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氧化修饰高密度脂蛋白激活活性氧启动p38信号促使大鼠卵巢颗粒细胞凋亡

• 图4｜氧化修饰高密度脂蛋白(ox-HDL)通过激活活性氧和p38信号通路诱导大鼠卵巢颗粒细胞凋亡

  

  结果：为研究对照组血清来源HDL、模型组血清来源HDL以及阳性对照ox-HDL对活性氧生成和p38信号通路影响，实验选择超氧化物染料探针H2DCF-DA检测活性氧的生成以及Western blot检测总p38和p-p38的表达，见图4A-D。相对于空白对照组，对照组血清来源HDL不影响活性氧生成以及总p38及p-p38表达，而模型组血清来源HDL和阳性对照ox-HDL均能促进活性氧生成和p-p38表达(P < 0.05)，但不影响总p38表达。为进一步明确ox-HDL通过活性氧和p38通路激活来诱导卵巢颗粒细胞凋亡，采用活性氧抑制剂Tempol、NAC或p-p38抑制剂SB203580分别预孵育卵巢颗粒细胞30 min，然后与ox-HDL共孵育24 h，采用流式细胞AnnexinV/PI 双染法检测细胞凋亡，见图4E，F，结果显示活性氧抑制剂Tempol、NAC或p-p38 抑制剂SB203580均能部分逆转ox-HDL诱导的卵巢颗粒细胞凋亡(P < 0.05)。

  
  

  图5｜在氧化修饰高密度脂蛋白(ox-HDL)诱导大鼠卵巢颗粒细胞凋亡中活性氧是p38的上游信号

  

  结果：为验证在ox-HDL诱导大鼠卵巢颗粒细胞凋亡实验中活性氧信号的激活是否早于p38信号激活，实验选择活性氧抑制剂Tempol、NAC预孵育大鼠卵巢颗粒细胞30 min，然后与ox-HDL共孵育24 h，Western blot检测p-p38的表达，见图5A，B，结果显示，活性氧抑制剂Tempol、NAC均能显著抑制ox-HDL诱导的大鼠卵巢颗粒细胞p-p38表达(P < 0.05)，不影响总p38表达。而选择p-p38抑制剂SB203580预孵育大鼠卵巢颗粒细胞30 min，然后与ox-HDL共孵育24 h，H2DCF-DA染色检测活性氧的生成，发现p-p38抑制剂SB203580并不能影响ox-HDL诱导的大鼠卵巢颗粒细胞活性氧生成，见图5C，D。以上结果提示，在ox-HDL诱导大鼠卵巢颗粒细胞凋亡实验中，活性氧是p38的上游
  

  信号。

  
  

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发布日期： 2023-09-27  浏览： 178