骨髓干细胞

    血管内皮生长因子联合碱性成纤维细胞生长因子改善骨髓间充质干细胞复制性衰老
  • 图1|大鼠骨髓间充质干细胞形态及鉴定

    结果:接种48 h后,可见集落样细胞生成,传至第3代细胞形态基本稳定,呈梭形或纺锤形,漩涡状或平行排列,见图1A-C。成骨诱导21 d茜素红染色呈阳性,大体观可见诱导组孔板底部呈均匀的橙色,镜下观可见橙红色大小不一的颗粒,见图1D-F;成脂诱导10 d油红O染色阳性,镜下可见橙色圆形脂滴形成,见图1G,H;未诱导组未见脂滴形成,见图1I。流式结果显示,MSCs表面标志物CD90、CD44阳性(细胞表达率> 98%),CD31、CD45阴性(表达率 < 2%),提示细胞纯度较好,见图1J

    图3|VEGF联合bFGF对骨髓间充质干细胞衰老的影响

    结果:模型组细胞宽大,VEGF联合bFGF干预14 d后细胞由宽大变为细长,呈漩涡状,与正常细胞(3代细胞)形态接近,见图3A。β-半乳糖苷酶活性染色结果显示,模型组阳性细胞率较正常组明显升高(P < 0.001),VEGF联合bFGF组较模型组显著降低(P < 0.01),见图3B,C

    图4|VEGF联合bFGF对骨髓间充质干细胞F-actin和细胞核的影响

    结果:图4。与正常组比较,模型组细胞核个数减少,细胞骨架总面积减小,但差异无显著性意义(P > 0.05);与模型组比较,VEGF联合bFGF组干预14 d后细胞核个数明显增加(P < 0.001),细胞骨架总面积增加(P < 0.01)。用F-actin绿色荧光面积除以细胞核个数,得到单个细胞骨架面积,结果显示模型组平均单个细胞骨架面积增加,VEGF联合bFGF干预后单个细胞骨架面积减小,但各组间未见统计学差异(P > 0.05)。

    图5|VEGF联合bFGF对骨髓间充质干细胞集落形成和衰老相关基因的影响

    结果:集落形成是年轻MSCs的特性之一,与衰老模型组比较,VEGF联合bFGF组MSCs集落增多(P < 0.05),见图5,提示VEGF联合bFGF可改善复制性传代导致的MSCs衰老。

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  • 发布日期: 2024-01-23  浏览: 35