其他干细胞

    骨形态发生蛋白2介导同型半胱氨酸促进血管钙化
  • 图2|人体颈动脉组织钙化情况

    结果:对收集的蜡块标本进行苏木精-伊红染色和茜素红染色,发现钙化组茜素红染色阳性面积多于非钙化组(P < 0.05),与宁夏医科大学总医院病理科所调取的患者资料相符合,见图2

    图3|钙化组与非钙化组人体颈动脉组织中BMP2、Runx2和α-SMA表达

    结果:免疫组化结果显示,钙化组BMP2和Runx2表达量高于非钙化组(P < 0.05),钙化区域BMP2和Runx2高表达;钙化组α-SMA表达量低于非钙化组(P < 0.05),钙化区域α-SMA低表达,钙化区域发生表型转化,见图3

    图4|小鼠钙化模型建立 

    结果:高同型半胱氨酸血症组血清Hcy水平高于对照组(P < 0.05),高蛋氨酸饮食使体内Hcy水平增加,小鼠体内形成高同型半胱氨酸血症;苏木精-伊红染色和茜素红染色结果显示,高同型半胱氨酸血症组头臂干组织钙化面积高于对照组(P < 0.05),小鼠钙化模型造模成功,见图4


    图5|小鼠头臂干组织BMP2、Runx2和α-SMA表达

    结果:免疫组化结果显示,高同型半胱氨酸血症组头臂干组织BMP2和Runx2表达量高于对照组(P < 0.05),钙化区域BMP2和Runx2高表达;高同型半胱氨酸血症组α-SMA表达量低于对照组(P < 0.05),钙化区域α-SMA低表达,钙化区域发生表型转化,见图5


    图6|梯度浓度同型半胱氨酸(Hcy)干预平滑肌细胞

    结果:CCK-8细胞活力检测显示,Hcy浓度> 800 μmol/L时细胞存活率不足50%,所以后续实验去除了800 μmol/L这个浓度;茜素红染色结果显示,A7r5细胞钙化程度随着Hcy浓度梯度增加;BMP2和Runx2蛋白含量随Hcy浓度梯度增加(P < 0.05),α-SMA蛋白含量随Hcy浓度梯度降低(P < 0.05),平滑肌细胞发生表型转化,见图6

    图7|过表达BMP2促进同型半胱氨酸(Hcy)致平滑肌细胞钙化表型转化

    结果:茜素红染色结果显示,对照+BMP2过表达组、β-甘油磷酸钠+ BMP2过表达组、Hcy+ BMP2过表达组较相对应的对照组、β-甘油磷酸钠组和Hcy组钙化程度增加,Hcy+ BMP2过表达组最明显;蛋白印迹实验显示Runx2蛋白表达随BMP2表达增加而增加(P < 0.05),α-SMA蛋白表达随BMP2表达增加而降低(P < 0.05),平滑肌细胞发生表型转化,见图7

    图8|BMP2/Runx2通路介导同型半胱氨酸(Hcy)促进平滑肌细胞钙化表型转化

    结果:免疫荧光染色显示,Hcy钙化培养基培养的BMP2过表达A7r5细胞组较普通A7r5细胞组BMP2表达量增加,且Runx2表达量随BMP2表达量增加而增加(P < 0.05),见图8

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  • 发布日期: 2023-11-25  浏览: 55