2.1   锰基金属有机骨架的表征     2.1.1   X射线衍射分析   由图1可见，不同结晶时间对终产物的结晶度有很大的影响，当结晶时间达到5 h时，结晶相就可被检测到；当结晶时间达到15 h时，已具有很高的结晶度，而当结晶时间超过25 h后结晶度明显降低；当结晶时间超过50 h时，结构开始坍塌。在结晶时间为15 h时，其合成样品的衍射峰位置、晶化度和衍射峰强度均优于其他结晶时长，故确定最优结晶时间为15 h。"

通过X射线粉末衍射对合成的样品进行结构鉴定，在图2中合成样品([Mn3(μ3-ade)2(OA)2])的结晶度高，峰位与基于[Mn3(μ3-ade)2(ap)2]nDMF体系的模拟衍射峰吻合得很好，表明具有相同的拓扑结构，说明采用水热搅拌法可以得到目标金属有机骨架，而衍射峰的相对强度差异是由每个晶体表面的结晶度不同以及新的溶剂引起的。"

2.1.2   红外光谱分析   由图3可见，合成金属有机骨架样品的红外光谱图中900-650 cm-1处对应于C-H同位相面外弯曲振动，1 250-1 000 cm-1处为C-H面内弯曲振动区，1 448，1 489，1 562 cm-1对应于配体草酸钾中O-C-O的特征峰，说明草酸的羧基与金属锰离子发生了配位反应，而在3 219 cm-1处对应腺嘌呤-NH2的弯曲振动峰，说明腺嘌呤的氨基是构成骨架的一部分。"

2.1.3   扫描电镜分析   根据图4A合成样品的图像可以判断，锰基金属有机骨架为数十微米的不规则易碎块状固体，表面相对光滑。"

2.1.4   X射线光电子能谱分析   X射线光电子能谱分析可揭示合成锰基金属有机骨架样品中金属锰的价态和配体腺嘌呤与锰的配位情况。由图5可见，在Mn 2p轨道扫描中，在641.56 eV处显示出典型Mn(Ⅱ)3/2轨道的特征峰，与NIST谱库中氯化锰的结合能位置基本一致。据报道，腺嘌呤和腺嘌呤阴离子的X射线光电子能谱分别在400 eV和398 eV处显示出氨基和嘌呤骨架的氮原子峰[39]，而在400.0 eV和399.3 eV处有N 1s峰，结合能的偏移可能归因于锰-腺嘌呤配位，表明配合物成功合成。"

2.2   锰基金属有机骨架的pH值稳定性   由图6可见，尽管在两种pH值条件下该载体材料的衍射峰发生了变化，材料骨架发生了不同程度的坍塌，但相较于pH=7.4的环境，该材料在pH=5.8的环境中稳定性更佳，骨架结构相对更完整，能够携带黄芩苷到达肿瘤区并缓慢持续地释放药物，实现被动靶向的效果，结合体外释放图谱也可佐证该结论。"

2.3   黄芩苷的标准曲线及最大吸收波长   由图7可见，黄芩苷在甲醇溶液中的最大吸收波长为278 nm，在0-14 mg/L的质量浓度范围内，吸光度(A)与质量浓度(c)线性关系良好，回归方程为A=0.057 2c(mg/L)+0.018 3(R2=0.998 3)。黄芩苷在两种pH值PBS中的最大吸收波长均为275 nm，在pH=5.8和7.4的PBS环境中，有效质量浓度检测范围分别为0-10.5 mg/L和0-12 mg/L，回归方程依次为A=0.079 7c(mg/L)+0.020 2(R2=0.996 1)、A=0.070 2c(mg/L)+0.031 7(R2=0.992 5)。"

2.4   装载黄芩苷锰基金属有机骨架的表征    2.4.1   X射线衍射分析   从图2中可以看出，装载药物后，复合物在X射线衍射谱图中的衍射峰既不能与合成锰基金属有机骨架[Mn3(μ3-ade)2(OA)2]的衍射峰吻合，也不能与原始药物黄芩苷的衍射峰相吻合，基于上述结果分析可能是由于合成的锰基金属有机骨架[Mn3(μ3-ade)2(OA)2]在药物装载过程中参与了化学反应，从而导致骨架结构发生转化。 2.4.2   红外光谱分析   由图3可见，在锰基金属有机骨架的红外光谱图中，3 219 cm-1处的谱峰是骨架中-NH2的振动峰，在装载黄芩苷后该吸收峰消失，有可能是该氨基与黄芩苷中的羟基存在作用力；在游离黄芩苷的红外光谱谱图中，3 394 cm-1处对应的羟基振动峰在装载黄芩苷后也移动到3 356 cm-1处，进一步说明锰基金属有机骨架在装载黄芩苷时黄芩苷中的羟基与腺嘌呤存在相互作用，也证实了晶体结构转化的发生。 2.4.3   扫描电镜分析   由图4B可见，装载黄芩苷后，锰基金属有机骨架的形态转变为具有黄芩苷药物涂层的棒状晶体，横截面宽度为2.0-3.0 μm。装载前后的形态变化进一步支持了晶体材料发生转化的猜想。 2.4.4   X射线光电子能谱分析   药物装载后，锰基金属有机骨架的C和N峰发生变化，是由药物分子和骨架配体引起的。另一方面，基于药物装载前骨架Mn的峰位存在新的一组峰，这也证实了结构转化的发生，可以通过X射线衍射和红外光谱结果相互确认。 2.5   锰基金属有机骨架的载药率   如表1所示，当加入药物与载体质量相同时，载药率高，单纯增加载体投入量载药率会显著下降；在预实验中，增加药物投入量与药物质量至载体比为2∶1时，甚至出现药物装载失败的情况，说明最佳药物与载体质量比为1∶1，当药物与载体质量比为1∶1时，随着装载时间的延长，载药率在8 h达到峰值，药物装载达到饱和，这可能是药物吸附与解吸达到动态平衡；当装载时间延长到10 h时载药率呈现一定程度的下降，可能是吸附在晶体表面的药物因装载时间过长脱落所致，因此确定药物装载的最优条件为药物与载体质量比1∶1，装载时间8 h。"

2.6   装载黄芩苷后锰基金属有机骨架的体外释放性能及释药方程拟合   黄芩苷作为一种重要的抗肿瘤药物，在体内释放时会经历不止一种体内环境，如血液环境、胃肠道环境、肿瘤微环境等，因此使用pH=5.8、7.4的PBS来模拟肿瘤微环境和血液环境，以考察在不同环境中黄芩苷的释放。按照透析袋扩散法研究了载药金属有机骨架在两种环境下的体外释放行为，所得累计药物释放百分比随时间变化的曲线，见图8。"

装载黄芩苷后锰基金属有机骨架在以pH=5.8，7.4 PBS为释放介质的释药曲线中，分别在前3 h和前5 h释放较快，曲线较陡，累计释放率可达(49.52±5.04)%和(32.93±3.45)%，这是吸附在金属有机骨架表面的黄芩苷快速扩散进入释放介质造成的，在随后的十几个小时中释放曲线相对平稳，是因为装载进金属有机骨架孔道内的黄芩苷被缓慢释放出来，呈现出良好的缓释效果。 装载黄芩苷后锰基金属有机骨架在模拟酸性肿瘤微环境(pH=5.8)中比在模拟血液环境(pH=7.4)中显示出更快的药物释放模式，表明锰基金属有机骨架[Mn3(μ3-ade)2(OA)2]作为药物载体能防止药物在循环过程中渗漏过快，并增强了药物在肿瘤部位的蓄积，从而提高了其抗肿瘤疗效。 释药方程拟合结果见表2。根据拟合结果，在pH=5.8和7.4的PBS释药环境中，拟合优度最高的均为一级释药方程，拟合效果显著，释药过程符合缓释制剂一级释药动力学过程。上述结果均表明，装载黄芩苷的锰基金属有机骨架[Mn3(μ3-ade)2(OA)2]在体外释放评价中具有良好的缓释效果。"