关节腔内注射医用臭氧治疗颞下颌关节骨关节炎模型大鼠的合适剂量

doi:10.12307/2022.670

中国组织工程研究 ›› 2022, Vol. 26 ›› Issue (23): 3700-3705.doi: 10.12307/2022.670

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关节腔内注射医用臭氧治疗颞下颌关节骨关节炎模型大鼠的合适剂量

张婉霞1，2，尼加提·努尔穆罕默德1，2，买斯吐热木·黒力力1，2，柳江龙1，2，刘迪1，2，买买提吐逊·吐尔地1，2

1新疆医科大学第一附属医院(附属口腔医院)口腔颌面创伤正颌外科，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830054；2新疆维吾尔自治区口腔医学研究所，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830054

收稿日期:2021-08-03 接受日期:2021-10-11 出版日期:2022-08-18 发布日期:2022-02-12
通讯作者: 买买提吐逊·吐尔地，博士，主任医师，新疆医科大学第一附属医院(附属口腔医院)口腔颌面创伤正颌外科，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830054；新疆维吾尔自治区口腔医学研究所，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830054
作者简介:张婉霞，女，1991年生，河南省宁陵县人，汉族，在读硕士，医师，主要从事颌面创伤外科研究。

An appropriate dose of intra-articular medical ozone injection in a rat model of temporomandibular joint osteoarthritis

Zhang Wanxia1, 2, Nijiati·Nuermuhanmode1, 2, Maisituremu·Heilili1, 2, Liu Jianglong1, 2, Liu Di1, 2, Maimaitituxun·Tuerdi1, 2

1Department of Oral and Maxillofacial Trauma and Orthognathic Surgery, the First Affiliated Hospital (Affiliated Stomatological Hospital) of Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China; 2Xinjiang Uygur Autonomous Region Institute of Stomatology, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China

Received:2021-08-03 Accepted:2021-10-11 Online:2022-08-18 Published:2022-02-12
Contact: Maimaitituxun·Tuerdi, MD, Chief physician, Department of Oral and Maxillofacial Trauma and Orthognathic Surgery, the First Affiliated Hospital (Affiliated Stomatological Hospital) of Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China; Xinjiang Uygur Autonomous Region Institute of Stomatology, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China
About author:Zhang Wanxia, Master candidate, Physician, Department of Oral and Maxillofacial Trauma and Orthognathic Surgery, the First Affiliated Hospital (Affiliated Stomatological Hospital) of Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China; Xinjiang Uygur Autonomous Region Institute of Stomatology, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：
骨关节炎：是一种累及包括颞下颌关节在内的关节软骨退行性疾病，这种疾病被认为不是由老化过程引起的，而是由关节软骨的生化改变和生物力学应力变化引起的。在中国，40岁以上人群患病率约38.46%，女性患病率大于男性，且有随年龄增长而升高的趋势。
臭氧：臭氧由3个氧原子组成，是氧的同素异形体，又叫三原子氧，极易溶于水，淡蓝色，具有特殊臭味，密度比氧气高1.6倍。由于臭氧极其不稳定，在20 ℃条件下半衰期约40 min，因此，不可长期储存。臭氧是一种备受争议的气体，一方面，在适宜浓度下可以在工、农、医疗等行业发挥重大作用；另一方面，由于它的强氧化性具有潜在的细胞毒性，会给抗氧化能力差的器官带来一定的损伤，如眼睛、肺等。

背景：医用臭氧是臭氧与氧气的混合物，与体液接触能快速产生活性氧，并激活机体的抗氧化系统。在临床上，关节腔内注射医用臭氧可有效缓解骨关节炎的进展。
目的：观察关节腔内注射医用臭氧对大鼠颞下颌关节骨关节炎的治疗作用。
方法：采用关节腔内一次性注射碘乙酸钠法建立大鼠颞下颌关节骨关节炎模型后，向大鼠关节腔内注射质量浓度分别为20，30，40 mg/L医用臭氧，1次/周，连续注射3周，模型组及对照组注射等量生理盐水，最后一次注射后1周，通过锥形束CT检查评价颞下颌关节的结构变化，然后取一侧颞下颌关节组织并抽取腹主动脉血，ELISA法检测髁突软骨及血浆中肿瘤坏死因子α水平，取另一侧颞下颌关节组织，经苏木精-伊红染色及番红O-固绿染色，采用改良Mankin’s评分法评估颞下颌关节组织的病理变化程度。
结果与结论：①锥形束CT观察结果：对照组大鼠颞下颌关节髁突形状规则，表面光滑；医用臭氧20，30 mg/L组大鼠髁突形变及表面缺损程度较模型组、医用臭氧40 mg/L组小；②ELISA法检测结果：与对照组相比，模型组、医用臭氧20，30，40 mg/L组大鼠髁突软骨及血浆中肿瘤坏死因子α表达水平显著升高(P < 0.05)；与模型组、医用臭氧40 mg/L组相比，医用臭氧20，30 mg/L组髁突软骨及血浆中肿瘤坏死因子α表达水平明显下降(P < 0.05)；③组织学观察结果：医用臭氧20，30，40 mg/L组及模型组改良Mankin’s评分均高于对照组(P < 0.05)，医用臭氧20，30 mg/L组改良Mankin’s评分低于模型组、医用臭氧40 mg/L组(P < 0.05)；④结果表明，关节腔内注射质量浓度分别为20，30 mg/L医用臭氧时，能明显缓解大鼠颞下颌关节骨关节炎的进展，但是当臭氧质量浓度上升到40 mg/L时，反而会加重大鼠颞下颌关节骨关节炎的病变程度。

https://orcid.org/0000-0002-0505-0993 (买买提吐逊·吐尔地)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

关键词: 颞下颌关节紊乱病, 颞下颌关节, 骨关节炎, 臭氧, 关节腔, 注射, 治疗, 大鼠

Abstract: BACKGROUND: Medical ozone is a mixture of ozone and oxygen that, in contact with body fluids, rapidly produces reactive oxygen species and activates the body’s antioxidant system. Clinically, the intra-articular injection of medical ozone can effectively alleviate the progress of osteoarthritis.
OBJECTIVE: To study the therapeutic effect of intra-articular injection of medical ozone in a rat model of temporomandibular joint osteoarthritis.
METHODS: The rat model of temporomandibular joint osteoarthritis was established through intra-articular injection of sodium iodoacetate. Medical ozone with mass concentrations of 20, 30 and 40 mg/L was then injected into the joint cavity of the experimental rats once a week for 3 weeks. Model group and control group were injected with the equal amount of saline. The structural changes of the temporomandibular joint were evaluated by cone beam CT examination 1 week after the last injection. The tumor necrosis factor α level in the condylar cartilage and plasma was measured by ELISA, and the tissue samples of the temporomandibular joint on the other side were stained with hematoxylin-eosin and safranin O-fast green, and histopathological changes of the temporomandibular joint were evaluated by the modified Mankin’s score.
RESULTS AND CONCLUSION: Cone beam CT results indicated that the temporomandibular joint and condylar process of control rats had regular shape and smooth surface, while condylar process deformation and surface defects of rats in the medical ozone 20 and 30 mg/L groups were smaller than those in the model and medical ozone 40 mg/L groups. ELISA results revealed that the expression levels of tumor necrosis factor α in the cartilage and plasma of the rat condylar process were significantly increased in the model group and medical ozone 20, 30, 40 mg/L groups compared with the control group (P < 0.05). Compared with the model group and medical ozone 40 mg/L group, the expression level of tumor necrosis factor α in the cartilage and plasma were significantly decreased in the medical ozone 20, 30 mg/L groups (P < 0.05). Histological observation revealed that the modified Mankin’s score in the medical ozone 20, 30, 40 mg/L groups and the model group were significantly higher than that in the control group (P < 0.05); the modified Mankin’s score in the medical ozone 20, 30 mg/L groups was significantly lower than that in the model group and the medical ozone 40 mg/L group (P < 0.05). To conclude, the intra-articular injection of 20 and 30 mg/L medical ozone can significantly delay the progression of osteoarthritis in the temporomandibular joint of rats, but when the mass concentration of ozone is increased to 40 mg/L, it will aggravate osteoarthritis in the temporomandibular joint of rats.

Key words: temporomandibular joint disorder, temporomandibular joint, osteoarthritis, ozone, intra-articular, injection, therapeutics, rats

中图分类号:

张婉霞, 尼加提·努尔穆罕默德, 买斯吐热木·黒力力, 柳江龙, 刘迪, 买买提吐逊·吐尔地. 关节腔内注射医用臭氧治疗颞下颌关节骨关节炎模型大鼠的合适剂量[J]. 中国组织工程研究, 2022, 26(23): 3700-3705.

Zhang Wanxia, Nijiati·Nuermuhanmode, Maisituremu·Heilili, Liu Jianglong, Liu Di, Maimaitituxun·Tuerdi. An appropriate dose of intra-articular medical ozone injection in a rat model of temporomandibular joint osteoarthritis[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2022, 26(23): 3700-3705.

图/表（结果） 5

2.1 实验动物数量分析选取SD大鼠50只，中途脱落8只，原因：腹腔注射麻醉药物时，操作方法不正确或者麻醉药物过量所致，最终进入结果分析42只SD大鼠，随机分为5组，其中对照组6只，模型组6只，医用臭氧20，30，40 mg/L组各10只。
2.2 锥形束CT扫描结果对照组大鼠颞下颌关节侧面三维图及顶视三维图可见髁突形状规则，表面光滑；医用臭氧20，30 mg/L组大鼠髁突形变及表面缺损程度较模型组、医用臭氧40 mg/L组小，见图2。

2.3 ELISA检测结果与对照组相比，模型组、医用臭氧20，30，40 mg/L组大鼠髁突软骨及血浆中肿瘤坏死因子α水平显著升高，差异有显著性意义(P < 0.05)；与模型组相比，医用臭氧20，30 mg/L组髁突软骨及血浆中肿瘤坏死因子α水平明显下降，差异亦有显著性意义(P < 0.05)；但医用臭氧40 mg/L与模型组相比，医用臭氧20 mg/L组与医用臭氧30 mg/L组相比，差异无显著性意义(P > 0.05)，见表2。

2.4 苏木精-伊红染色及番红O-固绿染色结果
2.4.1 对照组无明显病理学改变，髁突软骨由表及里可分为纤维层、增殖层、肥大层和钙化软骨层，4层结构排列紧密、有序，层次清楚，软骨细胞排列整齐，分布均匀，番红O-固绿染色组织红染明显，改良Mankin’s法评分为0.67±0.82，见图3和表3。

2.4.2 模型组 4层结构层次不清，细胞数量明显减少，无细胞区范围较大，肥大层及钙化软骨层可见裂隙，番红O-固绿染色组织红染明显降低，部分区域可见失染，改良Mankin’s法评分为10.00±0.89，见图3和表3。
2.4.3 医用臭氧20 mg/L组 4层结构较为清晰，髁突表面纤维层崩解，细胞数量轻度减少，无细胞区范围较小，番红O-固绿染色组织红染轻度减低，改良Mankin’s法评分为4.50±0.97，见图3和表3。
2.4.4 医用臭氧30 mg/L组 4层结构较为清晰，髁突表面胶原纤维崩解，亦出现无细胞区，细胞数量稍减少，番红O-固绿染色组织红染轻度减低，改良Mankin’s法评分为5.10±0.99，见图3和表3。
2.4.5 医用臭氧40 mg/L组 4层结构层次不清，胶原纤维层凹凸不平，纤维崩解，软骨细胞排列紊乱、数量严重减少，番红O-固绿染色组织红染重度减低，改良Mankin’s法评分为10.50±0.97，见图3和表3。
医用臭氧20，30，40 mg/L组及模型组改良Mankin’s评分均高于对照组，差异有显著性意义(P < 0.05)，医用臭氧20，30 mg/L组改良Mankin’s评分低于模型组，差异亦有显著性意义(P < 0.05)，医用臭氧40 mg/L与模型组相比，医用臭氧20 mg/L组与医用臭氧30 mg/L组相比，改良Mankin’s评分差异无显著性意义(P > 0.05)。

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引言

颞下颌关节骨关节炎是一种病因复杂、发病机制不明的口腔颌面部常见疾病，是颞下颌关节紊乱病的重症类型，其病理特征是进行性软骨降解、软骨下骨重塑以及滑膜组织的慢性炎症[1]，影像学表现为颞下颌关节的退行性改变，如骨质吸收、骨质破坏、髁突高度变低、骨赘形成等[2]。PEREIRA等[3]经尸检发现，16-39岁人群中颞下颌关节骨关节炎的发病率约为28%，而在55-78岁人群中发病率高达56%。患者常因关节区疼痛、运动障碍、弹响和杂音等就诊。
现阶段尚无法治愈颞下颌关节骨关节炎[4]，临床治疗以改善患者症状、阻止炎症继续进展、尽可能恢复关节的各种功能为主。颞下颌关节骨关节炎的治疗方法较多，但仍未出现理想的治疗手段。现阶段，临床以保守治疗为主，包括物理治疗和药物治疗。物理疗法的目的是通过电、磁、光、超声波等手段达到消炎镇痛、缓解痉挛、消除大脑皮质中的病理兴奋灶的作用，并增进受损关节组织的强度[5]。然而，物理疗法的原理多为热效应，对于颞下颌关节骨关节炎并不能取得令人满意的治疗效果，且对于关节软骨的修复作用目前尚缺乏具体的机制研究。
药物疗法的治疗目标在于减轻软骨退行性变、缓解疼痛、改善功能和促进受损软骨重塑[6]。目前临床上用于治疗骨关节炎的药物种类繁多，按给药途径可分为2种，即口服药物和关节腔内注射药物。口服的药物有解热镇痛药、非类固醇类抗炎药、抗抑郁药、氨基葡萄糖和软骨素等。长期应用口服药物，其副反应可能会给患者尤其是伴有其他慢性系统性疾病的老年患者带来更大的身体负担，而且多年的临床研究表明，许多口服药物对于骨关节炎的治疗作用微乎其微，有时候仅仅是充当心理安慰剂的作用[7]。关节腔内注射的药物主要有激素、透明质酸钠、非类固醇类抗炎药、阿片类镇痛药、几丁糖、臭氧、富血小板血浆等。大量的临床研究表明，关节腔内注射药物治疗颞下颌关节骨关节炎疗效确切，且易被患者接受，其中关节腔内注射医用臭氧在临床上具有费用低、创伤小、可重复治疗、并发症少等优点，近年来，已被广泛用于治疗髋、膝等骨关节炎[8-9]，且疗效确切。但现阶段，医用臭氧在颞下颌关节疾病中的应用相对较少，且基础研究甚少，限制了医用臭氧治疗颞下颌关节骨关节炎的临床应用。
该研究通过关节腔内一次性注射碘乙酸钠法构建颞下颌关节骨关节炎模型[10]，观察从低到高3种不同质量浓度医用臭氧对颞下颌关节骨关节炎大鼠关节软骨的影响，以期为临床应用医用臭氧治疗颞下颌关节骨关节炎提供帮助。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

材料方法

1.1 设计随机对照动物实验，采用单因素方差分析(one-way ANOVA)、K-W(Kruskal-Wallis)秩和检验进行组间比较。
1.2 时间及地点实验于2021年1-6月在新疆医科大学动物实验中心及新疆医科大学临床医学研究院完成。
1.3 材料
1.3.1 实验试剂及仪器碘乙酸钠(生工生物工程股份有限公司)；大鼠肿瘤坏死因子α ELISA试剂盒(武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司)；医用臭氧发生器(德国Hermann公司)；高速离心机(科大创新股份有限公司中佳分公司)；切片机、包埋机、显微系统(Leica，德国)；恒温箱(上海爱朗仪器有限公司)；防脱载玻片(南通海伦生物医学器材制造有限公司)。
1.3.2 实验动物及分组 42只雄性SD大鼠，8-10周龄，体质量260-320 g，由新疆医科大学动物实验中心提供。实验经过新疆医科大学第一附属医院动物伦理委员会批准，实验过程中严格遵循 2006 年科学技术部发布的《关于善待实验动物的指导性意见》。实验前所有大鼠均在相同条件下适应性喂养1周，自由饮食及活动。42只SD大鼠随机分为5组，其中对照组6只，模型组6只，医用臭氧20，30，40 mg/L组各10只。
1.4 实验方法
1.4.1 麻醉 0.3%戊巴比妥钠(10 mL/kg)腹腔注射。
1.4.2 关节腔注射操作步骤麻醉效果满意后，大鼠侧卧位，采用1 mL胰岛素注射器(29 G针头)，触摸颧弓后下方并垂直进针，直抵骨面，稍后退，回抽无血即可注射；反之，则需调整进针位置、方向或深度，见图1。

1.4.3 处置麻醉下模型组及医用臭氧20，30，40 mg/L组大鼠双侧颞下颌关节腔一次性注射碘乙酸钠溶液50 μL(1 mg碘乙酸钠溶于50 μL生理盐水中)建立颞下颌关节骨关节炎模型，对照组大鼠双侧颞下颌关节腔注射等量生理盐水。

模型建立3周后，医用臭氧各组大鼠分别注射20，30，40 mg/L医用臭氧0.1 mL，模型组及对照组注射等量生理盐水，频率为1次/周，连续注射3周为1个疗程。末次注射医用臭氧1周后，每组各选1只大鼠，在腹腔注射麻醉下行锥形束CT扫描。
1.4.4 取材锥形束CT扫描后，腹腔麻醉下抽取大鼠腹主动脉血5 mL，加入含有肝素钠抗凝剂的采血管中，3 000 r/min离心15 min后取上清液，-20 ℃保存备用；而后麻醉下颈椎脱臼法处死大鼠，完整剥离髁突组织，一侧放入-80 ℃冰箱中冻存，一侧放入40 g/L多聚甲醛中固定。
1.5 主要观察指标
1.5.1 锥形束CT扫描观察颞下颌关节的结构变化对锥形束CT扫描结果分析并进行三维重建，对比各组大鼠颞下颌关节的结构变化。
1.5.2 ELISA试剂盒检测髁突软骨及血浆中肿瘤坏死因子α水平取10 mg冻存髁突软骨及部分与之相连的软骨下骨组织，于液氮中加入匀浆介质研磨，4 ℃，10 000×g离心10 min，取上清液采用固相双抗体夹心ELISA法检测肿瘤坏死因子α水平，严格按照试剂盒说明书进行操作，酶标板内分别加入不同浓度(梯度稀释)的标准品及关节组织匀浆的上清液、血浆上清液，进行温育、洗涤等操作步骤，最后于酶标仪波长450 nm处读取标本吸光度值，在双对数坐标轴上拟合四参数逻辑函数的标准曲线，而后将样品的吸光度值代入标准曲线，计算样品肿瘤坏死因子α水平。
1.5.3 苏木精-伊红染色及番红O-固绿染色行组织形态学检查组织固定48 h后，EDTA脱钙液脱钙，直至1 mL注射器针尖能插透骨组织最厚处，而后脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、常规苏木精-伊红染色、番红O-固绿染色后，图像采集，参照改良Mankin’s评分表对关节组织的病损程度进行组织学评分，见表1。

1.6 统计学分析若满足正态性及方差齐性，采用SPSS 25.0统计软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA)，计量资料使用x±s表示；若不满足正态性及方差齐性，则采用K-W(Kruskal-Wallis)秩和检验，检验水准α=0.05，P < 0.05为差异有显著性意义，而后可进行两两比较。

讨论

臭氧是一种使用时间较早、用途极广的易溶于血液和组织液的蓝色气体，早在1856年就被用来对手术室及手术器械进行消毒，1892年已被用于治疗肺结核，第一次世界大战期间被用来治疗战伤，发挥抗炎杀菌的作用[11]；之后意大利医生BOCCI[12]发现医用臭氧具有抗炎、镇痛和促进局部组织再生等功能，可被用来治疗糖尿病、肢体缺血等疾病。近年来，关节腔内注射医用臭氧已成为治疗骨关节炎的一种新方法，它的治疗机制：其一，臭氧在常温下迅速分解为O2和具有氧化能力的氧原子，局部高浓度的活性氧可通过温和、短暂、可控的氧化应激反应来上调机体的抗氧化和免疫系统，加快组织的有氧代谢，达到消炎的作用[11]，即臭氧分解后带来的局部高浓度活性氧，可改善骨关节炎时关节腔内过低的氧分压，降低具有较强氧化功能的氧自由基的形成[13]，进而抑制氧自由基对软骨细胞的过氧化作用，增加软骨基质的合成。另外，关节腔内注射臭氧后，可诱导合成超氧化物歧化酶等抗氧化酶，清除过多氧自由基，保护软骨细胞，维持机体的氧化-抗氧化平衡[14]；其二，臭氧可通过抑制前列腺素、缓激肽等致痛物质的合成和释放，减轻疼痛，亦可作用于释放疼痛物质的神经末梢，促进脑啡肽等物质的合成，达到镇痛效果，从而增加患者的依从性[15]。
在颞下颌关节骨关节炎的进程中，细胞因子的作用不容忽视，它们可通过多种途径干扰滑膜组织的新陈代谢，在软骨的降解吸收中发挥作用，如：基质金属蛋白酶13、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α。有研究表明，在骨关节炎患者的关节液中，通常存在着这3种炎症因子的高表达[16]。而臭氧可抑制基质金属蛋白酶13、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α的表达，调控炎症因子在骨关节炎进程中所介导的信号通路，改善软骨损伤、促进软骨修复[17]。该实验研究结果显示，治疗结束后，医用臭氧20，30 mg/L组大鼠髁突软骨及血浆中肿瘤坏死因子α水平明显下降，与上述研究结果一致。
医用臭氧在临床上可通过单独使用或者联合其他方法、药物等用于治疗患者不同关节的疾病，例如王佳玮等[8-9，18-21]通过关节腔内注射医用臭氧治疗髋关节炎、膝关节炎、踝关节炎、肩周炎、腰椎间盘突出、股骨头坏死等；YAMANER等[22-23]使用医用臭氧治疗由颞下颌关节紊乱病引起的咀嚼肌疼痛、下颌运动受限，亦取得了良好的临床效果。邓力等[24]采取颞下颌关节腔内注射医用臭氧与关节腔内注射曲安奈德治疗颞下颌关节炎进行比较，发现两者疗效无明显区别，但臭氧组并发症更少、安全性更高。杨萍萍等[25]通过关节腔内注射医用臭氧与注射透明质酸钠治疗颞下颌关节不可复性盘前移位进行比较，发现两者效果相似，但医用臭氧价格更低廉。
医用臭氧在不同动物的髋关节、膝关节、踝关节的骨关节炎和风湿性关节炎的基础研究中也取得了比较理想的治疗效果[26-28]。但吴志强等[29]在25 mg/L医用臭氧1 mL椎旁注射治疗SD大鼠盘源性疼痛的研究中，发现医用臭氧在缓解疼痛的同时，却加重了腰椎间盘的退变。该研究发现关节腔内注射20，30 mg/L臭氧时，对关节组织起治疗作用，大鼠关节软骨及血浆中肿瘤坏死因子α水平及Mankin’s评分均较模型组大鼠明显降低，而质量浓度上升到40 mg/L时，会损害关节组织。由此可见，医用臭氧虽然可以抑制颞下颌关节骨关节炎大鼠肿瘤坏死因子α生成，纠正体内氧化-抗氧化反应失衡，减轻炎症因子对关节的损伤和局部炎症反应，不失为治疗颞下颌关节骨关节炎的一种有效方法，但是当浓度达到一定水平时，反而会加重组织的病变程度。
目前，关于医用臭氧关节腔内注射治疗骨关节炎的适宜浓度、最佳剂量、间隔周期等尚不统一，它的长期治疗效果如何相关报道较少，而国外针对膝关节炎的临床研究发现，关节腔内注射医用臭氧的短期效果明显优于关节腔内注射透明质酸、富血小板血浆、富含生长因子血浆的患者，但随访到6个月后，发现医用臭氧组患者症状改善效果不如其他3组[30]；但另一个随访6个月的临床试验则证明，关节腔内注射医用臭氧与注射透明质酸效果一致[31]，与上述结果不同。所以，医用臭氧对于颞下颌关节疾病的长期治疗效果如何，有必要对医用臭氧治疗颞下颌关节骨关节炎进行更详细、全面的研究，以便其能有效、规范、安全地治疗颞下颌关节骨关节炎。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

关节腔内注射医用臭氧治疗颞下颌关节骨关节炎模型大鼠的合适剂量

An appropriate dose of intra-articular medical ozone injection in a rat model of temporomandibular joint osteoarthritis

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