中国组织工程研究 ›› 2010, Vol. 14 ›› Issue (10): 1764-1768.doi: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.10.011
• 干细胞培养与分化 stem cell culture and differentiation • 上一篇 下一篇
王东旭,姜海行,苏思标,覃山羽,梁梓宇
Wang Dong-xu, Jiang Hai-xing, Su Si-biao, Qin Shan-yu, Liang Zi-yu
摘要:
背景:在肝纤维化发生发展过程中,肝星状细胞起着关键作用。研究证实骨髓间充质干细胞移植可作为治疗肝纤维化的方法,但其逆转肝纤维化的机制不明。
目的:探讨体外共培养条件下,大鼠骨髓间充质干细胞对肝星状细胞增殖的调控机制。
方法:实验组在半透膜上接种大鼠骨髓间充质干细胞,在6孔塑料培养板上接种肝星状细胞,建立上下双层细胞共培养体系;对照组将大鼠骨髓间充质干细胞更换为成纤维细胞;空白组仅行肝星状细胞单独培养。WST-8法检测肝星状细胞生长抑制率,流式细胞仪分析细胞周期,RT-PCR检测肝星状细胞CyclinD1和P27 mRNA的表达,Western blot检测肝星状细胞CyclinD1和P27蛋白的表达。
结果与结论:与空白组、对照组比较,实验组共培养24,48,72 h肝星状细胞生长抑制率均显著升高(P < 0.01);共培养72 h G0/G1期细胞显著增加(P < 0.01),S期细胞显著减少(P < 0.01),可阻滞肝星状细胞由G0/G1期向S期转换。共培养24 h,实验组CyclinD1 mRNA及蛋白表达开始下调,至72 h时表达量显著低于对照组、空白组(P < 0.01);共培养全过程中各组p27 mRNA的表达无明显差异(P > 0.05),共培养24 h时实验组p27蛋白表达较对照组、空白组均显著上调(P < 0.01)。结果证实大鼠骨髓间充质干细胞能够抑制肝星状细胞的增殖,其机制可能是通过下调CyclinD1表达、上调P27蛋白表达,使细胞周期停滞于G0/G1期实现的。
中图分类号: