保留残端与不保留残端重建前交叉韧带腱骨愈合情况比较

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2016.51.005

中国组织工程研究 ›› 2016, Vol. 20 ›› Issue (51): 7634-7641.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.51.005

• 肌肉肌腱韧带组织构建 tissue construction of the muscle, tendon and ligament • 上一篇下一篇

保留残端与不保留残端重建前交叉韧带腱骨愈合情况比较

张磊1，2，岳娜3，张太良4，谢崇新2，白靖平1

新疆医科大学附属肿瘤医院，1骨与软组织科，3病理科，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830011；2新疆武警兵团指挥部医院骨科，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830063；4新疆医科大学第一附属医院骨科中心，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830054

出版日期:2016-12-09 发布日期:2016-12-09
通讯作者: 白靖平，博士，教授，博士生导师，新疆医科大学附属肿瘤医院骨与软组织科，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830011
作者简介:张磊，男，1979年生，新疆维吾尔自治区阿勒泰市人，汉族，新疆医科大学在读博士，主要从事骨与关节损伤研究，现工作单位为新疆武警兵团指挥部医院骨科。
基金资助:
新疆生产建设兵团自然科学基金资助项目(2015AD004)

Tendon-bone healing after acute anterior cruciate ligament reconstruction with versus without remnant preservation

Zhang Lei1, 2, Yue Na3, Zhang Tai-liang4, Xie Chong-xin2, Bai Jing-ping1

1Department of Bone and Soft Tissue, 3Department of Pathology, the Affiliated Tumor Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China; 2Department of Orthopaedics, Hospital Affiliated to Xinjiang Production and Construction Corps Headquarters of Chinese People’s Armed Police Forces, Urumqi 830063, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China; 4Department of Orthopaedic Surgery, the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China

Online:2016-12-09 Published:2016-12-09
Contact: Bai Jing-ping, M.D., Professor, Doctoral supervisor, Department of Bone and Soft Tissue, the Affiliated Tumor Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China
About author:Zhang Lei, Studying for doctorate, Department of Bone and Soft Tissue, the Affiliated Tumor Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China; Department of Orthopaedics, Hospital Affiliated to Xinjiang Production and Construction Corps Headquarters of Chinese People’s Armed Police Forces, Urumqi 830063, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China
Supported by:
the Natural Science Foundation of the Xinjiang Production and Construction Corps, No. 2015AD004

摘要/Abstract

摘要：

文章快速阅读：

文题释义：
保留残端重建前交叉韧带：前交叉韧带断裂后胫骨残端多能存在较长时间，以往为了手术操作方便和视野清晰，常将其完全清除掉。然而现在发现前交叉韧带富含血管、神经可能会对移植物的重建有所帮助，所以保留残端重建前交叉韧带成为了一些学者研究的热点。目前不少学者认为保留残端重建前交叉韧带的优势是：①促进移植腱血管化，加快移植腱再韧带化；②促进膝关节本体感觉恢复，提高膝关节功能；③促进移植物腱骨愈合。
腱骨愈合：移植物在体内重塑包括2个部分：一是关节腔内段部分，二是骨隧道内段部分。移植腱与骨的愈合情况是重建手术成功与否的重要标志。有学者对交叉韧带翻修手术的原因做了统计，原因主要是再次创伤、手术技术欠佳和生物混杂因素，其中生物混杂因素所占比例最高，将近50%，而腱骨愈合不良又占生物混杂因素的30%，所以备受国内外学者关注。

摘要
背景：保留残端重建能够促进腱骨愈合，但目前的研究仅停留组织学水平。从分子生物层面报道保残重建对促进腱骨愈合作用机制的研究国内外尚未见报道。
目的：探讨保留残端重建前交叉韧带对腱骨愈合的机制。
方法：72只新西兰兔随机分为不保残组、牵张保残组和残端鞘内重建组，各24只，分别采取不保残、牵张保残和残端鞘内重建方法进行急性期双膝前交叉韧带重建。
结果与结论：①苏木精-伊红染色结果显示，牵张保残组和残端鞘内重建组兔腱骨愈合优于不保残组，残端鞘内重建组优于牵张保残组；②实时荧光定量PCR结果表明，牵张保残组和残端鞘内重建组兔移植腱周边骨组织中骨保护素 mRNA表达水平及骨保护素/RANKL比值大于不保残组，且残端鞘内重建组兔移植腱周边骨组织中上述指标大于牵张保残组，而RANKL mRNA表达水平小于不保残组；③结果提示2种保留残端重建前交叉韧带方法都能够促进腱骨愈合，其中以残端鞘内重建最明显，作用机制可能与早期上调骨道中骨保护素mRNA，下调RANKL mRNA有关。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程
ORCID: 0000-0003-2299-6243(白靖平)

关键词: 组织构建, 组织工程, 重建前交叉韧带, 保留残端；腱骨愈合, 骨保护素, 细胞核因子κB 受体活化因子配体

Abstract:

BACKGROUND: Reconstruction with remnant preservation can enhance tendon-bone healing. However, the study limits on the histological level, and there is a lack of research based on the modular biological level.
OBJECTIVE: To investigate whether anterior cruciate ligament reconstruction with remnant preservation can enhance tendon-bone healing.
METHODS: Seventy-two New Zealand rabbits were randomly allocated to three groups (n=24 per group), followed by cruciate ligament reconstruction without remnant (group A), with remnant preservation (femoral tensioning and augmented suture) (group B) and with remnant preservation (graft passing remnant anterior cruciate ligament sheath) (group C), respectively.
RESULTS AND CONCLUSION: Hematoxylin-eosin staining showed that the tendon-bone healing in the groups B and C surpassed that in the group A, and group B was better than group C. Real-time PCR revealed that the expression level of osteoprotegrin mRNA and the osteoprotegrin/receptor activator of nuclear factor-κB ligand (RANKL) ratio were greater in the groups B and C than in the group A, and highest in the group C, while the expression levels of RANKL mRNA in the groups B and C were lower than that in the group A. In conclusion, these two kinds of anterior cruciate ligament reconstruction methods with remnant preservation can enhance tendon-bone healing, which have obtained most obvious achievements in the anterior cruciate ligament reconstruction in the graft passing anterior cruciate ligament remnant sheath that may be related to the up-regulation of osteoprotegrin mRNA and down-regulation of RANKL mRNA.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

Key words: Tendons, Anterior Cruciate Ligament, Tissue Engineering

中图分类号:

R318

张磊，岳娜，张太良，谢崇新，白靖平. 保留残端与不保留残端重建前交叉韧带腱骨愈合情况比较[J]. 中国组织工程研究, 2016, 20(51): 7634-7641.

Zhang Lei, Yue Na, Zhang Tai-liang, Xie Chong-xin, Bai Jing-ping. Tendon-bone healing after acute anterior cruciate ligament reconstruction with versus without remnant preservation[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2016, 20(51): 7634-7641.

图/表（结果） 1

2.1 实验动物数量分析共纳入72只新西兰兔，不保残组24只中有1只因术后伤口感染而淘汰；牵张保残组24只中有2只因腹泻而死亡；残端鞘内重建组24只中1只腹泻、另1只无明显诱因死亡。及时补充各组至24只。饲养过程无脱失，最后72只新西兰大白兔进入结果分析。

2.2 组织学观察结果重建后3周，残端鞘内保残组腱骨界面连接紧密，以肉芽组织为主，可见少量血管组织；牵张保残重建组腱骨界面大部分连接紧密；不保残重建组腱骨界面连接疏松，腱骨分界明显。重建后6 周，残端鞘内重建组腱骨界面连接紧密，有Sharpey’s 纤维生成，血管丰富；牵张保残组腱骨界面连接也较紧密，可见Sharpey’s 纤维，但纤维数量少于残端鞘内保残组；不保残组腱骨分界已模糊，界面间仍以肉芽组织为主，胶原纤维少而且排列紊乱。重建后第12周，残端鞘内

保残组腱骨界面愈合良好，连接紧密，Sharpey’s 纤维是连接的主要方式，可见软骨细胞生成；牵张保残组腱骨界面连接紧密，同样以Sharpey’s 纤维连接为主，并可见软骨细胞；不保残组腱骨界面结合紧密，Sharpey’s 纤维较6周时增多，但排列不规则，软骨细胞少见(图2) 。

2.3 骨保护素mRNA的表达重建后3周时，牵张保残组与残端鞘内重建组兔移植腱周边骨组织中骨保护素mRNA的表达水平大于不保残组(P < 0.05)，残端鞘内重建组兔移植腱周边骨组织中骨保护素mRNA的表达水平大于牵张保残组(P < 0.05)；6周时，牵张保残组与残端鞘内重建组兔移植腱周边骨组织中骨保护素mRNA的表达水平大于不保残组(P < 0.05)；12周时，牵张保残组与残端鞘内重建组兔移植腱周边骨组织中骨保护素mRNA的表达水平小于不保残组(P < 0.05；图3)。

2.4 RANKL mRNA的表达重建后3周，牵张保残组与残端鞘内重建组兔移植腱周边骨组织中RANKL mRNA的表达水平小于不保残组(P < 0.05)，残端鞘内重建组与牵张保残组兔移植腱周边骨组织中RANKL mRNA的表达水平差异无显著性意义(P>0.05)；6周时牵张保残组与残端鞘内重建组兔移植腱周边骨组织中RANKL mRNA的表达水平小于不保残组(P < 0.05)，残端鞘内重建组与牵张保残组兔移植腱周边骨组织中RANKL mRNA的表达水平差异无显著性意义(P > 0.05)；12周时3组兔移植腱周边骨组织中RANKL mRNA的表达水平差异无显著性意义(P > 0.05；图4)。

2.5 骨保护素/RANKL比值重建后3周时，残端鞘内重建组与牵张保残组兔移植腱周边骨组织中骨保护素/RANKL比值大于不保残组(P < 0.05)，残端鞘内重建组兔移植腱周边骨组织中骨保护素/RANKL比值大于牵张保残组(P < 0.05)；6周时，牵张保残组与残端鞘内重建组兔移植腱周边骨组织中骨保护素/RANKL比值大于不保残组(P < 0.05)，残端鞘内重建组与牵张保残组兔移植腱周边骨组织中骨保护素/RANKL比值差异无显著性意义(P < 0.05)；12周时，牵张保残组与残端鞘内重建组兔移植腱周边骨组织中骨保护素/RANKL比值小于不保残组(P < 0.05)，残端鞘内重建组与牵张保残组兔移植腱周边骨组织中骨保护素/RANKL比值差异无显著性意义(P > 0.05；图5)。

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引言

材料方法

1.1 设计随机对照动物实验。

1.2 时间及地点实验于2015年12月至2016年3月在新疆医科大学第一附属医院动物实验中心完成。

1.3 材料雄性新西兰兔72只(封闭群)，兔龄6-8个月，体质量3.0-3.5 kg，由新疆医科大学动物实验中心提供(动物许可证：XJYKDX201501204)。实验经新疆医科大学第一附属医院动物实验中心批准，所有实验兔均在重建前适应性饲养1周。

1.4 方法

1.4.1 动物分组采用随机数字法将新西兰兔分为3组，不保残重建组、残端鞘内重建组和牵张保残重建组，各24只。

1.4.2 急性期双膝前交叉韧带重建

残端鞘内重建：动物称质量后，舒泰(法国维克) 7 mg/kg+速眠新Ⅱ(长春军事医学科学院军事兽医研究所)0.15 mL/kg肌注麻醉，切取同侧跟腱中间1/3为移植腱，长约4 cm，直径2 mm。取髌旁内侧入路，将髌骨向外脱位，在股骨附着处切断前交叉韧带，保留滑膜组织。直径2 mm克氏针(上海浦东金环医疗器械有限公司)自股骨原前交叉韧带止点印迹处钻取股骨隧道。分离前交叉韧带胫骨残端成圆筒状结构(图1A)；细导针(英国施乐辉公司)在残端印迹中心通过，2.0 mm空心钻(英国施乐辉公司)沿导针反向扩孔，移植腱经胫骨隧道从残端中心穿过，使残端像“袖套”包绕移植物(图1B)。固定移植腱胫骨端和股骨端。生理盐水冲洗，逐层缝合^[12]。

牵张保残重建：麻醉、手术入路、移植腱取材、股骨隧道制法同上。胫骨端隧道制法为：在前交叉韧带残端缝1针作为牵引线，胫骨隧道内口定位在前交叉韧带足迹中心偏后1 mm处^[20]，钻取胫骨隧道，移植腱由胫骨隧道外口向关节内穿入，先固定移植腱胫骨端，伸直位将前交叉韧带残端与移植腱缝合，再固定股骨端，残端引线从股骨骨道中穿过，将残端尽量向股骨隧道牵拉，给予残端一定张力(图1C)。

不保残重建：显露前交叉韧带后将其完全清理。股骨隧道定位、钻取与和移植腱固定同保残重建，胫骨隧道定位在原前交叉韧带残迹中心(图1D)。

重建后各组动物双下肢不制动，切口不包扎，肌注青霉素4×10⁵ U/kg，连续5 d，每天伤口消毒，10 d后拆线。

1.4.3 取材重建后 3，6，12 周，各组各取8只兔处死，取左侧胫骨关节软骨下方5 mm处移植腱与骨组织，100 g/L多聚甲醛固定，制成5 μm的切片，行苏木精-伊红染色，观察移植腱-骨愈合情况；右膝刮取胫骨关节软骨下方5 mm处骨隧道内移植腱周边骨组织3 mm³，液氮速冻，-80 ℃冰箱冷藏，行实时荧光定量PCR检测。

1.4.4 苏木精-伊红染色石蜡切片脱蜡，梯度乙醇水化，苏木精染色2 min，自来水冲洗直至返蓝，盐酸乙醇分化3-5 s，伊红染色3 min，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

1.4.5 实时荧光定量PCR 充分研磨骨组织，按Trizol法提取组织总RNA，反转录-聚合酶链反应按说明书操作，具体反应体系为总RNA 50 ng-5 μg、引物(0.1 g/L) 1 μL、2×TS反应混合物10 μL、TransScript^@RT/RI酶混合物1 μL、gDNA Remover 1 μL，加去RNase水至20 μL。引物由上海生工科技生物有限公司合成。

引物序列：
引物	序列(5’-3’)	产物大小(bp)
β-actin	F: TCA CCA TGG ATG ATG ATA TCG C R: CGT GCT CGA TGG GGT ACT TCA	225
骨保护素	F: CAA ATG TCC TCC TGG CAC CT R: TTC ACT GGT GTG CCA AGT GT	109
RANKL	F: AAA ATT CAG GCG AGC TTC CG R: TTC TTC TCC ACC CCA TCA GC	149

PCR 反应条件：94 ℃×5 min，56 ℃×40 s，72 ℃ ×30 s，40个循环，结束后，取反应液5 μL 进行琼脂糖凝胶电泳，确认PCR 反应产物。以β-actin 为对照基因，采用2^-^??Ct法计算各目的基因 mRNA 相对表达量，结果与不保残重建组的比值表示。

1.5 主要观察指标 ①移植腱-骨愈合组织学形态；②骨保护素和RANKL mRNA表达水平以及两者比值。

1.6 统计学分析采用SPSS 20.0统计软件进行分析，数据以表示，组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用Bonferroni检验，P < 0. 05为差异有显著性意义。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

讨论

使用兔制作前交叉韧带重建与损伤的模型，在研究中被大家普遍使用^[21-24]，原因是兔性格温和，易于大量饲养，且前交叉韧带解剖结构与人类十分相像。刘平等^[25]对兔膝关节详细解剖后发现兔前交叉韧带的股骨端止点位于股骨外髁内侧面后部，呈椭圆形，胫骨止点位于内侧髁间棘外前方，呈扇形分布，胫骨止点面积较股骨端大。兔前交叉韧带直径在胫骨端最大，从胫骨端向股骨端逐渐变细，纤维也可分为前内束和后外束，两束间界限不明确，整个韧带被滑膜充分包绕。可以看出兔前交叉韧带无论是解剖结构、止点位置还是形态都与人类十分相近。姜文跃等^[26]认为前交叉韧带生物力学特点与人类及恒河猴基本一致，可以用来模拟人体力学实验。

作者进行了长时间的预实验，力求手术快速、微创，避免因长时间暴露出现切口感染，提高术后存活率，发现牵张保残模型较易复制，而复制残端鞘内重建模型较为困难，原因是兔前交叉韧带胫骨端横截面积较小，如果从胫骨止点向关节外钻取骨隧道，克氏针极易同交叉韧带缠绕，致使前交叉韧带残端破坏；从关节外向关节内钻取骨隧道，又无法保证出口位于残端中心。实验采用显微手术器械先将胫骨前交叉韧带残端分离成“袖套”状，细导针从胫骨残端中心通过，穿透胫骨外皮质，2.0 mm空心钻沿导针方向从胫骨外皮质逆行钻取骨道，在突破关节软骨后立即停止钻取，防止空心钻高速转动损伤残端，改由克氏针手动制作骨隧道。然后移植腱从胫骨关节腔外向关节腔内牵引，从残端中心通过，通过上述建模方法，成功避免了兔前交叉韧带残端直径较小，难以从中心通过的缺点，为后续实验进行提供了较高质量的模型。Sun等^[14]在2013年使用兔制作了牵张保残和不保残动物实验模型，发现保残重建组在腱骨愈合方面优于不保残组。但此实验只对腱骨愈合的组织学情况进行了比较，并未深入至分子生物水平；同时也未对残端鞘内重建方法进行造模。为了进一步比较保残重建前交叉韧带与不保残重建之间的差异，作者对临床中常用的2种保残方法进行对比，分析两者对腱骨愈合组织及周围骨组织中同时骨保护素及RANKL mRNA表达水平的影响，可以说是对保残重建前交叉韧带理论的进一步补充。

移植肌腱与骨道的修复重建过程缓慢而且复杂。韧带止点分可分为为间接止点和直接止点两种。正常前交叉韧带止点是韧带与骨软骨直接结合，包括4层结构，即致密结缔组织、纤维软骨、钙化纤维软骨和骨组织。间接止点的特征是胶原纤维(Sharpey纤维)在移植肌腱与骨隧道之间连接。前交叉韧带重建腱-骨愈合机制仍不完全清楚，可能存在间接止点和直接止点两种类型。Tomita等^[27]的研究发现在重建后12周时骨隧道中可见Sharpey纤维，推测重建前交叉韧带腱骨愈合为间接愈合，而Weiler等^[28]则认为腱骨愈合是直接连接。也有学者推测腱-骨愈合是由间接止点向直接止点逐渐转化的过程，最终形成直接连接^[29]。作者在腱骨愈合过程中既能看到Sharpey纤维，又能观察到纤维软骨，可能是间接止点向直接止点逐渐转化的过程。

骨保护素是分泌型糖蛋白的一种，为肿瘤坏死因子受体超家族成员。骨保护素通过与RANK竞争性结合RANKL从而实现抑制破骨细胞分化，降低破骨细胞活性，诱导破骨细胞凋亡、增加骨密度的功能^[30-31]。如果将骨保护素基因敲除，小鼠松质骨骨小梁出现明显的破坏吸收征象^[32-33]。既往研究显示局部使用骨保护素能促进移植腱的腱骨愈合，并且与骨保护素浓度呈正相关^[34-35]。实验中保留残端重建前交叉韧带后3和6周时骨保护素含量高于不保残重建组，原因可能与下列因素有关：①骨组织中骨保护素由成骨细胞和骨髓基质细胞所分泌。先前的文献显示，关节液浸泡会使骨道内成骨细胞数量减少^[36]。保留残端重建前交叉韧带能够较好封闭胫骨骨道内口，减少滑液侵袭，移植腱周围成骨细胞数量可能多于不保残组，骨保护素的生成来源较多；②骨保护素可被血管内皮生长因子、血小板衍生生长因子等多种血管生长因子调节^[37]。Xie等^[38]的研究表明保留残端重建前交叉韧带后移植腱血管内皮生长因子表达高于不保残组，作者推测在保残组中骨保护素生长调节因子高于不保残组，所以导致骨保护素mRNA表达较不保残重建明显增加。

RANKL是肿瘤坏死因子配体家族一员^[39]，其能够调控T细胞和树突状细胞的生长和功能，以及破骨细胞的分化成熟。RANKL与RANK结合后，引起RANK C端结构域发生变化，与相关因子结合，引起细胞内多种酶的层联放大反应，促使破骨细胞的活化^[40]。既往实验显示RANKL过量表达后，出现破骨细胞活性过高，骨代谢出现负平衡^[41]，即骨吸收。在重建后3和6周，残端鞘内重建组和牵张保残重建组RANKL含量低于不保残组，其原因可能是残端组织覆盖在骨道内口处，减少了关节液中炎性因子对骨道的刺激。交叉韧带重建后，尤其在重建后早期，关节液中白细胞介素6、白细胞介素1、肿瘤坏死因子β含量急剧增加。Bishop等^[42]报道白细胞介素6、白细胞介素1、肿瘤坏死因子β等细胞因子都可以通过骨保护素/RANKL/RANK通路调节骨代谢。白细胞介素6不但能够直接刺激破骨细胞分化^[43]，增加RANKL的分泌^[44]，还能刺激Th17细胞分泌Foxp3，通过Foxp3诱导破骨细胞增殖，进一步提高RANKL^[45]。白细胞介素1可以通过刺激破骨细胞表达肿瘤坏死因子联合受体6进而促进RANK/RANKL信号级联^[46]，肿瘤坏死因子也能直接刺激成骨细胞分泌RANKL ^[47]。

骨保护素/RANKL/RANK通路是骨代谢中至关重要的一条信号通路，是成骨细胞与破骨细胞之间相互作用的信号通道^[48]。用骨保护素/RANKL的比值作为探针来评估骨异常重建过程中骨微环境的变化，已被广泛用于各种疾病的检测当中。当骨保护素/RANKL的比例上升时，成骨细胞活性增强，破骨细胞活性受到抑制，骨合成增加，分解减少，骨代谢趋向于正平衡^[49-50]；反之，破骨细胞活性增强，成骨受抑制，骨吸收大于骨形成，骨代谢趋向负平衡^[51-52]。此次实验中，保留残端组骨保护素/RANKL比例在重建后早期(3和6周)高于不保残组，说明在重建早期保留残端重建前交叉韧带能促进腱骨愈合。

同时在实验中还发现：①残端鞘内重建组在3周时骨保护素、骨保护素/RANKL比值高于牵张保残重建组，RANKL低于牵张保残组，原因可能是残端鞘内重建组移植腱从残端中心穿过，残端对骨道的封闭效果好于牵张保残，所以关节液对骨道的影响更小；②12周时保残组骨保护素表达、骨保护素/RANKL比值小于不保残组。推测形成这一现象是保残组与不保残组腱骨愈合处在不同阶段所造成的。Wang等^[53]发现骨折后4周骨保护素/RANKL明显增高，原因是骨折愈合早起，成骨为主要趋势，成骨细胞活性增加，Giganti等^[54]认为在骨折修复阶段骨保护素/RANKL呈增高趋势，在骨折塑形期骨保护素/RANKL比值下降。在12周时保留残端重建腱骨愈合已基本完成，而不保残组仍处在重建阶段，所以不保残组骨保护素/RANKL比值高于保留残端重建组。

综上所述，与不保留残端重建前交叉韧带相比，保留残端重建前交叉韧带能够促进移植腱腱骨愈合，其作用机制可能是通过上调骨道中骨保护素 mRNA，下调RANKL mRNA来实现的，而这一作用在残端鞘内保残中更加明显。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

保留残端与不保留残端重建前交叉韧带腱骨愈合情况比较

Tendon-bone healing after acute anterior cruciate ligament reconstruction with versus without remnant preservation

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