胚胎干细胞
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图1｜治疗后不同时间点大鼠创面愈合情况
结果：PBS组及干细胞组创面均随着治疗时间的推移呈愈合趋势；干细胞组创面肉芽组织生长良好，创基呈鲜红色，新生组织质地柔软，触碰后易出血，创面无明显渗出物，而PBS组创面肉芽组织生长一般，创基呈暗红色，新生组织质地略硬，创面表面可见少量血性渗出物；干细胞组在6 d时创面边缘可见少量新生上皮，8 d时可见明显上皮化表现，而PBS组在8 d时才在创面边缘观察到少量新生上皮；在观察终点14 d时，干细胞组创面未愈合创面面积小于PBS组，而创面新生上皮面积明显大于PBS组，见图1。
图3｜各组大鼠创面组织形态观察(14 d，苏木精-伊红染色)
结果：苏木精-伊红染色结果显示：低倍镜下干细胞组皮肤创面修复质量比PBS组更好，干细胞组表皮层完整，与真皮层贴附良好，而PBS组表皮未完全愈合，且表皮层与真皮层呈分离状态；另外干细胞组新生组织范围大于PBS组；高倍镜下观察发现正常皮肤内可见少量细胞及大量的胶原纤维组织，干细胞组的组织形态更加接近正常皮肤，具有粗大的胶原纤维及相对较少数量的细胞，而PBS组内可见大量的细胞浸润及少量稀疏且排布杂乱的胶原纤维，见图3。
图4｜各组大鼠创面组织中胶原纤维形态观察(14 d，Masson染色)
结果：Masson染色结果显示：低倍镜下正常皮肤内胶原纤维呈深蓝色，呈“网格样”排列，均匀散布在真皮层内，干细胞组胶原纤维染色较接近于正常皮肤，而PBS组胶原纤维染色深度低于干细胞组。高倍镜下观察可见正常皮肤内胶原纤维粗大，在真皮层内排列呈束，彼此交织吻合，胶原纤维束间隙清晰，胶原纤维排列疏松而整齐，胶原纤维染色为深蓝色，间隙内可见少量细胞生长；PBS组创面新生皮肤组织内胶原纤维细小而稀疏，胶原纤维染色为浅蓝色，胶原纤维排列杂乱，其内可见大量细胞分布；干细胞组胶原纤维染色较PBS组更接近于正常皮肤，可见其胶原纤维粗大，胶原纤维染色为深蓝色，间隙内细胞数量明显少于PBS组，胶原纤维结构致密，胶原纤维排列较杂乱，见图4A。对创面组织中胶原纤维占比进行定量分析结果表明：干细胞组及PBS组胶原纤维含量均少于正常皮肤(P < 0.01)，但是干细胞组新生组织内胶原纤维含量明显高于PBS组(P < 0.01)，见图4B。
图5｜各组大鼠创面组织血管新生情况(14 d，CD34免疫组化)
结果：通过使用CD34来标记血管内皮细胞，从而观察创面新生皮肤组织中的血管新生情况，结果表明：正常皮肤真皮层可见少量血管分布，供血血管主要集中于真皮深层，而干细胞组及PBS组新生组织内可见大量弥散分布的新生毛细血管，见图5A。对创面组织中新生血管进行定量分析结果表明：干细胞组及PBS组创面组织中血管数量明显高于正常皮肤(P < 0.01)，其中干细胞组创面组织中新生血管数量明显高于PBS组(P < 0.01)，见图5B。
图6｜各组大鼠创面组织炎性因子表达(14 d，免疫组化)
结果：通过使用白细胞介素6、肿瘤坏死因子α来标记创面组织中炎症因子，从而观察创面新生皮肤组织中的炎症反应情况，结果表明：在正常皮肤内，白细胞介素6、肿瘤坏死因子α均呈低表达状态，而干细胞组及PBS组新生组织内白细胞介素6、肿瘤坏死因子α均呈表达升高状态，见图6。
图8｜各组大鼠创面组织巨噬细胞极化表型分析(14 d，免疫荧光染色)
结果：通过使用免疫荧光染色方法观察创面内巨噬细胞极化情况，结果表明：在正常皮肤内，M1型巨噬细胞与M2型巨噬细胞均处于较低水平；干细胞组及PBS组新生组织内巨噬细胞数量均高于正常皮肤，见图8A。对创面组织中M1型巨噬细胞与M2型巨噬细胞定量分析结果表明：干细胞组及PBS组创面组织中M1型巨噬细胞与M2型巨噬细胞计数均高于正常皮肤(P < 0.01)，其中干细胞组创面组织中M1型巨噬细胞计数明显低于PBS组(P < 0.01)，而干细胞组创面组织中M2型巨噬细胞计数明显高于PBS组(P < 0.01)，见图8B。
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