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前列腺素I2-内皮祖细胞保护氧化应激受损心肌细胞凋亡：心肌电生理验证

张靖，阮璐，康莉，崔晓海，张佳

中国组织工程研究 2019, 23 (在线): 1-7. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.00.000

摘要（490）

PDF （1295KB）（396）

背景：研究发现前列腺素I2及其类似物可预防压力超负荷性心肌肥厚，以及降低心肌缺血再灌注损伤，然而，其半衰期较短限制了其临床应用。作者前期以来源于骨髓的内皮祖细胞为载体构建了前列腺素I2-内皮祖细胞可持续产生前列腺素I2。
目的：观察前列腺素I2-内皮祖细胞对氧化应激引起的心肌细胞损伤的影响。
方法：体外培养大鼠心肌细胞H9c2，实验分为4组：① H2O2干预H9c2细胞4 h。其他3组H9c2在加入H2O2前1h进行条件培养基预处理：②分别加入前列腺素I2-内皮祖细胞条件培养基。③内皮祖细胞的条件培养基。④加入PBS作为空白组。观察条件培养基-前列腺素I2-内皮祖细胞对内皮祖细胞管腔形成能力的影响；应用MTT和Hoechst 33342测定条件培养基对H2O2诱导的心肌细胞存活率及凋亡的影响。取雄性SD大鼠分离心肌，应用全细胞膜片钳技术检测条件培养基-前列腺素I2-内皮祖细胞对H2O2诱导的大鼠心肌细胞电生理活动的影响。
结果与结论：①条件培养基-前列腺素I2-内皮祖细胞组管腔形成能力明显强于条件培养基-内皮祖细胞组。②与条件培养基-内皮祖细胞组和空白对照组相比，条件培养基-前列腺素I2-内皮祖细胞预处理可显著降低H2O2诱导的心肌细胞凋亡和保存细胞存活(P < 0.01)。③条件培养基-前列腺素I2-内皮祖细胞预处理可预防H2O2诱导的早期后除极的发生，并且可缩短H2O2诱导的动作电位时程的延长(P < 0.01)。④结果提示前列腺素I2-内皮祖细胞通过分泌前列腺素I2保护氧化应激诱导损伤心肌细胞，可以心肌电生理活动作为保护效应的评价指标。

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骨髓间充质干细胞体外构建工程化心肌组织的生存

田茂，朴海南，陈宇，赵琦，潘心

中国组织工程研究 2014, 18 (20): 3133-3138. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.20.004

摘要（542）

PDF （1957KB）（640）

背景：到目前为止，工程化心肌组织仍然面临很多的问题。研究证实，骨髓间充质干细胞可分化为心肌样细胞；聚乙交酯、聚己内酯为常用的人工高分子材料，生物相容性良好。
目的：观察体外构建骨髓间充质干细胞-聚乙交酯-聚己内酯共聚物补片在正常心肌组织和梗死后心肌组织中的生长情况。
方法：SD大鼠骨髓间充质干细胞采用贴壁分离筛选法进行分离、培养，选取第3代进行体外DAPI标记。制作骨髓间充质干细胞悬液(2×106/cm2)种植于聚乙交酯-聚己内酯共聚物上形成骨髓间充质干细胞-聚乙交酯-聚己内酯共聚物补片。培养48 h在电镜下观察；苏木精-伊红染色后在光学显微镜下观察。大鼠结扎左冠状动脉前降支制作心肌梗死模型。将补片植入到正常心肌组织和梗死后心肌组织培养5周，行病理学检查了解骨髓间充质干细胞在组织中的存活情况。
结果与结论：光学显微镜和电镜观察结果示，骨髓间充质干细胞在聚乙交酯-聚己内酯共聚物支架中呈三维生长，细胞与支架黏附良好。在激光共聚焦显微镜下，对比观察补片植入正常心肌组织后第1周和第5周切片结果，同第1周相比，第5周的心肌组织内出现DAPI标记的骨髓间充质干细胞；心肌梗死区出现DAPI标记的骨髓间充质干细胞。苏木精-伊红染色结果示，梗死区出现骨髓间充质干细胞。提示骨髓间充质干细胞在聚乙交酯-聚己内酯共聚物支架上贴附生长，黏附良好。骨髓间充质干细胞-聚乙交酯-聚己内酯共聚物补片可用于心肌组织修复。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

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犬左室乳头肌的导管超声消融

王岐凤，王志刚，黄晶

中国组织工程研究 2013, 17 (24): 4409-4413. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.24.006

摘要（507）

PDF （1344KB）（448）

背景：近年来的研究表明左室乳头肌在室性心律失常的发生中起到了重要的作用。
目的：在经胸超声图像监控下，观察自制的超声消融导管消融动物左室乳头肌的可行性和安全性。
方法：普通杂种犬9只，随机分为2组：对照组3只，消融组6只。3%戊巴比妥钠麻醉后于无菌条件下分离其颈动脉并置入8F动脉鞘管，行机械通气并记录体表心电图，导管在经胸超声的引导下达到左心室腔，通过经胸超声图像调整导管与乳头肌的贴靠关系，保持导管与乳头肌贴靠良好，随后以声强 50 W/cm²、时间60 s消融左室乳头肌。
结果与结论：所有动物在观察期内均正常存活，乳头肌等解剖结构经胸超声图像显示清楚，并能通过经胸超声图像明确导管与乳头肌的相对位置及贴靠情况，切开动物心肌后，大体可见乳头肌内消融灶与周围正常心肌组织界限清晰，中央区呈白色，绕以淡红色的周边区。光镜下见消融灶与周边组织界线分明，灶内心肌细胞坏死，细胞间隙增宽，大量红细胞浸润。无附壁血栓、心肌灼伤及穿孔和心脏破裂等手术相关并发症。可见在经胸超声的实时监控下，能够实现导管对乳头肌深部组织安全有效的消融。

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新生大鼠心肌细胞和心肌成纤维细胞的同时分离

施雨露，李晓辕，曹美娜，于姝媛，王苹

中国组织工程研究 2013, 17 (24): 4414-4420. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.24.007

摘要（767）

PDF （1879KB）（2042）

背景：利用心肌组织中不同细胞的黏附特性差异，通过优化心肌细胞的培养条件，一次分离同时获得心肌和心肌成纤维细胞。
目的：探讨新生大鼠心肌和心肌成纤维细胞同时分离的有效方法。
方法：采用低浓度胰蛋白酶冷消化结合胶原酶复合消化，差速分离心肌和心肌成纤维细胞。通过使用不同种类的血清改良心肌细胞培养条件，免疫荧光鉴定心肌细胞和心肌成纤维细胞纯度。
结果与结论：心肌培养48 h时Troponin T阳性细胞率为89.3%。第2代的心肌成纤维细胞培养波形蛋白阳性细胞率为93.6%。含马血清的培养基组心肌细胞阳性率明显高于牛血清培养组(P < 0.05)。实验应用的新生大鼠心肌细胞分离培养方法，心肌细胞和心肌成纤维细胞纯度高、活性好，且能同时获得心肌细胞和心肌成纤维细胞。

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TrkB-shiRNA质粒转染心脏微血管内皮细胞

陈斯韵，曹亮，李震，沈晓涛，郑馨，梁永佳，蔡冬青

中国组织工程研究 2010, 14 (20): 3655-3659. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.20.011

摘要（399）

PDF （639KB）（531）

背景：脑源性神经营养因子与其受体TrkB在心脏与骨骼肌内皮细胞存在表达，在心脏血管系统的发育中及骨骼肌缺血时能有效促进血管新生，但其促血管新生的细胞与分子机制尚不清楚。

目的：应用针对脑源性神经营养因子受体TrkB的shiRNA质粒对心脏微血管内皮细胞进行转染，观察TrkB 3种亚型的表达及心脏微血管内皮细胞的生长状况和形态，初步探讨脑源性神经营养因子-TrkB通路在心脏微血管内皮细胞中的调控作用。

方法：使用TrkB-shiRNA质粒转染大鼠心脏微血管内皮细胞，应用荧光实时定量PCR检测TrkB的3个亚型，TrkB-FL、TrkB-T1及TrkB-T2 mRNA的表达，并观察经转染的心脏微血管内皮细胞的增殖情况。

结果与结论：应用TrkB-shiRNA质粒转染心脏微血管内皮细胞后，TrkB 3种亚型在转染后的4 d内mRNA表达均下降(P < 0.05或P < 0.01)，且经转染的心脏微血管内皮细胞的生长变慢。说明TrkB-shiRNA质粒可沉默心脏微血管内皮细胞的TrkB-FL、TrkB-T1及TrkB-T2的表达，且TrkB表达被抑制可能会影响心脏微血管内皮细胞的增殖。

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