干扰和过表达端粒酶卡哈尔体蛋白1小鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性对比

doi:10.12307/2025.686

中国组织工程研究 ›› 2025, Vol. 29 ›› Issue (31): 6616-6624.doi: 10.12307/2025.686

• 骨髓干细胞 bone marrow stem cells • 上一篇下一篇

干扰和过表达端粒酶卡哈尔体蛋白1小鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性对比

林书倩1，2，3，赵玺龙1，2，3，高景1，2，3，潘兴华1，2，3，李自安1，2，3，阮光萍1，2，3

1解放军联勤保障部队第九二〇医院基础医学实验室，云南省昆明市 650032；2干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程研究中心，云南省昆明市 650032；3云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室，云南省昆明市 650032

收稿日期:2024-07-08 接受日期:2024-08-27 出版日期:2025-11-08 发布日期:2025-02-18
通讯作者: 阮光萍，博士，副主任医师，解放军联勤保障部队第九二〇医院基础医学实验室，云南省昆明市 650032；干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程研究中心，云南省昆明市 650032；云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室，云南省昆明市 650032
作者简介:林书倩，女，1998年生，河南省南阳市人，汉族，昆明医科大学在读硕士，技师，主要从事细胞衰老的研究。
基金资助:
云南省科技计划项目重大科技专项(2018ZF007)，项目负责人：潘兴华；云南省重点项目资助课题(202101AS070039)，项目负责人：阮光萍

Comparison of biological characteristics of mouse bone marrow mesenchymal stem cells after interference and overexpression of telomere Cajal body protein-1

Lin Shuqian1, 2, 3, Zhao Xilong1, 2, 3, Gao Jing1, 2, 3, Pan Xinghua1, 2, 3, Li Zian1, 2, 3, Ruan Guangping1, 2, 3

1Basic Medical Laboratory of 920 Hospital of Joint Logistics Support Force of Chinese PLA, Kunming 650032, Yunnan Province, China; 2Integrated Engineering Research Center of Cell Biological Medicine of State and Regions, Kunming 650032, Yunnan Province, China; 3Transfer Medicine Key Laboratory of Cell Therapy Technology of Yunnan Province, Kunming 650032, Yunnan Province, China

Received:2024-07-08 Accepted:2024-08-27 Online:2025-11-08 Published:2025-02-18
Contact: Ruan Guangping, MD, Associate chief physician, Basic Medical Laboratory of 920 Hospital of Joint Logistics Support Force of Chinese PLA, Kunming 650032, Yunnan Province, China; Integrated Engineering Research Center of Cell Biological Medicine of State and Regions, Kunming 650032, Yunnan Province, China; Transfer Medicine Key Laboratory of Cell Therapy Technology of Yunnan Province, Kunming 650032, Yunnan Province, China
About author:Lin Shuqian, Master candidate, Technician, Basic Medical Laboratory of 920 Hospital of Joint Logistics Support Force of Chinese PLA, Kunming 650032, Yunnan Province, China; Integrated Engineering Research Center of Cell Biological Medicine of State and Regions, Kunming 650032, Yunnan Province, China; Transfer Medicine Key Laboratory of Cell Therapy Technology of Yunnan Province, Kunming 650032, Yunnan Province, China
Supported by:
Major Science and Technology Project of Yunnan Science and Technology Plan Project, No. 2018ZF007 (to PXH); Key Project of Yunnan Province Applied Basic Research Program, No. 202101AS070039 (to RGP)

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：

端粒酶卡哈尔体蛋白1：是近年来发现的与细胞寿命息息相关的一种新型蛋白，是端粒酶的关键核心蛋白，在调节端粒酶活性与延长端粒长度方面发挥着重要的作用。端粒酶卡哈尔体蛋白1也被证实与肿瘤的发病和预后有关。大量研究表明在多种类型的癌症中均发现端粒酶卡哈尔体蛋白1上调的现象，端粒酶卡哈尔体蛋白1表达量上升增强了细胞的增殖、分化以及侵袭、迁移的能力，使肿瘤细胞的转移能力增强。
骨髓间充质干细胞：间充质干细胞最初是一类成纤维细胞样细胞，易于贴附于塑料培养板表面，在机体内间充质干细胞存在于骨髓、胎盘、脐带、羊膜、脂肪等组织中，尤以骨髓中数量较多、分化能力最强。目前发现骨髓间充质干细胞具有向骨、软骨、脂肪、肌肉、肌腱、神经等组织分化的潜能。骨髓间充质干细胞在组织损伤及退行性病变的治疗中前景巨大。

摘要
背景：随着年龄的增长，骨髓间充质干细胞的功能逐渐降低，延缓骨髓间充质干细胞自身衰老成为一项重要课题。
目的：通过改变端粒酶卡哈尔体蛋白1(telomerase cajal body protein 1，TCAB1)基因的表达，探讨延缓骨髓间充质干细胞衰老的途径。
方法：细胞贴壁法培养小鼠骨髓间充质干细胞，应用重组慢病毒技术过表达或干扰骨髓间充质干细胞中的TCAB1基因，采用qPCR检测衰老相关基因P16、P21、P53、P27的表达，qPCR检测Telomere的表达判断端粒的相对长度；Western blot检测衰老蛋白P16、P21、P53、P27的表达；CCK-8法检测细胞增殖情况；Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡试剂盒检测细胞凋亡情况。
结果与结论：过表达TCAB1基因骨髓间充质干细胞中衰老相关基因及蛋白的表达量下降，端粒相对长度增加，细胞增殖能力较强，细胞凋亡数量较少，细胞呈现年轻状态；干扰TCAB1基因骨髓间充质干细胞中衰老相关基因及蛋白的表达量上升，端粒相对长度缩短，细胞增殖能力较弱，细胞凋亡数量较多，细胞呈现衰老状态。以上结果表明，在适当范围内增加TCAB1的表达量，可以延缓细胞衰老的速度。

https://orcid.org/0000-0002-1485-298X(林书倩)；https://orcid.org/0000-0002-3784-7040(阮光萍)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

关键词: 骨髓间充质干细胞, 端粒酶卡哈尔体蛋白1, 衰老, 过表达, 干扰, 细胞增殖, 细胞凋亡, 工程化干细胞

Abstract: BACKGROUND: With the increase of age, the function of bone marrow-derived mesenchymal stem cells is gradually reduced, and delaying the aging of bone marrow-derived mesenchymal stem cells itself has become an important topic.
OBJECTIVE: To explore ways to delay the aging of bone marrow-derived mesenchymal stem cells by changing the expression of telomerase Cajal body protein 1 (TCAB1) gene.
METHODS: Mouse bone marrow-derived mesenchymal stem cells were cultured by cell adhesion method. TCAB1 gene in bone marrow-derived mesenchymal stem cells was overexpressed and interfered by recombinant lentivirus technique. The expression of aging related genes P16, P21, P53, and P27 was detected by qPCR. The relative length of telomeres was detected by qPCR. The expression of aging proteins P16, P21, P53, and P27 was detected by western blot assay. Cell proliferation was detected by CCK-8 assay. Annexin V-PE/7-AAD apoptosis kit was used to detect the degree of cell apoptosis.
RESULTS AND CONCLUSION: Bone marrow-derived mesenchymal stem cell lines overexpressing TCAB1 gene had decreased expression of senescence related genes and proteins, increased Telomere relative length, stronger cell proliferation, less apoptosis, and a youthful state. The expression of age-related genes and proteins in bone marrow mesenchymal stem cells interfering with TCAB1 gene increased, and the relative telomere length decreased; cell proliferation ability was weak; cell apoptosis was more, and cells showed senescence. These results indicate that increasing the expression of TCAB1 in an appropriate range can delay the rate of cell senescence.

Key words: bone marrow mesenchymal stem cell, telomerase Cajal body protein 1, aging, overexpression, interference, cell proliferation, cell apoptosis, engineered stem cell

中图分类号:

林书倩, 赵玺龙, 高景, 潘兴华, 李自安, 阮光萍. 干扰和过表达端粒酶卡哈尔体蛋白1小鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性对比[J]. 中国组织工程研究, 2025, 29(31): 6616-6624.

Lin Shuqian, Zhao Xilong, Gao Jing, Pan Xinghua, Li Zian, Ruan Guangping. Comparison of biological characteristics of mouse bone marrow mesenchymal stem cells after interference and overexpression of telomere Cajal body protein-1[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2025, 29(31): 6616-6624.

图/表（结果） 7

2.1 小鼠骨髓间充质干细胞形态 骨髓液离心收集沉淀，放入培养瓶中培养，在显微镜下观察发现细胞数量繁多且悬浮在培养瓶中，见图1A；24 h换液，观察到贴壁细胞；第7天发现大量梭形的贴壁细胞，呈集落样生长，汇合度达到80%-90%，可按照1∶2进行传代，见图1B。

2.2 小鼠骨髓间充质干细胞表型鉴定 流式细胞术检测细胞表面标志物的表达：CD11b阳性率为0.044%、CD29阳性率为99.8%、CD45阳性率为0.51%、CD90阳性率为90.3%，见图2。

2.3 过表达TCAB1细胞株
2.3.1 目的基因扩增 以骨髓间充质干细胞的总RNA为模板，设计引物，扩增TCAB1序列，可在目的基因大小处观察到条带，达到扩增所需基因的目的，见图3。
2.3.2 序列比对 电泳回收的片段基因与EcoRI和BamHI双酶切的线性化载体重组，同源重组的产物转入感受态细胞中，挑选单个菌落溶于菌液中，摇床扩增后进行测序，测序结果与目的基因的序列比对一致，见图4。
2.3.3 双酶切质粒电泳 测序一致的菌落可提取质粒，EcoRI和BamHI酶切后，用琼脂糖凝胶跑电泳，与未被酶切的结果相比，双酶切质粒的大片段与空载体大小相近，小片段在1 000-2 000 bp之间，符合目的基因大小，过表达载体构建成功，见图5。
2.3.4 TCAB1在骨髓间充质干细胞中的过表达效率 普通显微镜下观察细胞贴壁、梭形、漩涡状生长，见图6A。荧光显微镜可观察到较多被标记的绿色荧光，见图6B。qPCR检测细胞中TCAB1基因的表达量，与OE-NC组相比，OE-TCAB1组TCAB1基因的表达量明显上升，差异有显著性意义(P < 0.001)，见图6C。
2.4 干扰TCAB1细胞株
2.4.1 重组质粒序列比对 干扰序列梯度退火，得到退火产物，载体进行双酶切获得线性化载体。在T4连接酶的作用下同源重组，得到的产物转入感受态细胞中，挑选单个菌落溶于菌液，摇床扩增后进行测序，测序结果与目的序列比对一致，见图7。

2.4.2 TCAB1在骨髓间充质干细胞中的干扰效率 普通显微镜下观察细胞贴壁、呈梭形、漩涡状生长，见图8A。荧光显微镜可观察到较多被标记的绿色荧光，见图8B。qPCR检测细胞中TCAB1基因的表达量，与Sh-NC组相比，Sh-TCAB1组TCAB1基因的表达量明显下降，差异有显著性意义(P < 0.001)，见图8C。

2.5 衰老相关基因表达 与Sh-NC组相比，Sh-TCAB1组P16、P21、P53、P27表达上升，TCAB1表达下降，但P16、P21变化差异不大，无统计学意义；P53、P27、TCAB1变化差异较大，有统计学意义(P < 0.05，P < 0.01，P < 0.001)。与OE-NC组相比，OE-TCAB1组P16、P21、P53、P27表达下降，TCAB1表达上升，均有统计学意义(P < 0.05，P < 0.01)，见图9。
2.6 衰老相关蛋白表达 与Sh-NC组相比，Sh-TCAB1组P16、P21、P53、P27蛋白表达上升，TCAB1蛋白表达下降，差异有显著性意义(P < 0.05，P < 0.000 1)。与OE-NC组相比，OE-TCAB1组P16、P21、P53、P27蛋白表达下降，TCAB1蛋白表达上升，差异有显著性意义(P < 0.001，P < 0.000 1)，见图10。

2.7 细胞增殖能力 与Sh-NC组相比，Sh-TCAB1组细胞增殖速度较慢，在24 h后明显下降，差异有显著性意义(P < 0.000 1)。与OE-NC组相比，OE-TCAB1组细胞增殖速度较快，在72 h后上升明显，差异有显著性意义(P < 0.000 1)，见图11。

2.8 细胞凋亡情况 与Sh-NC组比较，Sh-TCAB1组细胞凋亡率升高，差异有显著性意义(P < 0.000 1)。与OE-NC组比较，OE-TCAB1组细胞凋亡率降低，差异有显著性意义(P < 0.000 1)，见图12。
2.9 细胞端粒长度 与Sh-NC组相比，Sh-TCAB1组Telomere表达下降(P < 0.000 1)，端粒长度明显缩短；与OE-NC组相比，OE-TCAB1组Telomere表达升高(P < 0.000 1)，端粒长度明显增长，见图13。

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引言

材料方法

1.1 设计 细胞学体外实验。
1.2 时间及地点 实验于2022年1月至2024年6月在解放军联勤保障部队第九二〇医院基础医学实验室完成。
1.3 材料
1.3.1 实验动物 雌性C57小鼠购买于斯贝福(北京)生物技术有限公司，许可证号：SCXK(京)2019-0010，6-8周龄，体质量22-24 g，饲养于中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院基础医学实验室动物中心，屏障环境饲养，环境卫生清洁。实验方案经中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院实验动物伦理委员会批准，审批号为2019-002(科)-01。实验过程遵循了国际兽医学编辑协会《关于动物伦理与福利的作者指南共识》和本地及国家法规。实验动物在麻醉下进行所有的手术，并最大限度地减少其疼痛、痛苦和死亡。
1.3.2 主要试剂和仪器 DMEM/F12培养基、胎牛血清(以色列BI公司)；TCAB1、P16、P21、P27及P53一抗(Proteintech公司)；二抗(Servicebio公司)；质粒提取试剂盒(Omega公司)；CCK-8试剂盒(日本同仁公司)；Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒(Elabscience公司)；BCA蛋白定量检测试剂盒(碧云天公司)；SolutionⅠ/SolutionⅡ(曝光液)(Affinity公司)；RNA提取试剂盒(Promega公司)；反转录试剂盒(Servicebio公司)；定量PCR mix(Promega公司)；CO2细胞培养箱(德国Eppendorf公司)；百级层流超净工作台(苏州佳宝公司)；-80 ℃超低温冰箱(青岛海尔公司)；离心机(上海安亭仪器厂)；液氮罐(四川西亚公司)；流式细胞仪(美国BD公司)。
1.4 实验方法
1.4.1 骨髓间充质干细胞的分离、培养及鉴定 颈椎脱臼法处死C57小鼠，无菌取两侧股骨，用含双抗的PBS浸泡股骨，反复冲洗3次，用1 mL注射器抽取PBS冲洗骨髓腔，将骨髓冲洗液离心，收集沉淀，使用含体积分数10%胎牛血清的DMEM/F12培养基重悬混匀后接种于T25培养瓶内，置于37 ℃、体积分数5% CO2培养箱中培养，24 h后半量换液，继续培养并观察细胞状态，待细胞汇合度达到80%-90%即可传代。流式细胞术检测第3代细胞表面CD11b、CD29、CD45及CD90的表达。
1.4.2 构建过表达TCAB1的载体 设计TCAB1过表达引物序列(5’-3’)：primer-F：tcg agc tca agc ttc gaa ttc ATG AAG ACG TCG GAG GAG CG ；primer-R：atg gtg cgg ccg cgt gga tcc TTA ACT CAT CCC CAC AGC CTC T。目的序列进行PCR电泳实验获得目的条带进行胶回收，获得产物。将胶回收产物与线性化载体同源重组，构建过表达质粒。质粒转入感受态细胞中，取单个生长的阳性菌落测序。
1.4.3 构建干扰TCAB1的载体 设计TCAB1干扰引物序列(5’-3’)：Primer-F：GAT CGG ATA TCA GTG GAG CTC TTA GTT CAA GAG ACT AAG AGC TCC ACT GAT ATC CTT TTT TG；Primer-R： AAT TCA AAA AAG GAT ATC AGT GGA GCT CTT AGT CTC TTG AAC TAA GAG CTC CAC TGA TAT CC。引物序列按照95-55 ℃，每分钟降温5 ℃进行退火，获得退火产物。将退火产物与线性化载体同源重组，构建干扰质粒。质粒转入感受态细胞中，取单个生长的阳性菌落测序。
1.4.4 慢病毒包装 DMEM/F12培养基培养293T细胞，转染前1 d，胰蛋白酶消化细胞后以5×106个密度接种于2个10 cm培养皿。次日，取2个灭菌EP管，其中一管加入5 μg过表达重组质粒、3.75 μg pHelper1质粒、1.25 μg pHelper2质粒，另一管加入5 μg 干扰重组质粒、3.75 μg pHelper1质粒、1.25 μg pHelper2质粒，每个Ep管中再加入PEI转染试剂和DMEM/F12培养基混合至总体积为1 mL，在室温下孵育15 min。将1 mL 转染混合液逐滴加入接种293T细胞的2个细胞培养皿中，做好标记，37 ℃培养4-6 h后，更换10 mL新鲜DMEM/F12 培养基。转染24 h后，用10 mL含病毒的培养基换液。转染48 h收集细胞培养上清，4 ℃、4 000×g离心10 min，上清液用0.45 μm滤器过滤后4 000×g离心15 min，上清液分装后-80 ℃保存。经检测，获得效价为107-108的病毒悬液，用于细胞转染。
1.4.5 慢病毒转染骨髓间充质干细胞 慢病毒感染前18-24 h，将第3代骨髓间充质干细胞以3×105/孔密度铺到6孔板中，使细胞在慢病毒转染时的数量为6×105/孔左右；待细胞贴壁融合度为70%时，用含10 μg/mL Polybrene的2 mL新鲜DMEM/F12培养基替换原培养基，加入5 μL慢病毒悬液，37 ℃继续培养8 h，用新鲜DMEM/F12培养基替换含有病毒的培养基，荧光显微镜观察标记细胞克隆生长情况，选择细胞状态好、荧光强度较强的克隆逐级扩大培养。

1.4.6 定量PCR方法检测衰老相关基因表达 TRIzol法提取正常组、Sh-NC组、Sh-TCAB1组、OE-NC组、OE-TCAB1组骨髓间充质干细胞的总RNA，测RNA浓度后进行反转录：37 ℃ 15 min；98 ℃ 5 min；4 ℃终止反应，目的片段产物进行扩增反应检测P16、P21、P27及P53的基因表达： 95 ℃预变性2 min；95 ℃变性30 s；60 ℃退火50 s；72 ℃延伸1 min；72 ℃终延伸5 min，进行40个循环后结束反应。采用2-ΔΔCt法对mRNA水平进行相对定量分析。各基因引物序列见表1。

1.4.7 Western blot检测衰老相关蛋白表达 将RIPA裂解液100 μL加入到6孔板中，反复吹打，提取正常组、Sh-NC组、Sh-TCAB1组、OE-NC组、OE-TCAB1组骨髓间充质干细胞总蛋白，用BCA方法测量蛋白浓度，上样蛋白煮沸10 min，让蛋白变性，使用SDS-PAGE凝胶电泳法对各组蛋白进行电泳，使用湿转法将蛋白转至PVDF膜，用5% BSA进行封闭，用P16、P21、P53、P27、TCAB1、β-actin一抗(1∶2 000)4 ℃孵育过夜，次日室温孵育对应二抗(1∶3 000)，使用凝胶成像仪进行化学成像，使用Image J软件进行灰度值分析。
1.4.8 CCK-8法检测细胞增殖 将正常组、Sh-NC组、Sh-TCAB1组、OE-NC组、OE-TCAB1组骨髓间充质干细胞浓度调整为1×108 L-1，接种于96孔板中，每孔100 μL，每组设置3个复孔。将96培养板放入培养箱中培养，待细胞稳定贴壁后取出培养板，每孔加入10 μL CCK-8试剂，轻轻晃动混匀液体，在培养箱中孵育1-4 h，使用酶标仪在450 nm处测定吸光度值。
1.4.9 流式标记法检测细胞凋亡情况 正常组、Sh-NC组、Sh-TCAB1组、OE-NC组、OE-TCAB1组骨髓间充质干细胞以5×105/孔密度接种在6孔板中，第2天贴壁细胞消化离心，收集细胞沉淀，PBS清洗2次，加入100 μL 1×Binding Buffer结合液悬浮细胞，然后在细胞悬液中加入5 μL Annexin V-APC染色液，轻轻混匀，2-8 ℃避光孵育5-10 min，再加入5-10 μL 7-ADD染色液轻轻混匀，2-8 ℃避光孵育1-3 min，最后加入400 μL 1×Binding Buffer混匀，立即上流式细胞仪检测，用Folwjo软件获取结果，统计活细胞、早期凋亡细胞、晚期凋亡细胞和死细胞比例。
1.4.10 定量PCR检测端粒相对长度 分别设计端粒和内参36B4的引物(表1)，根据Ct值计算端粒的相对长度。
1.5 主要观察指标 衰老相关基因、蛋白的相对变化量，细胞增殖和凋亡变化，端粒相对长度。
1.6 统计学分析 通过SPSS 17.0软件进行统计分析，实验数据以x±s表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差(One-Way ANOVA)分析。以P < 0.05为差异有显著性意义。文章统计学方法已经通过解放军联勤保障部队第九二〇医院生物统计学专家审核。

讨论

TCAB1作为端粒合成过程中的一种重要蛋白[12]，能够通过调节端粒长度的变化保护细胞免受损伤[13]，与细胞寿命息息相关。目前，研究表明TCAB1在多种肿瘤中表达量异常增加[14]，导致细胞不受体内凋亡机制的控制，细胞异常增殖转变为肿瘤细胞，在这些肿瘤细胞中调低TCAB1的表达，反而会终止细胞的异常增殖[15]，TCAB1的表达失控无疑是让肿瘤细胞寿命增长的一个因素，若是在正常骨髓间充质干细胞中上调该基因的表达，是否能够在一定范围内提高体内细胞更新换代的速度，快速补充新鲜细胞，替换组织器官中的衰老、损伤细胞，减慢体内组织器官衰老的速度，达到延缓细胞衰老的目的。
调控细胞生长过程中的关键基因是研究细胞状态以及寿命的重要手段[16-17]，对于骨髓间充质干细胞来说，若是能够在一定范围内调控细胞增殖关键基因的表达量，达到恢复细胞功能以及延长细胞寿命的效果，可能会让细胞发挥出更大的功能[18]。目前，调控基因表达的技术有CRISPR-Cas9基因编辑技术[19-20]、RNA干扰技术和表观遗传学技术等多种技术手段[21-22]，实验之所以选择慢病毒载体转染是因为此方法获得的稳转株类型可以在相当长的时间内保持稳定特性[23-24]，可以支持后续实验的开展[25-26]。过表达以及干扰的目的基因片段与线性化载体同源重组，产物转入感受态细胞中获得测序一致的阳性质粒，293T细胞培养获得病毒上清[27]，从而过表达和干扰骨髓间充质干细胞中TCAB1基因的表达，获得稳定传代的过表达株与干扰株，是改变细胞内基因表达的常用技术手段[28]。
实验结果显示，在正常骨髓间充质干细胞中过表达TCAB1，衰老相关基因P16、P21、P53、P27的表达量下降，细胞有恢复年轻状态的趋势；干扰TCAB1的表达，衰老相关基因P16、P21、P53、P27的表达量增加，细胞有朝衰老方向发展的趋势，说明在一定范围内提高TCAB1基因的表达量，有延缓细胞衰老的作用，但由于衰老基因同时也是体内的抑癌基因[29-30]，从实验结果来看，细胞并没有发生癌变，只是端粒相对长度变长。过表达TCAB1抑癌基因被下调后，是否会引起致瘤的风险，还有待深入研究。实验没有检测改变TCAB1表达后骨髓间充质干细胞的分化潜能，具体变化还有待深入研究。
虽然实验发现了TCAB1能够改善细胞活性，但基于肿瘤细胞中TCAB1过表达以及抑制抑癌基因表达的现象[31-33]，如何在正常细胞中把握TCAB1的过表达量尚未有准确的方法，需要更多的实验探索TCAB1延缓细胞衰老的内在机制，才能够使这种作用在临床上发挥更大的用途。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

干扰和过表达端粒酶卡哈尔体蛋白1小鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性对比

Comparison of biological characteristics of mouse bone marrow mesenchymal stem cells after interference and overexpression of telomere Cajal body protein-1

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