3可能对人颞下颌关节腔中的SFMSCs成骨分化有促进作用，其调节成骨分化的机制仍不明了。已有研究证实地塞米松在体外调节人间充质干细胞成骨及矿化中起关键作用^[9-10]，但地塞米松的添加浓度亦存在争议。

颞下颌关节紊乱关节腔炎性微环境中的SFMSCs的生物学特性可能会受到影响^[11]，实验通过比较不同组分的成骨诱导液诱导SFMSCs成骨分化的差异，初探地塞米松和1，25-二羟维生素D3在SFMSCs成骨诱导中的调控作用，也为应用地塞米松和1，25-二羟维生素D3诱导关节腔内自体存在的SFMSCs修复关节组织提供初步的设想依据。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

材料方法

1.1 设计 细胞学体外实验。

1.2 时间及地点 实验于2015年4月至2016年3月在中山大学广东省口腔医学重点实验室完成。

1.3 材料

1.3.1 样本 关节滑液来源于中山大学附属口腔医院颞下颌关节门诊就诊的颞下颌关节紊乱病患者。实验已获中山大学附属口腔医院医学伦理会批准，所有参与研究的患者均已签署知情同意书。

1.3.2 实验主要实验仪器及试剂 小型无热源超纯水系统(Milli-Q Advantage A10，Thermo公司)；细胞培养箱(Heraeus HERAcell 150i，Thermo公司)；荧光定量 PCR 仪(Light Cycler 480，ROCHE公司)；全自动倒置显微镜(ZEISS公司)；澳洲胎牛血清、DMEM高糖培养基、α-MEM培养基、Glutamax、胰酶(Gibco公司)；Trizol(Invitrogen公司)；RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit (Thermo Scientific公司)；热启动重组Taq DNA聚合酶(TaKaRa公司)；Von Kossa 染色试剂盒(GenMed Scientifics公司)；维生素C-2磷酸(Wako公司)；地塞米松(Millipore公司)；β-甘油酸钠(Santa Cruz公司)；1，25二羟维生素 D3(Sigma公司)。

1.4 实验方法

1.4.1 人颞下颌关节SFMSCs的培养 选取保守无创治疗效果不佳的颞下颌关节紊乱患者29例36侧关节，年龄18-61岁，其中男4例，女25例。患者均未接受过非类固醇类抗炎药物、肌松剂等或其他药物治疗，且无特异性炎症、类风湿关节炎、外伤史或肿瘤等其他全身系统性疾病。患者因诊疗需要进行关节灌洗，将含有 2 mL利多卡因的注射器进入关节上腔，反复注入回抽获取含颞下颌关节滑液的灌洗液，将灌洗液标本离心(300×g，5 min)，弃上清后的沉淀于完全培养基(α-MEM+体积分数为10%胎牛血清+ 1× Glutamax)中重悬，接种于培养皿中，在37 ℃、体积分数为5%CO₂培养箱中培养，第3天即可看到零星散在的贴壁细胞，2周后即可见到多个细胞克隆团形成。将获得的原代细胞混合体外培养扩增。

1.4.2 成骨分化诱导 选取第3-5代SFMSCs，按5 000个/cm²的密度接种于6孔板中，在37 ℃、体积分数为5% CO₂的条件下培养24 h，去除原完全培养基后，加入不同的成骨诱导液，具体诱导液成分见表1，继续用完全培养基培养作为对照组，每3 d更换1次培养基。

1.4.3 茜素红染色 成骨诱导液诱导第7，14，21天，去除培养基，双蒸水清洗2遍，40 g/L多聚甲醛固定10 min，再用双蒸水清洗2遍，0.1%茜素红染液37 ℃孵育30 min，双蒸水冲洗后直至背景干净后，全自动倒置显微镜下观察染色情况。

1.4.4 Von Kossa染色 成骨诱导液诱导第21天，去除培养基，按照Von Kossa染色试剂盒的操作手册对标本进行染色处理，全自动倒置显微镜下观察染色情况。

1.4.5 RT-PCR 检测基因表达 成骨诱导液诱导第28天，去除培养基，用Trizol提取细胞总RNA，应用RvertAid First Strand cDNA Synthesis kit合成cDNA，主要操作步骤如下：25 ℃孵育5 min，42 ℃孵育60 min，最后72 ℃孵育5 min，4 ℃维持，保存于-20 ℃。采用热启动重组Taq DNA聚合酶检测相关基因RUNX-2、OCN和ALP的表达情况，主要操作步骤如下：95 ℃预变性3 min；95 ℃ 30 s，55 ℃ 30 s，72 ℃ 45 s总共40个循环；72 ℃延伸10 min，稳定4 ℃后获取样品熔解曲线。运用2^-^??Ct方法计算目的基因的相对表达水平，其中GAPDH作为内参基因，并计算扩增效率。??Ct=(Ct_{target gene}–Ct_GAPDH)sample-(Ct_{target gene} – Ct_GAPDH) control。基因引物序列见表2。

1.5 主要观察指标 ①SFMSCs经不同组分成骨诱导液体外诱导后茜素红染色情况；②SFMSCs经不同组分成骨诱导液体外诱导后Von Kossa染色情况；③SFMSCs经不同组分成骨诱导液体外诱导后成骨分化标志基因(RUNX2、OCN和ALP)的表达。

1.6 统计学分析 所有数值均记为x(_)±s，采用SPSS 15.0统计软件分析，组间比较采用方差分析，P < 0.05为差异有显著性意义。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

讨论

应用干细胞组织工程技术修复颞下颌关节骨及软骨组织破坏成为治疗骨关节疾病的焦点之一。间充质干细胞是最被广泛应用的一类干细胞，它可以从骨髓、外周血、脂肪、肌肉、皮肤、牙髓、滑膜、滑液、关节盘等不同成体组织中分离获得^[12-13]。而不同组织来源的间充质干细胞也表现出不同的优势特性^[14-15]。从颞下颌关节中分离获得的间充质干细胞在颞下颌关节软骨及软骨下骨的修复和再生中有积极的作用，并在应用于颞下颌关节紊乱病的诊疗中更有优势。本研究通过对临床颞下颌关节检查获得的关节灌洗液进行培养及鉴定获得SFMSCs，比手术获取滑膜组织培养干细胞更简便微创，且细胞增殖能力强^[4]。因此，本研究以SFMSCs为种子细胞，通过比较不同组分的成骨诱导液对SFMSCs成骨能力差异，分析1，25-二羟维生素D3和地塞米松在其成骨分化中的角色，充分利用其生物学特性优化成骨分化，对颞下颌关节疾病的诊疗应用有重要的意义。

3.1 地塞米松对SFMSCs成骨分化的作用 地塞米松是一种人工合成的皮质类固醇，目前较多在临床中被用作抗炎药。尽管应用地塞米松可能引起或加剧骨质疏松，仍有较多研究中采用地塞米松进行体外诱导间充质干细胞多向分化^[16]。地塞米松不仅能促进成骨细胞的成熟分化，在诱导人间充质干细胞的成骨分化中亦有积极的作用，是诱导间充质干细胞成骨分化的必备因素^[17-18]，本研究也发现其在体外可与β-甘油酸钠和维生素C一起诱导矿化。然而地塞米松在改善骨形成应用中的浓度一直存在争议，且其诱导分化的机制仍不明晰^[19]。Yuasa等^[20]认为地塞米松在10-1 000 nmol/L浓度范围都可以明显增强成骨细胞的分化。通过体外细胞学实验发现含地塞米松的培养基可以影响骨髓间充质干细胞的增殖能力，在最低浓度10 nmol/L时细胞在整个过程保持最佳增殖能力，而在含100 nmol/L和1 000 nmol/L地塞米松的培养基中的骨髓间充干细胞在刚开始时增殖能力较弱，且这两个浓度对细胞增殖能力无显著差异。随后比较含100 nmol/L和1 000 nmol/L地塞米松的成骨诱导液诱导成骨情况，发现两者之间也无显著性差异。同时，有研究报道100 nmol/L地塞米松可以诱导小鼠和人间充质干细胞成骨分化的同时有较强的成脂分化能力^[7^，^10]。本研究对成骨诱导液中地塞米松的应用选择100 nmol/L和10 nmol/L两个浓度进行比较。

RUNX2是骨形成初阶段的标志基因，它的表达是成骨分化、骨生成和骨发育的标志。ALP是成骨细胞的表型标志，可以反映成骨细胞的活性^[21]。本研究中，通过比较组2和组3高低浓度地塞米松诱导液的茜素红染色、Von Kossa染色结果和成骨相关标志基因表达，发现不同浓度地塞米松均可以诱导SFMSCs成骨分化，通过ALP基因表达显示高浓度地塞米松未造成分化形成的成骨细胞功能异常，并且没有脂滴的形成。推测应用100 nmol/L地塞米松是诱导SFMSCs成骨的有效成分，可能与颞下颌关节紊乱病与雌激素水平之间关系密切有关。糖皮质激素主要通过诱导骨细胞凋亡或影响成骨细胞的增殖或分化功能而导致骨损伤，而雌激素可以拮抗这一作用从而起到保护效应^[22]。但有研究发现虽然应用糖皮质激素早期可以明显促进间充质干细胞的成骨，但持续应用会减少糖皮质激素受体及糖皮质激素受体-HDAC6复合体的表达，从而抑制OCN的表达，不断降低分化成骨细胞成熟的潜能，加速退化^[23]。OCN是骨组织中最丰富的非胶原蛋白，由成骨细胞合成和分泌，是体外诱导间充质干细胞成骨分化更加稳定的标志。然而本实验中组1、组2和组3成骨诱导中OCN的表达均不理想。考虑到地塞米松在诱导间充质干细胞成骨分化中的复杂生物学作用，希望进一步了解诱导SFMSCs成骨的调控或协同因素，减少地塞米松在诱导骨形成中的不良作用。

3.2 1，25-二羟维生素D3对SFMSCs成骨分化的作用 1，25-二羟维生素D3是维生素D3的活性代谢产物，是骨代谢及钙磷平衡的重要调节因子。1，25-二羟维生素D3的缺乏与佝偻病和软骨病等骨矿化缺陷性疾病相关，也有研究发现1，25-二羟维生素D3既可刺激成骨细胞的活性，又可提高破骨细胞的活性从而调节骨钙的沉积和释放^[24]。其对成骨细胞的生长和功能分化的刺激或抑制作用主要取决于细胞来源、分化的初始状态和1，25-二羟维生素D3的浓度^[25-26]。Chen等^[27]实验研究发现维生素D3通过上调牙周韧带相关蛋白PLAP-1，从而负向调节小鼠牙周膜成纤维细胞的成骨分化，阻止牙周韧带矿化。而Song等^[28]发现维生素D3可以协同增强含有BMP-2诱导的脂肪干细胞的成骨分化，表现在ALP活性增加和基质矿化水平的提高。这可能是因为在维生素D3介导的成骨诱导中涉及BMP信号通路的重要作用^[29]。此外，体外研究还发现高浓度的维生素D3会抑制鸡骨髓间充干细胞的增殖能力和成骨分化，但细胞来源不同，其对维生素D3的敏感浓度不同^[30]。Mostaf等^[7]也发现在10 μg/L碱性成纤维细胞生长因子条件下添加维生素D3和地塞米松时可抑制人间充质干细胞的成脂分化，而成骨诱导25 d后钙化能力明显增加，这对指导临床应用骨组织工程修复有重要意义。另一个影响维生素D3成骨诱导的因素则是分化阶段，Olivares-Navarrete等^[31]报道1，25-二羟维生素D3不仅促进鼠胚胎干细胞体外拟胚体的形成分化，而且对人间充质干细胞也有促进骨形成的作用，其主要通过核受体(VDR)和蛋白二硫化物异构酶A(PDIA3)这两个经典的维生素D受体起作用，PDIA3在分化的早期阶段其重要作用，而VDR则在分化的后期阶段起更重要的作用。

本实验中，在含有10 nmol/L 1，25-二羟维生素D3的成骨诱导液中SFMSCs的矿化结节出现最早，且整个诱导过程中矿化形成量最多。同时，OCN、ALP和RUNX2的基因表达均较对照组明显上调，说明1，25-二羟维生素D3可以明显提高SFMSCs的成骨分化能力，这与前述一些相关研究结果较符。同时研究显示ALP的基因表达在含1，25-二羟维生素D3组较不含1，25-二羟维生素D3组要低，这可能是因为成骨细胞的维生素D受体可结合OCN基因的启动子从而促进成骨细胞成熟、新骨形成及OCN的转录表达^[32-33]。也可通过增加人间充质干细胞ΔNp63的基因表达，从而增加OCN的表达促进骨成熟^[34]。鉴于ALP、RUNX2是骨形成早期的指标，而OCN则是成骨分化后期的一个标志物，作者推测1，25-二羟维生素D3对SFMSCs成骨诱导的主要作用在于加速成骨分化进程。同时，成骨诱导液中的地塞米松也可以通过增加维生素D受体的表达进而增加目标基因启动子的结合，从而增加1，25-二羟维生素D3的成骨作用^[35]。然而，不同的细胞对1，25-二羟维生素D3的反应不同，高浓度的1，25-二羟维生素D3可能会抑制成骨分化、骨细胞矿化和成骨分化中的细胞增殖^[36-37]。因此，对1，25-二羟维生素D3诱导SFMSCs的最佳浓度、时间及具体机制仍需要进一步更深入的研究。

结论：实验证明10 nmol/L 1，25-二羟维生素D3和100 nmol/L地塞米松可以明显提高SFMSCs的骨形成能力。对SFMSCs成骨分化调控因素和机制的探讨及如何应用自体滑液干细胞修复颞下颌关节骨组织仍需进一步研究。

1，25-二羟维生素D3和地塞米松促进人颞下颌关节滑液间充质干细胞的体外成骨分化

Combined use of 1,25-dihydroxyvitamin D3 and dexamethasone promotes osteogenic differentiation of synovial fluid mesenchymal stem cells from human temporomandibular joint

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