深圳市青年同型半胱氨酸及其他临床指标与MTHFR C677T基因的多态性

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2014.42.027

中国组织工程研究 ›› 2014, Vol. 18 ›› Issue (42): 6871-6877.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.42.027

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深圳市青年同型半胱氨酸及其他临床指标与MTHFR C677T基因的多态性

毕佳佳，张思韵，罗雯媛，关幸求

北京大学深圳医院神经内科，广东省深圳市 518036

修回日期:2014-07-21 出版日期:2014-10-08 发布日期:2014-10-08
通讯作者: 罗雯媛，副主任医师，北京大学深圳医院神经内科，广东省深圳市 518036
作者简介:毕佳佳，女，1987年生,北京大学医学部在读硕士，主要从事脑血管病的基础研究。
基金资助:
深圳市科技创新委员会资助项目(JCYJ20130402114019656)

Relationships of plasma homocysteine levels and other clinical indexes with the polymorphisms of MTHFR gene C677T among the young people in Shenzhen area

Bi Jia-jia, Zhang Si-yun, Luo Wen-yuan, Guan Xing-qiu

Department of Neurology, Peking University Shenzhen Hospital, Shenzhen 518036, Guangdong Province, China

Revised:2014-07-21 Online:2014-10-08 Published:2014-10-08
Contact: Luo Wen-yuan, Associate chief physician, Department of Neurology, Peking University Shenzhen Hospital, Shenzhen 518036, Guangdong Province, China
About author:Bi Jia-jia, Studying for master’s degree, Department of Neurology, Peking University Shenzhen Hospital, Shenzhen 518036, Guangdong Province, China
Supported by:
a grant from Shenzhen Municipal Science and Technology Innovation Committee, No. JCYJ20130402114019656

摘要/Abstract

摘要：

背景：N5，10-亚甲基四氢叶酸还原酶(5，10-methylenetetrahydro-fotate reductase，MTHFR)基因发生突变，易引起高同型半胱氨酸血症，而高同型半胱氨酸血症为脑卒中的独立危险因素。
目的：分析深圳地区青年人群同型半胱氨酸水平与MTHFR C677T基因多态性之间的关系，并探讨高同型半胱氨酸血症与其他临床资料之间是否具有相关性。
方法：分别收集101例高同型半胱氨酸血症患者作为实验组，101例同型半胱氨酸血值正常者作为对照组(20-45岁)。收集入组人员的口腔唾液标本，用纳米磁珠法提取DNA，PCR扩增目的片段，并将扩增产物送与公司测序。
结果与结论：实验组和对照组MTHFR C677T基因的CC型、CT型、TT型3种基因型总体分布频率具有显著性意义(P < 0.01)，说明深圳地区青年人群同型半胱氨酸水平与MTHFR C677T的多态性具有一定的相关性。实验组中TT型基因频率及T等位基因频率均明显高于对照组，且实验组TT基因型的受试者同型半胱氨酸水平明显高于CT基因型及CC 基因型受试者，差异均有显著性意义(P < 0.05)，说明TT型比CT型更能影响同型半胱氨酸水平。实验组收缩压、舒张压值显著高于对照组(P < 0.05)，表明高同型半胱氨酸血症可引起血压值增高；试验并不能确定高同型半胱氨酸血症能增高血脂水平。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

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关键词: 组织构建, 组织工程, 基因组DNA, 口腔拭子, 无创, 纳米磁珠, 基因型, 同型半胱氨酸, 高同型半胱氨酸血症, N5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR C677T), 叶酸, 深圳青年

Abstract:

BACKGROUND: Hyperhomocysteine can be caused by 5,10-methylene tetrahydrofolate reductase (MTHFR) gene mutation, and HHcy is the independent risk factor for cerebral stroke.
OBJECTIVE: To study the correlation between plasma homocysteine level and polymorphisms of MTHFR gene C677T of young people in Shenzhen area, and to explore the relationships of plasma hyperhomocysteine level with other clinical indicators.
METHODS: A total of 101 cases with hyperhomocysteine were collected as experimental group, and 101 cases with normal homocysteine level served as control group (20-45 years old). Genomic DNA was extracted with magnetic nanoparticles method from mouth swab samples of 202 cases. Then the DNA was amplified into target gene fragment by PCR, and amplification product was then sequenced.
RESULTS AND CONCLUSION: The frequencies of CC, CT, TT genotype of MTHFR C677T showed significant differences between the experimental group and the control group (P < 0.01). This evidence indicates that the polymorphisms of MTHFR gene C677T can influence plasma homocysteine level of young people in Shenzhen area; TT genotype frequencies and T allele frequencies in the experimental group were higher than that of control group. Besides, the plasma homocysteine level of TT genotype was significantly higher than that of CT genotype and CC genotype in the experimental group (P < 0.05). We can conclude that TT genotype can improve the homocysteine level more than CT genotype; The systolic blood pressure and diastolic blood pressure in the experimental group were significantly higher than that in the control group (P < 0.05). It indicated that hyperhomocysteine can induce the elevation of blood pressure level; but it is not sure that hyperhomocysteine can increase cholesterol level in our study.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

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Key words: DNA, nano, homocysteine, folic acid

中图分类号:

R318

毕佳佳，张思韵，罗雯媛，关幸求. 深圳市青年同型半胱氨酸及其他临床指标与MTHFR C677T基因的多态性[J]. 中国组织工程研究, 2014, 18(42): 6871-6877.

Bi Jia-jia, Zhang Si-yun, Luo Wen-yuan, Guan Xing-qiu. Relationships of plasma homocysteine levels and other clinical indexes with the polymorphisms of MTHFR gene C677T among the young people in Shenzhen area[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2014, 18(42): 6871-6877.

图/表（结果） 3

2.1 纳米磁珠核酸提取试剂盒提取口腔拭子标本基因组DNA所需的时间 纳米磁珠核酸提取试剂盒提取口腔拭子标本基因组DNA 1 h左右即可完成1份口腔拭子标本基因组DNA的快速提取，同时操作5-10个口腔拭子标本需要1.5-2 h。

2.2 紫外分光光度计检测基因组DNA纯度和浓度结果 纳米磁珠法核酸提取试剂盒法获取口腔拭子基因组DNA浓度均值为(35.67±7.67) ng/L，A₂₆₀/A₂₈₀比值在1.7-1.9之间，获得的口腔拭子标本基因组DNA纯度好，无RNA、蛋白质污染和DNA降解。

2.3 PCR产物电泳结果 纳米磁珠法痕量核酸提取试剂盒提取的基因组DNA可成功PCR扩增出预期的目的条带，具体结果见图1。

2.4 DNA测序图谱 纳米磁珠法痕量核酸提取试剂盒组PCR产物均100%测序成功，都能获得满意的测序结果，见图2。

2.5 Hardy-weinberg平衡检验 本组对202例深圳青年人群MTHFR C677T基因型进行Hardy-weinberg平衡检验，结果显示两组基因型均符合遗传平衡定律(实验组 χ²=3.648 3，P=0.056 1；对照组χ²=0.479 7，P=0.488 5)，说明在遗传学上具有群体代表性。

2.6 实验组和对照组MTHFR C677T 基因型和等位基因分布情况 两组C677T位点经检测后均分为CC基因型、CT基因型和TT基因型。实验组的3类基因型频率分别为22.8%，39.6%，37.6%，C和T等位基因频率分别为42.6%，57.4%。对照组的三类基因型频率分别为45.5%，41.5%，12.8%，C和T等位基因频率分别为66.3%，33.7%(图3)。

两组中3类基因型总体分布频率差异有显著性意义(χ² =19.97，P < 0.01)。两组中C及T等位基因频率的分布差异也有显著性意义(χ² =22.99，P < 0.01，表1)。

2.7 实验组与对照组MTHFR C677T位点基因型与同型半胱氨酸水平的关系 深圳地区青年高同型半胱氨酸血症人群组与同型半胱氨酸血值正常人群组MTHFR C677T位点基因分型与相对应的同型半胱氨酸水平比较，差异有显著性意义(P < 0.05)。

实验组中CT型与CC型相比，同型半胱氨酸水平差异有显著性意义(P < 0.05)；TT型及与CC型相比，同型半胱氨酸水平差异有显著性意义(P < 0.01)；CT型与TT型相比，同型半胱氨酸水平差异有显著性意义(P < 0.05，表2)。对照组中3种基因型同型半胱氨酸水平间比较，差异无显著性意义(P > 0.05)。

2.8 实验组与对照组在同型半胱氨酸血值、血压、血糖、血脂(总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白)等方面的比较 本组中实验组与对照组在空腹血糖、三酰甘油等方面比较，差异无显著性意义(P > 0.05)；在收缩压、舒张压、总胆固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白方面比较，差异有显著性意义(P < 0.05，表3)。

2.9 实验组3种基因型间临床资料的比较 本组中实验组各基因型同型半胱氨酸值间在血压、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白等方面的比较差异无显著性意义(P > 0.05，表4)，说明高同型半胱氨酸血症对血压、血脂的影响并不随同型半胱氨酸、浓度升高而增大。

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引言

脑卒中是一种突然起病的脑血液循环障碍性疾病，临床上表现为一次性或永久性脑功能障碍的症状和体征，它分为缺血性脑卒中和出血性脑卒中，缺血性卒中占脑卒中的80%^[1]。其中脑血栓形成是缺血性脑卒中最常见的类型，约占全部脑卒中的70%^[2]。而不稳定性动脉粥样硬化斑块及在其基础上形成的血栓是引起脑梗死、心肌梗死等急性心脑血管疾病的主要发病机制^[3]。近年来，随着检测水平的提高和分子生物学技术的发展，成为脑梗死研究新热点的高同型半胱氨酸血症就是通过促进脑血管动脉粥样硬化形成而促进脑卒中发生的^[4-7]。国外Ashjazadeh等^[8]通过对171例脑卒中患者检测其血浆同型半胱氨酸值和叶酸、维生素B₁₂水平的病例-对照研究表明高同型半胱氨酸血症是缺血性脑卒中的一项独立危险因素。因而，在脑卒中预防工作中，监控同型半胱氨酸水平，保持其处于一个正常稳定的范围内，对于降低脑卒中的发生危险十分有益。

同型半胱氨酸是一种非必须的含硫氨基酸，是体内营养必须氨基酸甲硫氨酸循环和代谢的中间产物，是反应性血管损伤性氨基酸。甲硫氨酸在三磷酸腺苷参与下先形成S-腺苷甲硫氨酸，S-腺苷甲硫氨酸在甲基转移酶作用下变成S-腺苷同型半胱氨酸，后者脱去腺苷即变成同型半胱氨酸。同型半胱氨酸主要通过3条途径代谢：①以维生素B₁₂为辅助因子，在甲硫氨酸合成酶的作用下，N5，10-亚甲基四氢叶酸还原酶(5,10-methylenetetrahydro-fotate reductase，MTHFR)催化重新合成甲硫氨酸。②在胱硫醚-β合成酶(CBS)催化下，维生素B₆作为辅助因子，与丝氨酸缩合形成胱硫醚，进一步分解。③释放到细胞外基质^[8-9]。而高同型半胱氨酸血症即是因体内甲硫氨酸代谢障碍致使其代谢中间产物—同型半胱氨酸水平高于正常值15 μmol/L而引起的^[9]。根据美国心脏协会(AHA)和Kang等的推荐，高同型半胱氨酸血症分为轻度(15-30 µmol/L)、中度(30-100 µmol/L)和重度(>100 µmol/L)。

除外生活习惯等环境因素和其他疾病因素，遗传因素也是导致高同型半胱氨酸血症的重要原因。同型半胱氨酸再甲基化代谢途径中的常见关键酶N5，10-亚甲基四氢叶酸还原酶(5，10-methylenetetrahydro-fotate reductase，MTHFR)基因缺陷是引起高同型半胱氨酸血症的主要遗传因素。其中最常见的是位于染色体1P36.3上的MTHFR基因C677T位点突变，C677T中缬氨酸替代丙氨酸后会影响黄素腺嘌呤二核苷酸与MTHFR结合，可使酶活性下降，进而影响体内甲硫氨酸的代谢，引起高同型半胱氨酸血症^[10-11]。

近年来，随着脑血管病的发病年龄逐渐提前和发病率的逐年上升，青年型脑梗(年龄小于45岁)占脑梗死的比例也逐渐增大。作者前期所做的临床病例回顾性研究发现，青年型脑梗死的主要病因仍为动脉粥样硬化^[12]。高同型半胱氨酸血症、高血压以及高血脂均是促进动脉粥样硬化形成的病因，同时也有研究发现，高同型半胱氨酸血症患者同型半胱氨酸水平与血压及血脂具有一定的相关性^[13]。那么对于预防青年型卒中，监控青年人群同型半胱氨酸的水平就尤为重要，而MTHFR C677T基因多态性与青年同型半胱氨酸水平的关系的研究对于监控同型半胱氨酸水平和对脑血管病进行提前预防就具有十分积极的作用^[14]。同时，了解同型半胱氨酸与血压、血脂的相关性也有助于调整高同型半胱氨酸血症的治疗方案。

本试验主要以深圳青年人群为研究对象，调查研究了深圳市青年人群同型半胱氨酸水平与MTHFR C677T基因多态性以及血压、血脂水平的关系，了解深圳市青年高同型半胱氨酸血症患者MTHFR C677T基因的等位基因分布频率，为后期扩大样本，建立基因库提供可行性依据。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

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材料方法

设计：采用纳米磁珠法提取病例组和对照组的DNA模板，PCR扩增目的片段后送由公司进行DNA序列检测。

时间及地点：于2013年7月至2014年5月在北京大学深圳医院中心实验室完成。

对象：2013年7月至2014年3月，于北京大学深圳医院深圳市人民医院、深圳市南山医院选取的年龄在20-45岁人群。实验组为经检查同型半胱氨酸值高于15 μmol/L的体检人员101例(男76例，女25例)，平均年龄(38.57±5.68)岁。对照组为同型半胱氨酸值正常的体检人员101例(男75例，女26例)平均年龄(37.05±6.61)岁。所有入组人员均排除既往脑卒中、冠心病、周围血管病、血液系统疾病、肝肾功能异常、严重感染及恶性肿瘤及2周内服用叶酸、B族维生素史者。入选对象均为深圳地区户口的青年人群。两组间年龄、性别组成差异无显著性意义(P < 0.05)。北京大学深圳医院伦理委员会批准试验方案，研究符合赫尔辛基宣言。

材料：

方法：经北京大学深圳医院体检科采取体检者清晨空腹肘静脉血5 mL，用高效液相色谱-荧光检测法测定血同型半胱氨酸浓度，符合本研究入组条件的人群为受试对象。

收集口腔拭子标本：受试对象漱口后，用灭菌口腔拭子末端在其两侧颊黏膜往返擦拭各10次，之后将口腔拭子末端剪下置于1.5 mL离心管，室温保存以备后续用纳米磁珠DNA痕量核酸提取试剂盒(法医样本DNA提取试剂盒/血斑/烟蒂/口腔拭子)提取基因组DNA。

纳米磁珠提取口腔拭子标本基因组DNA：①加入 300 μL裂解液BufferA和10 μL BufferB至放置口腔拭子末端的离心管中，用漩涡振荡器混匀数秒，90 ℃恒温加热30 min。②将裂解完成液转移到一个新的1.5 mL离心管中，向其中加入5 μL纳米磁珠，300 μL异丙醇，颠倒混匀 5-10 min后在磁力架上弃上清，小心保留纳米磁珠。③加入500 μL洗涤液Ⅰ，颠倒混匀1 min后在磁力架上弃上清，小心保留纳米磁珠。④加入500 μL洗涤液Ⅱ，颠倒混匀1 min后在磁力架上弃上清，小心保留纳米磁珠。⑤重复步骤④1次。⑥室温开盖静置5 min后加入50 μL洗脱液，混匀磁珠后65 ℃加热10 min，期间每隔3 min摇匀磁珠。⑦在磁力架上将上清液转移至新的离心管，该上清液为基因组DNA，-20 ℃保存备用。

紫外分光光度计检测基因组DNA浓度：用紫外分光光度uv-2450检测所提取的基因组DNA紫外吸收峰，计算基因组DNA的纯度(A₂₆₀/A₂₈₀比值)和浓度。

PCR反应：用于PCR扩增的上下游引物序列分别是F：5’-TCA CCT GGA TGG GAA AGA-3’，R：5’- ATC CCT CGC CTT GAA CAG-3’。

引物由英潍捷基(上海)贸易有限公司合成，扩增的目的条带为256 bp，包含需要分析的MTHFR C677T基因多态位点，即SNP∶1801133位点。PCR扩增反应在ABI 2720 Thermal Cycler中进行，反应体系为40 μL，包括20 μL TaKaRa Taq™ HS Perfect Mix R300 A，各2 μL的上、下游引物，3 μL基因组DNA，剩下体积由超纯水补足。每次扩增均设阴性对照，即用超纯水代替模板基因组DNA。PCR反应条件：98 ℃，2 min；98 ℃，10 s；58 ℃，30 s；72 ℃，28 s；共40循环；4 ℃保温。

DNA电泳与DNA测序：用琼脂糖、TAE电泳缓冲液与溴化乙锭制备2%琼脂糖凝胶。取3 μL DL5000 molecular mass marker、3 μL PCR产物用微量移液器小心加入样品槽中。在Biometra电泳系统中120 V电泳20 min。电泳结束后，在凝胶成像分析系统中拍照成像，观察电泳结果以确认有无成功扩增出256 bp的目的条带。

成功扩增256 bp的PCR产物送至深圳华大基因公司测序以分析MTHFR基因多态性，测序结果由澳大利亚Technelysium公司的Chromas2.22软件分析。

主要观察指标：①观察纳米磁珠核酸提取试剂盒提取口腔拭子标本基因组DNA所需的时间。②获得的基因组DNA纯度、浓度。③PCR产物电泳结果。④ DNA测序图。⑤MTHFR基因 C677T基因型的分布。⑥同型半胱氨酸血值正常人群组(对照组)与高同型半胱氨酸血症人群组(实验组)在血同型半胱氨酸值、血压、血糖、血脂(总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白)等方面是否具有显著差异。

统计学分析：由SPSS 13.0统计学软件进行数据分析，所有计量资料均以x(_)±s表示，组间比较采用t 检验；计数资料以频数表示，组间比较采用卡方检验；采用Hardy- weinberg平衡法检测样本是否有群体代表性。P < 0.05为差异有显著性意义。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

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讨论

本组中所采用的DNA样本提取方法是纳米磁珠法，此方法获得的基因组DNA浓度均值为(35.67±7.67) ng/L ，A₂₆₀/A₂₈₀比值在1.7-1.9之间(一般A₂₆₀/A₂₈₀比值正常范围为1.7-1.9，小于1.7提示有蛋白污染，大于1.9说明有RNA污染或DNA降解^[15])，获得的口腔拭子标本基因组DNA纯度好，无RNA、蛋白质污染和DNA降解，虽然磁珠法提取的DNA浓度与血液标本提取的DNA浓度相比差距较大，但所提取的标本92%均可成功扩增PCR产物。与常用的血液试剂盒提取DNA方法比较，磁珠法提取DNA耗时短，存储条件简单，无需冷藏保存，常温即可长久保存，显著降低了实验成本，且操作过程安全，避免了血液样本给操作人员带来的污染，同时它的无创性标本采集也减轻了受试者的心理和身体负担，使其易于接受实验^[16-19]。

本研究主要了解深圳地区青年人群血同型半胱氨酸与MTHFR C677T基因多态性之间的相互关系。研究显示实验组中纯合突变型TT型基因频率(37.6%)及T等位基因频率(57.4%)远高于对照组的TT型基因频率(12.8%)及T等位基因频率(33.7%)。而对照组中正常基因型CC型基因频率(45.5%)及C等位基因频率(66.3%)也高于实验组CC型基因频率(22.8%)及C等位基因频率(42.6%)。据此作者认为，同型半胱氨酸水平与MTHFR C677T的多态性具有一定的相关性，这与国内外关于MTHFR基因多态性是影响血同型半胱氨酸水平的主要因素的观点相一致^[20-21]。本研究中，实验组TT基因型、CT基因型、CC基因型的同型半胱氨酸水平分别为(33.62±16.54)，(24.18±6.81)，(18.38±3.11) μmol/L，各基因型间同型半胱氨酸水平差异有显著性意义(P < 0.05)，可以看出，TT基因型同型半胱氨酸水平明显高于CC基因型同型半胱氨酸水平，说明纯合突变TT基因型对血浆同型半胱氨酸水平的影响比杂合突变CT基因型更大；但本次研究结果显示，对照组中3种基因型同型半胱氨酸水平间的比较，差异无显著性意义(P > 0.05)，说明T等位基因的突变在对照组中对同型半胱氨酸值的影响不大，作者认为这可能与对照组人群生活习惯有关，对照组人群可能在平时生活中比较注重多摄入叶酸和B族维生素含量丰富的食物，因而有助于维持血浆同型半胱氨酸值的稳定，从而表明生活习惯等环境因素在维持同型半胱氨酸值正常范围中起着不可忽略的作用。本实验与作者所在实验团队前期实验 (研究60岁以上老年卒中人群和非卒中人群同型半胱氨酸水平及MTHFR C677T基因多态性之间相互关系)相比^[22]，本次实验对照组中的基因型频率与老年非卒中人群中3种基因型频率相同，而实验组中纯合突变TT基因型频率(37.6%)与老年卒中人群中TT基因型频率(24.3%)较为接近，但略高，充分说明青年高同型半胱氨酸血症患者若对同型半胱氨酸值不加干预，老年后发生脑卒中的风险会非常大，因而对于高同型半胱氨酸血症患者进行基因型检测，并据此调整治疗方案具有十分重要的作用。

研究显示高同型半胱氨酸血症在造成血管内皮细胞功能紊乱，致使动脉粥样硬化的同时，也与原发性高血压有着密切的关系，高同型半胱氨酸血症是导致原发性高血压的因素之一^[23-24]。一项国内6城市的研究数据显示，中国约75%的高血压患者伴有血浆同型半胱氨酸水平升高，而伴同型半胱氨酸增高的高血压又称为H型高血压^[25-26]。本研究中实验组收缩压、舒张压的均值明显高于对照组，且超出正常值范围，说明高同型半胱氨酸血症对血压增高具有明显影响，因而对同型半胱氨酸水平进行控制会有助于维持血压的正常和稳定。此外，有研究表明，高同型半胱氨酸血症是通过促进细胞内同型半胱氨酸硫内脂的形成及促进低密度脂蛋白氧化等环节促进动脉粥样硬化的^[27-29]。因而同型半胱氨酸水平与血脂水平也有密切关系，国外即有研究显示同型半胱氨酸水平与胆固醇、三酰甘油呈正相关^[30-31]。本研究中实验组和对照组虽然在总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇方面比较，差异有显著性意义(P < 0.05)，其中实验组中的总胆固醇(5.02±1.06) mmol/L和低密度脂蛋白胆固醇(3.52±0.81) mmol/L均值要高于对照组(4.71±0.73)，(3.29±0.84) mmol/L，但是两组间总胆固醇值均处于正常值范围(3.1-5.7 mmol/L)，且低密度脂蛋白胆固醇值均高于正常范围(2.1-3.1mmol/L)。相较于两组间高同型半胱氨酸血症与血压值的显著相关，这可能与两组人员携带其他血脂异常相关基因的遗传问题或本身的生活习惯有关，因此并不能说明高同型半胱氨酸血症能增高总胆固醇和低密度脂蛋白浓度。另有研究实验组各基因型同型半胱氨酸浓度间在血压、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白等方面的比较差异无显著性意义(P > 0.05)，说明高同型半胱氨酸血症对血压、血脂的影响并不随同型半胱氨酸浓度的升高而增大。同时，两组在三酰甘油方面比较，差异无显著性意义(P > 0.05)。结合此3个研究结果来看，高同型半胱氨酸血症并不一定会对总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇产生影响。

叶酸是体内甲基的间接供体，维生素B₆、B₁₂是蛋氨酸合成酶的辅酶，两者的缺乏阻碍了蛋氨酸的再生成，造成了同型半胱氨酸的积蓄^[32]。因而，对于高同型半胱氨酸血症的治疗和预防，目前国内外采取的主要方法就是补充叶酸和B族维生素^[33]。Franken等^[34]对21例高同型半胱氨酸血症患者用维生素B₆和叶酸进行治疗，6周后血同型半胱氨酸浓度全部恢复正常。国内也有相关研究表明，叶酸联合维生素B₁₂能显著降低血浆同型半胱氨酸值^[35]。近期Lancet杂志发表的荟萃分析包含273项全球基因研究数据库的结果表明：在叶酸低水平的亚洲地区，补充叶酸降低血同型半胱氨酸值，将降低脑卒中风险22%左右^[36]。补充叶酸和维生素B₁₂对于降低H型高血压也具有十分积极的作用^[37]。另有研究表明，服用降血脂药物辛伐他汀，在维持血脂稳定的同时，也有一定的降同型半胱氨酸值的作用，虽然具体机制还不明确，但对于调整高同型半胱氨酸血症治疗方案和预防脑卒中具有十分积极的意义^[38-39]。

结论：作者研究了深圳地区青年人群中血浆同型半胱氨酸值与MTHFR C677T基因多态性之间的相互关系，调查了深圳青年高同型半胱氨酸血症和同型半胱氨酸值正常组的MTHFR C677T基因CC型、CT型、TT型分布频率分别为22.8%、39.6%、37.6%、45.5%、41.5%、12.8%，对于建立深圳市青年高同型半胱氨酸血症 MTHFR C677T基因库以及推荐补充叶酸和B族维生素进行高同型半胱氨酸血症和脑卒中的预防提供了一定的基因型频率分布的数据支持；通过对本次研究与作者以往研究的对比，发现青年高同型半胱氨酸血症如果不能调控好同型半胱氨酸水平，随着年龄的增长，发生脑卒中的风险非常大；本研究还发现高同型半胱氨酸血症能促进高血压的发生，但不能肯定其对总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇的浓度有影响。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

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深圳市青年同型半胱氨酸及其他临床指标与MTHFR C677T基因的多态性

Relationships of plasma homocysteine levels and other clinical indexes with the polymorphisms of MTHFR gene C677T among the young people in Shenzhen area

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