其他干细胞
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图1｜人诱导多能干细胞表型鉴定
结果：免疫荧光对人诱导多能干细胞干性标记物进行检测，荧光图片显示人诱导多能干细胞特异核转录因子OCT4和NANOG在细胞核高水平特异表达，人诱导多能干细胞特异膜蛋白SSEA4在细胞膜高水平特异表达。诱导多能干细胞增殖标记物Ki67特异且强阳性定位在细胞核中。上述结果均符合人诱导多能干细胞特征，见图1。
图3｜在人诱导多能干细胞不同分化阶段动态观察细胞形态变化
结果：明场显微镜下观察显示，随着分化进展，细胞形态经历了上皮到间充质样再到上皮样特征转变过程，具体表现为第0天的经典上皮样人诱导多能干细胞形态特征且细胞呈紧密连接样，2 d后的心脏内胚层细胞则呈现出经典的间充质样特征，细胞呈现单细胞弥散分布。经过消化再接种即第7天的细胞又展现出经典的上皮样内皮细胞特征，细胞呈多边形，细胞边缘呈锯齿状且相互嵌合。上述结果初步提示内皮细胞分化成功。见图3。
图5｜免疫荧光在蛋白水平验证内皮细胞特异标记物
结果：在第2，5，7，12天分别检测心脏中胚层标记物(TBX5)、内皮前体细胞标记物(CD34)、内皮细胞膜特异标记物(VE-Cadherin、CD31)，结果显示TBX5强阳性且特异定位于细胞核中，而CD34信号则以细胞膜为主，同时胞浆也有表达；内皮细胞标记物VE-Cadherin和CD31二者信号均特异定位在细胞膜上。此外，VE-Cadherin在2个时间节点表达丰度无明显变化，而与第7天相比，CD31蛋白水平在第12天呈现显著上调，提示内皮细胞进一步成熟。上述结果在蛋白水平证实了人诱导多能干细胞经历了心脏中胚层、内皮前体细胞并最终向内皮细胞成功定向分化。见图5。
图6｜利用血管成环实验评价分化内皮细胞的血管生成功能
结果：血管形成能力是内皮细胞重要且特异的细胞功能之一，取分化后第15天的细胞进行血管成环实验，结果显示分化的内皮细胞具备较好的体外血管成环能力，并且其成环能力对血管内皮生长因子呈现浓度依赖效应。见图6。