其他干细胞

    一种同时培养原代皮质及海马神经元的实验方法
  • 图2|SD大鼠皮质神经元在倒置显微镜下图像


    图3|SD大鼠海马神经元在倒置显微镜下图像

    结果:接种24 h后,细胞体积变清晰,呈不规则圆形,周围环绕光晕,少数细胞已有细小突起,均已贴壁生长。持续培养3 d后,胞体逐步增大,部分呈聚团性生长,突触延长,细胞间出现交联。继续培养至7 d后,胞体成熟饱满,细胞质显著增多,光晕细胞间形成神经网络联系,细胞聚集明显,见图23


    图4|皮质神经元β-Tubulin免疫荧光鉴定

    结果:倒置荧光显微镜观察显示,细胞胞体和突触均能被β-Tubulin抗体所标记,证明此细胞为神经元细胞,见图4


    图5|皮质神经元Neun免疫组化染色(×400)

    结果:Neun免疫组化染色结果表明,培养细胞均显棕色,染色呈阳性,证明提取培养细胞是神经元细胞,见图5


    图6|皮质神经元的MAP2免疫荧光鉴定

    结果:免疫荧光染色可见神经元胞体及树突着色,结果显示,经MAP2鉴定得到神经元纯度为(94.00±0.34)%,见图6


    图7|海马神经元的MAP2免疫荧光鉴定

    结果:免疫荧光染色可见神经元胞体及树突着色,结果显示,经MAP2鉴定得到神经元纯度为(91.00±0.26)%,见图7


    图8|海马神经元的Neun免疫荧光鉴定

    结果:Neun免疫荧光染色结果表明,培养7 d海马神经元胞核染色明显,证明提取培养细胞是神经元细胞,见图8


  • 发布日期: 2022-08-05  浏览: 967