鞘内注射右美托咪定干预慢性神经痛模型大鼠脊髓背角蛋白激酶C的表达

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2014.29.016

中国组织工程研究 ›› 2014, Vol. 18 ›› Issue (29): 4683-4688.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.29.016

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鞘内注射右美托咪定干预慢性神经痛模型大鼠脊髓背角蛋白激酶C的表达

邓海洪，马松梅，肖晓山

广东省第二人民医院麻醉科，广东省广州市 510317

修回日期:2014-05-27 出版日期:2014-07-09 发布日期:2014-07-09
通讯作者: 肖晓山，硕士，教授，主任医师，硕士生导师，广东省第二人民医院麻醉科，广东省广州市 510317
作者简介:邓海洪，男，1973年生，广东省五华县人，汉族，广东医学院在读硕士，副主任医师，主要从事麻醉和疼痛医学的研究。
基金资助:
广东省医学科研基金立项资助科研课题(A2012146)

Effect of intrathecal injection of dexmedetomidine on protein kinase C expression of spinal dorsal horn neurons in a rat model of chronic neuralgia

Deng Hai-hong, Ma Song-mei, Xiao Xiao-shan

Department of Anesthesiology, Second People’s Hospital of Guangdong Province, Guangzhou 510317, Guangdong Province, China

Revised:2014-05-27 Online:2014-07-09 Published:2014-07-09
Contact: Xiao Xiao-shan, Master, Professor, Chief physician, Master’s supervisor, Department of Anesthesiology, Second People’s Hospital of Guangdong Province, Guangzhou 510317, Guangdong Province, China
About author:Deng Hai-hong, Studying for master’s degree, Associate chief physician, Department of Anesthesiology, Second People’s Hospital of Guangdong Province, Guangzhou 510317, Guangdong Province, China
Supported by:
Medical Sciences Foundation of Guangdong Province, No. A2012146

摘要/Abstract

摘要：

背景：右美托咪啶是一种高效、高选择性的α2肾上腺素受体激动剂，具有镇静、镇痛、抗焦虑等作用，对呼吸影响小。

目的：观察鞘内注射右美托咪定对坐骨神经分支选择性损伤模型大鼠的镇痛作用。

方法：雄性SD大鼠60只，随机均分为3组。除正常对照组外，另2组大鼠建立坐骨神经分支选择性损伤模型，右美托咪定组在造模后14 d内每天鞘内注射右美托咪定3 μg/kg，生理盐水组在同时注射等容量的生理盐水。于坐骨神经分支选择性损伤模型前、术后鞘内给药前和鞘内给药后2，7，14 d测定大鼠热刺激缩足反射潜伏期和机械刺激缩足反射痛阈值，并在术后第2，7，14天鞘内注射药物后，每组每个时间点分别处死4只大鼠，取其L₄_-₆脊髓，RT-PCR及Western blot法分别检测脊髓背角蛋白激酶C mRNA及蛋白水平的表达情况，苏木精-伊红染色检测脊髓背角神经元形态学变化，免疫组织化学法检测脊髓背角蛋白激酶C蛋白表达的水平及分布情况。

结果与结论：与正常对照组比较，给药前、给药后各时点生理盐水组和右美托咪定组热刺激缩足反射潜伏期和机械刺激缩足反射痛阈值均明显降低(P < 0.05)；与生理盐水组比较，给药后各时点右美托咪定组热刺激缩足反射潜伏期延长和机械刺激缩足反射痛阈值均明显升高(P < 0.05)；右美托咪定组脊髓背角蛋白激酶C表达明显明显低于生理盐水组，且在给药14 d时达到最低接近于正常对照组。右美托咪定组脊髓背角神经元凋亡程度也较生理盐水组轻微，在给药14 d时神经元形态基本接近正常对照组。提示鞘内注射右美托咪定可减轻坐骨神经分支选择性损伤模型引起的痛敏，可能与其抑制脊髓背角蛋白激酶C的表达相关。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

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关键词: 组织构建, 组织工程, 鞘内注射, 右美托咪定, 脊髓背角, 慢性神经痛, 蛋白激酶C

Abstract:

BACKGROUND: Dexmedetomidine is an efficient, highly selective alpha-2 adrenergic receptor agonist, with sedative, analgesia and anti-anxiety effects, it has little impact on the respiration.

OBJECTIVE: To observe the analgesic effect induced by intrathecal injection of dexmedetomidine in rat model of spared nerve injury.

METHODS: A total of 60 male Sprague-Dawley rats were randomly divided into three groups (n=12): normal control group, dexmedetomidine group and saline group. Except for the normal control group, spared nerve injury model was established in the rats of dexmedetomidine group and saline group. Dexmedetomidine group was treated with intrathecal injection of dexmedetomidine 3 μg/kg every day within 14 days after injury. Saline group was given equal volume of saline for 14 days. The thermal withdrawal latency and mechanical withdrawal threshold were measured respectively before injury, after injury, before injection, and 2, 7, 14 days after intrathecal injection. Four rats were sacrificed in each group at day 2, 7 and 14 after injection, and the lumbar segments (L₄_-₆) of the spinal cord were removed. Real-time RT-PCR and western blot analysis were used to determine the expression of protein kinase C mRNA and protein in the spinal dorsal horn neurons.

Hematoxylin-eosin staining was performed to detect the morphology of the spinal dorsal horn neurons and immunohistochemistry staining was carried out to assess the expression level and distribution of protein kinase C.

RESULTS AND CONCLUSION: The thermal withdrawal latency and mechanical withdrawal threshold in dexmedetomidine group and saline group were significantly decreased compared with normal control group before or after injection (P < 0.05). However, both the thermal withdrawal latency and mechanical withdrawal threshold in dexmedetomidine group after intrathecal injection were significantly higher than those in saline group (P < 0.05). The protein kinase C expression in spinal dorsal horn neurons was significantly decreased in dexmedetomidine group compared with saline, and reached to the most lowest levels as normal control group on 14 days after injection. Moreover, the apoptosis of spinal dorsal horn neurons in dexmedetomidine group was lighter than that in saline group, and was similar to the morphology of neurons in normal control group on 14 days after injection. Intrathecal injection of dexmedetomidine could attenuate the hyperalgesia induced by spared nerve injury, which might be associated with the inhibition of protein kinase C expression in spinal dorsal horn.

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Key words: spinal cord, neuralgia, protein kinase C

中图分类号:

R318

邓海洪，马松梅，肖晓山. 鞘内注射右美托咪定干预慢性神经痛模型大鼠脊髓背角蛋白激酶C的表达[J]. 中国组织工程研究, 2014, 18(29): 4683-4688.

Deng Hai-hong, Ma Song-mei, Xiao Xiao-shan. Effect of intrathecal injection of dexmedetomidine on protein kinase C expression of spinal dorsal horn neurons in a rat model of chronic neuralgia[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2014, 18(29): 4683-4688.

图/表（结果） 2

2.1 实验动物数量分析 实验分批进行，脱落动物在下一批随机分组补充。总共饲养69只SD大鼠，60只纳入实验，9只不纳入实验统计：鞘内置管后死亡2例，出现神经病理性损伤感觉和运动丧失5例，导管脱落2例。

2.2 三组大鼠痛阈的变化 造模前3组大鼠热刺激缩足反射潜伏期、机械刺激缩足反射痛阈值差异无显著性意义。与正常对照组比较，给药前和给药后各时点生理盐水组和右美托咪定组热刺激缩足反射潜伏期、机械刺激缩足反射痛阈值均明显缩短(P < 0.05)。与生理盐水组比较，右美托咪定组在给药后各时点热刺激缩足反射潜伏期、机械刺激缩足反射痛阈值均明显延长(P < 0.05)，见表1。

2.3 光镜下各组脊髓病理学变化 正常对照组神经元细胞未见明显病理改变；生理盐水组脊髓背角神经元数目明显减少，部分细胞出现皱缩、胞核轮廓不清，甚至变性坏死，细胞内尼氏体聚集成团块状或溶解消失；右美托咪定组在给药前脊髓背角神经元变性坏死及尼氏体凝固、溶解情况与生理盐水组相似，但随着给药天数的增加逐渐减轻，直至14 d接近正常(图1)。

2.4 各组蛋白激酶C mRNA表达水平变化 RT-PCR检测结果显示，与正常对照组相比，生理盐水组蛋白激酶C mRNA表达水平明显升高(P < 0.05)，而右美托咪定组在给药后第2天其表达水平明显低于生理盐水组，并随着给药天数的增加继续降低，到14 d其表达水平接近正常对照组，低于生理盐水组(P < 0.05)，见图2。

2.5 Western blot检测各组蛋白激酶C蛋白表达水平 Western blot显示，正常对照组蛋白激酶C蛋白表达较低，但生理盐水组表达明显升高(P < 0.05)，给药2 d后右美托咪定组蛋白激酶C表达有所下降，随着给药时间的延长，右美托咪定组蛋白激酶C表达持续下降，在14 d时达到最低，与正常对照组表达相当，7，14 d时与生理盐水组相比差异有显著性意义(P < 0.05)，见图3。

2.6 免疫组织化学各组蛋白激酶C蛋白表达比较 正常对照组脊髓背角神经元蛋白激酶C蛋白表达为阴性或弱阳性；生理盐水组脊髓背角神经元中蛋白激酶C表达为强阳性；右美托咪定组神经元术后蛋白激酶C表达为强阳性，随着给药天数的增加，其表达逐渐降低，到14 d表达接近阴性(图4)。

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引言

在2011年国际疼痛学会(IASP)神经病理性疼痛学组对神经病理性疼痛疾病进行了重新定义：“神经病理性疼痛是由躯体感觉神经系统的损伤和疾病而直接造成的疼痛” 。包括周围性神经痛，继发于肿瘤浸润的神经病、痛性糖尿病神经病、幻肢痛、疱疹后疼痛、乳腺切除术后疼痛、三叉神经痛、中枢性神经痛综合征、脊髓损伤疼痛等，临床常称为慢性神经痛。其主要表现为痛觉的高反应性，以自发性疼痛、痛觉过敏和痛觉超敏等为特征，可持续数天至数年。

神经病理痛的致病因素广泛，病理机制复杂，临床症状表现具多样性和差异性，疗效不满意^[1]。一旦产生了神经性疼痛，神经系统的多个层面包括周围神经、中枢神经和交感神经都是被涉及的对象，成熟神经元结构、神经元之间的连接以及神经递质、受体、离子通道数量和质量均会发生改变。如何从信号转导通路中将庞杂的大量的分子变化串联起来解释神经性疼痛的发生，找到神经性疼痛发病过程中的关键分子，以便有针对性地设计不良反应尽可能少的有效药物，是近年来疼痛学研究的一项挑战性课题及研究热点，也是未来药物开发的重要方向。

研究表明神经病理痛可能与蛋白激酶C等细胞内信号转导分子的异常激活密切有关^[2]。蛋白激酶C广泛分布于多种组织、器官和细胞，蛋白激酶C是G蛋白偶联受体系统中的效应物，是一种细胞质酶，在非活性状态下是水溶性的，游离存在于胞质溶胶中，激活后成为膜结合的酶，能激活细胞质中的酶，参与生化反应的调控，同时也能作用于细胞核中的转录因子，参与基因表达的调控，是一种多功能的酶。蛋白激酶C的活性依赖于钙离子和磷脂的存在，但只有在磷脂代谢中间产物二酰基甘油存在下，生理浓度的钙离子才起作用，当细胞受到刺激后，蛋白激酶C以Ca²⁺依赖的形式从胞浆中移位到细胞膜上，此过程称之为转位，一般将蛋白激酶C的转位作为蛋白激酶C激活的标志。

神经损伤使得细胞内的P物质大量释放，并且激活磷脂酶C，水解膜磷脂，使细胞内的三磷酸肌醇和二酰甘油浓度增加。二酰甘油能使无活性的蛋白激酶C 由胞浆转移至胞膜从而活化。激活的蛋白激酶C使一氧化氮合酶等钙调蛋白磷酸化，引起脊髓的可塑性变化，是信息得以长久维持，从而导致中枢的敏感化^[3]。

研究发现，脊髓背角蛋白激酶Cγ的激活使N-甲基-D-天氡氨酸受体通道打开后导致痛觉过敏的形成是炎性疼痛和神经病理性疼痛的机制之一^[4]；酪氨酸蛋白激酶受体B的表达也随脑源性神经营养因子的增加而上调脊髓背角的脑源性神经营养因子与突触后神经元上的酪氨酸蛋白激酶受体B结合，通过激活蛋白激酶C途径从而引起痛觉过敏^[5]；大鼠足底注射甲醛后，脊髓后角神经元内蛋白激酶C可被激活并发生膜转移^[6]；在正常大鼠脊髓内给予蛋白激酶C激动剂，可使大鼠产生自发痛和痛觉过敏^[7]；而蛋白激酶Cγ基因敲除小鼠则对伤害性刺激几乎不发生痛反应^[8]。在组织损伤或炎症诱导的自发性痛及痛觉过敏产生中，脊髓传导伤害性信息神经元中蛋白激酶C激活起重要作用^[9]，而鞘内应用右美托咪啶能在脊髓水平抑制蛋白激酶Cγ表达，缓解大鼠骨癌模型的疼痛。

右美托咪啶是新型高选择性的α2肾上腺素能受体激动剂，与α2肾上腺素能受体、α1肾上腺素能受体结合的比例为1 600∶1，由于其具有抗交感、镇静和镇痛的作用，无呼吸抑制，能稳定血流动力学，现已广泛用于麻醉科、重症监护病房的镇静。鞘内注射右美托咪啶可减轻小鼠急性炎性痛和减轻坐骨神经结扎损伤(CCI)模型大鼠的机械和热痛敏^[10-12]，产生明显镇痛效应^[13]，其镇痛作用的主要受体是脊髓及其外周的α2肾上腺素能受体，鞘内给药可提高脊髓α2肾上腺素能受体的药物浓度，减少药物对大脑中枢的影响。根据文献报道，实验通过鞘内注射右美托咪啶 3 μg/kg探讨右美托咪定的镇痛效应及其对脊髓背角神经元蛋白激酶C表达的影响^[14-15]。本实验之所以选择坐骨神经保留性神经损伤模型，是因为该模型操作简单、产生疼痛需要的时间短、疼痛程度的个体差异性小^[16]。

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材料方法

设计：随机对照动物实验。

时间及地点：2012年6月至2013年8月在南方医科大学实验动物中心完成了本课题。

材料：

实验动物与分组：清洁级6周龄雄性SD大鼠60只，体质量180-220 g，由南方医科大学实验动物中心提供(合格证号：No.4402101601)。采用随机数字表法分为3组 (n= 20)：正常对照组、生理盐水组、右美托咪定组，每组在鞘内注射药物后即日和第2，7，14天分别处死4只大鼠，各组根据处死时点分4个亚组：给药后即日组(D0，n=20)，给药后2 d组(D2，n=16)，给药后7 d组(D7，n=12)，给药后14 d组(D14，n=8)。右美托咪定组在坐骨神经分支选择性损伤模型术后14 d内每天鞘内注射右美托咪定3 μg/kg，生理盐水稀释至10 μL，然后用生理盐水10 μL冲管；生理盐水组鞘内注射等容量生理盐水。

实验方法：

鞘内置管：参照Yaksh等^[17]法经枕环孔将PE-10导管置入鞘内至腰膨大处，肌注青霉素(4.0-5.0)×10⁴U预防感染，分笼独养5 d，以下弃用：运动丧失，尾麻痹、瘫痪、下肢跛行、单或双侧后肢麻痹拖曳者；局部感染；导管脱落或堵塞不能注药。

坐骨神经分支选择性损伤模型模型建立：生理盐水组、右美托咪定组参照Bennett方法^[18]制作坐骨神经分支选择性损伤模型模型，用5-0丝线分别结扎并切断腓总神经和胫神经，保留2-4 mm远端残端，保持腓肠神经完整，分层缝合肌肉和皮肤，肌注青霉素(4.0-5.0)×10⁴U预防感染。正常组不做处理。

行为学实验：参照文献[19]各组大鼠于药物注射前、注射后2，7和14 d，测定机械性缩足反射阈值和热缩足潜伏期。

Real-Time RT-PCR：取自大鼠的脊髓组织经液氮冷冻法碾磨后，用Trizol提取总RNA，用SuperScript First- Strand Synthesis System试剂盒进行反转录成cDNA，随后用SYBR Green I进行实时荧光定量PCR。

蛋白激酶C特异性引物序列为：sense，5’-CTC CCA TTC CTT CTC CAT CC-3’；anti-sense，5’- CAT CAC CTT CCC AAA ACT GC-3’；管家基因GAPDH作为内对照，其引物序列为：sense，5’-AAA CCC ATC ACC ATC TTC C-3’；anti-sense，5’-GAC TCC ACG ACA TAC TCA GC-3’。

Western blot：取新鲜未固定的脊髓组织经冷冻碾磨后，加sample buffer裂解，12 000 r/min离心10 min去沉淀，98 ℃煮10 min变性，SDS-PAGE电泳，200 mA转膜，5%的脱脂奶室温封闭1 h，兔抗鼠蛋白激酶C一抗(1∶500) 4 ℃孵育过夜；羊抗兔二抗(1∶2 000)室温孵育 45 min，TBST洗膜3次，15 min/次，ECL化学发光。Tubulin(1∶1 000)作为内参。

免疫组织化学染色技术：将大鼠L₄_-₆脊髓取出后立即放40 g/L多聚甲醛灌注固定，石蜡包埋，每例标本于石蜡切片机上切取5张厚度为2 mm的切片。柠檬酸盐缓冲液高压修复抗原，滴加山羊血清封闭液，室温孵育20 min，加一抗蛋白激酶C(1∶100，兔抗，Sigma)，4 ℃过夜。加通用型二抗(生物素化抗兔IgG)，室温孵育20 min；再加三抗(辣根酶标记链霉卵白素工作液)，室温孵育20 min，DAB显色。苏木精复染，乙醇梯度脱水透明，中性树胶封固。阴性对照片用PBS代替一抗。

主要观察指标：①3组痛阈的变化。②光镜下各组脊髓病理学变化。③各组蛋白激酶C mRNA表达水平变化。④Western blot检测各组蛋白激酶C蛋白表达水平。

统计学分析：采用SPSS 13. 0统计软件进行分析，计量资料以x(_)±s表示，组间比较采用单因素方差分析，组内比较采用自身配对t 检验，P < 0.05差异为有显著性意义。

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讨论

本实验运用坐骨神经分支选择性损伤模型法成功建立了大鼠病理性神经痛模型，结果表明生理盐水组与右美托咪定组热刺激缩足反射潜伏期和机械刺激缩足反射痛阈值较正常对照组有明显下降，提示这两组大鼠有痛觉超敏的形成。结果显示，在运用右美托咪定后，各时点机械刺激缩足反射痛阈值和热刺激缩足反射潜伏期又出现不同程度的升高，说明鞘内注射右美托咪定可以减轻坐骨神经分支选择性损伤模型引起的痛敏。并且随着给药天数的增加，大鼠机械刺激缩足反射痛阈值和热刺激缩足反射潜伏期逐渐升高，而脊髓背角神经元内蛋白激酶C的表达逐渐降低，提示右美托咪定可能参与了蛋白激酶C表达的抑制从而减轻病理性神经痛引起的痛觉超敏，起到明显的镇痛作用。有研究表明，右美托咪定镇痛的作用机制可能由于其能增强下行抑制通路对背角神经元的作用或者通过作用于钙通道抑制钙内流从而抑制神经递质C纤维肽的释放，产生抗伤害效应。

大量研究表明在外伤、肿瘤以及炎症等损因素所致的神经病理性疼痛动物模型中存在着不同程度的脊髓背角神经元凋亡。本实验结果显示，生理盐水组与右美托咪定组在造模术后痛敏形成的过程中出现明显的脊髓背角神经元细胞的凋亡，而正常神经元数量减少。更值得注意的是，随着给药天数的增加，右美托咪定注射组大鼠各时点痛敏较生理盐水对照组有明显得改善，而脊髓背角神经元的凋亡程度也逐渐减轻直到14 d时神经元形态基本恢复正常。该结果提示在坐骨神经分支选择性损伤模型神经病理性疼痛中脊髓背角神经元的凋亡与痛敏的形成之间可能存在着一定的关系。

有研究发现脊髓背角神经元的凋亡是神经病理性疼痛形成的重要因素^[20]，为脊髓敏感化提供了病理性结构基础;同时发现那些凋亡的神经元多数为痛觉传导抑制性神经元，这些抑制性神经元数目的减少可引起脊髓背角的过度兴奋，参与脊髓敏感化的维持，在神经病理性疼痛形成中发挥重要作用。

本实验结果显示鞘内注射右美托咪定不仅能降低脊髓背角蛋白激酶C的表达，同时能减轻坐骨神经分支选择性损伤模型大鼠模型中神经病理性疼痛引起的神经元凋亡程度，提示右美托咪定可能通过抑制神经元细胞的凋亡起到镇痛作用，并推测蛋白激酶C可能参与了病理性神经痛中神经元细胞凋亡的分子事件。

蛋白激酶C是细胞内重要的信号转导分子，它的活动依赖于磷脂，可以被Ca²⁺激活。在哺乳动物中蛋白激酶C有12种亚型，它们构成一个丝氨酸/苏氨酸激酶超家族。蛋白激酶C在细胞分裂、增殖、凋亡、细胞骨架蛋白的重塑以及离子通道的调节及细胞分泌等方面发挥着重要的作用^[21-22]。一氧化氮作为一种神经信号传递因子，可导致细胞内Ca²⁺通道开放，使得细胞内Ca²⁺浓度不断增加，并与蛋白激酶C调节区结合发生构象变化从而活化蛋白激酶C^[23-24]。活化的蛋白激酶C使包括N-甲基-D-天氡氨酸受体(NMDAR)、降钙素基因相关肽^[25]、一氧化氮合酶在内的钙调蛋白磷酸化^[26]，引起脊髓的可塑性变化，使信息得以长久维持最终导致中枢的敏感化。本实验结果显示，大鼠神经痛敏在造模后24 h内发生并伴随着蛋白激酶C表达的升高，进一步证实了蛋白激酶C的表达在病理性神经痛敏形成机制中的重要作用。

目前常用的大多数强效镇痛药都有呼吸抑制作用。当前的研究显示，右美托咪定对自主呼吸没有抑制作用，可保持用药过程中血流动力学的稳定，减少围术期心肌缺血的发生，在疼痛治疗以及麻醉方面有更广阔用途^[27-28]。

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蛋白激酶C是一种细胞质酶，在未受刺激的细胞中，PKC主要分布在细胞质中，呈非活性构象。一旦有第二信使的存在，PKC将成为膜结合的酶，它能激活细胞质中的酶，参与生化反应的调控，同时也能作用于细胞核中的转录因子，参与基因表达的调控，是一种多功能的酶。
蛋白激酶C的作用：
1.对糖代谢的控制：在肝细胞中，蛋白激酶C与蛋白激酶A协作磷酸化糖原合成酶，抑制葡萄糖聚合酶（glucose-polymerizing enzyme）的活性，促进糖原代谢。cAMP介导的促进糖原分解、抑制糖原合成作用是由胰高血糖素受体和β肾上腺素受体结合了相应激素所引起；而IP3、DAG和Ca2+介导的促进糖原分解和抑制糖原合成的是由α肾上腺受体结合肾上腺素所引起。cAMP激活蛋白激酶A，而IP3、DAG和Ca2+ 激活蛋白激酶C.
2.对细胞分化的控制：肌细胞生成素是一种转录因子，在肌细胞分化中起关键作用。在成肌细胞（myoblast）中，蛋白激酶C可使肌细胞生成素磷酸化，抑制了肌细胞生成素与DNA结合的能力，因而阻止了细胞分化为肌纤维。
3.参与基因表达调控：蛋白激酶C至少可通过两种途径参与基因表达的控制。一种途径是蛋白激酶激活一个磷酸化的级联系统，使MAP蛋白激酶磷酸化，磷酸化的MAP蛋白激酶将基因调节蛋白Elk-1磷酸化，使之激活。激活了Elk-1与一个短的DNA序列（称为血清反应元件，SRE）结合，然后与另一个因子（血清反应因子，SRF）共同调节基因表达。另一种途径是蛋白激酶磷酸化并激活抑制蛋白Iκ-B，释放基因调节蛋白NF-κ-B，使之进入细胞核激活特定基因的转录。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

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鞘内注射右美托咪定干预慢性神经痛模型大鼠脊髓背角蛋白激酶C的表达

Effect of intrathecal injection of dexmedetomidine on protein kinase C expression of spinal dorsal horn neurons in a rat model of chronic neuralgia

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