牙髓干细胞

    流体静水压力对牙髓干细胞成牙/成骨分化的影响
  • 图 1 |牙髓干细胞形态及多向分化能力

    结果:  利用组织块酶消化法成功分离培养牙髓干细胞,第5天可在镜下观察到组织块周围有长梭形细胞贴壁生长,大小、形态较均一,见图1A;10 d左右,可见牙髓干细胞呈集落生长,排列成团块或漩涡状,见图1B;当细胞融合至80%以上,通过0.25%胰酶消化传代并扩大培养。 体外成骨诱导培养2周进行茜素红染色,显微镜下观察可见牙髓干细胞排列紧密,细胞间有大量呈现团块状的红褐色钙化结节,见图1C;体外成脂诱导培养3周进行油红O染色,显微镜下可见细胞间染成红色且发亮的脂滴,见图1D

    图 2 |流式细胞仪分析牙髓干细胞表面抗原

    结果:流式细胞仪检测分析牙髓干细胞中CD29、CD90、CD105、CD146高表达,而CD34和CD45近乎不表达,见图2

    图 4 |各组牙髓干细胞茜素红染色及定量分析

    结果: 使用不同压力值的流体静水压矿化诱导14 d后,茜素红染色及定量分析结果显示:流体静水压力均明显抑制牙髓干细胞成牙/成骨向分化能力(P < 0.05),其中120 kPa流体静水压的抑制作用最为显著,见图4

    图 5 |各组牙髓干细胞成牙 / 成骨分化相关蛋白的表达



    结果:进一步通过Western blot观察成牙/成骨分化相关基因的表达,结果显示:在流体静水压力刺激下牙本质涎磷蛋白、骨钙素与Ⅰ型胶原的表达显著降低(P < 0.05),见图5,与茜素红染色结果一致。

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  • 发布日期: 2021-05-11  浏览: 634