脂肪干细胞
-
图1｜骨质疏松症大鼠模型的鉴定
结果：micro-CT结果显示，与假手术组相比，骨质疏松症组大鼠骨小梁明显减少，骨密度明显降低；横断面可见明显骨髓空腔。骨形态学指标显示，与假手术组相比，骨质疏松症组骨小梁厚度、骨小梁数目、骨体积分数明显减小，骨小梁间距明显增大(均P < 0.05)。苏木精-伊红染色结果显示，假手术组骨小梁完整，骨髓腔较小，骨量较多；而骨质疏松症组骨小梁较稀疏，骨髓腔较大，骨量较少，说明骨质疏松症组大鼠骨质疏松严重，见图1。
图2｜脂肪间充质干细胞(ADSCs)的形态观察和鉴定
结果：第3代ADSCs呈漩涡状排列，细胞呈长梭形，形态趋于一致。碱性磷酸酶染色可见蓝紫色染色结节，茜素红染色可见橙红色钙化结节，油红O染色可见红色融合变大的脂滴；ADSCs表面标志物CD90(99.1%)和CD105(99.9%)呈阳性表达，造血干细胞标记物CD34(1.0%)和CD45(1.1%)呈阴性表达，见图2。
图3｜脂肪间充质干细胞(ADSCs)转染效果
结果：BMP2/ADSCs组转染效率达到70%以上。Western blot结果显示，与ADSCs组相比，BMP2/ADSCs组BMP2蛋白水平明显升高(P < 0.05)，说明转染成功，见图3。
图4｜过表达骨形态发生蛋白2(BMP2)的脂肪间充质干细胞(ADSCs)对骨质疏松症大鼠颌骨缺损的修复作用
结果：micro-CT结果显示，各组大鼠上颌骨缺损体积随时间推移均变小；骨缺损体积由小到大排列为假手术组、BMP2/ADSCs组、ADSCs组和骨质疏松症组。骨形态学指标显示，与假手术组相比，骨质疏松症组、ADSCs组和BMP2/ADSCs组骨小梁间距明显增加，骨体积分数明显减小；与骨质疏松症组相比，ADSCs组和BMP2/ADSCs组骨小梁间距明显减小，骨体积分数明显增加；与ADSCs组相比，BMP2/ADSCs组骨小梁间距明显减小，骨体积分数明显增加(均P < 0.05)。苏木精-伊红染色结果显示，假手术组骨缺损区可见大量新骨及血管生成，成骨细胞活跃，新骨结构类似板层骨，已存在部分骨性连接；骨质疏松症组骨缺损区仅可见少量新生骨质，纤维结缔组织丰富，与周边骨交界明显；ADSCs组骨缺损区可见明显新骨生成，纤维组织较多，新生骨结构较紊乱，无明显骨连接；BMP2/ADSCs组骨缺损区可见大量新骨和部分血管生成，成骨细胞充盈，但新骨结构较紊乱，存在骨与类骨连接形式。与假手术组相比，骨质疏松症组、ADSCs组和BMP2/ADSCs组的组织学评分明显降低，新骨面积明显减小；与骨质疏松症组相比，ADSCs组和BMP2/ADSCs组的组织学评分明显升高，新骨面积明显增加；与ADSCs组相比，BMP2/ADSCs组的组织学评分明显升高，新骨面积明显增加(均P < 0.05)，见图4。
图5｜过表达骨形态发生蛋白2(BMP2)的脂肪间充质干细胞(ADSCs)对骨质疏松症大鼠牙槽骨成骨相关基因表达的影响
结果：免疫组化染色结果显示，与假手术组相比，骨质疏松症组、ADSCs组碱性磷酸酶、骨钙素、BMP2的平均吸光度值明显降低；BMP2/ADSCs组碱性磷酸酶、骨钙素的平均吸光度值明显降低，BMP2的平均吸光度值明显升高。与骨质疏松症组相比，ADSCs组和BMP2/ADSCs组碱性磷酸酶、骨钙素及BMP2的平均吸光度值明显升高；与ADSCs组相比，BMP2/ADSCs组碱性磷酸酶、骨钙素及BMP2的平均吸光度值明显升高(均P < 0.05)。RT-qPCR和Western blot检测结果也显示，与假手术组相比，骨质疏松症组、ADSCs组碱性磷酸酶、骨钙素、BMP2 mRNA和蛋白水平明显降低；BMP2/ADSCs组碱性磷酸酶、骨钙素 mRNA和蛋白水平明显降低，BMP2 mRNA和蛋白水平明显升高；与骨质疏松症组相比，ADSCs组和BMP2/ADSCs组碱性磷酸酶、骨钙素及BMP2 mRNA和蛋白水平明显升高；与ADSCs组相比，BMP2/ADSCs组碱性磷酸酶、骨钙素及BMP2 mRNA和蛋白水平明显升高(均P < 0.05)。见图5。