阿仑膦酸钠干预去卵巢大鼠骨质疏松的腰椎代谢组学分析

doi:10.12307/2025.375

中国组织工程研究 ›› 2025, Vol. 29 ›› Issue (11): 2277-2284.doi: 10.12307/2025.375

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阿仑膦酸钠干预去卵巢大鼠骨质疏松的腰椎代谢组学分析

陈鑫飞1，戴雅惠1，谢冰颖2，3，黄小彬2，3，黄惠敏2，3，黄景文2，3，李生强2，3，葛继荣2，3

1福建中医药大学，福建省福州市 350003；2福建省中医药科学院基础研究所，福建省福州市 350003；3福建省中西医结合防治骨质疏松重点实验室(福建省中医药科学院，福建中医药大学附属康复医院)，福建省福州市 350003

收稿日期:2024-04-17 接受日期:2024-06-12 出版日期:2025-04-18 发布日期:2024-08-10
通讯作者: 李生强，博士，研究员，福建省中医药科学院基础研究所，福建省福州市 350003；福建省中西医结合防治骨质疏松重点实验室(福建省中医药科学院，福建中医药大学附属康复医院)，福建省福州市 350003
作者简介:陈鑫飞，男，1997年生，河北省馆陶县人，汉族，福建中医药大学在读硕士，主要从事中医药防治骨质疏松症方面的研究。
基金资助:
国家自然科学基金项目(81774350)，项目负责人：李生强；福建省科技厅省属公益类科研院所基本科研专项(2019R1003-1)，项目负责人：李生强；福建省自然科学基金项目(2023J01856)，项目负责人：谢冰颖；福建省中医药科研项目(2021zylc42)，项目负责人：李生强

Metabolomics analysis of the lumbar spine after alendronate sodium intervention in ovariectomized rats with osteoporosis

Chen Xinfei1, Dai Yahui1, Xie Bingying2, 3, Huang Xiaobin2, 3, Huang Huimin2, 3, Huang Jingwen2, 3, Li Shengqiang2, 3, Ge Jirong2, 3

1Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou 350003, Fujian Province, China; 2Institute of Basic Research, Fujian Academy of Chinese Medical Science, Fuzhou 350003, Fujian Province, China; 3Fujian Key Laboratory of Combined Traditional Chinese and Western Medicines for Prevention and Treatment of Osteoporosis (Rehabilitation Hospital Affiliated to Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fujian Academy of Chinese Medical Sciences), Fuzhou 350003, Fujian Province, China

Received:2024-04-17 Accepted:2024-06-12 Online:2025-04-18 Published:2024-08-10
Contact: Li Shengqiang, MD, Researcher, Institute of Basic Research, Fujian Academy of Chinese Medical Science, Fuzhou 350003, Fujian Province, China; Fujian Key Laboratory of Combined Traditional Chinese and Western Medicines for Prevention and Treatment of Osteoporosis (Rehabilitation Hospital Affiliated to Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fujian Academy of Chinese Medical Sciences), Fuzhou 350003, Fujian Province, China
About author:Chen Xinfei, Master candidate, Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou 350003, Fujian Province, China
Supported by:
National Natural Science Foundation of China, No. 81774350 (to LSQ); Basic Research Project of Fujian Provincial Public Research Institute, Science and Technology Department, No. 2019R1003-1 (to LSQ); Natural Science Foundation of Fujian Province, No. 2023J01856 (to XBY); Fujian Province Traditional Chinese Medicine Research Project, No. 2021zylc42 (to LSQ)

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：
代谢组学：诞生于20世纪末，由英国伦敦帝国大学Jeremy Nicholson教授创立，而后在基因组学时代兴起的一门跨领域学科，其主要目标是定量研究生命体对外界刺激、病理生理变化以及本身基因突变而产生的体内代谢物水平的多元动态反应。
液相色谱-质谱联用：色谱-质谱技术作为代谢组学研究最重要的工具，主要针对生物样本中小分子代谢物种类多、极性跨度大和浓度动态范围大的特点，以高效液相色谱作为分离系统，高分辨率质谱为检测系统的一种串联分析平台，与其他色谱-质谱联用技术相比，更适用于分析难挥发或热稳定性差的代谢物。

背景：研究报道，阿仑膦酸钠的摄入能显著提高骨质疏松症患者的骨密度。
目的：利用色谱-质谱技术分析比对阿仑膦酸钠干预去卵巢大鼠模型前后代谢物变化，进一步探索阿仑膦酸钠治疗骨质疏松症的具体机制及作用靶点。
方法：选择雌性SD大鼠36只，随机分为骨质疏松症组、阿仑膦酸钠组及假手术组，前两组采用去卵巢法建立骨质疏松症模型。造模4周后，阿仑膦酸钠组大鼠给予阿仑膦酸钠灌胃；假手术组和骨质疏松症组分别给予等体积生理盐水灌胃。连续灌胃12周后，通过色谱-质谱技术分析腰椎代谢物，得出共同差异代谢物，对其进行京都基因与基因组百科全书通路等生物信息学分析。
结果与结论：①3组共得到17种共同显著性差异代谢物；②通过京都基因与基因组百科全书富集分析表明，阿仑膦酸钠可能调节不饱和脂肪酸生物合成、亚油酸代谢等通路保护去卵巢模型大鼠；③结果提示，阿仑膦酸钠可能通过干预不饱和脂肪酸生物合成代谢和亚油酸代谢发挥其抗骨质疏松作用，从而达到预防骨质疏松症的目的。
https://orcid.org/0009-0006-8822-9505(陈鑫飞)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

关键词: 骨质疏松, 代谢组学, 阿仑膦酸钠, 亚油酸代谢, 不饱和脂肪酸生物合成, 差异代谢物, 色谱-质谱技术, 中医药

Abstract: BACKGROUND: Studies have reported that alendronate intake significantly increases bone mineral density in patients with osteoporosis.
OBJECTIVE: To analyze and compare the changes in metabolites before and after alendronate intervention in ovariectomized rats by chromatography-mass spectrometry, and to further explore the specific mechanism and target of alendronate in the treatment of osteoporosis.
METHODS: A total of 36 female Sprague-Dawley rats were randomly divided into model group, alendronate sodium group and sham operation group. The osteoporosis model was established by ovariectomy in the first two groups. Four weeks after modeling, the rats in the alendronate group were intragastrically given alendronate sodium, while those in the sham operation group and model group were given equal volume of normal saline. After 12 weeks of continuous gavage, the metabolites of the lumbar spine were analyzed by chromatography-mass spectrometry, and the common differential metabolites were obtained, which were analyzed by bioinformatics such as Kyoto Gene and Genome Encyclopedia pathway.
RESULTS AND CONCLUSION: Totally 17 different metabolites were obtained in the three groups. The enrichment analysis of the Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes showed that alendronate sodium could regulate unsaturated fatty acid biosynthesis, linoleic acid metabolism and other pathways to protect ovariectomized rats. These results indicate that alendronate sodium may exert its anti-osteoporosis effect by interfering with unsaturated fatty acid bioanabolism and linoleic acid metabolism, so as to achieve the purpose of preventing osteoporosis.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

Key words: osteoporosis, metabolomics, alendronate sodium, linoleic acid metabolism, unsaturated fatty acid biosynthesis, differential metabolite, chromatography-mass spectrometry, traditional Chinese medicine

中图分类号:

陈鑫飞, 戴雅惠, 谢冰颖, 黄小彬, 黄惠敏, 黄景文, 李生强, 葛继荣, . 阿仑膦酸钠干预去卵巢大鼠骨质疏松的腰椎代谢组学分析[J]. 中国组织工程研究, 2025, 29(11): 2277-2284.

Chen Xinfei, Dai Yahui, Xie Bingying, Huang Xiaobin, Huang Huimin, Huang Jingwen, Li Shengqiang, Ge Jirong. Metabolomics analysis of the lumbar spine after alendronate sodium intervention in ovariectomized rats with osteoporosis[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2025, 29(11): 2277-2284.

图/表（结果） 9

2.1 实验动物数量实验共有36只SD雌性大鼠，实验造模及干预过程均无大鼠死亡而脱失。
2.2 大鼠左侧胫骨骨密度经两两比较，与假手术组比较，骨质疏松症组大鼠胫骨骨密度显著降低(P=0.001，P < 0.05)；与骨质疏松症组比较，阿仑膦酸钠组大鼠胫骨骨密度结果显示升高(P=0.005，P < 0.01)；假手术组大鼠胫骨骨密度高于阿仑膦酸钠组但差异无显著性意义(P=0.713，P > 0.05)，见表1。

2.3 大鼠胫骨Mirco-Ct分析利用Mirco-Ct观察3组大鼠胫骨骨小梁情况发现，与假手术组比较，骨质疏松症组大鼠骨小梁数目少、间隙大、排列稀疏；阿仑膦酸钠组大鼠骨小梁数目增多、间隙减小，排列整齐，见图1A-C。骨微观参数分析显示，与假手术组比较，骨质疏松症组大鼠骨密度、骨体积分数、骨表面积组织体积比均显著降低(P < 0.05)；与骨质疏松症组相比，阿仑膦酸钠组大鼠骨密度、骨体积分数、骨表面积组织体积比升高(P < 0.05)；与假手术组比较，骨质疏松症组和阿仑膦酸钠组大鼠的骨小梁模式因子增加，骨小梁分离度变宽，骨质疏松症组大鼠骨小梁数目减少；与骨质疏松症组比较，阿仑膦酸钠组大鼠骨小梁数目增加，但差异均无显著性意义，见图1D-I。

2.4 正交偏最小二乘判别分析见图2，3。在骨质疏松症组和假手术组大鼠的腰椎样品比较中，正离子模式下，骨质疏松症组有2(R2Y：0.984)个主成分，见图2A；负离子模式下，假手术组有3个(R2Y∶0.991)主成分，见图3A。在骨质疏松症组和阿仑膦酸钠组大鼠腰椎样品比较中，正离子模式下，阿仑膦酸钠组有 2个(R2Y∶0.980)主成分，见图2B；负离子模式下，骨质疏松症组有3个(R2Y∶
0.992)主成分，见图3B(3组样本组间组内存在代谢差异)。

2.5 单变量统计分析正负离子模式下3组间得到53个差异代谢物(VIP > 1)。以倍数变化> 1.5表明两组间代谢物含量上升，倍数变化< 1.5 则反之，因此在正负离子模式下，按照该条件，发现在骨质疏松症组和假手术组中有12个代谢物上调，41个代谢物下调；而经阿仑膦酸钠药物治疗后相较于骨质疏松症组发现，有19个代谢物上调，34个代谢物下调。并将该结果展示于火山图中，见图4，5。

2.6 差异代谢物筛选结果在VIP > 1且P < 0.05 条件下进行代谢物筛选并两两比较，结果显示，阿仑膦酸钠的干预，能够显著回调骨质疏松症组与假手术组间38个差异代谢物中的17个代谢物，即潜在生物标志物，见表2。

离子强度分析后，骨质疏松症组中有5个生物标志物在阿仑膦酸钠干预后下调；12个生物标志物在阿仑膦酸钠干预后上调。其中邻氨基苯甲酸、芥酸酰胺、磷酸胆碱，D-阿拉伯糖-1，4-内酯等在两两比较时差异有显著性意义，见图6。
2.7 差异代谢物KEGG通路富集分析富集分析骨质疏松症组与假手术组、骨质疏松症组和阿仑膦酸钠组之间的差异代谢物，并将分析后的结果展示于气泡图中(仅展示前20条通路)，如图7所示。经过分析比较后发现不饱和脂肪酸代谢、亚油酸代谢、矿物吸收等重要通路是二者共同富集的通路。

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引言

材料方法

1.1 设计随机对照动物实验，检测指标均为计量资料，多组间比较采用单因素方差分析及两两比较。
1.2 时间及地点实验于2018年9月至2019年9月分别在福建省中医药科学院基础研究所实验室和上海中科新生命生物科技有限公司完成。
1.3 材料
1.3.1 实验动物 36只3月龄SPF级SD雌性大鼠，体质量为180-200 g，购于上海斯莱克实验动物有限责任公司，生产许可证号：SCXK(沪)2017-0005；饲养于福建省中医药科学院比较实验中心3个月，使用许可证号为：SYXK (闽) 2016-0005。实验过程遵循了国际兽医学编辑学会《关于动物伦理与福利的作者指南共识》和本地及国家法规，且该实验方案得到福建省中医药科学院动物实验伦理委员会批准，批准号为：FJATCM-IAEC2018034。
1.3.2 药品及试剂阿仑膦酸钠(杭州默沙东制药有限公司，国药准字 H20010515)；乙酸铵 (Sigma，货号：70221)，乙腈 (Merck，货号：1499230-935)。
1.3.3 实验仪器 Agilent 1290 Infinity LC 超高压液相色谱仪，AB Triple TOF 5600/6600 质谱仪，Discovery W双能X射线骨密度仪，低温高速离心机(Eppendorf5430R)，Micro-computed tomography(micro-CT，ZKKS-MCT-Sharp， zhongkekasheng Co.，China)。
1.4 实验方法
1.4.1 实验动物分组将36只SD雌性大鼠随机均分为骨质疏松症组(n=12)、阿仑膦酸钠组(n=12)、假手术组(n=12) 3组。
1.4.2 实验动物造模及干预方法骨质疏松症组及阿仑膦酸钠组大鼠参照课题组前期实验方法行双侧卵巢切除术[11]，假手术组大鼠切除双侧卵巢旁同等体积脂肪组织。术后1个月，阿仑膦酸钠组大鼠灌胃阿仑膦酸钠，剂量参照实验动物等效剂量系数折算法进行计算，确定为6.25 mg/kg；另外使用等量生理盐水对骨质疏松症组及假手术组大鼠进行灌胃。灌胃频率均为1 次/周，持续3个月。

1.4.3 取材连续干预大鼠3个月，最后一次灌胃2 h过后，分别对3组大鼠进行腹腔注射2%戊巴比妥钠麻醉(40 mg/kg)，麻醉后取出 L1，L2和左侧胫骨，于-80 ℃冰箱保存。
1.4.4 样本处理 -80 ℃冰箱中取出腰椎样品80 mg，加入200 μL双蒸水涡旋振荡60 s，混匀，按照1∶1比例加入甲醇/乙腈溶液800 μL，涡旋振荡60 s，30 min低温超声，2次。完成后将样品放于-20 ℃冰箱1 h，得到蛋白沉淀，再用4 ℃低温离心机离心20 min(14 000 r/min)，离心完成后，用适宜的移液枪小心提取上清液，注意不要吸到上清液以外的液体，然后将其放入冷冻干燥机，进行冷冻升华、再干燥，最后操作完成后放于-80 ℃冰箱保存。
1.4.5 骨密度检测使用Discovery W双能X射线骨密度仪检测3组大鼠左侧胫骨骨密度。
1.4.6 Mirco-Ct骨骼分析在微ct成像系统(电压为70 kV、电流为100 μA)上进行微ct扫描和形态测量分析。根据微ct结果对所得图像进行重建，并通过分析软件测量3组大鼠左侧胫骨的骨形态计量参数，参数包括骨矿物质密度、骨组织体积与组织体积比值、骨表面积组织体积比、骨小梁模式因子、骨小梁数目、骨小梁分离度。统计分析在Prism 9.5(GraphPad Prism Software，USA)上完成。
1.4.7 色谱和质谱条件及代谢组学数据分析色谱质谱条件参考课题组前期研究[12]。使用质谱软件ProteoWizard对数据进行导入分析，其次Pareto-scaling预处理，正交偏最小二乘判别分析结合变异倍数分析，最后用R软件绘制火山图。
通过正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)方法可直接在正交主成分上看出组内的变异。观察模型参数R2Y和Q2二者的值是否接近1，判断模型是否可靠，其中当Q2 > 0.5表示模型稳定可靠，当Q2 < 0.3则表示模型稳定性较低。
根据变量权重值(VIP)和P(corr)值来筛选差异代谢物，筛选条件为VIP > 1和P > 0.05。京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG，https://www.kegg.jp/)和代谢物生物作用(MBRole2.0，http://csbg.cnb. csic.es/mbrole2/)等数据库对差异代谢物进行分析。
1.5 主要观察指标 ①3组大鼠骨密度；②大鼠胫骨Mirco-Ct分析；③差异代谢物；④差异代谢物KEGG通路富集分析结果。
1.6 统计学分析福建中医药大学统计学专家已审核该文统计学方法。实验采用SPSS 29.0软件进行统计分析，数据均为计量资料，采用x±s表示。当数据符合正态分布且方差齐时，多组间比较采用单因素方差分析后再进行两两比较。P < 0.05为差异有显著性意义。

讨论

3.1 既往研究及不足双膦酸盐作为临床上公认的治疗骨质疏松症的药物，其中含氮双膦酸盐阿仑膦酸钠又作为主要药物被广泛应用。1970年，阿仑膦酸钠首次被合成，最开始用于寻找钙化抑制剂。1995年，该药被FDA批准治疗“低骨量”的患者[13]。阿仑膦酸钠主要发挥抗骨吸收作用，其发挥作用的机制是由于能够抑制破骨细胞中的法呢基焦磷酸合成酶(Farnesyl pyrophosphate synthase，FPPS)，法呢基焦磷酸合成酶作为甲羟戊酸途径中关键酶，可通过产生异戊二烯类脂质影响破骨细胞功能的发挥[14]，同时对其他骨细胞功能的发挥也很重要。双膦酸盐类药物在临床实际应用过程中跟骨矿物质结合程度不同，各类药物(阿仑膦酸钠、利塞膦酸钠、伊班膦酸钠和唑来膦酸)在骨骼基质中的保留时间也不尽相同，这种持续滞留即使在停药后也会产生长期残留效应[15]。阿仑膦酸钠已被证实为改善全身骨密度最有效的抗骨吸收药物[16]，
在最新的一篇有关阿仑膦酸钠治疗地中海贫血相关骨质疏松的一项随机对照试验中，显示每天口服阿仑膦酸钠持续12个月，能够有效改善L型脊柱的骨密度，降低血清骨生化转换指标[17]，能有效缓解地中海贫血患者的腰背痛，且耐受性和安全性良好。朱忠华等[18]在文献中指出阿仑膦酸钠配合辛伐他汀可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路相关因子的表达来提高骨质疏松大鼠的骨密度，改善骨组织的微结构。马广丽等[19]发现阿仑膦酸钠治疗骨质疏松症可有效改善骨转换指标，降低血清Klotho蛋白水平，且安全性和有效性均良好。目前有关阿仑膦酸钠治疗骨质疏松症的文献多集中于单药或联合用药治疗，与其相关的作用机制和有效靶点不足，仍需进一步研究。
3.2 研究的意义从代谢组学角度研究阿仑膦酸钠治疗去卵巢大鼠模型的作用机制。此次实验中，骨质疏松症组中的邻氨基苯甲酸、N-6甲基腺苷等12个异常代谢物在阿仑膦酸钠组中得到上调，说明阿仑膦酸钠可能通过上调这些代谢物来发挥治疗作用。通过KEGG分析结果，阿仑膦酸钠组和骨质疏松症组差异代谢物主要富集于不饱和脂肪酸生物合成、亚油酸代谢、矿物吸收等通路并对其进行分析。
骨质疏松症是由于成骨细胞和破骨细胞二者作用不平衡所引发的退行性疾病，骨代谢的机制复杂多变，有研究显示，人体内3-羟基邻氨基苯甲酸浓度降低可能会导致骨质疏松症，这可能与其能够促氧化及具有抗氧化活性能力相关[20-21]。在经干预后邻氨基苯甲酸发生回调，提示阿仑膦酸钠可能是通过升高3-羟基邻氨基苯甲酸的浓度来治疗骨质疏松。在此次研究中阿仑膦酸钠对N6-甲基腺苷(N6-methyladenine，m6A)具有回调作用，是一种甲基化腺苷核苷酸，在细胞水平上，已知N6-甲基腺苷修饰通过调节碱性磷酸酶、Runt相关转录因子2 (Runt-related transcription factor 2，Runx2)、Osterix、血管内皮生长因子和其他相关基因的表达来影响骨相关细胞的细胞增殖、分化和凋亡，如骨髓间充质干细胞、成骨细胞和破骨细胞[22]。HAN等[23-24]在文献中指出N6-甲基腺苷与非编码RNA(ncRNA)之间的相互作用能够调控多种生物学过程，二者之间的相互调节能很好地保持骨稳态，在骨质疏松的病理生理过程中起着决定作用，因此靶向N6-甲基腺苷修饰的非编码RNA可能是一种新的治疗骨质疏松的方法。WU等[25]研究证明通过对骨髓间充质干细胞中METTL3的条件性敲除所引发的骨质疏松，是由于骨髓间充质干细胞中METTL3介导的N6-甲基腺苷甲基转移酶的下调导致的，由此可证明N6-甲基腺苷甲基转移酶的下调会降低成骨分化，引起成骨减少。另外跟成骨相关的基因 Runt相关转录因子2和Osterix二者的表达也会随着METTL6 的敲低表达而降低[26]。
有研究表明，共轭亚油酸(conjugated linoleic acid，CLA)可以促进骨形成，但其发挥作用的具体机制尚不清楚，LIN等[27]通过体内外实验检验共轭亚油酸对骨形成的作用，在实验中发现成骨细胞的碱性磷酸酶、runt相关转录因子2和骨钙素表达均上调，这一发现与前者研究不谋而合，并提出共轭亚油酸可以刺激成骨细胞的分化，并抑制前脂肪细胞通过蛋白激酶B(AKT)/mTORC1信号通路分化为脂肪细胞。还发现共轭亚油酸可以抑制核因子κB的促骨细胞原受体激活因子(核因子κB受体活化因子配体)，刺激核因子κB受体活化因子配体的诱饵受体骨保护素表达，从而预防绝经后骨质流失[28]。阿仑膦酸钠可通过亚油酸代谢干预治疗骨质疏松，但其是否通过上述机制来参与治疗仍需进一步阐明。
在骨质疏松患者群体中，患病的很大一部分原因跟饮食环境因素有关[29]。与多种维生素一样，多不饱和脂肪酸与骨骼健康密切相关，是重要的免疫营养素，在骨质疏松患者的营养治疗中发挥着重要作用[30-32]。有研究表明，多不饱和脂肪酸参与骨溶解、骨形成、骨代谢等多种疾病[33-35]，其摄入量和 n-6 及 n-3 多不饱和脂肪酸的比例与人类的骨密度息息相关[36-38]。更有学者提出n-6至n-3多不饱和脂肪酸的高比例也许是肥胖和骨质疏松症风险增加的原因之一[39]。骨矿物质流失是造成成骨细胞、破骨细胞作用不平衡的原因，而n-3 多不饱和脂肪酸恰可以通过增加成骨细胞的活性来促进骨骼发育过程中的矿物质沉积[40]。有相关研究报道，饮食n-3能有效减少去卵巢小鼠的骨质流失[41]，另有通过服用鱼油类食物可以抑制大鼠破骨细胞的活性的报道。总之多不饱和脂肪酸、n-3多不饱和脂肪酸、n-6多不饱和脂肪酸的摄入，可以显著增加患者骨密度，降低患者骨折风险[42]。多不饱和脂肪酸代谢可能是阿仑膦酸钠治疗骨质疏松的重要途径。
综上所述，此次研究采用色谱-质谱技术，研究了阿仑膦酸钠对去卵巢模型大鼠的治疗作用，主要集中于筛选经阿仑膦酸钠干预模型大鼠前后发生变化的共同显著性差异代谢物以及分析差异代谢物所富集的通路，研究共筛选出17种共同显著性差异代谢物及不饱和脂肪酸生物合成代谢、亚油酸代谢等代谢通路，提示阿仑膦酸钠通过调控上述差异代谢物和通路来治疗骨质疏松症，但并未对上述差异代谢物及通路进一步验证，差异代谢物之间以及共同富集的通路之间是否存在差异或协同作用仍不够明确。研究为临床上阿仑膦酸钠治疗骨质疏松症提供新的实验室依据，为后续相关新药开发提供新思路。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

阿仑膦酸钠干预去卵巢大鼠骨质疏松的腰椎代谢组学分析

Metabolomics analysis of the lumbar spine after alendronate sodium intervention in ovariectomized rats with osteoporosis

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