2.1   枸杞多糖对2型糖尿病大鼠肠道菌群多样性和丰度的影响   与空白对照组相比，模型对照组Chao1、Observed_species、Shannon显著降低(P < 0.01)。与模型对照组相比，枸杞多糖组Chao1、Observed_species、Shannon显著升高(P < 0.01)。根据主成分分析显示，空白对照组与模型对照组的菌群组成结构存在显著差异，模型对照组与枸杞多糖组的菌群组成结构存在显著差异，见图1。
门：与空白对照组相比，模型对照组厚壁菌门、候选门辐射群和脱硫杆菌门显著降低(P < 0.01)，变形菌门、拟杆菌门和放线菌门显著升高(P < 0.01)。与模型对照组相比，枸杞多糖组厚壁菌门、候选门辐射群和脱硫杆菌门显著升高(P < 0.01)，变形菌门、拟杆菌门和放线菌门显著降低(P < 0.01)，见图2-4。
属：与空白对照组相比，模型对照组Firmicutes_unclassified、Lachnospiraceae_NK4A136_group、Clostridia_UCG-014_unclassified、Monoglobus、Lachnospiraceae_unclassified、Ruminococcus、Eubacterium]_coprostanoligenes_group_unclassified、Clostridiales_unclassified、Phascolarctobacterium、Ruminococcaceae_unclassified、Intestinimonas、Colidextribacter、Desulfovibrionaceae 



unclassified和Desulfovibrio显著降低(P < 0.01)，Kineothrix、Escherichia-Shigella、Klebsiella、Muribaculaceae_unclassified和Enterorhabdus显著升高(P < 0.01)。与模型对照组相比，枸杞多糖组Firmicutes_unclassified、Lachnospiraceae_NK4A136_group、Clostridia_UCG-014_unclassified、Monoglobus、Lachnospiraceae_unclassified、Ruminococcus、Eubacterium]_coprostanoligenes_group_unclassified、Clostridiales_unclassified、Phascolarctobacterium、Ruminococcaceae_unclassified、Intestinimonas、Colidextribacter、Desulfovibrionaceae unclassified和Desulfovibrio显著升高(P < 0.01)，Kineothrix、Escherichia-Shigella、Klebsiella、Muribaculaceae_unclassified和Enterorhabdus显著降低(P < 0.01)，见图2-4。
2.2   枸杞多糖对2型糖尿病大鼠短链脂肪酸、糖脂代谢、胰岛素抵抗以及炎症的影响   与空白对照组相比，模型对照组乙酸、异丁酸、异戊酸、己酸以及短链脂肪酸总量均显著降低(P < 0.05或P < 0.01)；与模型对照组相比，枸杞多糖组丙酸、异丁酸、丁酸、戊酸、己酸以及短链脂肪酸总量均显著升高(P < 0.05或P < 0.01)，见表2。
造模后干预前，与空白对照组相比，模型对照组体质量显




著升高；与模型对照组相比，枸杞多糖组体质量未见显著差异(P > 0.05)；干预12周后，与空白对照组相比，模型对照组体质量显著降低，与模型对照组相比，枸杞多糖组体质量显著升高( P < 0.01)，见表2；空白对照组与枸杞多糖组的体质量呈上升趋势，模型对照组体质量呈下降趋势(P < 0.01)，见图5A，表2。造模后干预前，与空白对照组相比，模型对照组血糖显著升高；与模型对照组相比，枸杞多糖组血糖未见显著差异(P > 0.05)；干预12周后，与空白对照组相比，模型对照组血糖显著升高；与模型对照组相比，枸杞多糖组血糖显著降低(P < 0.01)，见表2；空白对照组与模型对照组的血糖呈上升趋势，枸杞多糖组的血糖呈下降趋势(P < 0.01)，见图5B，表2。与空白对照组相比，模型对照组三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平显著升高(P < 0.01)，高密度脂蛋白胆固醇和胰高血糖素肽1水平显著降低(P < 0.01)；与模型对照组相比，枸杞多糖组高密度脂蛋白胆固醇和胰高血糖素肽1水平显著升高(P < 0.05或P < 0.01)，三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平显著降低(P < 0.05或P < 0.01)，见表2。
与空白对照组相比，模型对照组三酰甘油/高密度脂蛋白胆固醇水平显著升高(P < 0.01)，胰岛素水平显著降低(P < 0.01)；与模型对照组相比，枸杞多糖组胰岛素水平显著升高(P < 0.01)，三酰甘油/高密度脂蛋白胆固醇水平显著降低(P < 0.01)，见表2。
与空白对照组相比，模型对照组白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平显著升高(P < 0.01)；与模型对照组相比，枸杞多糖组白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平显著降低(P < 0.01)，见表2。



2.3   枸杞多糖对2型糖尿病大鼠肠道菌群与短链脂肪酸、糖脂代谢、胰岛素抵抗以及炎症指标相关性的影响   
门：厚壁菌门与乙酸和丁酸呈显著正相关(P < 0.05)；变形菌门与乙酸和丁酸呈显著负相关(P < 0.05)；拟杆菌门与乙酸和丁酸呈显著负相关(P < 0.05)；放线菌门与异丁酸呈显著负相关(P < 0.05)；脱硫杆菌门与异丁酸呈显著负相关(P < 0.05)，见图2D，表3。
属：Lachnospiraceae_NK4A136_group与异丁酸呈显著正相关(P < 0.05)；Clostridia_UCG-014_unclassified与乙酸和丁酸呈显著正相关(P < 0.05)；Monoglobus与异丁酸呈显著正相关(P < 0.05)；Phascolarctobacterium与己酸呈显著正相关(P < 0.05)；
Intestinimonas与异戊酸呈显著正相关(P < 0.05)；Muribaculaceae_unclassified与乙酸和丁酸呈显著正相关(P < 0.05)；Enterorhabdus与己酸呈显著负相关(P < 0.05)；Candidatus_Saccharimonas与乙酸和丁酸呈显著正相关(P < 0.05)；Desulfovibrionaceae unclassified与异丁酸呈显著正相关(P < 0.05)；Desulfovibrio与己酸呈显著正
















著正相关(P < 0.05)；Kineothrix与低密度脂蛋白胆固醇呈显著正相关(P < 0.05)；Colidextribacter与低密度脂蛋白胆固醇呈显著负相关(P < 0.05)；Muribaculaceae_unclassified与三酰甘油呈显著正相关(P < 0.05)，与胰高血糖素肽1呈显著负相关(P < 0.05)；Candidatus_Saccharimonas与三酰甘油呈显著负相关(P < 0.05)，与胰高血糖素肽1呈显著正相关(P < 0.05)；Desulfovibrionaceae unclassified与高密度脂蛋白胆固醇呈显著正相关(P < 0.05)，见图2C，表4。
门：放线菌门与三酰甘油/高密度脂蛋白胆固醇呈显著正相关(P < 0.05)；脱硫杆菌门与三酰甘油/高密度脂蛋白胆固醇呈显著负相关(P < 0.05)，见图2D，表4。
属：Lachnospiraceae_NK4A136_group与三酰甘油/高密度脂蛋白胆固醇呈显著负相关(P < 0.05)；Monoglobus与三酰甘油/高密度脂蛋白胆固醇呈显著负相关(P < 0.05)；Desulfovibrionaceae unclassified与三酰甘油/高密度脂蛋白胆固醇呈显著负相关(P < 0.05)，见图2C，表4。
属：Firmicutes_unclassified与肿瘤坏死因子α呈显著负相关(P < 0.05)；Monoglobus与白细胞介素6呈显著负相关(P < 0.05)；Intestinimonas与白细胞介素6呈显著负相关(P < 0.05)；Kineothrix与肿瘤坏死因子α呈显著正相关(P < 0.05)；Colidextribacter
与肿瘤坏死因子α呈显著负相关(P < 0.05)，见图2C，表4。

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肠道菌群是控制人体健康的重要因素，保持人体与肠道菌群的共生关系至关重要，许多慢性疾病与肠道微生态紊乱有关[1]。2型糖尿病是全球常见的代谢性疾病之一。迄今为止，2型糖尿病仍不可治愈，干预措施主要集中于血糖控制以及相关并发症的防治。肠道菌群在代谢性疾病尤其是2型糖尿病的发生发展中发挥着重要作用[2]。近年来，关于枸杞多糖的健康益处报道越来越多，如抗氧化、降脂降糖、减轻炎症、对抗肿瘤、保护神经等[3]。最近许多研究表明，枸杞多糖可以通过多种方式改善2型糖尿病，但是从肠道菌群角度，枸杞多糖缓解糖尿病的潜在因素尚未完全阐明。由此立足于肠道菌群这一前沿视角，探究枸杞多糖在2型糖尿病治疗中的作用，有望解锁糖尿病防治新策略。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

1.1    设计   随机对照动物实验。
1.2   时间及地点   实验于2022年9月至2023年1月在黑龙江中医药大学方剂学实验室完成。肠道菌群测序以及短链脂肪酸检测由杭州联川生物技术股份有限公司完成。
1.3   材料
1.3.1   实验动物   SPF级8周龄雄性SD大鼠18只，体质量(200±20) g，购自黑龙江中医药大学安评中心，生产许可证号：SCXK(黑)2023-001。实验动物饲养于黑龙江中医药大学方剂学实验室，使用许可证号：SYXK(黑)2023-011，室内通风良好、环境干净整洁，室温20-25 ℃，相对湿度55%-70%。大鼠分笼饲养，每笼6只，每日光照时间12 h，大鼠进食与饮水自由。
实验方案经哈尔滨体育学院学术委员会批准(2024056)。实验过程遵循了国际兽医学编辑协会《关于动物伦理与福利的作者指南共识》和本地及国家法规。实验动物在麻醉下进行所有的手术，并最大限度地减少其疼痛、痛苦和死亡。
1.3.2   实验药物、饲料、试剂   实验所用的维持型和高糖高脂饲料(10%猪油、20%蔗糖、2.5%胆固醇、0.5%胆酸钠、67%维持型饲料)购自沈阳市于洪区前珉饲料有限公司；枸杞多糖购自上海源叶生物科技有限公司；链脲佐菌素和戊巴比妥钠购自美国
Sigma-Aldrich公司；柠檬酸钠缓冲液购自Solarbio公司；氯化钠注射液购自哈尔滨三联制药有限公司。
1.4   实验方法   
1.4.1   实验分组与动物模型建立   18只8周龄雄性SD大鼠适应性饲养1周后，随机选取6只为空白对照组，其余大鼠进行2型糖尿病造模。造模大鼠先给予高糖高脂饲料饲养8周诱导胰岛素抵抗，8周喂养结束后禁食不禁水12 h，尾静脉单次注射1%链脲佐菌素溶液(35 mg/kg)，模拟2型糖尿病的发病过程。注射后间隔72 h测量空腹血糖，若空腹血糖≥16.7 mmol/L则视为造模成功。将12只2型糖尿病模型大鼠随机分为模型对照组(n=6)和枸杞多糖组(n=6)。
1.4.2   枸杞多糖干预方案   将枸杞多糖溶解于蒸馏水中，枸杞多糖组大鼠按照200 mg/(kg·d)的剂量(该剂量可确保枸杞多糖达到一定的药理作用，且不会因过量而产生严重的毒副作用[4-6])灌胃枸杞多糖溶液，每次2 mL[7-8]；模型对照组灌胃生理盐水，每次2 mL。每日灌胃1次，连续灌胃12周。
1.4.3   体质量及空腹血糖测定   观察各组大鼠日常的精神状态、活动量。每周同一时间记录大鼠的体质量和空腹血糖值，测定空腹血糖前12 h禁食不禁水，取大鼠尾静脉血，采用血糖仪以及配套试纸测定血糖值。
1.4.4   酶联免疫吸附实验   采用ELISA试剂盒检测血清总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、胰岛素、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、胰高血糖素肽水平，具体操作如下：末次灌胃后需禁食12-16 h，于次日上午采集血液。选择腹主动脉取血，采集1.0-2.0 mL全血并注入不含抗凝剂的离心管中，通过血液自然凝固后离心获取血清。在酶标板上设置标准孔、空白对照孔及待测样品孔，其中标准孔需加入不同浓度的标准品50 μL；空白对照孔不添加样品和酶标试剂，其余操作步骤与其他孔一致；待测样品孔先加入40 μL稀释液，再加入10 μL待测样品(使样品最终稀释5倍)，添加时需将样品滴至孔底，避免触碰孔壁，加样后轻轻摇匀。随后，除空白孔外，每孔均加入100 μL酶标试剂，用密封膜封板后置于37 ℃环境中孵育60 min。在此期间，将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水按比例稀释20倍备用。孵育结束后，按照常规流程完成洗板操作(具体洗涤次数按试剂盒说明书执行)。然后进行显色反应，每孔依次加入显色剂A 50 μL和显色剂B 50 μL，轻轻摇匀后置于37 ℃避光环境中反应15 min。反应完成后，每孔加50 μL终止液，此时溶液颜色会由蓝色立即转变为黄色。为保证检测精度，需在添加终止液后15 min内，于450 nm波长下测定各孔的吸光度值。

1.4.5   肠道菌群16S rDNA高通量测序   大鼠处死前1 d采集粪便样本。收集18只大鼠的新鲜粪便颗粒用于肠道菌群分析。采用CTAB法提取样本总DNA，通过琼脂糖凝胶电泳检测DNA质量，同时采用紫外分光光度计对DNA进行定量，然后进行PCR扩增，扩增片段及引物序列见表1。经过PCR扩增后的产物采用AMPure XT beads进一步纯化，采用Qubit对DNA进行精确定量，使用Agilent 2100生物分析仪和Illumina的文库定量试剂盒对纯化后的PCR产物评估，合格的文库(2 nmol/L以上)按照一定比例混合，经过NaOH变性处理，转化为单链形式，然后使用NovaSeq 6000测序仪进行双端测序，每端长度为250 bp。在获得测序数据后，根据barcode信息对数据进行拆分，并去除其中的接头和barcode序列。处理后的数据利用qiime dada2 denoise-paired工具进行长度过滤和噪声去除，从而得到ASV特征序列及其对应的丰度信息。用SILVA数据库对ASV序列进行物种注释，并根据丰度表统计各个物种在不同样本中的丰度。

1.4.6   液相色谱-质谱联用法检测短链脂肪酸水平   样本制备：称取50 mg大鼠粪便样品，加入适量80%甲醇水，研磨，4 ℃、20 000×g离心15 min，取20 μL上清液于1.5 mL离心管中，加入EDC溶液和3-NPH溶液进行衍生化反应，加入初始流动相溶液至500 μL，涡旋混匀，取200 μL至进样小瓶用于液相色谱-质谱联用检测分析。色谱质谱条件参数如下：色谱柱为Agilent Poroshell 120 EC-C18 2.7 μm(2.1×100 mm)，色谱柱温度：40 ℃，进样量：2 μL，流动相A：水，流动相B：甲醇+乙腈(体积比=1∶1)。质谱条件参数：多反应监测(MRM)，负离子模式(Negative)。定量检测：通过标准品方法学比对保留时间和MRM碎片离子来定性，内标法定量。测试过程中，检测浓度高出校准曲线范围的样品，均通过稀释合适倍数后重新进行测试，并采用稀释后所测得数据作为定量结果。
1.5   主要观察指标   ①大鼠一般情况：干预前体质量、干预12周后体质量、体质量变化量，干预前血糖、干预12周后血糖和血糖变化量；②短链脂肪酸：乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸、己酸水平和短链脂肪酸水平；③糖脂代谢指标：三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和胰高血糖素肽1水平；④胰岛素抵抗指标：三酰甘油/高密度脂蛋白胆固醇、胰岛素水平；⑤炎症指标：白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平。
1.6   统计学分析   采用R语言软件包进行α多样性分析、β多样性分析、肠道菌群丰度以及相关性分析。组间比较采用单因素方差分析(ANOVA)和最小显著差异(LSD)检验。使用SPSS 23统计软件进行多因素方差分析，P < 0.05为差异有显著性意义。采用GraphPad Prism软件(8.0.2)验证差异比较结果，并进行绘图。数据以Means±SEM表示。重复测量3组数据。文章统计学方法已通过哈尔滨体育学院生物统计学专家审核。

肠道菌群在人类健康中发挥着至关重要的作用，菌群生态失调与多种病理过程相关[9-10]。2型糖尿病患者常合并肠道菌群紊乱和功能障碍，累及多个器官[11]。维持或恢复微生物多样性对于预防菌群失调所致的肠道稳态失衡至关重要。肠道菌群诱发2型糖尿病的机制可能与胰岛素抵抗和脂代谢紊乱有关[12]。有研究表明，肥胖是2型糖尿病风险的主要决定因素，典型病理特征为内脏脂肪过度积累[13]。例如，脂肪堆积可通过加剧胰岛素抵抗，同时损伤胰岛β细胞功能导致胰岛素分泌不足，二者共同作用使外周组织对葡萄糖的摄取减少、肝糖输出增加，最终诱发2型糖尿病[14]。短链脂肪酸是由肠道菌群通过发酵难消化多糖产生的一类碳链长度为1-6个碳原子的脂肪酸。肠道菌群与短链脂肪酸之间存在动态双向互作关系：肠道菌群不仅通过代谢活动决定短链脂肪酸的组成与丰度，而且短链脂肪酸可通过调控肠道菌群的多样性、稳定性及生长繁殖，形成反馈调节网络[15]。短链脂肪酸的异常代谢可能通过不同机制影响脂质代谢：一方面，特定短链脂肪酸可通过激活肝脏脂肪生成通路，促进三酰甘油在肝细胞内的合成[16]；另一方面，部分短链脂肪酸可通过抑制脂肪酸合成酶、乙酰辅酶A羧化酶等关键酶活性，减少内源性脂肪酸合成，同时通过激活过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α通路增强脂肪组织产热，促进能量消耗，从而发挥减脂效应[17]。另外，短链脂肪酸诱导信号的目标之一是葡萄糖稳态[18]。胰高血糖素样肽1是与葡萄糖稳态相关的公认递质。一般来说，胰高血糖素样肽1在肠道中产生，在调节血液葡萄糖浓度方面起着关键作用[19]。值得关注的是，近期一项研究通过直肠给药方式向肠道局部递送短链脂肪酸，观察到胰高血糖素样肽1分泌显著增加，提示短链脂肪酸可能通过直接作用于肠道内分泌细胞促进胰高血糖素样肽1释放，印证了二者之间的因果调控关系[20]。此外，慢性炎症及促炎细胞因子(如白细胞介素6、肿瘤坏死因子α)升高是2型糖尿病的重要病理特征，其发生与肠道菌群失调诱导的脂肪组织促炎状态密切相关[1]。同样，肠道菌群代谢产物短链脂肪酸可以在抑制炎症过程中发挥作用，并调节代谢和免疫稳态[21]。当肠道菌群紊乱导致短链脂肪酸生成减少时，肠道固有免疫细胞(如树突状细胞、T细胞)的抗炎极化能力受损，同时肠黏膜组蛋白去乙酰化酶活性升高，促炎因子转录增强，最终加剧肠道局部及全身炎症反应[22]。近年来研究证实，短链脂肪酸可通过抑制核因子κ轻链增强子结合蛋白信号通路、促进T细胞分化，显著降低促炎因子水平，加速黏膜炎症修复，从而在代谢性炎症调控中发挥核心作用[23-24]。
益生菌可通过竞争性排斥机制抑制肠道有害菌增殖，同时通过增强肠上皮细胞紧密连接蛋白表达强化肠道机械屏障，通过激活肠道相关淋巴组织促进免疫稳态，包括增强自然杀伤细胞活性及抑制促炎细胞因子的释放[25]。在健康个体中，致病菌在肠道菌群中仅占极低丰度[26]。然而，慢性炎症状态下，宿主免疫系统紊乱可通过上调致病菌毒力基因的转录，并破坏肠道黏液层屏障，为致病菌在肠黏膜表面的黏附定植创造条件[27]。该研究发现2型糖尿病大鼠肠道菌群整体丰度明显低于正常大鼠，并且厚壁菌门中Kineothrix、变形菌门中Escherichia-Shigella和Klebsiella、拟杆菌门Muribaculaceae_unclassified以及放线菌门中Enterorhabdus的丰度明显升高，提示其可能作为有害菌群在2型糖尿病大鼠中发挥作用。在2型糖尿病大鼠模型中，机体呈现显著的炎症反应加剧、脂质代谢紊乱及葡萄糖稳态失衡，上述病理表型与既往研究结果一致。此外，短链脂肪酸水平及组成比例高度依赖肠道共生菌群的组成，菌群失调可导致短链脂肪酸异常[28]。由此，解析2型糖尿病患者肠道菌群的特征性组成，并评估特定微生物丰度与宿主代谢指标的相关性，对阐明肠道菌群在糖尿病发病中的作用机制及挖掘潜在微生物标志物具有重要意义。
拟杆菌门、厚壁菌门和放线菌门在肠道中含量最高。拟杆菌门主要产生乙酸盐和丙酸盐，而厚壁菌门以丁酸盐作为主要代谢终产物[29]。此外，短链脂肪酸还包括戊酸、己酸、异丁酸以及异戊酸等。该研究发现，在2型糖尿病大鼠模型中，乙酸、异丁酸、异戊酸及己酸含量显著降低，而丙酸、丁酸和戊酸含量无显著变化。这一结果提示，2型糖尿病可能导致短链脂肪酸谱的差异化改变，其中乙酸、异丁酸、异戊酸和己酸异常与肠道菌群中特定产酸菌属的丰度变化密切相关。厚壁菌门中的Clostridia_UCG-014_unclassified、拟杆菌门中的Muribaculaceae_unclassified以及候选门辐射群中的Candidatus_Saccharimonas与乙酸显著相关，厚壁菌门中的Lachnospiraceae_NK4A136_group和Monoglobus以及脱硫杆菌门中的Desulfovibrionaceae unclassified与异丁酸显著相关，厚壁菌门中的Intestinimonas与异戊酸显著相关，厚壁菌门中的Phascolarctobacterium、放线菌门中的Enterorhabdus以及脱硫杆菌门中的Desulfovibrio与己酸显著相关，这为上述推测提供了直接的证据。另外，2型糖尿病引起的糖脂代谢紊乱均与上述菌群-短链脂肪酸平衡失调有关，而对于炎症的调控则与Firmicutes_unclassified、Colidextribacter以及变形菌门相关。此外，饮食干预对人类肠道微生物群的调节作用已被证实可赋予宿主多重健康效益。为了预防以及减缓易感人群糖尿病的发展，迫切需要减轻慢性炎症和胰岛素抵抗进展的简单治疗策略[30]。
生物活性多糖具有多种生物学功能，包括免疫调节和代谢活性。它们的作用与肠道菌群密切相关[31]。
例如，铁皮石斛多糖可通过促进拟杆菌属的增殖，提升肠道内烟酸(维生素B3)的合成水平。在机制上，烟酸作为配体激活肠道上皮细胞表面的G蛋白偶联受体，通过增强紧密连接蛋白的表达，系统性强化肠道机械屏障功能，从而改善胰岛素抵抗并缓解2型糖尿病进程[32]。另一项研究发现，灵芝多糖治疗改善了糖尿病小鼠肠道菌群的组成，并显著降低了厚壁菌门/拟杆菌门比值，提示脂质积累改善[33]。此外，具有抗炎特性的多糖可以通过抑制促炎细胞因子的产生和调节肠道和全身的免疫反应来帮助减轻炎症[32]。例如，有研究发现枸杞阿拉伯半乳糖苷(枸杞多糖的一个亚型[34])可以通过调节代谢组缓解慢性炎症[35]。此外，多糖经肠道菌群发酵的主要代谢产物为短链脂肪酸，其通过调节特定微生物的丰度重塑肠道菌群生态[36]。肠道微生物分泌的糖苷水解酶等酶类可将宿主难消化的碳水化合物分解为单糖、寡糖等小分子物质，供微生物自身代谢及宿主吸收利用[15]。这一代谢过程通过为有益菌提供底物，促进其生长繁殖，从而优化菌群结构，维持或恢复菌群多样性与功能稳定性。由此，生物活性多糖在恢复肠道微环境稳态方面显示出巨大的潜力，在疾病中的作用值得探索[2]。
多糖可通过调节脂质代谢通路发挥降血脂效应，主要表现为降低血浆总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平[32]。该研究显示，枸杞多糖可显著升高2型糖尿病大鼠血浆高密度脂蛋白胆固醇水平，同时降低总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平。此外，枸杞多糖可显著降低血清促炎细胞因子白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平，改善空腹血糖并提升血清胰岛素及胰高血糖素样肽1水平。这一效应与灵芝多糖通过抗炎及促进胰高血糖素样肽1分泌缓解糖尿病小鼠糖代谢异常的报道一致[4]。多糖可介导肠道微生物群稳态的恢复，而2型糖尿病患者常伴随肠道菌群多样性降低等菌群失调特征[32]。该研究显示，枸杞多糖组大鼠的肠道菌群生物多样性显著高于模型对照组。先前的一项研究报道称，厚壁菌门/拟杆菌门比率的增加与肥胖和肠道菌群的平衡有关，较高的比率通常表明体内不健康的生理状态[37]。令人惊讶的是，该研究模型对照组的厚壁菌门/拟杆菌门比率明显低于枸杞多糖组，提示在2型糖尿病大鼠中可能出现了严重的炎症反应，此时的拟杆菌门以致病菌为主，枸杞多糖通过调节肠道菌群的比例改善了这种现象。此外，该研究通过比较特定菌群，研究了枸杞多糖对微生物组的调节作用。研究发现，枸杞多糖显著提高了Firmicutes_unclassified、Lachnospiraceae_NK4A136_group、Clostridia_UCG-014_unclassified、Monoglobus、Phascolarctobacterium、
Intestinimonas、Colidextribacter、Candidatus_Saccharimonas、Desulfovibrionaceae unclassified和Desulfovibrio的丰度，抑制了Kineothrix、Muribaculaceae_unclassified和Enterorhabdus的丰度。综上，枸杞多糖提高了有益菌的丰度，同时降低了有害菌的丰度，保护宿主免受有害菌群及其代谢物造成的损害。
越来越多的证据表明，肠道菌群紊乱与多种代谢疾病的发生发展密切相关，重塑肠道菌群稳态对维护宿主代谢健康具有重要意义[38]。因此，该研究又探究了肠道菌群与生化特征之间的关系。三酰甘油与Clostridia_UCG-014_unclassified和Candidatus_
Saccharimonas的相对丰度呈显著负相关，与Muribaculaceae_unclassified的相对丰度呈显著正相关。高密度脂蛋白胆固醇与Lachnospiraceae_NK4A136_group、Monoglobus和Desulfovibrionaceae unclassified的相对丰度呈显著正相关。低密度脂蛋白胆固醇与Firmicutes_unclassified和Colidextribacter的相对丰度呈显著负相关，与Kineothrix的相对丰度呈显著正相关。这些结果表明上述菌群可能与脂质代谢有关。三酰甘油/高密度脂蛋白胆固醇与Lachnospiraceae_NK4A136_group、Monoglobus和
Desulfovibrionaceae unclassified的相对丰度呈显著负相关。胰高血糖素样肽1与Clostridia_UCG-014_unclassified、Candidatus_Saccharimonas的相对丰度呈显著正相关，与Muribaculaceae_unclassified的相对丰度呈显著负相关。这些结果表明上述菌群可能与血糖调节以及胰岛素抵抗有关。白细胞介素6与Monoglobus和Intestinimonas的相对丰度呈显著负相关。肿瘤坏死因子α与Firmicutes_unclassified和Colidextribacter的相对丰度呈显著负相关，与Kineothrix的相对丰度呈显著正相关。这些结果表明上述菌群可能与炎症调节有关。此外，该研究发现枸杞多糖不仅缓解了炎症，改善了肠道菌群的比例，同样也提高了短链脂肪酸的产生。有研究表明，丁酸盐可通过激活腺苷酸活化蛋白激酶信号通路抑制饮食诱导的肥胖和胰岛素抵抗，还可通过刺激肠道L细胞分泌胰高血糖素样肽1以减少食物摄入量[39]，且丙酸盐与丁酸盐可通过协同机制激活肠道糖异生[40]。而该研究中枸杞多糖同样显著提高了丁酸的含量。结合上述结果，Clostridia_UCG-014_unclassified、Candidatus_Saccharimonas和Muribaculaceae_unclassified可能参与调节丁酸的生成，以改善2型糖尿病大鼠的糖脂代谢。另外，有研究表明异丁酸是肠道微生物对蛋白质发酵的特征性代谢产物，异丁酸生成与微生物蛋白代谢通路密切相关[41]。该研究异丁酸水平升高，推测可能与枸杞多糖中含有的蛋白质成分被肠道微生物利用、驱动氨基酸发酵代谢有关[4]，并且Lachnospiraceae_NK4A136_group、Monoglobus和Desulfovibrionaceae unclassified可能通过增强氨基酸发酵代谢通路促进异丁酸生成，以抑制胰岛素抵抗，改善脂代谢。综上，重塑肠道菌群的组成和结构是降低糖尿病风险的重要策略。
结论：枸杞多糖可以改善糖尿病大鼠的糖脂代谢紊乱、炎症反应以及胰岛素抵抗，缓解高血糖，减少脂质积累，并抑制体质量减轻。枸杞多糖可显著调控肠道菌群结构，增加了Lachnospiraceae_NK4A136_group、Clostridia_UCG-014_unclassified、Monoglobus、Phascolarctobacterium、Candidatus_Saccharimonas、Desulfovibrionaceae unclassified以及Desulfovibrio丰度，减少了Muribaculaceae_unclassified和Enterorhabdus丰度。同时，枸杞多糖还显著提高了短链脂肪酸水平，并且Clostridia_
UCG-014_unclassified、Candidatus_Saccharimonas和Muribaculaceae_unclassified可能参与调节丁酸的生成，以改善2型糖尿病大鼠的糖脂代谢，Lachnospiraceae_NK4A136_group、Monoglobus和Desulfovibrionaceae unclassified可能参与调节异丁酸的生成，以抑制胰岛素抵抗以及改善脂代谢。另外，枸杞多糖可通过增加Firmicutes_unclassified、Clostridia_UCG-014_unclassified、Intestinimona和Colidextribacter以及抑制Kineothrix来改善2型糖尿病大鼠的炎症反应，未来同样可重点关注。肠道菌群机制共同促成了枸杞多糖在治疗2型糖尿病方面的潜在益处，为2型糖尿病等代谢性疾病的干预提供了新机制视角。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

当前研究热点聚焦于以枸杞多糖为代表的天然活性成分通过重塑肠道菌群结构、促进短链脂肪酸生成并修复肠屏障功能，形成“菌群-肠-代谢”交互调控网络以改善2型糖尿病糖脂异常的机制解析，以及整合多组学技术揭示枸杞多糖通过多靶点信号通路调节胰岛素抵抗与脂质代谢的作用规律，同时推动药食同源资源向功能食品及辅助治疗药物的产业化转化。未来发展趋势将围绕深度解析菌群代谢物介导的肠-肝-胰轴跨器官协同机制、开发靶向关键菌群及代谢产物的精准干预策略、探索与现有药物的协同治疗方案，以及建立多糖结构-活性关系评价体系并加速临床转化等方向展开，旨在突破单靶点治疗局限，推动糖尿病从单一药物干预向多维度微生态调节策略转变，为糖尿病防控提供新的科学依据与产业路径。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

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