骨髓干细胞

    绝经后骨质疏松小鼠骨髓间充质干细胞免疫相关因子抗体芯片检测及 关键差异基因分析
  • 图2|绝经后骨质疏松小鼠模型的鉴定

    结果:建模术后12周,使用ELISA试剂盒检测假手术组与卵巢切除组血清雌二醇水平,见图2A,卵巢切除组小鼠血清雌二醇水平低于假手术组,差异有显著性意义(t=13.368,P < 0.001)。Micro CT扫描假手术组与卵巢切除组小鼠的股骨并进行形态学分析,见图2B-D,结果显示与假手术组相比,卵巢切除组骨小梁数目(Tb.N,t=5.188,P=0.003)、骨小梁厚度(Tb.Th,t=5.124,P=0.003)与骨体积分数(BV/TV,t=4.677,P=0.005)均显著低于假手术组,而卵巢切除组骨表面积体积比(BS/BV,t=5.650,P=0.002)及骨小梁间隙(Tb.Sp,t=12.779,P < 0.001)均显著高于假手术组,表明卵巢切除组小鼠存在明显的骨质疏松样改变。

    图3|假手术组和卵巢切除组小鼠骨髓间充质干细胞培养光学显微镜图

    结果:经全骨髓贴壁法培养后,在光学显微镜下观察两组BMSCs的生长情况及细胞形态,可见两组 BMSCs均能贴壁生长,呈梭形或扁平多角形,具有间充质干细胞形态特征,见图3

    图5|两组小鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导及成脂诱导后染色图

    结果:卵巢切除组和假手术组BMSCs成骨诱导21 d后行茜素红染色,光学显微镜下可见两组BMSCs均有钙化结节的产生,见图5A,具有成骨分化潜能。卵巢切除组和假手术组BMSCs成脂诱导14 d后行油红O染色,光学显微镜下可见两组BMSCs均有脂滴的产生,见图5B,具有成脂分化潜能。两组BMSCs均符合骨髓间充质干细胞特性。

    图6|抗体芯片检测结果

    结果:通过细胞因子抗体芯片检测假手术组和卵巢切除组中存在差异表达的蛋白,荧光检测后获得荧光扫描图,见图6A。以卵巢切除组的蛋白表达量与假手术组的蛋白表达量的比值作为差异倍数。其中上调组需满足FC≥1.3且 P值< 0.05;下调组需满足FC≤0.7且P值< 0.05。差异蛋白聚类热力图与火山图揭示两组样本中存在明显差异表达且具有统计学意义的蛋白,见图6B,C。结果显示,与假手术组相比,卵巢切除组中表达上调的蛋白有3个,分别是Gremlin,GHR,Ax1;下调的有VE-Cadherin,M-CSF,Prolactin,IL-16,CXCL5,TNF-beta/TNFSF1B,IFN-gamma R1,VEGF-D,Soggy-1等65个蛋白。


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  • 发布日期: 2023-11-24  浏览: 56