骨髓干细胞
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图1｜骨髓间充质干细胞形态及分化能力鉴定
普通光学显微镜下观察贴壁的BMSCs呈长梭形或纺锤状，见图1A。成骨诱导14 d后，茜素红染色可观察到多个红色钙结节，见图1B；成脂诱导21 d后，油红O染色可观察到细胞内有红色脂滴形成，见图1C；成软骨诱导21 d后，阿利新蓝染色可观察到细胞呈浅蓝色，见图1D。以上结果证明，分离提取出的细胞符合BMSCs的特征。
图2｜软骨细胞形态及鉴定
普通光学显微镜下观察贴壁的软骨细胞呈多角形、三角形或不规则的卵圆形，可见成簇生长现象，排列紧密为“铺路石”样，见图2A；阿利新蓝染色可见软骨细胞呈浅蓝色，见图2B；经细胞免疫化学染色可见细胞产生的Ⅱ型胶原被染成棕褐色，见图2C。以上结果显示，分离提取出的细胞符合软骨细胞的特征。
图3｜慢病毒转染骨髓间充质干细胞(标尺：100 μm)
经嘌呤霉素(1.5 ng/mL)筛选后使用共聚焦显微镜观察LV-NC-BMSCs组和LV-Chm-1-BMSCs组的转染效率，镜下显示大多数转染的BMSCs表达绿色荧光蛋白，表明转染过程比较成功，见图3。
图4｜外泌体(Exos)鉴定及软骨细胞摄取外泌体情况
透射电镜观察可见Exos呈圆形，见图4A；纳米粒径分析Exos直径在40-150 nm之间，见图4B；Western blot结果显示Exos特异标志物CD63、CD81、TSG101的表达呈阳性，Chm-1在Chm-1-Exos中高表达，见图4C。以上结果证实经过超速离心法提取的物质分别为NC-Exos和Chm-1-Exos。
NC-Exos和Chm-1-Exos被DiI标记为红色，细胞核被DAPI标记为蓝色，细胞骨架被Phalloidin标记为绿色，共聚焦显微镜下可见NC-Exos和Chm-1-Exos均可以被骨关节炎软骨细胞摄取并在细胞核周围区域聚集，见图4D。