2.1   网络药理学分析结果   
2.1.1   再生障碍性贫血差异表达基因的获取与分析   选取GSE3807数据集进行差异表达基因筛选，包含6个再生障碍性贫血患者和2个健康志愿者的骨髓CD3+T细胞测序数据。R语言分析后获得834个差异表达基因(P < 0.05，|logFC| > 2)，并绘制差异表达基因火山图，见图1A。对差异表达基因进行GO和GSEA富集分析，选取P < 0.01前20的GO功能富集结果进行展示，见图1B，差异表达基因参与造血、髓系细胞分化等生物学过程，激活了免疫受体活性、细胞因子受体活性、生长因子活性等分子功能。随后GSEA富集分析显示参与了凋亡、IFN-γ、IL-6-STAT3等相关通路，见图1C-E。
2.1.2   当归多糖靶点网络构建   当归多糖属于植物多糖，根据其结构特点分为同聚多糖和杂多糖，目前所提取的多糖以杂多糖为主，见图2A，主要由半乳糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、阿拉伯糖和鼠李糖5种单糖组成[12]，通过Pubchem获得单糖结构，借助数据库获得当归多糖潜在靶点347个，通过STRING数据库并导入Cytoscape获得蛋白互作网络图，见图2B。
2.1.3   当归多糖-再生障碍性贫血靶点网络构建及功能分析   将当归多糖与再生障碍性贫血靶点取交集后得到77个潜在治疗靶点，见图3A，随后将潜在靶点导入STRING平台获得蛋白相互作用网络，并在Cytoscape软件中进行拓扑分析，结果显示VEGFA、EGLN1、BCL2、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6等血管生成、凋亡及免疫相关因子度值显著，见图3B，其中VEGFA表达在再生障碍性贫血中呈现显著下调，EGLN1表达则显著上调，提示当归多糖可能通过这些靶点干预再生障碍性贫血。
为进一步探讨当归多糖治疗再生障碍性贫血的机制，对潜在靶点进行GO和KEGG富集分析，设置P < 0.05。GO富集的生物学过程主要涉及造血、炎症反应、细胞生长的正向调节等，见图3C。KEGG通路富集分析表明，潜在治疗靶点富集于多个通路，主要包括Th17细胞分化、NK相关细胞毒性、细胞黏附因子等IFN-γ、IL-2、IL-4相关信号通路，见图3D。
2.2   实验验证结果   
2.2.1   当归多糖对小鼠造血功能及存活率的影响   与对照组相比，模型组、当归多糖组的外周血细胞数量、骨髓单个核细胞数量和造血组织增生度均明显减少(P < 0.01)，证明造模成功，见图4A-E。与模型组相比，应用当归多糖干预后各项指标均得到一定的恢复(P < 0.01)，小鼠存活率显著提高，见图4F，表明当归多糖对再生障碍性贫血患者的造血功能具有改善作用。



2.2.2   当归多糖对Th1、Th2细胞亚群的影响   IFN-γ、IL-4分别是Th1、Th2细胞主要分泌的细胞因子，与对照组相比，模型组Th1/Th2比例均升高(P < 0.01)，IFN-γ水平升高，IL-4水平降低(P < 0.01)，经过当归多糖干预后，各项指标得到恢复，见图5，提示当归多糖能够通过调节Th1/Th2细胞比例失衡改善再生障碍性贫血患者的免疫功能紊乱。
2.2.3   当归多糖对VEGFA、EGLN1表达水平的影响   结合GEO测序结果与网络药理学分析，发现VEGFA表达在再生障碍性贫血患者中明显下调，EGLN1表达则显著上调。免疫组化检测结果显示，与模型组相比，当归多糖组VEGFA表达水平显著升高，EGLN1表达水平显著下降(P < 0.01)，见图6，提示当归多糖可能通过靶向VEGFA、EGLN1促进血管生成以调节骨髓造血微环境，从而促进造血功能恢复。
2.2.4   当归多糖对再生障碍性贫血小鼠骨髓单个核细胞凋亡水平的影响   与模型组相比，当归多糖组骨髓单个核细胞凋亡率、活性氧水平显著降低(P < 0.01)，Cleaved Caspase-3蛋白表达水平显著增高，Bcl-2/Bax比值显著降低(P < 0.01)，见图7。

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再生障碍性贫血(aplastic anemia)是一种骨髓造血功能衰竭综合征，伴有全血细胞减少、骨髓增生减低，典型表现为贫血、出血、感染等症状[1]。再生障碍性贫血发病机制较为复杂，主要涉及免疫功能紊乱、造血微环境异常、造血干细胞缺陷等方面[2]。目前的治疗方案主要包括造血干细胞移植、免疫抑制剂治疗等，但仍存在复发率较高、并发症多等缺点[3-6]。
中医治疗再生障碍性贫血疗效确切，寻找能够改善免疫紊乱及造血微环境异常的中药及其有效成分对于治疗再生障碍性贫血具有重要意义。《本草纲目》：“当归，和血补血。”当归多糖是当归的重要成分，主要由鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖等构成，在血液系统疾病中广泛应用[7]。现代药理研究显示，当归多糖具有促进造血、调节免疫、抗肿瘤、抗衰老等作用，能够改善再生障碍性贫血患者的造血功能，促进血小板生成、提高血红蛋白水平和红细胞计数[8-9]。然而，当归多糖治疗再生障碍性贫血的具体作用机制尚不完全清楚。
该研究旨在借助网络药理学和动物实验，进一步明确当归多糖对再生障碍性贫血免疫及造血功能的作用与潜在靶点，为当归多糖在再生障碍性贫血中的临床应用提供理论依据。


中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

1.1    设计   数据库挖掘及随机对照动物实验。
1.2   时间及地点   实验于2020年2-7月在山东中医药大学附属医院完成。
1.3   网络药理学分析
1.3.1   再生障碍性贫血相关靶点获取   借助基因表达综合数据库(gene expression omnibus，GEO)获得再生障碍性贫血患者与健康志愿者骨髓CD3+ T细胞的测序数据，运用R语言获取差异表达基因(P < 0.05，|logFC| > 2)，根据logFC对差异表达基因进行基因本体(gene ontology，GO)和基因集富集分析(gene set enrichment analysis，GSEA)。
1.3.2   当归多糖活性成分及靶点预测   结合PubChem平台(https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov)与相关文献获取当归多糖相关活性成分结构，将化合物结构上传至Swisstargetprediction (http://www.swisstargetprediction.ch)和Pharmmapper (http://www.lilab-ecust.cn/pharmmapper)，获取当归多糖相应预测靶点。
1.3.3   蛋白相互作用网络构建   利用Venn在线工具(https://bioinformatics.psb.ugent.be/webtools/Venn/)获取药物和疾病的共同靶点，将共同靶点导入STRING平台(https://string-db.org/)，获取治疗靶点的蛋白相互作用网络。使用Cytoscape 3.8.2软件构建当归多糖治疗再生障碍性贫血的潜在靶点网络，并运用“Analyze Network”功能对节点的度值进行计算和排序，度值越大，节点的重要性越大。
1.3.4   GO功能富集与京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG)富集分析   运用R语言对再生障碍性贫血相关差异表达基因和当归多糖治疗再生障碍性贫血的潜在靶点进行GO和KEGG富集分析，设置P < 0.05。
1.4   实验验证
1.4.1   试剂与仪器   当归多糖(纯度≥98%，批号：CYL023)购自陕西慈缘生物技术有限公司；VEGFA(货号：66828-1-I)、EGLN1 (货号：66589-1-Ig)、Bcl-2(货号：26593-1-AP)、Bax (货号：50599-2-Ig)、Cleaved Caspase-3 (货号：25128-1-AP)抗体购自美国Proteintech公司；细胞标志物抗体CD3-FITC、CD4-PE、干扰素γ(interferon γ，IFN-γ)-PE、白细胞介素4(interleukin 4，IL-4)-PE购自美国BD Biosciences公司；苏木精-伊红染色试剂盒(货号：C0105S)购自上海碧云天生物生物技术有限公司；ELISA试剂盒(货号：D6050D)购自美国R&D Systems公司；DAB试剂盒(货号：EE0017)购自济南思科捷生物技术有限公司；ECL化学发光检测试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司(货号：SW2010)；HEMAVET 950FS动物血细胞分析仪、FACSCalibur流式细胞仪购自美国BD Biosciences公司；电子显微镜购自日本OLYMPUS公司。
1.4.2   实验动物造模、分组及给药   SPF级雄性BALB/c小鼠72只，6-8周龄，饲养在温暖、安静的环境中，自由获取食物和水，并在实验开始前适应1周；SPF 级DBA/2小鼠10只，8-12 周龄，取其颌下、腋窝、腹股沟、肠系膜、腹膜后淋巴结及脾脏，制备淋巴细胞悬液。
   小鼠均由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证号：SCXK (京)2016-0006，动物实验方案经山东中医药大学附属医院伦理委员会审批通过，批准编号：AWE-2019-053。
将BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组和当归多糖组，每组24只。采用免疫介导法(60Co-γ射线照射+淋巴细胞输注)建立再生障碍性贫血模型[10]，模型组和当归多糖组小鼠经60Co-γ射线(5.0 Gy，5 min)照射后4 h内，经尾静脉注射DBA/2供体小鼠淋巴细胞(2×106个)。造模后，当归多糖组小鼠给予当归多糖灌胃[200 mg/(kg·d)]，其他组给予等量生理盐水溶液[10 mL/(kg·d)]，连续灌胃14 d，计算各组小鼠存活率。
1.4.3   造血面积检测及血细胞计数   造模后第1，7，14天，采用摘眼球取血方法获得外周血，用HEMAVET950FS动物血细胞分析仪检测外周血象，包括白细胞、红细胞及血小板计数；造模后第1，7，14天，每组随机选取3只小鼠，麻醉后采用颈椎脱臼法处死，取小鼠右侧股骨，制备石蜡切片，进行苏木精-伊红染色，在400倍镜下估算造血组织增生度，造血组织增生度=造血组织面积/(造血组织面积+非造血组织面积)；取小鼠左侧股骨，用RPMI1640培养液冲洗出骨髓腔内骨髓，采用淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞[11]，400倍显微镜下计数。
1.4.4   流式细胞术分析Th1、Th2细胞及比例   造模后第14天取各组小鼠脾脏，制备脾的单细胞悬液，调整细胞浓度为2×109 L-1。使用淋巴细胞分离液分离脾单个核细胞，收集细胞1×105个，加入anti-CD3-FITC和anti-CD4-PE，室温放置20 min，加入红细胞裂解液1 mL混匀，室温放置10 min，离心(2 000 r/min，5 min)弃上清，依次加入anti-IFN-γ-PE、anti-IL-4-PE，4 ℃条件下避光孵育30 min，PBS洗涤2次，重悬，上流式细胞仪检测，最终以IFN-γ和IL-4的散点图表示Th1细胞和Th2细胞。实验重复3次。
1.4.5   ELISA检测血清IFN-γ、IL-4水平   造模后第14天，应用1.4.3中各组小鼠外周血，分离血清，按照ELISA试剂盒说明书操作，检测IFN-γ、IL-4水平，实验重复3次。
1.4.6   免疫组化检测骨髓VEGFA、EGLN1表达   造模后第14天，取1.4.3制作的骨髓组织切片，用枸橼酸盐缓冲液抗原修复20 min，PBS冲洗3次，用5% BSA封闭，加入VEGFA、EGLN1的一抗于4 ℃湿盒中孵育过夜，然后加入生物素标记的二抗37 ℃孵育20 min，用DAB显色、苏木精复染后，在400倍光学显微镜镜下随机选取1个视野，以棕黄色为阳性表达，采用Image-Pro软件测定每个视野中的平均吸光度值，检测VEGFA、EGLN1的表达，实验重复3次。
1.4.7   流式细胞术检测骨髓单个核细胞凋亡水平   根据AnnexinⅤ试剂盒说明书操作。各组细胞离心，PBS洗涤，收集2×105个骨髓单个核细胞，加入5 μL Annexin V-FITC混匀，加入5 μL碘化丙碇溶液混匀，室温避光反应15 min，上流式细胞仪检测，统计Q4区数值，计算早期凋亡率，实验重复3次。
1.4.8   DCFH-DA检测骨髓单个核细胞中活性氧水平   将骨髓单个核细胞以1×106个/孔密度接种于6孔板，于37 ℃、体积分数5% CO2培养箱中培养。培养24 h后弃去原RPMI1640培养基，用冷的PBS润洗2次，加入无血清培养液按1∶1 000稀释的2，7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)，终浓度为10 μmol/L，37 ℃培养箱内孵育20 min，每隔3-5 min颠倒混匀一下，使探针和细胞充分接触，用无血清的DMEM培养液洗涤细胞3次，荧光显微镜观察并拍摄图片，统计各组细胞荧光强度，计算各组细胞活性氧相对含量，实验重复3次。活性氧相对含量=当归多糖组细胞荧光强度/模型组细胞荧光强度。
1.4.9   Western blot检测骨髓单个核细胞中Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达水平   将骨髓单个核细胞以1×106个/孔密度接种于6孔板，于37 ℃、体积分数5%CO2培养箱中培养24 h后收集细胞，RIPA裂解液(RIPA∶PMSF=100∶1)裂解后收集总蛋白。每组蛋白质上样20 μg，在10%SDS-PAGE上80 V浓缩20 min，120 V分离1 h，使用湿吸印法将样品在4 ℃下于110 V转移到PVDF膜上，将PVDF膜在含5%脱脂牛奶的TBST中封闭2 h，然后在4 ℃条件下与一抗Bcl-2(1∶1 000)、Bax(1∶1 000)、Cleaved Caspase-3(1∶500)或GAPDH(1∶4 000)孵育过夜，TBST冲洗3次后与稀释的二抗(1∶3 000)在封闭液中室温孵育2 h，TBST冲洗，用ECL化学发光检测试剂盒显色，然后将印迹转移到成像机上进行曝光和分析，使用 Image J 软件测定条带灰度值，以目的蛋白灰度值/内参灰度值作为该样本的相对蛋白表达量，实验重复3次。
1.5   主要观察指标   ①当归多糖与再生障碍性贫血的潜在联系；②当归多糖干预对各组小鼠存活率、外周血象、骨髓象、Th1/Th2细胞比例及细胞因子水平、VEGFA及EGLN1表达水平、骨髓单个核细胞凋亡的影响。

1.6   统计学分析   使用SPSS 19.0进行数据的统计分析，计量资料以x±s表示，组间差异采用单因素方差分析，多重比较使用修正的F检验，P < 0.05为差异有显著性意义。文章统计学方法已经通过山东中医药大学生物统计学专家审核。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

根据临床表现及特点，现代中医学将再生障碍性贫血命名为“髓劳”，病机多属气血两虚[13]。当归功用养血活血，是中医治疗再生障碍性贫血的最常用药物之一。当归多糖是当归的主要效用成分，能够上调SIRT1表达、下调p53及p21表达以延缓骨髓造血干细胞衰老，抗骨髓造血细胞凋亡，并能够改善再生障碍性贫血造血微环境[14-15]，但其对再生障碍性贫血干预的具体作用机制尚不明确。
目前认为再生障碍性贫血与免疫功能紊乱、造血微环境异常密切相关。CD4+辅助T细胞亚群及其分泌因子参与再生障碍性贫血发病，其中Th1和Th2细胞亚群数量及比例是再生障碍性贫血免疫应答调节中的重要一 环[16-17]。该研究选取再生障碍性贫血患者骨髓CD3+ T细胞的mRNA测序数据进行分析，共筛选出834个差异表达基因，包括多个免疫相关基因，如IFN、趋化因子受体1(C-X3-C motif chemokine receptor 1，CX3CR1)、血小板因子。IFN、CX3CR1在调节Th1免疫应答中发挥重要作用[18-19]，血小板因子能够阻止活化的Th1细胞释放IL-2和IFN-γ等造血负调控因子[20]。与既往研究一致，GO及GSEA分析显示再生障碍性贫血相关差异表达基因主要参与造血、髓系细胞分化等生物学过程，与免疫受体活性、生长因子活性等分子功能密切相关，并参与凋亡、IFN-γ、IL-6-STAT3等通路。
Th1细胞主要分泌IL-2、IFN-γ、肿瘤坏死因子α，Th2细胞则分泌IL-4、IL-6等细胞因子[21-22]。Th1细胞反应亢进能够抑制造血干、祖细胞的自我更新和增殖分化，其分泌的IFN-γ和肿瘤坏死因子α能够通过Fas/Fasl系统诱导造血干细胞凋亡，从而抑制造血功能[23]。此外，Th1细胞极化还会导致IL-4减少，而IL-4可诱导前体Th0细胞向Th2细胞分化，从而加重Th1/Th2比值的失调[24]。再生障碍性贫血患者往往呈现Th1细胞优势反应，Th1/Th2细胞比例显著升高[25-26]。该研究通过网络药理学得到当归多糖干预再生障碍性贫血作用靶点77个，其中IFN-γ、肿瘤坏死因子α、IL-2、IL-4、IL-6在蛋白相互作用网络表现出显著的重要性，提示了当归多糖对Th1和Th2相关细胞因子的调节作用。进一步构建再生障碍性贫血小鼠模型，证实了再生障碍性贫血中Th1/Th2细胞比例失衡，而当归多糖能够通过恢复Th1/Th2细胞比例，改善骨髓造血，提高外周血细胞及骨髓单个核细胞计数，提高小鼠存活率，提示当归多糖能够通过干预Th1/Th2比例改善再生障碍性贫血免疫功能紊乱，从而促进再生障碍性贫血造血功能恢复。
异常T细胞免疫所诱导的造血干细胞凋亡是导致再生障碍性贫血骨髓衰竭的重要原因，再生障碍性贫血免疫异常往往导致造血微环境的破坏，骨髓微血管系统是骨髓造血微环境的重要组成部分，是骨髓造血细胞生长的基础，对再生障碍性贫血的发生、发展、预后起着重要作用[27-28]。VEGFA作为一种促血管生成因子，在维持骨髓造血微环境方面具不可忽视的作用，其分泌水平的高低与再生障碍性贫血的发病和严重程度密切相关[29-30]。
临床研究发现再生障碍性贫血患者骨髓微血管密度与VEGFA表达均显著降低，重症再生障碍性贫血患者骨髓组织中的VEGFA表达量往往低于慢性再生障碍性贫血患者[31]。此外，VEGFA及其下游信号分子Notch组成的VEGFA-Notch信号通路还能够参与调节再生障碍性贫血小鼠模型Th1/Th2平衡，并降低造血负调控因子肿瘤坏死因子α和IFN-γ水平[32-33]。此外，HIF-1ɑ信号通路能够交联Notch通路调节T细胞迁移与分化，恢复再生障碍性贫血中Th1/Th2、Th17/Treg等T细胞亚群比例失衡[34]。EGLN1能够诱导HIF-ɑ的泛素化增加和蛋白酶体降解，从而抑制下游血管生成[35]。与既往研究一致，该研究通过GEO测序及网络药理学研究发现，VEGFA在再生障碍性贫血患者中显著下调(logFC=-4.45)，而EGLN1显著上调(logFC=2.70)，并在当归多糖-再生障碍性贫血靶点网络中度值排名前2位，KEGG富集分析则表明相关治疗靶点显著富集于Th17细胞分化、NK相关细胞毒性、细胞黏附因子等IFN-γ、IL-2、IL-4相关信号通路。既往研究表明当归多糖能够促进VEGFA表达[36]，但对于当归多糖调节EGLN1的表达尚未有相关报道。该研究通过免疫组化检测发现再生障碍性贫血小鼠中VEGFA的表达显著下降，而EGLN1的表达显著上升，经当归多糖干预后，VEGFA的表达上升，EGLN1的表达下降，骨髓造血面积及外周血细胞、骨髓单个核细胞计数恢复，证实了当归多糖能够通过上调VEGFA水平并下调EGLN1水平，从而促进骨髓微血管生成，改善骨髓造血微环境，以恢复再生障碍性贫血造血功能。
异常T细胞免疫所诱导的造血干细胞凋亡是导致再生障碍性贫血骨髓衰竭的重要原因[37]。既往研究发现重度再生障碍性贫血患者骨髓单个核细胞的凋亡指数显著高于非重度再生障碍性贫血患者，表明再生障碍性贫血的严重程度与骨髓干细胞凋亡程度密切相关[38]。通过网络药理学研究发现，当归多糖干预再生障碍性贫血的治疗靶点包括Bax、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9等多个凋亡相关因子，并广泛富集在PI3K-Akt、FoxO等信号通路。Bcl-2蛋白家族通过内源性线粒体途径来调节细胞凋亡，包括抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax两大类，Bcl-2/Bax是细胞对凋亡易感性的重要标志[39]。当细胞内Bcl-2水平降低或Bax水平升高，线粒体释放细胞色素C增加，诱导Cleaved Caspase-3释放，从而激活下游细胞凋亡级联反应[40]。活性氧主要在线粒体生成，介导线粒体凋亡[41]。活性氧的增加会对骨髓造血干细胞造成氧化损伤，损害其自我更新能力并诱导其衰老，从而促进造血干细胞过早耗尽导致骨髓衰竭[42]。PI3K-Akt通路与细胞凋亡密切相关，PI3K激活催化产生PIP3，进而激活下游的Akt，活化的Akt进一步磷酸化下游蛋白，如Bax、Bcl-2、Caspase-3等介导细胞凋亡。FoxO作为Akt的下游，是参与细胞凋亡、免疫调节等相关基因表达的重要转录因子，能够上调Bax表达并下调Bcl-2表达从而促进凋亡[43-44]。该研究结果显示，当归多糖能够显著提高再生障碍性贫血小鼠骨髓单个核细胞计数，降低骨髓单个核细胞凋亡率。与模型组相比，当归多糖组活性氧水平显著下降，凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-3表达水平显著升高，Bcl-2/Bax比值显著降低，提示当归多糖减轻了骨髓细胞氧化损伤，并抑制再生障碍性贫血小鼠骨髓造血干细胞凋亡。
综上所述，该研究基于GEO数据库挖掘与网络药理学预测了当归多糖通过干预异常T淋巴细胞及相关细胞因子治疗再生障碍性贫血的潜在靶点，通过体内实验发现当归多糖能够恢复再生障碍性贫血中异常Th1/Th2比例从而调节免疫功能紊乱，促进VEGFA介导的血管生成，改善再生障碍性贫血小鼠造血微环境，抑制骨髓造血干细胞凋亡，从而促进造血功能恢复。这些数据对于阐明当归多糖治疗再生障碍性贫血的潜在作用机制具有重要意义，为中医药治疗血液病提供了科学依据。

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文题释义：#br# 再生障碍性贫血：①血象：全血细胞减少，少数病例早期可仅1系或2系细胞减少。贫血属正常细胞型， 亦可呈轻度大红细胞。网织红细胞绝对值和比例显著减少，中性粒细胞减少低于0.5×109 L-1，血小板低于20×109 L-1。②骨髓象：骨髓涂片大体观察可见油滴增多，骨髓小粒镜检空虚，非造血细胞和脂肪细胞增多，一般在50%以上。#br# 骨髓造血微环境：是指骨髓造血细胞增殖、分化的全部环境因素，由基质细胞、细胞外基质和造血生长因子三部分组成，共同构成了造血细胞存活所必需的生理结构支架和信号传导载体，是造血系统的重要组成部分，具有支持造血细胞增殖及促使造血细胞向各个血细胞分化的作用。#br#

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再生障碍性贫血(aplastic anemia，AA)是一种骨髓造血功能衰竭综合征，发病机制较复杂，主要涉及异常T细胞免疫及骨髓造血微环境等。目前治疗方案主要包括造血干细胞移植、免疫抑制剂治疗，但存在复发率较高、并发症多等缺点。中医治疗再生障碍性贫血疗效确切，其中当归多糖作为补血中药当归的重要成分，具有促进造血、调节免疫等作用，但其对再生障碍性贫血的具体作用机制尚不清楚。

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本研究结合再生障碍性贫血骨髓T细胞测序分析、网络药理学，并建立再生障碍性贫血小鼠模型，发现当归多糖通过调节异常Th1/Th2细胞比例、促进VEGFA表达、抑制骨髓造血干细胞凋亡，改善骨髓造血微环境从而促进再生障碍性贫血造血功能恢复。这些数据对于阐明当归多糖治疗再生障碍性贫血的潜在作用机制具有重要意义，为中医药治疗血液病提供了科学依据。

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