其他干细胞
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图1｜脑室周围白质软化组大鼠大脑髓鞘形成受抑制
在脑室周围白质软化后14 d，分别通过MBP检测髓鞘形成和APC免疫染色的成熟少突胶质细胞数量(图1A，B)。与假手术组相比，脑室周围白质软化组大鼠白质中MBP表达以及APC+少突胶质细胞的数量显著减少(P < 0.01)。与免疫染色结果相似，透射电子显微镜显示脑室周围白质软化组白质中有髓轴突明显少于假手术组(P < 0.001)，见图1C。这些结果表明，脑室周围白质软化抑制白质中少突胶质细胞分化和髓鞘形成。
图2｜AGC1 mRNA在缺血损伤新生鼠白质中的表达
AGC1在许多神经系统疾病中失调，包括帕金森病、多发性硬化症和阿尔茨海默病[5-6]。因此，通过实时荧光定量PCR对AGC1进行定量分析。在体内假手术条件下，未成熟脑组织发育7，14 d后，AGC1 mRNA表达开始显著增加(P < 0.05)；与0 h相比，体内脑室周围白质软化开始后12-24 h时AGC1 mRNA表达显著升高(P < 0.05)，而在72 h-14 d时显著降低(P < 0.05)，见图2A。通过荧光显微镜鉴定作为白质祖细胞标志物的NG2和作为细胞增殖标志物的BrdU，结果表明，白质祖细胞可以增殖为同时出现NG2阳性红色荧光和BrdU阳性绿色荧光的神经球，见图2B。在体外对照条件下，与0 h相比，对照组72 h-14 d时AGC1 mRNA表达显著增加(P < 0.05)；与对照组相比，在缺氧葡萄糖剥夺后24 h开始显著诱导AGC1 mRNA表达(P < 0.05)，并在48 h达到最大值(P < 0.05)，而在缺氧葡萄糖剥夺后7-14 d时显著降低(P < 0.05)，见图2C。
图3｜荧光显微镜观察缺氧葡萄糖剥夺对少突胶质细胞前体细胞向MBP+/AGC1+?少突胶质细胞分化影响
在荧光显微镜下观察MBP+/AGC1+少突胶质细胞。结果表明，与对照组相比，缺氧葡萄糖剥夺组在72 h-14 d时MBP+/AGC1+少突胶质细胞形成较少，见图3。
图4｜pcDNA3-AGC1对脑室周围白质软化早产鼠发育中大脑髓鞘形成的影响
图5｜荧光显微镜观察pcDNA3-AGC1对少突胶质细胞前体细胞向MBP+/AGC1+?少突胶质细胞分化影响
鉴于AGC1对髓鞘形成的有益影响，研究通过构建pcDNA3-AGC1质粒增强白质中AGC1表达。结果显示，pcDNA3-AGC1处理组在脑室周围白质软化后14 d处髓鞘MBP染色和APC+少突胶质细胞数量比pcDNA3-NC对照组显著增强(P < 0.05)，见图4A，B。透射电子显微镜显示，在用pcDNA3-AGC1治疗后，白质中有髓轴突数量显著增加(P < 0.05)，见图4C，表明AGC1促进脑室周围白质软化脑内少突胶质细胞分化和髓鞘形成。此外，在体外实验中，pcDNA3-AGC1进一步促进了缺氧葡萄糖剥夺后72?h、7 d和14 d时少突胶质细胞前体细胞分化为MBP+/AGC1+?少突胶质细胞(P < 0.05)，见图5。