中国组织工程研究 ›› 2010, Vol. 14 ›› Issue (15): 2705-2808.doi: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.15.011
• 皮肤粘膜组织构建 skin and mucosal tissue construction • 上一篇 下一篇
王 东1,王 亮1,刘庆国2,王晓楠1,尉辉杰1,张建宁1
Wang Dong1, Wang Liang1, Liu Qing-guo2, Wang Xiao-nan1, Wei Hui-jie1, Zhang Jian-ning1
摘要:
背景:内皮祖细胞是内皮细胞的前体细胞,可参与新生血管的形成。研究发现,促红细胞生成素对骨髓内皮祖细胞有动员作用,促进血管的新生和损伤组织修复。 目的:观察不同浓度促红细胞生成素对体外培养的大鼠内皮祖细胞功能的影响。 方法:提取Wistar大鼠股骨和胫骨骨髓,利用密度梯度离心方法分离单核细胞进行培养,分别在培养基中加入0,4,8 U/mL不同浓度的促红细胞生成素进行培养。培养7 d后,对内皮祖细胞利用FITC-UEA-1和 Dil-Ac-LDL共同染色方法进行鉴定;同时利用CD34和CD133共同标记,以流式细胞仪进行鉴定;采用黏附实验、迁移实验及MTT实验对其功能进行评定。 结果与结论:培养到7 d左右,细胞形态变化完全,细胞之间形成联接,并可以围成似管腔状形态,十二三天时,细胞融合,形成铺路石样。培养细胞荧光染色显示内皮祖细胞呈双阳性染色,经流式细胞仪鉴定培养的内皮祖细胞可以结合CD133和CD34。黏附实验、迁移实验及MTT实验显示,促红细胞生成素呈剂量依赖性提高内皮祖细胞的黏附、迁移和增殖能力。说明在0~8 U/mL浓度内,促红细胞生成素呈剂量依赖性提高内皮祖细胞的黏附、迁移和增殖功能。
中图分类号: