黄芩汤调控肠道菌群治疗小鼠肠道急性移植物抗宿主病的机制

doi:10.12307/2024.727

中国组织工程研究 ›› 2025, Vol. 29 ›› Issue (1): 95-102.doi: 10.12307/2024.727

• 细胞相关实验/试验研究Cell related experimental/trial studies • 上一篇下一篇

黄芩汤调控肠道菌群治疗小鼠肠道急性移植物抗宿主病的机制

夏梦婷1，孙润洁2，付佳琪2，李素贞1，于漫亚2，崔兴3

1山东中医药大学第一临床医学院，山东中医药大学千佛山校区，山东省济南市 250014；2山东中医药大学中医学院，山东省济南市 250014；3山东中医药大学第二附属医院肿瘤中心，山东省济南市 250000

收稿日期:2023-09-27 接受日期:2023-11-04 出版日期:2025-01-08 发布日期:2024-05-18
通讯作者: 崔兴，主任医师，博士生导师，山东中医药大学第二附属医院肿瘤中心，山东省济南市 250000
作者简介:夏梦婷，女，1996年生，山东中医药大学在读硕士，主要从事中医治疗血液和肿瘤疾病的临床及实验研究。
基金资助:
国家自然科学基金(81774080)，项目负责人：崔兴；泰山学者计划(tsqn201812145)，项目负责人：崔兴

Mechanism by which Huangqintang regulates intestinal flora for treatment of intestinal acute graft-versus-host disease in mice

Xia Mengting1, Sun Runjie2, Fu Jiaqi2, Li Suzhen1, Yu Manya2, Cui Xing3

1First School of Clinical Medicine, Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Qianfoshan Campus of Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250014, Shandong Province, China; 2School of Traditional Chinese Medicine, Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250014, Shandong Province, China; 3Oncology Center, Second Affiliated Hospital of Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250000, Shandong Province, China

Received:2023-09-27 Accepted:2023-11-04 Online:2025-01-08 Published:2024-05-18
Contact: Cui Xing, Chief physician, Doctoral supervisor, Oncology Center, Second Affiliated Hospital of Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250000, Shandong Province, China
About author:Xia Mengting, Master candidate, First School of Clinical Medicine, Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Qianfoshan Campus of Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250014, Shandong Province, China
Supported by:
National Natural Science Foundation of China, No. 81774080 (to CX); Taishan Scholars Program, No. tsqn201812145 (to CX)

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：
黄芩汤：出自于《伤寒论》辨太阳病脉证并治第172条，为治疗热泻热痢的经典方剂，具有清肠止痢、和中止痛之功效，被后世誉为治痢之先方。现代临床上黄芩汤主要用于治疗溃疡性结肠炎等疾病。黄芩汤适应证与胃肠道急性移植物抗宿主病症状有很大的重叠，因此选用黄芩汤进行研究。
自噬：是一种进化上较为保守的细胞自我降解机制，胞质内的物质被包裹进囊泡中结合溶酶体形成自噬溶酶体，并被其中的溶解酶降解，借此实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新。

背景：肠道急性移植物抗宿主病是异基因造血干细胞移植后最凶险的并发症之一，具有较高的致死率，如何通过应用中药改善肠道炎症、调节自噬以治疗肠道急性移植物抗宿主病是当下值得研究的问题。
目的：探讨黄芩汤调控肠道菌群治疗肠道急性移植物抗宿主病的机制。
方法：CB6F1小鼠经总剂量8 Gy的60Co X射线照射后通过尾静脉输入Balb/c H-2d小鼠的单个核细胞悬液(骨髓+脾)制备急性移植物抗宿主病模型，随机分为模型组及黄芩汤高、中、低剂量组。造模后分别给予不同剂量黄芩汤或等体积生理盐水连续灌胃14 d，进行临床急性移植物抗宿主病评分并记录生存时间，取小肠组织做苏木精-伊红染色行小肠黏膜病理分级评分。使用16S rDNA测序检测各组小鼠肠道菌群，行免疫荧光、免疫组化染色、PCR等检测自噬相关标志物的表达。
结果与结论：①与模型组相比，黄芩汤中、高剂量组小鼠存活时间显著延长(P < 0.01)，临床急性移植物抗宿主病评分显著降低(P < 0.01)，小肠黏膜病理分级评分显著降低(P < 0.01)，小肠组织炎症因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6水平显著下降(P < 0.01)，小鼠小肠黏膜上皮结构完整性部分恢复；②肠道菌群研究发现，与模型组相比，黄芩汤中剂量组促炎菌株肠球菌显著减少(P < 0.05)，而有益菌如梭状芽孢杆菌及促自噬的红球菌显著增多(P < 0.05)；③与模型组相比，黄芩汤中剂量组的自噬标志物显著升高(P < 0.05)；透射电镜下，黄芩汤中剂量组自噬泡数量显著增多；④结果表明：黄芩汤显著降低条件性致病菌丰度和小肠组织炎症因子水平，并提高有益菌相对丰度，同时促进小肠黏膜自噬的表达，从而明显改善急性移植物抗宿主病小鼠肠道症状。

https://orcid.org/0000-0002-8771-5898 (崔兴)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

关键词: 肠道急性移植物抗宿主病, 黄芩汤, 造血干细胞移植, 肠道菌群, 梭状芽孢杆菌, 肠球菌, 抗炎, 自噬

Abstract: BACKGROUND: Intestinal acute graft-versus-host disease is one of the most aggressive complications after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation with high lethality. How to improve intestinal inflammation and regulate autophagy by applying traditional Chinese medicine in order to treat intestinal acute graft-versus-host disease is a worthwhile research issue nowadays.
OBJECTIVE: To investigate the mechanism of Huangqintang modulating intestinal flora for the treatment of intestinal acute graft-versus-host disease.
METHODS: CB6F1 mice were irradiated with 60Co X radiation at a total dose of 8 Gy, and then single nucleated cell suspensions (bone marrow cells + splenocytes) from Balb/c H-2d mice were injected into the tail vein in order to prepare a model of intestinal acute graft-versus-host disease. These samples were randomly divided into the model group and the high-, moderate-, and low-dose Huangqintang groups. After modeling, the model, high-, moderate-, and low-dose groups received different doses of Huangqintang or an equal volume of saline by continuous gavage for 14 days. Clinical acute graft-versus-host disease grading, and survival time was recorded. Small intestinal tissues from each group were stained with hematoxylin and eosin for small intestinal mucosal pathology scoring. The intestinal flora of mice in each group was detected using 16S rDNA sequencing. Autophagy-related markers were detected using immunofluorescence, immunohistochemistry, and PCR.
RESULTS AND CONCLUSION: (1) Compared with the model group, the survival time of mice was significantly prolonged (P < 0.01); the clinical acute graft-versus-host disease scores were significantly reduced (P < 0.01); the pathological grading scores of the small intestinal mucosa were significantly diminished (P < 0.01); the levels of the small intestinal tissue inflammatory factors tumor necrosis factor-α, interleukin-1β, and interleukin-6, were significantly decreased (P < 0.01); the structural integrity of the small intestinal mucosal epithelium was partially restored in mice after the intervention of moderate and high-dose Huangqintang. (2) The study of intestinal flora found that compared with the model group, the pro-inflammatory strain Enterococcus was significantly reduced (P < 0.05), while beneficial bacteria such as Clostridium_innocuum and Rhodococcus, a pro-autophagy bacterium, were significantly elevated (P < 0.05) in the moderate-dose Huangqintang group. (3) Compared with the model group, the autophagy markers were significantly elevated in the moderate-dose Huangqintang group (P < 0.05); under transmission electron microscopy, the number of autophagic vacuoles of moderate-dose Huangqintang group increased significantly. (4) The results showed that Huangqintang significantly reduced the abundance of conditionally pathogenic bacteria and the level of inflammatory factors in small intestinal tissues, and increased the relative abundance of beneficial bacteria and promoted the expression of autophagy in the small intestinal mucosa, which resulted in a significant improvement of intestinal symptoms in mice with acute graft-versus-host disease.

Key words: intestinal acute graft-versus-host disease, Huangqintang, hematopoietic stem cell transplantation, intestinal microbiota, clostridium, enterococcus, antiinflammation, autophagy

中图分类号:

夏梦婷, 孙润洁, 付佳琪, 李素贞, 于漫亚, 崔兴. 黄芩汤调控肠道菌群治疗小鼠肠道急性移植物抗宿主病的机制[J]. 中国组织工程研究, 2025, 29(1): 95-102.

Xia Mengting, Sun Runjie, Fu Jiaqi, Li Suzhen, Yu Manya, Cui Xing. Mechanism by which Huangqintang regulates intestinal flora for treatment of intestinal acute graft-versus-host disease in mice[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2025, 29(1): 95-102.

图/表（结果） 6

2.1 黄芩汤成分分析 为了评价黄芩汤主要的化学成分，使用UPLC-MS/MS在正、负离子模式下进行分析，见图1。30种化合物(14种黄酮类化合物，5种氨基酸及其衍生物，3种核苷酸及其衍生物，3种酚酸类，2种萜类，2种有机酸，1种生物碱)含量相对较高。具体信息见表4。

2.2 黄芩汤治疗aGVHD的效果 造模后小鼠的临床aGVHD评分降低，模型组小肠黏膜上皮结构破坏严重，肠绒毛脱落，潘氏细胞内含有大量的嗜酸颗粒，符合肠道aGVHD的病理特征，与肠道aGVHD应呈现的病理特征一致。观察苏木精-伊红染色图片发现，黄芩汤治疗后小肠黏膜上皮炎性细胞浸润减少，杯状细胞数量增加，细胞排列紊乱得到明显改善，且潘氏细胞减少，表明黄芩汤对减轻小肠黏膜炎症具有显著疗效，其中黄芩汤中剂量组小肠黏膜上皮结构完整性最好，且黏膜病理炎症评分显著降低(P < 0.01)，见图2A，B。
临床aGVHD评分显示，黄芩汤中、高剂量组显著低于模型组(P < 0.01)，见图2C。
模型组小鼠生存时间最长至14 d，而黄芩汤治疗后，模型组与黄芩汤低、中、高剂量组的平均生存时间(9.7 d vs. 15.3 d vs. 28.4 d vs. 28.9 d)及中位生存时间(9 d vs. 11 d vs. 25 d vs. 23 d)出现显著差异，黄芩汤中、高剂量组小鼠存活时间得到显著延长，见图2D。
外周血血清炎症因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6水平：模型组显著升高，黄芩汤中剂量组显著降低(P < 0.01)，见图2E。
以上数据说明黄芩汤能通过降低炎性因子有效改善aGVHD小鼠肠道黏膜上皮结构，降低死亡率。

2.3 黄芩汤对肠道菌群的影响 该实验Specaccum曲线逐渐平缓，表明抽样充分，可以进行数据分析，见图3A。Shannon-Wiener曲线趋向平坦，说明测序的数据量较为丰富，见图3B。Venn图显示，对照组有821个操作分类单元，模型组有454个操作分类单元，黄芩汤中剂量组有488个操作分类单元，见图3C。样品间差异(β多样性)主要通过PCA分析、PCoA分析、NMDS分析展示，各组样本组间不重叠，提示各组菌群构成有显著差异，见图3D-F。
对照组的主要菌属是肠道微生态稳定的关键因素。在门水平上，Bacteroidetes(45.34%)、Firmicutes (52.12%)、Proteobacteria(0.64%)、Verrucomicrobia(0.30%)为4大主要菌类。在属水平上，Muribaculaceae_norank(30.86%)、Lactobacillus(19.78%)、Bacteroides(2.19%)为对照组小鼠肠道菌群的主要构成，见图4A，B。

LefSe 分析展示黄芩汤治疗后各组间差异显著的菌群，见图5A。相较于模型组，黄芩汤中剂量组的肠球菌(Enterococcus)、Muribaculaceae_unclassified显著减少(P < 0.05)，而有益菌如梭状芽孢杆菌(Clostridium_innocuum)及促自噬的红球菌(Rhodococcus)则显著增加(P < 0.05)，见图5B。而既往研究已经证实肠球菌与炎性因子的分泌相关[12-13]，红球菌菌株能诱导炎症性肠病等疾病的
自噬[14-15]。

2.4 黄芩汤对自噬的影响 免疫荧光和免疫组化结果显示，与对照组相比，模型组自噬标志物LC3B、Beclin1显著降低，而P62显著升高(P < 0.01)，经黄芩汤干预后明显恢复(P < 0.01)，见图6-8。
透射电镜下，模型组的自噬泡较其他两组明显减少，部分细胞器数量减少并且形态不完整。而黄芩汤治疗后，黄芩汤中剂量组自噬泡数量较模型组显著增加，甚至高于对照组，线粒体数量上升并且形态得到恢复，见图9A，B。
同时PCR实验验证了自噬标志物LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1、P62的mRNA水平变化与免疫组化及免疫荧光所呈现的趋势一致(P < 0.01)，见图9C。

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引言

材料方法

1.1 设计 随机对照动物实验。
1.2 时间及地点 实验于2022年1-7月在山东中医药大学附属医院完成。
1.3 材料
1.3.1 实验动物 SPF级6-8周龄CB6F1雌性小鼠70只，体质量18-22 g；SPF级10周龄Balb/c H-2d雄性小鼠15只，体质量18-22 g。实验动物均购自北京维通利华实验动物技术有限公司，动物生产许可证SCXK2012-0001。实验方案经山东中医药大学附属医院伦理委员会审批后通过(伦理号：AWE-2019-037)。
1.3.2 药物与抗体 黄芩、炙甘草、芍药、大枣等中药材购自山东省中医药东院区中药房；抗LC3B、Beclin 1、P62等抗体购自Affinity Biosciences公司(俄亥俄州辛辛那提市，美国)；RIPA裂解液、聚碳酸酯荧光黄购自Sparkjade生物科技有限公司(济南，中国)。
1.3.3 主要仪器 Miseq PE300 测序仪(美国Illumina公司)；ELISA试剂盒(美国Thermofisher公司)；ABI GeneAmp® 9700(美国Thermofisher公司)；QuantiFluor™ -ST蓝色荧光定量系统(美国Promega公司)；反转录试剂盒(中国Sparkjade生物科技有限公司)；透射电镜、动物X射线辐照仪X-RAD225由山东省肿瘤医院提供。
1.4 实验方法
1.4.1 黄芩汤的制备 黄芩汤(《伤寒论》)由黄芩30 g、炙甘草20 g、芍药20 g和大枣24 g组成，加药材10倍量的纯水，浸泡30 min，熬煮2次，每次1 h，将2次的药液进行混合过滤后，加热浓缩为2 g/mL药液备用。
1.4.2 黄芩汤的UPLC-MS/MS分析 黄芩汤与甲醇和双蒸馏水(体积比1∶1)以1∶20混合，超声30 min，通过0.22 μm过滤膜过滤。使用UPLC-ESI-MS/MS系统(UPLC，ExionLC™ AD，https://sciex.com.cn/; MS, Applied Biosystems 4500 Q TRAP，https://sciex.com.cn/)分析。色谱柱为Acquity UPLC C18柱(2.1 mm×100 mm，1.7 µm)。正、负离子模式均采用配备电喷雾电离源的质谱仪，质量范围为120-1 800 m/z。电离电压分别为5 500 V(正离子模式)和-4 500 V(负离子模式)，毛细管温度为550 ℃。采用XCMS软件导入质谱，进行材料鉴定。
1.4.3 骨髓和脾单个核细胞的制备 近交系Balb/c H-2d小鼠经麻醉后脱颈椎法处死，保持无菌，取出小鼠的骨髓和脾脏。将骨髓加入等量PBS混匀，然后缓慢加在细胞分离液上层，室温1 500 r/min离心20 min，收集从上至下第二层雾状液体，加入PBS制成骨髓单个核细胞悬液。将脾脏滴加PBS研磨至粉碎并将研磨液过200目尼龙滤网，4 ℃、1 500 r/min离心5 min后收集沉淀物，裂解红细胞后离心，收集细胞，加入PBS制成脾脏单个核细胞悬液。

1.4.4 aGVHD小鼠模型的建立及分组处理 64只CB6F1小鼠经60Co X射线(剂量3.7 cGy/s，总剂量8 Gy)照射4 h，然后经尾静脉注射骨髓及脾脏单个核细胞悬液(骨髓细胞1×107/只+脾细胞1×107/只)完成造模。随机选择6只正常CB6F1小鼠作为对照组，64只aGVHD模型小鼠随机等分为模型组及黄芩汤低、中、高剂量组。根据前期实验数据[9]，自造模当天起，黄芩汤低、中、高剂量组分别给予4.55，9.1，18.2 g/(kg·d)黄芩汤灌胃，对照组和模型组同时给予等量生理盐水，均连续灌胃14 d，观察各组小鼠存活率。末次灌胃8 h后每组随机选6只小鼠取材，取外周血、脾脏、小肠组织行各项指标检测。

1.5 主要观察指标
1.5.1 临床aGVHD评分 观察第14天生存小鼠的体质量、姿势、活动度、毛发、皮肤完整性和腹泻情况，按照文献[9-10]的aGVHD临床评分标准计算分数，见表1。

1.5.2 小肠黏膜组织学及病理炎症评分 小肠组织切片后用苏木精和伊红染色，观察病理切片中小鼠小肠黏膜的损伤情况，进行病理炎症评分及组织学分析[9，11]，见表2。

1.5.3 血清炎症因子检测 根据疗效确定黄芩汤剂量后，取对照组、模型组、黄芩汤中剂量组小鼠小肠组织，使用ELISA试剂盒检测肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6水平。

1.5.4 16S rDNA测序 采集对照组、模型组、黄芩汤中剂量组小鼠第15天的新鲜粪便，进行16S rDNA测序(上海鲸舟基因科技有限公司)。抽提的基因组DNA通过电泳分离进行鉴定。采用PCR检测方法进行定量。构建Illumina Miseq PE300文库、进行rDNA测序，最后进行生物学分析。
1.5.5 肠道菌群多样性分析 处理测序结果，对测序结果进行操作分类单元(operational taxonomic units，OTU)聚类和物种分类学分析，再对操作分类单元进行生物多样性分析和测序深度检测。
1.5.6 免疫组化 将对照组、模型组、黄芩汤中剂量组小肠组织用体积分数10%甲醛固定并进行脱色、切片、冲洗后，应用体积分数3%H2O2孵育、山羊血清孵育20 min，然后先后用一抗(抗LC3B、Beclin1、P62鼠单克隆抗体，1∶100)、二抗(兔LC3B、Beclin1、P62多克隆抗体，1∶50)孵育，在DAB底物溶液中显色，显微镜下观察LC3B、Beclin1及P62表达，随机选择5个视野，计算阳性着色细胞及总细胞数，进行半定量分析。
1.5.7 免疫荧光 上述3组小肠组织石蜡切片脱蜡，二甲苯浸泡，乙醇梯度脱水，1% Triton X 100通透，体积分数3%山羊血清室温封闭，避光孵育一抗(抗LC3、Beclin1、P62鼠克隆单抗，1∶250)，DAPI染核，抗荧光淬灭封片液封固，荧光显微镜拍照后随机选择5个视野，计算阳性着色细胞及总细胞数，进行半定量分析。
1.5.8 透射电镜分析 上述3组小鼠小肠组织切成小块(1 mm3)，用2.5%戊二醛和丙酮酸钠固定24 h，PBS清洗后转至1%锇酸中后固定2 h，逐级丙酮脱水，Epon812包埋，超薄切片，透射电子显微镜观察。

1.5.9 聚合酶链式反应(PCR) 上述3组小肠组织加入液氮充分研磨后，添加Trizol进行匀浆，提取RNA，然后用Sparkjade反转录试剂盒反转录为cDNA，应用LightCycler 480实时PCR系统进行PCR扩增。引物从生工生物工程(上海)股份有限公司获得，引物序列见表3。

1.6 统计学分析 采用软件SPSS 26.0进行统计学分析，计量资料满足正态分布以x±s表示，采用方差分析，P < 0.05为差异有显著性意义。文章统计学方法经过山东中医药大学生物统计学专家审核。

讨论

肠道aGVHD的发生发展与炎性因子和自噬密切相关[16-17]。而炎性因子和自噬水平异常与肠道菌群失调有密切联系[18]，已有多项研究表明肠道aGVHD患者的疾病进展死亡率与肠道菌群中肠球菌的增加呈正相关[12-13]，一方面可能与脂多糖释放导致肿瘤坏死因子等炎性因子释放有很大关系[19]；另一方面是菌群互作角度，有研究显示异基因造血干细胞移植后肠球菌增殖抑制了梭状芽孢杆菌水平是aGVHD低存活率的重要原因[13，20-21]，而且梭状芽孢杆菌可以通过上调肠道的调节性T细胞来减轻肠道炎症[22]。

近年来，肠黏膜自噬在肠道aGVHD中的研究越来越多，有研究显示，靶组织中自噬的减少可加剧肠道 aGVHD[23]，另一项研究表明通过降低mTOR水平增加自噬，可促进巨噬细胞由M1向M2转化，进而减轻aGVHD[24]。菌群与自噬相互作用的研究日益密切[25]，这体现在肠道微生物群组成的改变会影响肠黏膜自噬，例如小鼠口服单一细菌可以调节肠道自噬[26]，应用药物可改变肠道微生物群，从而增加小鼠肠道黏膜中ATG16L1、IRGM1等自噬相关蛋白的表达[27]。同样，肠道自噬也可重塑肠道微生物群，有研究显示自噬基因Atg7缺乏的小鼠肠道微生物群组成发生了显著变化[24]。

黄芩汤出自中医四大经典之一的《伤寒杂病论》，原方用于治疗太阳与少阳合病的下利。近年来随着对黄芩汤研究的不断深入，其应用范围也被逐渐拓宽，尤其广泛应用于消化系统疾病如溃疡性结肠炎[28]、结直肠癌等疾病[29]，临床疗效较好。近年来，黄芩汤调控肠道菌群治疗各种肠炎的研究也逐渐增多[8，30]，也有研究表明中医药通过调控肠道菌群稳态和自噬治疗肠炎等疾病具有较好的疗效[31-33]，但尚未有研究从肠道菌群的角度探讨黄芩汤治疗肠道aGVHD的机制，为此，设计了这项研究。

该研究首先证实了黄芩汤能通过改善肠道aGVHD小鼠小肠黏膜结构等延长小鼠生存期，而后基于16S rRNA测序技术探索黄芩汤对肠道aGVHD小鼠肠道菌群的调节作用，相较于对照组，模型组小鼠肠道菌群的丰度、均匀度和多样性均明显下降，表明肠道aGVHD的疾病进展过程会伴随肠道菌群的失调，这与多位学者的研究结果相符[34-35]。而相较于模型组，黄芩汤能显著抑制肠球菌属的丰度，升高梭状芽孢杆菌的丰度(P < 0.05)。针对小肠黏膜炎性因子的检测显示，黄芩汤可以显著降低肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6水平；针对小肠黏膜自噬标志物LC3B、Beclin1及P62的免疫组化、免疫荧光及PCR检测显示，黄芩汤干预后自噬水平明显恢复，且在透射电镜下黄芩汤治疗后小肠黏膜的自噬泡数量显著增加。这表明黄芩汤可以通过调节肠道菌群降低炎症反应，同时通过促进自噬分解胞质中的陈旧性物质，从而减少小肠黏膜上皮细胞的死亡和脱落，缓解aGVHD的进程。

该研究证实黄芩汤通过抑制aGVHD有害菌群促进有益菌群，起到抗炎、促进自噬作用，从而干预肠道aGVHD的进程。另外，该研究测序首次发现Muribaculaceae_unclassified在肠道aGVHD小鼠中显著升高，经黄芩汤干预后显著降低，但具体机制目前尚不明确。Muribaculaceae_unclassified目前在溃疡性结肠炎、肥胖等疾病中研究较多[36]，但在肠道aGVHD中尚未见报道。既往认为该细菌属于有益菌，有抗炎作用[37]，这与该研究的结果不一致，可能与该细菌存在双向作用或存在不同亚型有关。课题组计划下一步开展粪菌移植等实验深入探讨Muribaculaceae_unclassified在aGVHD中的具体机制。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

黄芩汤调控肠道菌群治疗小鼠肠道急性移植物抗宿主病的机制

Mechanism by which Huangqintang regulates intestinal flora for treatment of intestinal acute graft-versus-host disease in mice

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